一种胺基磷酸双姜黄素酯类化合物、制备方法及用途

摘要

本发明公开了一种胺基磷酸双姜黄素酯类化合物、制备方法及用途，属于药物化学领域。所述化合物其结构式如下：式(I)中R1和R2可环合形成饱和含氮杂环结构，即如下结构：所述化合物的制备方法为，先制备出胺基磷酰氯或硫代胺基磷酰氯，再与姜黄素反应即可得到本发明所述的化合物。所述的胺基磷酸双姜黄素酯类化合物具有较好的抗肿瘤活性，且化合物毒性比顺铂小，可用于制备抗肺癌、胃癌、白血病、乳腺癌及抗炎药物中。

说明书

技术领域

本发明涉及一种胺基磷酸双姜黄素酯类化合物、制备方法及用途，属于药物化学领域。

背景技术

姜黄是传统中药中的一味常用药材，主要用于破血行气、通经止痛。近年来研究表明，姜黄素具有降血脂、抗肿瘤、抗炎、利胆、抗氧化等作用，其中，其抗肿瘤作用尤其引人注意。1985年印度的Kuttan首先提出姜黄素具有抗肿瘤作用的可能性，以后世界各国学者对姜黄素的抗肿瘤作用和机制进行了深入细致的研究。多种体外和体内研究表明：姜黄素可以有效抑制乳腺、胃肠道、肝、胰腺、结肠、膀胱、肾、前列腺、子宫、卵巢、肺、口腔、皮肤等多个部位的肿瘤。此外姜黄素对白血病、淋巴瘤、多发性骨髓瘤等血液系统肿瘤也表现出良好的抑制作用。一般认为姜黄素通过抑制细胞色素P450酶系P4501A1，抑制酪氨酸激酶活性、抑制血管内皮生长因子(VEDGF)、抑制碱性成纤维细胞生长因子(b-FGF)、抑制端粒末端转移酶活性、降低基质金属蛋白酶-2(MMP-2)的表达、提高金属蛋白酶组织抑制剂(TIMP-I)的表达、阻断核因子-KB和转录因子AP-1的活性等多种途径抑制肿瘤细胞的生长，美国国立癌症研究所已将其列为第三代癌症化学预防药，且已进入Ⅲ期临床实验阶段。

虽然姜黄素具有多种生物活性，但姜黄素性质不稳定，水溶性差，体内代谢速度快，因而导致其生物利用度低，限制了它在临床的应用。为了改善姜黄素的生物利用度，世界各国学者做了大量的研究工作。Ishida等人合成了羟基被甲氧基和乙酯替代的双取代产物，并且对其做了体外抗乳腺癌和骨癌细胞活性研究，结果表明，双乙酯替代的产物相比较姜黄素活性稍有下降，而双甲氧基取代的则下降比较明显。姜黄素中羟基被甲氧基和乙酯替代的双取代产物结构如下

Ishida等发现当苯环上氢被F原子取代时，只有邻位取代的化合物具有细胞毒性，如下式所示的化合物1和3具有广泛的抗癌作用，活性强于姜黄素。

当把邻位的两个酚羟基用一个亚甲基连接起来便得到了胡椒基姜黄素，如下式所示，这个化合物也表现出一定的抗肿瘤活性。

Brian等设计合成了一系列单羰基连接的姜黄素类似物，并测试它们的广谱抗肿瘤细胞活性，发现针对白血病细胞系和内皮细胞增殖显示出显著的细胞毒性，但毒性也有所增加。其单羰基连接的姜黄素类似物结构如下式所示：

以上简单综述了姜黄素结构改造方面的一些结果，还有许多关于姜黄素结构改造方面取得的研究成果在此就不一一描述了。从以上研究工作可以看出，为了寻找抗肿瘤活性更强、毒副作用更低、药代动力学性质更合理的化合物，世界各国学者合成了大量的化合物，但是到目前为止还没有获得满意的结果。虽然有些化合物的抗肿瘤活性有所提高，但毒性也随之增大。综合考虑安全性和有效性，还没有找到优于姜黄素的化合物。

发明内容

为了寻找抗肿瘤活性更好的姜黄素衍生物，本发明提供了一种胺基磷酸双姜黄素酯类化合物、制备方法及用途。所述的胺基磷酸双姜黄素酯类化合物具有较好的抗肿瘤活性，且化合物毒性比顺铂小，可用于抗肺癌、胃癌、白血病、乳腺癌及抗炎药中。

本发明的目的由以下技术方案实现：

一种胺基磷酸双姜黄素酯类化合物，其结构式如下：

其中，X为O或S；

R₁和R₂分别独立为氢、直链烷烃或支链烷烃，且R₁和R₂碳链中间或末端可连接-Cl、-Br或苯环，R₁和R₂碳原子的总和不多于20个碳原子；

式(I)中R₁和R₂可环合形成饱和含氮杂环结构，即如下结构：

其中n＝0-4，即为三元、四元、五元、六元或七元含氮饱和杂环。

所述胺基磷酸双姜黄素酯类化合物优选如下化合物：

二{4-[(1E,6E)-7-(4-羟基-3-甲氧苯基)-3,5-二羰基庚-1,6-二烯-1-基]-2-甲氧苯基}胺基磷酸酯，简称Cur-1，结构式如下：

N-甲基-二{4-[(1E,6E)-7-(4-羟基-3-甲氧苯基)-3,5-二羰基庚-1,6-二烯-1-基]-2-甲氧苯基}-胺基磷酸酯，简称Cur-2，结构式如下：

N-乙基-二{4-[(1E,6E)-7-(4-羟基-3-甲氧苯基)-3,5-二羰基庚-1,6-二烯-1-基]-2-甲氧苯基}-胺基磷酸酯，简称Cur-3，结构式如下：

N-戊基-二{4-[(1E,6E)-7-(4-羟基-3-甲氧苯基)-3,5-二羰基庚-1,6-二烯-1-基]-2-甲氧苯基}-胺基磷酸酯，简称Cur-4，结构式如下：

N-壬基-二{4-[(1E,6E)-7-(4-羟基-3-甲氧苯基)-3,5-二羰基庚-1,6-二烯-1-基]-2-甲氧苯基}-胺基磷酸酯，简称Cur-5，结构式如下：

N-十五烷基-二{4-[(1E,6E)-7-(4-羟基-3-甲氧苯基)-3,5-二羰基庚-1,6-二烯-1-基]-2-甲氧苯基}-胺基磷酸酯，简称Cur-6，结构式如下：

N-异丁基-二{4-[(1E,6E)-7-(4-羟基-3-甲氧苯基)-3,5-二羰基庚-1,6-二烯-1-基]-2-甲氧苯基}-胺基磷酸酯，简称Cur-7，结构式如下：

N-异己基-二{4-[(1E,6E)-7-(4-羟基-3-甲氧苯基)-3,5-二羰基庚-1,6-二烯-1-基]-2-甲氧苯基}-胺基磷酸酯，简称Cur-8，结构式如下：

N-叔丁基-二{4-[(1E,6E)-7-(4-羟基-3-甲氧苯基)-3,5-二羰基庚-1,6-二烯-1-基]-2-甲氧苯基}-胺基磷酸酯，简称Cur-9，结构式如下：

N-苯基-二{4-[(1E,6E)-7-(4-羟基-3-甲氧苯基)-3,5-二羰基庚-1,6-二烯-1-基]-2-甲氧苯基}-胺基磷酸酯，简称Cur-10，结构式如下：

N-苄基-二{4-[(1E,6E)-7-(4-羟基-3-甲氧苯基)-3,5-二羰基庚-1,6-二烯-1-基]-2-甲氧苯基}-胺基磷酸酯，简称Cur-11，结构式如下：

N-苯丙基-二{4-[(1E,6E)-7-(4-羟基-3-甲氧苯基)-3,5-二羰基庚-1,6-二烯-1-基]-2-甲氧苯基}-胺基磷酸酯，简称Cur-12，结构式如下：

