一种治疗脓毒症心功能障碍的中药组合物

摘要

本发明公开了一种治疗脓毒症心功能障碍的药物，该药物由活性成份和药学上可接受的赋形剂组成，其中所述的活性成份是由下述原料制成：桂枝、丹参、太子参、苏合香酯、人工牛黄、生大黄。用本发明的中药组合物有效组分和赋形剂共同制备成，可以有效改善脓毒症心功能障碍患者的心功能，降低死亡率、心肌损伤标记物以及炎症介质，且未见不良反应。本药物填补了该治疗领域的空白。

说明书

技术领域

本发明涉及一种中药组合物，特别涉及一种治疗脓毒症心功能障碍的中药组合物。

背景技术

脓毒症(sepsis)是感染引起的全身性炎症反应综合症候群。据统计，每年全球约有1,800 多万脓毒症病例，并且以每年1.5％～8.0％的速度不断增长。脓毒症的病情凶险，病死率高， 全球每天约14,000人死于脓毒症，是重症监护病房内非心脏病人死亡的主要原因。尽管抗感 染治疗和器官功能支持技术取得了显著的进步，目前脓毒症的病死率仍高达30％～70％，且 该病治疗费用高，医疗资源消耗大，严重危害人类健康。

脓毒症心功能障碍(sepsismyocardialdysfunction)是指脓毒症患者并发心室扩大和射血 分数降低的临床综合征，其临床发生率达60％，是脓毒症死亡的重要原因之一。心脏做为受 累器官，其功能受损与脓毒症病死率升高密切相关。但目前临床上尚无治疗脓毒症心功能障 碍的有效药物。

发明内容

本发明的目的在于提供一种治疗脓毒症心功能障碍的中药组合物。

本发明所采取的技术方案是：

一种治疗脓毒症心功能障碍的中药组合物，其有效成分的原料药的质量组成为：桂枝14～ 16份、丹参14～16份、太子参18～22份、生大黄17～23份、苏合香酯0.9～1.3份、人工 牛黄0.8～1.2份。优选的，其有效成分的原料药的质量组成为：桂枝14～15份、丹参15～ 16份、太子参19～20份、生大黄18～20份、苏合香酯0.9～1.1份、人工牛黄0.9～1.1份。 更佳的，其有效成分的原料药的质量组成为：桂枝14～15份、丹参15～16份、太子参19～ 20份、生大黄18～20份、苏合香酯0.9～1.1份、人工牛黄0.9～1.1份。

桂枝、丹参、太子参和生大黄的有效成分为其水提物。

优选的，中药组合物的剂型为口服剂。口服剂选自胶囊剂、软胶囊剂、颗粒剂、片剂、 滴丸剂或口服液。

一种治疗脓毒症心功能障碍的中药组合物的制备方法，包括如下步骤：

1)取桂枝、丹参、太子参和生大黄加水煎煮，过滤后合并滤液，浓缩为浓缩液；

2)在浓缩液中加入乙醇，10℃以下静置至少8h；

3)回收乙醇，浓缩至相对密度为1.10～1.20，得浸膏；

4)取取苏合香脂和人工牛黄，粉碎，得药粉；

5)将浸膏和药粉混匀，干燥，加入可接受的药用辅料，制备得到口服剂；

其中，桂枝、丹参、太子参、生大黄、苏合香脂和人工牛黄的配比如上所述。

本发明的有益效果是：

本发明药物能够更有效降低心肌损伤标记物、改善心功能、降低死亡率、抑制炎症反应 和心肌细胞凋亡，保护内皮功能，改善血流动力学等作用，对于脓毒症心功能障碍患者具有 多靶点、多层次的心血管保护作用，填补了该治疗领域的空白。

具体实施方式

一种治疗脓毒症心功能障碍的中药组合物，其有效成分的原料药的质量组成为：桂枝14～ 16份、丹参14～16份、太子参18～22份、生大黄17～23份、苏合香酯0.9～1.3份、人工 牛黄0.8～1.2份。优选的，其有效成分的原料药的质量组成为：桂枝14～15份、丹参15～ 16份、太子参19～20份、生大黄18～20份、苏合香酯0.9～1.1份、人工牛黄0.9～1.1份。 更佳的，其有效成分的原料药的质量组成为：桂枝14～15份、丹参15～16份、太子参19～ 20份、生大黄18～20份、苏合香酯0.9～1.1份、人工牛黄0.9～1.1份。

桂枝、丹参、太子参和生大黄的有效成分为其水提物。

优选的，中药组合物的剂型为口服剂。口服剂选自胶囊剂、软胶囊剂、颗粒剂、片剂、 滴丸剂或口服液。

一种治疗脓毒症心功能障碍的中药组合物的制备方法，包括如下步骤：

1)取桂枝、丹参、太子参和生大黄加水煎煮，过滤后合并滤液，浓缩为浓缩液；

2)在浓缩液中加入乙醇，10℃以下静置至少8h；

3)回收乙醇，浓缩至相对密度为1.10～1.20，得浸膏；

4)取取苏合香脂和人工牛黄，粉碎，得药粉；

5)将浸膏和药粉混匀，干燥，加入可接受的药用辅料，制备得到口服剂；

其中，桂枝、丹参、太子参、生大黄、苏合香脂和人工牛黄的配比如上所述。

实施例1

原料药组成：桂枝15份、丹参15份、太子参20份、生大黄20份、苏合香酯1份、人 工牛黄1份。

制备方法：

1)按配比称取桂枝、丹参、太子参和生