N，N-二甲基-二{4-[(1E,6E)-7-(4-羟基-3-甲氧苯基)-3,5-二羰基庚-1,6-二烯-1-基]-2-甲氧苯基}-胺基磷酸酯，简称Cur-13，结构式如下：

N，N-二乙基-二{4-[(1E,6E)-7-(4-羟基-3-甲氧苯基)-3,5-二羰基庚-1,6-二烯-1-基]-2-甲氧苯基}-胺基磷酸酯，简称Cur-14，结构式如下：

N，N-二丁基-二{4-[(1E,6E)-7-(4-羟基-3-甲氧苯基)-3,5-二羰基庚-1,6-二烯-1-基]-2-甲氧苯基}-胺基磷酸酯，简称Cur-15，结构式如下：

N，N-二庚基-二{4-[(1E,6E)-7-(4-羟基-3-甲氧苯基)-3,5-二羰基庚-1,6-二烯-1-基]-2-甲氧苯基}-胺基磷酸酯，简称Cur-16，结构式如下：

N，N-二癸基-二{4-[(1E,6E)-7-(4-羟基-3-甲氧苯基)-3,5-二羰基庚-1,6-二烯-1-基]-2-甲氧苯基}-胺基磷酸酯，简称Cur-17，结构式如下：

N-2-氯乙基-二{4-[(1E,6E)-7-(4-羟基-3-甲氧苯基)-3,5-二羰基庚-1,6-二烯-1-基]-2-甲氧苯基}-胺基磷酸酯，简称Cur-20，结构式如下：

N，N-二(2-氯乙基)-二{4-[(1E,6E)-7-(4-羟基-3-甲氧苯基)-3,5-二羰基庚-1,6-二烯-1-基]-2-甲氧苯基}-胺基磷酸酯，简称Cur-21，结构式如下：

N-2-溴乙基-二{4-[(1E,6E)-7-(4-羟基-3-甲氧苯基)-3,5-二羰基庚-1,6-二烯-1-基]-2-甲氧苯基}-胺基磷酸酯，简称Cur-22，结构式如下：

N，N-二(2-溴乙基)-二{4-[(1E,6E)-7-(4-羟基-3-甲氧苯基)-3,5-二羰基庚-1,6-二烯-1-基]-2-甲氧苯基}-胺基磷酸酯，简称Cur-23，结构式如下：

二{4-[(1E,6E)-7-(4-羟基-3-甲氧苯基)-3,5-二羰基庚-1,6-二烯-1-基]-2-甲氧苯基}-N-(2-氯丙基)-胺基磷酸酯，简称Cur-24，结构式如下：

二{4-[(1E,6E)-7-(4-羟基-3-甲氧苯基)-3,5-二羰基庚-1,6-二烯-1-基]-2-甲氧苯基}-N-(2-氯-2-甲基丙基)-胺基磷酸酯，简称Cur-25，结构式如下：

二{4-[(1E,6E)-7-(4-羟基-3-甲氧苯基)-3,5-二羰基庚-1,6-二烯-1-基]-2-甲氧苯基}-N-(2-溴丙基)-胺基磷酸酯，简称Cur-26，结构式如下：

二{4-[(1E,6E)-7-(4-羟基-3-甲氧苯基)-3,5-二羰基庚-1,6-二烯-1-基]-2-甲氧苯基}-N-(2-溴-2-甲基丙基)-胺基磷酸酯，简称Cur-27，结构式如下：

O,O-二{4-[(1E,6E)-7-(4-羟基-3-甲氧苯基)-3,5-二羰基庚-1,6-二烯-1-基]-2-甲氧苯基}-胺基硫代磷酰酯，简称Cur-32，结构式如下：

N-2-氯乙基-O，O-二{4-[(1E,6E)-7-(4-羟基-3-甲氧苯基)-3,5-二羰基庚-1,6-二烯-1-基]-2-甲氧苯基}-胺基硫代磷酸酯，简称Cur-34，结构式如下：

N，N-二(2-氯乙基)-O,O-二{4-[(1E,6E)-7-(4-羟基-3-甲氧苯基)-3,5-二羰基庚-1,6-二烯-1-基]-2-甲氧苯基}-胺基硫代磷酸酯，简称Cur-35，结构式如下：

二{4-[(1E,6E)-7-(4-羟基-3-甲氧苯基)-3,5-二羰基庚-1,6-二烯-1-基]-2-甲氧苯基}-氮杂环丁烷-1-基磷酸酯，简称Cur-18，结构式如下：

二{4-[(1E,6E)-7-(4-羟基-3-甲氧苯基)-3,5-二羰基庚-1,6-二烯-1-基]-2-甲氧苯基}-吡咯啶-1-基磷酸酯，简称Cur-19，结构式如下：

二{4-[(1E,6E)-7-(4-羟基-3-甲氧苯基)-3,5-二羰基庚-1,6-二烯-1-基]-2-甲氧苯基}-吖丙啶-1-基磷酸酯，简称Cur-28，结构式如下：

二{4-[(1E,6E)-7-(4-羟基-3-甲氧苯基)-3,5-二羰基庚-1,6-二烯-1-基]-2-甲氧苯基}-2-甲基吖丙啶-1-基磷酸酯，简称Cur-29，结构式如下：

二{4-[(1E,6E)-7-(4-羟基-3-甲氧苯基)-3,5-二羰基庚-1,6-二烯-1-基]-2-甲氧苯基}-2，2-二甲基吖丙啶-1-基磷酸酯，简称Cur-30，结构式如下：

二{4-[(1E,6E)-7-(4-羟基-3-甲氧苯基)-3,5-二羰基庚-1,6-二烯-1-基]-2-甲氧苯基}-2-异丙基吖丙啶-1-基磷酸酯，简称Cur-31，结构式如下：

O,O-二{4-[(1E,6E)-7-(4-羟基-3-甲氧苯基)-3,5-二羰基庚-1,6-二烯-1-基]-2-甲氧苯基}-吖丙啶-1-基硫代磷酸酯，简称Cur-33，结构式如下：

本发明所述胺基磷酸双姜黄素酯类化合物的制备方法，

反应方程式如下：

步骤如下：

一、胺基磷酰氯的制备

当所述胺基磷酸双姜黄素酯类化合物结构如式(I)所示、且X＝O时，胺基磷酰氯的制备采用以下a或b步骤：

a.以三氯氧磷为溶剂，将取代胺的盐或铵盐加入溶剂中，加热回流反应完全即可得到胺基磷酰氯；

b.以四氢呋喃或二氯甲烷为溶剂，加入三氯氧磷和胺，以三乙胺为碱，在-10℃～45℃反应完全即可得到胺基磷酰氯；其中，三氯氧磷与胺的摩尔比为1～1.5：1，所用三氯氧磷与三乙胺的摩尔比为1:1；

当所述胺基磷酸双姜黄素酯类化合物结构如式(II)所示、且X＝O时，胺基磷酰氯的制备采用以下c步骤：

c.先将三氯氧磷和三乙胺溶于二氯甲烷或四氢呋喃中，在-10℃滴加饱和氮杂环的二氯甲烷溶液，然后升至室温反应完全即可得到环状胺基磷酰氯；其中，三氯氧磷与饱和氮杂环的摩尔比为1～1.5:1，三氯氧磷与三乙胺的摩尔比为1:1。

饱和氮杂环优选为氮杂环丙烷、2-甲基氮杂环丙烷、2,2-二甲基氮杂环丙烷、2-异丙基氮杂环丙烷、氮杂环丁烷、四氢吡咯、哌啶和氮杂环庚烷中的一种。

二、胺基磷酰氯与姜黄素反应得到所述胺基磷酸双姜黄素酯类化合物。

以二氯甲烷为溶剂，加入姜黄素和胺基磷酰氯，以三乙胺为碱，在-20℃～45℃反应完全得到所述胺基磷酸双姜黄素酯类化合物；其中三乙胺与姜黄素的摩尔比为1:1，姜黄素与胺基磷酰氯的摩尔比为2.5～2：1。

当式(I)和式(II)中的X＝S时，将上述步骤中的三氯氧磷更换成三氯硫磷，胺基磷酰氯更换成硫代胺基磷酰氯，其他步骤不变。

本发明所述胺基磷酸双姜黄素酯类化合物的用途，所述化合物用于制备抗肺癌、胃癌、白血病、乳腺癌及抗炎的药物中。

有益效果

本发明所述的胺基磷酸双姜黄素酯类化合物具有一定的抗肿瘤活性，其中化合物Cur-2、3、7、12、19、22、24、25的抗肿瘤活性与姜黄素相当，而化合物Cur-20、21、23、28、29、33、35的抗肿瘤活性与现在临床常用的顺铂相当或优于顺铂，且本发明所述的胺基磷酸双姜黄素酯类化合物毒性很低，具有良好的应用开发前景。

具体实施方式

下面通过以下胺基磷酸双姜黄素酯类化合物的合成及生物学评价对本发明作进一步说明，但下述实施例不应理解为对本发明的限制。

以下实施例中，熔点采用Fisher-John显微熔点仪测定(温度未经校正)；核磁共振光谱采用BrukerAvance400核磁共振仪测定，TMS(四甲基硅烷)为内标；LC-MS(液相色谱-质谱联用仪)数据采用VarianMS500测定，GC-MS(气相色谱-质谱联用仪)数据采用ThermoFisherDSQ-GCMS测定，紫外吸收采用NanoDrop2000/2000c紫外-可见分光光度计测定，荧光吸收采用Lumina荧光光度计测定，所用试剂均为分析纯试剂。

实施例1二{4-[(1E,6E)-7-(4-羟基-3-甲氧苯基)-3,5-二羰基庚-1,6-二烯-1-基]-2-甲氧苯基}胺基磷酸酯(Cur-1)的合成

氯化铵30g(0.56mol)加入新蒸馏的三氯氧磷180mL中，加热回流15h,待固体全部溶解，停止反应。减压将三氯氧磷蒸出，减压蒸馏得二氯磷酰胺52g，收率69.2％。

姜黄素1.84g(0.005mol)、二氯磷酰胺0.268g(0.002mol)溶于20mL二氯甲烷中并冷却至0℃，于该温度反应20min，然后逐滴加入三乙胺0.5g(0.005mol)的二氯甲烷溶液5mL，反应液升至室温反应1h,然后加热回流12h,停止反应，减压将溶剂蒸出得黄色油状液体，柱层析(流动相体积比石油醚：乙酸乙酯＝15:1)得二{4-[(1E,6E)-7-(4-羟基-3-甲氧苯基)-3,5-二羰基庚-1,6-二烯-1-基]-2-甲氧苯基}胺基磷酸酯(Cur-1)0.88g，收率55.6％。熔点(m.p):129-131℃。¹HNMR(400MHz,CDCl₃)δ：3.868(s,6H),3.936(s,6H),5.745(s,2H),5.832(s,2H),6.472-6.545(m,4H),6.905(d,2H),7.043-7.115(m,8H),7.327(d,2H),7.521-7.594(m,4H)；MS(ESI)m/z：798(M+H)。

实施例2N-甲基-二{4-[(1E,6E)-7-(4-羟基-3-甲氧苯基)-3,5-二羰基庚-1,6-二烯-1-基]-2-甲氧苯基}-胺基磷酸酯(Cur-2)的合成

甲铵盐酸盐30g(0.44mol)加入新蒸馏的三氯氧磷180mL中，加热回流12h,待固体全部溶解停止反应。减压将三氯氧磷蒸出，减压蒸馏得二氯磷酰甲胺39.6g，收率61.2％。¹HNMR(400MHz,CDCl₃)δ：2.826(s,3H),5.752(br,1H)；MS(EI)m/z：147(M⁺)。

姜黄素1.84g(0.005mol)、二氯磷酰甲胺0.294g(0.002mol)溶于20mL二氯甲烷中并冷却至0℃，于该温度反应20min；然后逐滴加入三乙胺0.5g(0.005mol)的二氯甲烷溶液5mL，滴加完毕，反应液升至室温反应1h,然后加热回流12h,停止反应，减压将二氯甲烷蒸出得黄色油状液体，柱层析(流动相体积比石油醚：乙酸乙酯＝15:1)得N-甲基-二{4-[(1E,6E)-7-(4-羟基-3-甲氧苯基)-3,5-二羰基庚-1,6-二烯-1-基]-2-甲氧苯基}-胺基磷酸酯(Cur-2)1.01g，收率62.4％。m.p:116-118℃。¹HNMR(400MHz,CDCl₃)δ：2.845(s,3H),3.856(s,6H),3.932(s,6H),5.622(br,1H),5.810(s,2H),6.466-6.525(m,4H),6.896(d,2H),7.006-7.085(m,8H),7.306(d,2H),7.521-7.598(m,4H)；MS(ESI)m/z：812(M+H)。

将甲胺盐酸盐换成乙胺盐酸盐，按同样操作可得Cur-3。

N-乙基-二{4-[(1E,6E)-7-(4-羟基-3-甲氧苯基)-3,5-二羰基庚-1,6-二烯-1-基]-2-甲氧苯基}-胺基磷酸酯(Cur-3)的实验结果：

收率60.5％。m.p:125-127℃。¹HNMR(400MHz,CDCl₃)δ：0.962(t,3H),3.045(t,2H),3.878(s,6H),3.940(s,6H),5.402(br,1H),5.836(s,2H),6.493-6.559(m,4H),6.902(d,2H),7.069-7.141(m,8H),7.328(d,2H),7.546-7.622(m,4H)；MS(ESI)m/z：826(M+H)。

实施例3N-戊基-二{4-[(1E,6E)-7-(4-羟基-3-甲氧苯基)-3,5-二羰基庚-1,6-二烯-1-基]-2-甲氧苯基}-胺基磷酸酯(Cur-4)的合成

三氯氧磷30.6g(0.2mol)溶于150mL二氯甲烷中并冷却至0℃，搅拌下逐滴加入正戊胺13.9g(0.16mol)和三乙胺20.2g(0.2mol)的二氯甲烷溶液50mL，0-5℃反应12h,减压将二氯甲烷蒸出，加入100mL甲苯，过滤，滤液减压浓缩得黄色液体，减压蒸馏得二氯磷酰戊胺24.9g，收率76.2％。¹HNMR(400MHz,CDCl₃)δ：0.912(t,3H),1.125-1.658(m,8H),2.835(t,2H)；MS(EI)m/z：204(M⁺)。

姜黄素1.84g(0.005mol)、二氯磷酰戊胺0.408g(0.002mol)溶于30mL二氯甲烷中并冷却至0℃，于该温度反应20min；然后逐滴加入三乙胺0.5g(0.005mol)的二氯甲烷溶液5mL，滴加完毕，反应液升至室温反应1h，然后加热回流15h，停止反应，减压将二氯甲烷蒸出得黄色油状液体，柱层析(流动相体积比石油醚：乙酸乙酯＝15:1)得N-戊基-二{4-[(1E,6E)-7-(4-羟基-3-甲氧苯基)-3,5-二羰基庚-1,6-二烯-1-基]-2-甲氧苯基}-胺基磷酸酯(Cur-4)1.22g，收率70.1％。熔点(m.p):141-143℃；¹HNMR(400MHz,CDCl₃)δ：0.906(t,3H),1.082-1.612(m,6H),2.826(t,2H),3.882(s,6H),3.940(s,6H),5.546(br,1H),5.787(s,2H),6.453-6.518(m,4H),6.872(d,2H),7.007-7.082(m,8H),7.315(d,2H),7.525-7.602(m,4H)；MS(ESI)m/z:868(M+H)。

分别以壬胺、十五烷基胺、异丁胺和2-乙基丁胺为起始原料，按同样实验操作可得Cur-5、Cur-6、Cur-7和Cur-8。

N-壬基-二{4-[(1E,6E)-7-(4-羟基-3-甲氧苯基)-3,5-二羰基庚-1,6-二烯-1-基]-2-甲氧苯基}-胺基磷酸酯(Cur-5)的实验结果：

收率56.4％。m.p:150-152℃；¹HNMR(400MHz,CDCl₃)δ：0.882(t,3H),1.108-1.621(m,14H),2.845(t,2H),3.836(s,6H),3.915(s,6H),5.446(br,1H),5.803(s,2H),6.456-6.522(m,4H),6.879(d,2H),7.007-7.105(m,8H),7.320(d,2H),7.525-7.602(m,4H)；MS(ESI)m/z:924(M+H)。

N-十五烷基-二{4-[(1E,6E)-7-(4-羟基-3-甲氧苯基)-3,5-二羰基庚-1,6-二烯-1-基]-2-甲氧苯基}-胺基磷酸酯(Cur-6)的实验结果：

收率39.2％。m.p:181-182℃；¹HNMR(400MHz,CDCl₃)δ：0.890(t,3H),1.126-1.651(m,26H),2.824(t,2H),3.840(s,6H),3.922(s,6H),5.512(br,1H),5.811(s,2H),6.443-6.519(m,4H),6.883(d,2H),7.023-7.195(m,8H),7.322(d,2H),7.533-7.608(m,4H)；MS(ESI)m/z:1009(M+H)。

N-异丁基-二{4-[(1E,6E)-7-(4-羟基-3-甲氧苯基)-3,5-二羰基庚-1,6-二烯-1-基]-2-甲氧苯基}-胺基磷酸酯(Cur-7)的实验结果：

收率42.1％。m.p:136-138℃；¹HNMR(400MHz,CDCl₃)δ：0.915(t,6H),1.745(m,1H),2.906(d,2H),3.852(s,6H),3.899(s,6H),5.665(br,1H),5.818(s,2H),6.429-6.533(m,4H),6.906(d,2H),7.015-7.163(m,8H),7.332(d,2H),7.552-7.606(m,4H)；MS(ESI)m/z:854(M+H)。

N-2-乙基丁基-二{4-[(1E,6E)-7-(4-羟基-3-甲氧苯基)-3,5-二羰基庚-1,6-二烯-1-基]-2-甲氧苯基}-胺基磷酸酯(Cur-8)的实验结果：

收率45.3％。m.p:151-152℃；¹HNMR(400MHz,CDCl₃)δ：0.882(t,6H),1.202(m,1H),1.306-1.352(m,4H),2.850(d,2H),3.849(s,6H),3.903(s,6H),5.5455(br,1H),5.812(s,2H),6.419-6.522(m,4H),6.918(d,2H),7.009-7.171(m,8H),7.336(d,2H),7.521-7.606(m,4H)；MS(ESI)m/z:882(M+H)。

实施例4N-叔丁基-二{4-[(1E,6E)-7-(4-羟基-3-甲氧苯基)-3,5-二羰基庚-1,6-二烯-1-基]-2-甲氧苯基}-胺基磷酸酯(Cur-9)的合成

三氯氧磷45.9g(0.3mol)溶于200mL二氯甲烷中并冷却至0℃，搅拌下逐滴加入叔丁胺14.8g(0.2mol)和三乙胺30.3g(0.3mol)的二氯甲烷溶液50mL，0-5℃反应12h，减压将二氯甲烷蒸出。加入100mL甲苯，过滤，滤液减压浓缩得黄色液体，减压蒸馏得二氯磷酰叔丁胺27.6g，收率72.5％。¹HNMR(400MHz,CDCl₃)δ：1.285(s,9H),5.676(br,1H)；MS(EI)m/z：190(M⁺)。

姜黄素1.84g(0.005mol)、二氯磷酰叔丁胺0.38g(0.002mol)溶于30mL二氯甲烷中并冷却至0℃，于该温度反应20min；然后逐滴加入三乙胺0.5g(0.005mol)的二氯甲烷溶液5mL，滴加完毕，反应液升至室温反应1h，然后加热回流12h，停止反应，减压将二氯甲烷蒸出得黄色油状液体，柱层析(流动相体积比石油醚：乙酸乙酯＝15:1)得N-叔丁基-二{4-[(1E,6E)-7-(4-羟基-3-甲氧苯基)-3,5-二羰基庚-1,6-二烯-1-基]-2-甲氧苯基}-胺基磷酸酯(Cur-9)0.88g，收率51.5％。m.p:155-157℃。¹HNMR(400MHz,CDCl₃)δ：1.296(s,9H),3.894(s,6H),3.975(s,6H),5.602(br,1H),5.838(s,2H),6.499-6.565(m,4H),6.958(d,2H),7.076-7.143(m,8H),7.355(d,2H),7.564-7.623(m,4H)；MS(ESI)m/z:854(M+H)。

实施例5N-苯基-二{4-[(1E,6E)-7-(4-羟基-3-甲氧苯基)-3,5-二羰基庚-1,6-二烯-1-基]-2-甲氧苯基}-胺基磷酸酯(Cur-10)的合成

三氯氧磷0.306g(0.002mol)、三乙胺0.202g(0.002mol)溶于20mL二氯甲烷中并冷却至-10℃，搅拌下逐滴加入苯胺0.186g(0.002mol)的二氯甲烷溶液8mL，滴加完毕，缓慢升至室温并继续反应1h得无色透明液体。

将姜黄素1.84g(0.005mol)、三乙胺0.5g(0.005mol)溶于15mL二氯甲烷中并冷却至-20℃，搅拌下将上步反应得到的液体逐滴加入，然后于-20℃反应20h，停止反应，减压将溶剂蒸出得黄色油状液体，柱层析(流动相体积比石油醚：乙酸乙酯＝20:1)得N-苯基-二{4-[(1E,6E)-7-(4-羟基-3-甲氧苯基)-3,5-二羰基庚-1,6-二烯-1-基]-2-甲氧苯基}-胺基磷酸酯(Cur-10)1.25g，收率71.6％。m.p:166-168℃。¹HNMR(400MHz,CDCl₃)δ：3.842(s,6H),3.896(s,6H),5.822(s,2H),6.456-6.518(m,4H),6.725(br,1H),6.892(d,2H),7.043-7.085(m,10H),7.369(d,2H),7.520-7.596(m,7H)；MS(ESI)m/z:874(M+H)。

分别以苄胺和苯丙胺为起始原料，按同样实验操作可得Cur-11和Cur-12。

N-苄基-二{4-[(1E,6E)-7-(4-羟基-3-甲氧苯基)-3,5-二羰基庚-1,6-二烯-1-基]-2-甲氧苯基}-胺基磷酸酯(Cur-11)的实验结果：

收率65.8％。m.p:162-164℃。¹HNMR(400MHz,CDCl₃)δ：3.863(s,6H),3.905(s,6H),3.955(s,2H),5.816(s,2H),6.442-6.530(m,4H),6.741(br,1H),6.886(d,2H),7.005-7.029(m,8H),7.369-7.425(m,7H),7.523-7.611(m,4H)；MS(ESI)m/z:888(M+H)。

N-苯丙基-二{4-[(1E,6E)-7-(4-羟基-3-甲氧苯基)-3,5-二羰基庚-1,6-二烯-1-基]-2-甲氧苯基}-胺基磷酸酯(Cur-12)的实验结果：

收率60.6％。m.p:171-173℃。¹HNMR(400MHz,CDCl₃)δ：1.751(m,2H),2.625(t,2H),2.902(t,2H),3.882(s,6H),3.923(s,6H),5.821(s,2H),6.433-6.534(m,4H),6.628(br,1H),6.902(d,2H),7.002-7.028(m,8H),7.346-7.423(m,7H),7.546-7.601(m,4H)；MS(ESI)m/z:916(M+H)。

实施例6N，N-二甲基-二{4-[(1E,6E)-7-(4-羟基-3-甲氧苯基)-3,5-二羰基庚-1,6-二烯-1-基]-2-甲氧苯基}-胺基磷酸酯(Cur-13)的合成

二甲铵盐酸盐35g(0.4mol)加入新蒸馏的三氯氧磷200mL中，加热回流15h,待固体全部溶解停止反应。减压将三氯氧磷蒸出，减压蒸馏得二氯磷酰二甲胺33.8g，收率52.6％。¹HNMR(400MHz,CDCl₃)δ：3.256(s,6H)；MS(EI)m/z:161(M⁺)。

姜黄素1.84g(0.005mol)、二氯磷酰二甲胺0.324g(0.002mol)溶于20mL二氯甲烷中并冷却至0℃，于该温度反应20min；然后逐滴加入三乙胺0.5g(0.005mol)的二氯甲烷溶液5mL，滴加完毕，反应液升至室温反应1h,然后加热回流14h,停止反应，减压将二氯甲烷蒸出得黄色油状液体，柱层析(流动相体积比石油醚：乙酸乙酯＝15:1)得N，N-二甲基-二{4-[(1E,6E)-7-(4-羟基-3-甲氧苯基)-3,5-二羰基庚-1,6-二烯-1-基]-2-甲氧苯基}-胺基磷酸酯(Cur-13)1.12g，收率68.2％。m.p:134-136℃。¹HNMR(400MHz,CDCl₃)δ：3.243(s,6H),3.876(s,6H),3.925(s,6H),5.832(s,2H),6.508-6.545(m,4H),6.902(d,2H),7.042-7.114(m,8H),7.325(d,2H),7.553-7.615(m,4H)；MS(ESI)m/z：826(M+H)。

以二乙胺盐酸盐为起始原料按同样实验操作可得Cur-14。

N，N-二乙基-二{4-[(1E,6E)-7-(4-羟基-3-甲氧苯基)-3,5-二羰基庚-1,6-二烯-1-基]-2-甲氧苯基}-胺基磷酸酯(Cur-14)的实验结果：

收率56.3％。m.p:138-140℃。¹HNMR(400MHz,CDCl₃)δ：0.976(t,6H),2.668(t,4H),3.865(s,6H),3.917(s,6H),5.818(s,2H),6.512-6.545(m,4H),6.915(d,2H),7.009-7.129(m,8H),7.336(d,2H),7.542-7.618(m,4H)；MS(ESI)m/z：854(M+H)。

实施例7N，N-二丁基-二{4-[(1E,6E)-7-(4-羟基-3-甲氧苯基)-3,5-二羰基庚-1,6-二烯-1-基]-2-甲氧苯基}-胺基磷酸酯(Cur-15)的合成

三氯氧磷0.306g(0.002mol)、三乙胺0.202g(0.002mol)溶于20mL二氯甲烷中并冷却至-10℃，搅拌下逐滴加入二丁基胺0.258g(0.002mol)的二氯甲烷溶液5mL，滴加完毕，缓慢升至室温并继续反应1h，过滤得无色透明液体。

将姜黄素1.84g(0.005mol)、三乙胺0.5g(0.005mol)溶于15mL二氯甲烷中并冷却至-20℃，搅拌下将上步反应得到的液体逐滴加入，然后于-20℃反应24h，停止反应，过滤，滤液减压将二氯甲烷蒸出得黄色油状液体，柱层析(流动相体积比石油醚：乙酸乙酯＝20:1)得N，N-二丁基-二{4-[(1E,6E)-7-(4-羟基-3-甲氧苯基)-3,5-二羰基庚-1,6-二烯-1-基]-2-甲氧苯基}-胺基磷酸酯(Cur-15)1.06g，收率58.5％。m.p:161-163℃。¹HNMR(400MHz,CDCl₃)δ：0.923(t,6H),1.142-1.695(m,8H),3.056(t,4H),3.856(s,6H),3.926(s,6H),5.815(s,2H),6.456-6.522(m,4H),6.863(d,2H),7.026-7.096(m,8H),7.315(d,2H),7.522-7.601(m,4H)；MS(ESI)m/z:910(M+H)。

分别以二庚胺和二癸胺为起始原料，按同样实验操作可得Cur-16和Cur-17。

N，N-二庚基-二{4-[(1E,6E)-7-(4-羟基-3-甲氧苯基)-3,5-二羰基庚-1,6-二烯-1-基]-2-甲氧苯基}-胺基磷酸酯(Cur-16)的实验结果：

收率46.3％。m.p:192-193℃。¹HNMR(400MHz,CDCl₃)δ：0.888(t,6H),1.125-1.516(m,20H),2.822(t,4H),3.838(s,6H),3.899(s,6H),5.808(s,2H),6.429-6.551(m,4H),6.821(d,2H),7.009-7.198(m,8H),7.325(d,2H),7.536-7.608(m,4H)；MS(ESI)m/z:995(M+H)。

N，N-二癸基-二{4-[(1E,6E)-7-(4-羟基-3-甲氧苯基)-3,5-二羰基庚-1,6-二烯-1-基]-2-甲氧苯基}-胺基磷酸酯(Cur-17)的实验结果：

收率33.5％。m.p:195-196℃。¹HNMR(400MHz,CDCl₃)δ：0.891(t,6H),1.109-1.526(m,32H),2.836(t,4H),3.855(s,6H),3.912(s,6H),5.816(s,2H),6.445-6.562(m,4H),6.839(d,2H),7.006-7.185(m,8H),7.336(d,2H),7.549-7.602(m,4H)；MS(ESI)m/z:995(M+H)。

实施例8二{4-[(1E,6E)-7-(4-羟基-3-甲氧苯基)-3,5-二羰基庚-1,6-二烯-1-基]-2-甲氧苯基}-氮杂环丁烷-1-基磷酸酯(Cur-18)的合成

三氯氧磷0.306g(0.002mol)、三乙胺0.202g(0.002mol)溶于20mL二氯甲烷中并冷却至-10℃，搅拌下逐滴加入氮杂环丁烷0.114g(0.002mol)的二氯甲烷溶液5mL，滴加完毕，缓慢升至室温并继续反应3h，过滤得无色透明液体。

将姜黄素1.84g(0.005mol)、三乙胺0.5g(0.005mol)溶于15mL二氯甲烷中并冷却至-20℃，搅拌下将上步反应得到的液体逐滴加入，然后于-20℃反应24h，停止反应，过滤，滤液减压将二氯甲烷蒸出得黄色油状液体，柱层析(流动相体积比石油醚：乙酸乙酯＝15:1)得二{4-[(1E,6E)-7-(4-羟基-3-甲氧苯基)-3,5-二羰基庚-1,6-二烯-1-基]-2-甲氧苯基}-氮杂环丁烷-1-基磷酸酯(Cur-18)0.78g，收率46.4％。m.p:120-122℃。¹HNMR(400MHz,CDCl₃)δ：2.346(m,2H),3.685(t,4H),3.848(s,6H),3.933(s,6H),5.808(s,2H),6.423-6.605(m,4H),6.875(d,2H),7.005-7.132(m,8H),7.338(d,2H),7.518-7.622(m,4H)；MS(ESI)m/z:838(M+H)。

实施例9二{4-[(1E,6E)-7-(4-羟基-3-甲氧苯基)-3,5-二羰基庚-1,6-二烯-1-基]-2-甲氧苯基}-吡咯啶-1-基磷酸酯(Cur-19)的合成

三氯氧磷0.306g(0.002mol)、三乙胺0.202g(0.002mol)溶于20mL二氯甲烷中并冷却至-10℃，搅拌下逐滴加入四氢吡咯0.144g(0.002mol)的二氯甲烷溶液5mL，滴加完毕，缓慢升至室温并继续反应3h，过滤得无色透明液体。

将姜黄素1.84g(0.005mol)、三乙胺0.5g(0.005mol)溶于15mL二氯甲烷中并冷却至-20℃，搅拌下将上步反应得到的液体逐滴加入，然后于-20℃反应24h，停止反应，过滤，滤液减压将二氯甲烷蒸出得黄色油状液体，柱层析(流动相体积比石油醚：乙酸乙酯＝15:1)得二{4-[(1E,6E)-7-(4-羟基-3-甲氧苯基)-3,5-二羰基庚-1,6-二烯-1-基]-2-甲氧苯基}-吡咯啶-1-基磷酸酯(Cur-19)1.03g，收率60.5％。m.p:136-138℃。¹HNMR(400MHz,CDCl₃)δ：2.132(t,4H),3.365(t,4H),3.876(s,6H),3.955(s,6H),5.811(s,2H),6.436-6.625(m,4H),6.882(d,2H),7.007-7.146(m,8H),7.386(d,2H),7.505-7.596(m,4H)；MS(ESI)m/z:852(M+H)。

实施例10N-2-氯乙基-二{4-[(1E,6E)-7-(4-羟基-3-甲氧苯基)-3,5-二羰基庚-1,6-二烯-1-基]-2-甲氧苯基}-胺基磷酸酯(Cur-20)的合成

β-氯乙基胺盐酸盐30g(0.26mol)、三氯氧磷40g(0.26mol)加入200mL二氯甲烷中并冷却至-20℃，搅拌下逐滴加入三乙胺26g(0.26mol)的二氯甲烷溶液100mL，滴加完毕，逐渐升至室温并反应过夜，减压将溶剂蒸出，减压蒸馏得β-氯乙基胺基磷酰氯33.6g，收率为53.6％。

将姜黄素1.84g(0.005mol)、三乙胺0.5g(0.005mol)溶于15mL二氯甲烷中并冷却至-20℃，搅拌下逐滴加入β-氯乙基胺基磷酰氯0.48g(0.002mol)的二氯甲烷溶液5mL，然后于-20℃反应24h，停止反应，过滤，滤液减压将二氯甲烷蒸出得黄色油状液体，柱层析(流动相体积比石油醚：乙酸乙酯＝15:1)得N-2-氯乙基-二{4-[(1E,6E)-7-(4-羟基-3-甲氧苯基)-3,5-二羰基庚-1,6-二烯-1-基]-2-甲氧苯基}-胺基磷酸酯(Cur-20)0.81g，收率45.2％。m.p:135-137℃。¹HNMR(400MHz,CDCl₃)δ：3.448(t,2H),3.726(t,2H),3.879(s,6H),3.940(s,6H),5.824(s,2H),6.472-6.566(m,4H),6.825(d,2H),7.005-7.125(m,8H),7.346(d,2H),7.517-7.623(m,4H)；MS(ESI)m/z:861(M+H)。

实施例11N，N-二(2-氯乙基)-二{4-[(1E,6E)-7-(4-羟基-3-甲氧苯基)-3,5-二羰基庚-1,6-二烯-1-基]-2-甲氧苯基}-胺基磷酸酯(Cur-21)的合成

双-(β-氯乙基)胺盐酸盐30g(0.12mol)加入新蒸馏的三氯氧磷180mL中，加热回流24h,待固体全部溶解，停止反应。减压将三氯氧磷蒸出，得白色固体，石油醚-丙酮重结晶得N,N-二-(β-氯乙基)胺基磷酰氯22.9g，收率为73.6％,m.p:55-56℃(JournalofTheAmericanChemicalSociety,76(3),655-658,1954)。

将姜黄素1.84g(0.005mol)、N,N-二-(β-氯乙基)胺基磷酰氯0.518g(0.002mol)溶于20mL甲苯中，冷却至-10℃并于该温度反应20min；然后逐滴加入三乙胺0.5g(0.005mol)的甲苯溶液5mL，反应液升至室温反应18h，停止反应，减压将甲苯蒸出得黄色油状液体，柱层析(流动相体积比石油醚：乙酸乙酯＝15:1)得N，N-二(2-氯乙基)-二{4-[(1E,6E)-7-(4-羟基-3-甲氧苯基)-3,5-二羰基庚-1,6-二烯-1-基]-2-甲氧苯基}-胺基磷酸酯(Cur-21)1.34g，收率72.5％。m.p:148-150℃。¹HNMR(400MHz,CDCl₃)δ：3.425(t,4H),3.723(t,4H),3.845(s,6H),3.927(s,6H),5.812(s,2H),6.456-6.583(m,4H),6.913(d,2H),7.006-7.115(m,8H),7.346(d,2H),7.521-7.604(m，4H)；MS(ESI)m/z：923(M+H)。

分别以β-溴乙基胺盐酸盐和双-(β-溴乙基)胺盐酸盐为起始原料，按同样实验操作可得Cur-22和Cur-23。

N-2-溴乙基-二{4-[(1E,6E)-7-(4-羟基-3-甲氧苯基)-3,5-二羰基庚-1,6-二烯-1-基]-2-甲氧苯基}-胺基磷酸酯(Cur-22)的实验结果：

收率41.5％。m.p:139-141℃。¹HNMR(400MHz,CDCl₃)δ：3.516(t,2H),3.645(t,2H),3.881(s,6H),3.941(s,6H),5.824(s,2H),6.472-6.566(m,4H),6.825(d,2H),7.005-7.125(m,8H),7.346(d,2H),7.517-7.623(m,4H)；MS(ESI)m/z:905(M+H)。

N，N-二(2-溴乙基)-二{4-[(1E,6E)-7-(4-羟基-3-甲氧苯基)-3,5-二羰基庚-1,6-二烯-1-基]-2-甲氧苯基}-胺基磷酸酯(Cur-23)的实验结果：

收率50.2％。m.p:161-162℃。¹HNMR(400MHz,CDCl₃)δ：3.532(t,4H),3.625(t,4H),3.845(s,6H),3.9362(s,6H),5.812(s,2H),6.456-6.583(m,4H),6.913(d,2H),7.006-7.115(m,8H),7.346(d,2H),7.521-7.604(m,4H)；MS(ESI)m/z：1012(M+H)。

实施例12二{4-[(1E,6E)-7-(4-羟基-3-甲氧苯基)-3,5-二羰基庚-1,6-二烯-1-基]-2-甲氧苯基}-N-(2-氯丙基)-胺基磷酸酯(Cur-24)的合成

三氯氧磷0.306g(0.002mol)、三乙胺0.202g(0.002mol)溶于20mL二氯甲烷中并冷却至-10℃，搅拌下逐滴加入2-氯丙胺0.187g(0.002mol)的二氯甲烷溶液5mL，滴加完毕，缓慢升至室温并继续反应3h，过滤得无色透明液体。

将姜黄素1.84g(0.005mol)、三乙胺0.5g(0.005mol)溶于15mL二氯甲烷中并冷却至-20℃，搅拌下将上步反应得到的液体逐滴加入，然后于-20℃反应24h，停止反应，过滤，滤液减压将二氯甲烷蒸出得黄色油状液体，柱层析(流动相体积比石油醚：乙酸乙酯＝15:1)得二{4-[(1E,6E)-7-(4-羟基-3-甲氧苯基)-3,5-二羰基庚-1,6-二烯-1-基]-2-甲氧苯基}-N-(2-氯丙基)-胺基磷酸酯(Cur-24)1.1g，收率63.2％。m.p:147-149℃。¹HNMR(400MHz,CDCl₃)δ：1.524(d,3H),2.652(d,2H),3.338(m,1H),3.865(s,6H),3.928(s,6H),5.818(s,2H),6.429-6.628(m,4H),6.736(br,1H)，6.895(d,2H),7.011-7.155(m,8H),7.386(d,2H),7.523-7.606(m,4H)；MS(ESI)m/z:875(M+H)。

实施例13二{4-[(1E,6E)-7-(4-羟基-3-甲氧苯基)-3,5-二羰基庚-1,6-二烯-1-基]-2-甲氧苯基}-N-(2-氯-2-甲基丙基)-胺基磷酸酯(Cur-25)的合成

三氯氧磷0.306g(0.002mol)、三乙胺0.202g(0.002mol)溶于20mL二氯甲烷中并冷却至-10℃，搅拌下逐滴加入2-氯-2-甲基丙胺0.215g(0.002mol)的二氯甲烷溶液5mL，滴加完毕，缓慢升至室温并继续反应4h，过滤得无色透明液体。

将姜黄素1.84g(0.005mol)、三乙胺0.5g(0.005mol)溶于15mL二氯甲烷中并冷却至-20℃，搅拌下将上步反应得到的液体逐滴加入，然后于-20℃反应24h，停止反应，过滤，滤液减压将二氯甲烷蒸出得黄色油状液体，柱层析(流动相体积比石油醚：乙酸乙酯＝15:1)得二{4-[(1E,6E)-7-(4-羟基-3-甲氧苯基)-3,5-二羰基庚-1,6-二烯-1-基]-2-甲氧苯基}-N-(2-氯-2-甲基丙基)-胺基磷酸酯(Cur-25)0.96g，收率54.3％。m.p:142-144℃。¹HNMR(400MHz,CDCl₃)δ：1.626(s,6H),3.125(s,2H),3.866(s,6H),3.926(s,6H),5.820(s,2H),6.429-6.628(m,4H),6.736(br,1H)，6.895(d,2H),7.011-7.155(m,8H),7.386(d,2H),7.523-7.606(m,4H)；MS(ESI)m/z:889(M+H)。

分别以2-溴丙胺和2-溴-2-甲基丙胺为起始原料，按同样实验操作可得Cur-26和Cur-27。二{4-[(1E,6E)-7-(4-羟基-3-甲氧苯基)-3,5-二羰基庚-1,6-二烯-1-基]-2-甲氧苯基}-N-(2-溴丙基)-胺基磷酸酯(Cur-26)的实验结果：

收率50.6％。m.p:150-152℃。¹HNMR(400MHz,CDCl₃)δ：1.548(d,3H),2.663(d,2H),3.452(m,1H),3.865(s,6H),3.928(s,6H),5.818(s,2H),6.429-6.628(m,5H),6.895(d,2H),7.011-7.155(m,8H),7.386(d,2H),7.523-7.606(m,4H)；MS(ESI)m/z:919(M+H)。

二{4-[(1E,6E)-7-(4-羟基-3-甲氧苯基)-3,5-二羰基庚-1,6-二烯-1-基]-2-甲氧苯基}-N-(2-溴-2-甲基丙基)-胺基磷酸酯(Cur-27)的实验结果：

收率58.5％。m.p:140-143℃。¹HNMR(400MHz,CDCl₃)δ：1.655(s,6H),3.206(s,2H),3.866(s,6H),3.926(s,6H),5.820(s,2H),6.429-6.628(m,4H),6.736(br,1H)，6.895(d,2H),7.011-7.155(m,8H),7.386(d,2H),7.523-7.606(m,4H)；MS(ESI)m/z:933(M+H)。

实施例14二{4-[(1E,6E)-7-(4-羟基-3-甲氧苯基)-3,5-二羰基庚-1,6-二烯-1-基]-2-甲氧苯基}-吖丙啶-1-基磷酸酯(Cur-28)的合成

三氯氧磷0.306g(0.002mol)、三乙胺0.202g(0.002mol)溶于20mL二氯甲烷中并冷却至-10℃，搅拌下逐滴加入氮杂环丙烷0.082g(0.002mol)的二氯甲烷溶液5mL，滴加完毕，缓慢升至室温并继续反应3h，过滤得无色透明液体。

将姜黄素1.84g(0.005mol)、三乙胺0.5g(0.005mol)溶于15mL二氯甲烷中并冷却至-20℃，搅拌下将上步反应得到的液体逐滴加入，然后于-20℃反应24h，停止反应，过滤，滤液减压将二氯甲烷蒸出得黄色油状液体，柱层析(流动相体积比石油醚：乙酸乙酯＝15:1)得二{4-[(1E,6E)-7-(4-羟基-3-甲氧苯基)-3,5-二羰基庚-1,6-二烯-1-基]-2-甲氧苯基}-吖丙啶-1-基磷酸酯(Cur-28)0.6g，收率36.5％。m.p:147-149℃。¹HNMR(400MHz,CDCl₃)δ：2.032(d,4H),3.836(s,6H),3.941(s,6H),5.819(s,2H),6.436-6.612(m,4H),6.906(d,2H),7.008-7.149(m,8H),7.375(d,2H),7.527-7.625(m,4H)；MS(ESI)m/z:824(M+H)。

实施例15二{4-[(1E,6E)-7-(4-羟基-3-甲氧苯基)-3,5-二羰基庚-1,6-二烯-1-基]-2-甲氧苯基}-2-甲基吖丙啶-1-基磷酸酯(Cur-29)的合成

三氯氧磷0.306g(0.002mol)、三乙胺0.202g(0.002mol)溶于20mL二氯甲烷中并冷却至-10℃，搅拌下逐滴加入2-甲基氮杂环丙烷0.114g(0.002mol)的二氯甲烷溶液5mL，滴加完毕，缓慢升至室温并继续反应3h，过滤得无色透明液体。

将姜黄素1.84g(0.005mol)、三乙胺0.5g(0.005mol)溶于15mL二氯甲烷中并冷却至-20℃，搅拌下将上步反应得到的溶液逐滴加入，然后于-20℃反应24h，停止反应，过滤，滤液减压将二氯甲烷蒸出得黄色油状液体，柱层析(流动相体积比石油醚：乙酸乙酯＝15:1)得二{4-[(1E,6E)-7-(4-羟基-3-甲氧苯基)-3,5-二羰基庚-1,6-二烯-1-基]-2-甲氧苯基}-2-甲基吖丙啶-1-基磷酸酯(Cur-29)0.525g，收率31.4％。m.p:148-149℃。¹HNMR(400MHz,CDCl₃)δ：1.271(d,3H),1.845(dd,1H),2.352(dd,1H),2.543(dd,1H),3.839(s,6H),3.945(s,6H),5.815(s,2H),6.436-6.612(m,4H),6.910(d,2H),7.007-7.149(m,8H),7.375(d,2H),7.527-7.619(m,4H)；MS(ESI)m/z:838(M+H)。

分别以2,2-二甲基氮杂环丙烷和2-异丙基氮杂环丙烷为起始原料，按同样实验操作可得Cur-30和Cur-31。

二{4-[(1E,6E)-7-(4-羟基-3-甲氧苯基)-3,5-二羰基庚-1,6-二烯-1-基]-2-甲氧苯基}-2，2-二甲基吖丙啶-1-基磷酸酯(Cur-30)的实验结果：

收率36.5％。m.p:139-141℃。¹HNMR(400MHz,CDCl₃)δ：1.286(s,6H),1.852(d,1H),2.354(d,1H),3.838(s,6H),3.942(s,6H),5.818(s,2H),6.436-6.612(m,4H),6.910(d,2H),7.007-7.149(m,8H),7.375(d,2H),7.527-7.619(m,4H)；MS(ESI)m/z:852(M+H)。

二{4-[(1E,6E)-7-(4-羟基-3-甲氧苯基)-3,5-二羰基庚-1,6-二烯-1-基]-2-甲氧苯基}-2-异丙基吖丙啶-1-基磷酸酯(Cur-31)的实验结果：

收率40.5％。m.p:152-153℃。¹HNMR(400MHz,CDCl₃)δ：0.921(d,6H),1.312(m,1H),1.906(dd,1H),2.346(dd,1H),3.839(s,6H),3.945(s,6H),5.815(s,2H),6.436-6.612(m,4H),6.910(d,2H),7.007-7.149(m,8H),7.375(d,2H),7.527-7.619(m,4H)；MS(ESI)m/z:866(M+H)。

实施例16O,O-二{4-[(1E,6E)-7-(4-羟基-3-甲氧苯基)-3,5-二羰基庚-1,6-二烯-1-基]-2-甲氧苯基}硫代磷酰胺(Cur-32)的合成

氯化铵30g(0.56mol)加入新蒸馏的三氯硫磷120mL中，加热回流20h,待固体全部溶解，停止反应。减压将三氯氧磷蒸出，减压蒸馏得二氯硫代磷酰胺49g，收率为58.5％。

将姜黄素1.84g(0.005mol)、二氯硫代磷酰胺0.3g(0.002mol)溶于25mL二氯甲烷中，冷却至0℃并于该温度反应20min；然后逐滴加入三乙胺0.5g(0.005mol)的二氯甲烷溶液5mL，反应液升至室温并继续反应18h,停止反应，减压将二氯甲烷蒸出得黄色油状液体，柱层析(流动相体积比石油醚：乙酸乙酯＝15:1)得黄色粉末状固体0.82g，收率为50.2％。m.p:190-191℃。¹HNMR(400MHz,CDCl₃)δ：3.870(s,6H),3.936(s,6H),5.745(s,2H),5.836(s,2H),6.472-6.545(m,4H),6.905(d,2H),7.043-7.115(m,8H),7.327(d,2H),7.521-7.594(m,4H)；MS(ESI)m/z：814(M+H)。

实施例17O,O-二{4-[(1E,6E)-7-(4-羟基-3-甲氧苯基)-3,5-二羰基庚-1,6-二烯-1-基]-2-甲氧苯基}-吖丙啶-1-基硫代磷酸酯(Cur-33)的合成

三氯硫磷34g(0.2mol)、三乙胺20.2g(0.2mol)加入100mL四氢呋喃中并冷却至-10℃，搅拌下逐滴加入氮杂环丙烷8.2g(0.2mol)，滴加完毕，缓慢升至室温并继续反应10h，过滤得无色透明液体。滤液减压浓缩得浅黄色液体，减压蒸馏得N-硫代二氯磷酰乙烯亚胺23g，收率66.3％。GC-MS(EI)m/z:174(M⁺)。

N-硫代二氯磷酰乙烯亚胺0.87g(0.005mol)、三乙胺1.01g(0.01mol)溶于20mL二氯甲烷中并冷却至0℃，搅拌下逐滴加入姜黄素3.68g(0.01mol)的二氯甲烷溶液30mL，滴加完毕，保持0-5℃反应30min，缓慢升至室温并继续反应16h，过滤得黄色透明液体。滤液减压浓缩得黄色油状液体，柱层析(流动相体积比石油醚：乙酸乙酯＝15:1)得黄色粉末状固体1.62g，收率38.6％。m.p:142-144℃。¹HNMR(400MHz,CDCl₃)δ：2.041(d,4H),3.836(s,6H),3.941(s,6H),5.825(s,2H),6.436-6.612(m,4H),6.906(d,2H),7.008-7.149(m,8H),7.375(d,2H),7.527-7.625(m,4H)；MS(ESI)m/z:840(M+H)。

实施例18N-2-氯乙基-O，O-二{4-[(1E,6E)-7-(4-羟基-3-甲氧苯基)-3,5-二羰基庚-1,6-二烯-1-基]-2-甲氧苯基}-胺基硫代磷酸酯(Cur-34)的合成

2-氯乙胺盐酸盐29g(0.25mol)加入三氯硫磷170g(1mol)中，加热回流20h，停止反应。减压蒸馏，先将过量三氯硫磷蒸出，然后得二氯硫代磷酰氯乙胺35.1g，收率66.3％。GC-MS(EI)m/z:212(M⁺)。

二氯硫代磷酰氯乙胺1.06g(0.005mol)、三乙胺1.01g(0.01mol)溶于20mL二氯甲烷中并冷却至0℃，搅拌下逐滴加入姜黄素3.68g(0.01mol)的二氯甲烷溶液30mL，滴加完毕，保持0-5℃反应30min，缓慢升至室温并继续反应20h，过滤得黄色透明液体。滤液减压浓缩得黄色油状液体，柱层析(流动相体积比石油醚：乙酸乙酯＝15:1)得黄色粉末状固体2.19g，收率50.2％。m.p:160-161℃。¹HNMR(400MHz,CDCl₃)δ：3.448(t,2H),3.726(t,2H),3.882(s,6H),3.945(s,6H),5.820(s,2H),6.472-6.566(m,4H),6.825(d,2H),7.005-7.125(m,8H),7.346(d,2H),7.517-7.623(m,4H)；MS(ESI)m/z:877(M+H)。

实施例19N，N-二(2-氯乙基)-O,O-二{4-[(1E,6E)-7-(4-羟基-3-甲氧苯基)-3,5-二羰基庚-1,6-二烯-1-基]-2-甲氧苯基}-胺基硫代磷酸酯(Cur-35)的合成

二(2-氯乙基)胺盐酸盐29.8g(0.17mol)加入三氯硫磷108g(0.64mol)中，加热回流24h，停止反应。减压蒸馏将过量三氯硫磷蒸出得白色固体，石油醚-丙酮重结晶得然后得N，N-二(2-氯乙基)胺基硫代磷酰二氯28.2g，收率60.5％。m.p:30-32℃，GC-MS(EI)m/z:274(M⁺)。

N，N-二(2-氯乙基)胺基硫代磷酰二氯1.38g(0.005mol)、三乙胺1.01g(0.01mol)溶于20mL二氯甲烷中并冷却至0℃，搅拌下逐滴加入姜黄素3.68g(0.01mol)的二氯甲烷溶液30mL，滴加完毕，保持0-5℃反应30min，缓慢升至室温并继续反应24h，过滤得黄色透明液体。滤液减压浓缩得黄色油状液体，柱层析(流动相体积比石油醚：乙酸乙酯＝15:1)得黄色粉末状固体2.17g，收率46.3％。m.p:180-182℃。¹HNMR(400MHz,CDCl₃)δ：2.546(t,4H),3.612(t,4H),3.845(s,6H),3.927(s,6H),5.812(s,2H),6.456-6.583(m,4H),6.913(d,2H),

7.006-7.115(m,8H),7.346(d,2H),7.521-7.604(m,4H)；MS(ESI)m/z:939(M+H)。

实施例20抗肿瘤活性研究

对实施例中制得的胺基磷酸双姜黄素酯类化合物Cur-1～Cur-35分别进行了体外抗肿瘤活性筛选，被筛选的肿瘤细胞株有：人体肝癌细胞HepG2、人体乳腺癌细胞MCF-7、人体肺癌细胞A549和人体结肠癌细胞HCT-116，选用姜黄素和顺铂为阳性对照，体外抗肿瘤活性筛选实验采用CCK-8试剂盒法，具体操作如下：将筛选用的肿瘤细胞株培养液(100微升5000个细胞)接种于96孔板上，同时加入10μL受试化合物4‰(物质的量千分比)DMSO(二甲基亚砜)水溶液(受试化合物浓度分别依次为0.1μg/ml、0.4μg/ml、2μg/ml、10μg/ml和50μg/ml)进行37℃恒温培养48h；然后每孔加入10μL的CCK-8溶液，在细胞培养箱内继续培养4h，得到培养液。用紫外分光光度计在450nm波长处测定培养液吸光度，并计算受试化合物IC₅₀值，测试结果见表1。

实验结果表明：本发明所述多数化合物对四种肿瘤细胞模型表现出一定抑制作用，其中化合物Cur-2、Cur-3、Cur-7、Cur-12、Cur-19、Cur-22、Cur-24和Cur-25对四种肿瘤细胞均表现出良好的抑制作用，与姜黄素相当；而化合物Cur-20、Cur-21、Cur-23、Cur-28、Cur-29、Cur-33和Cur-35表现出很强的抑制作用；与顺铂相当或优于顺铂，具有良好的应用开发前景。

表1受试化合物的体外抗肿瘤活性

本发明包括但不限于以上实施例，凡是在本发明精神的原则之下进行的任何等同替换或局部改进，都将视为在本发明的保护范围之内。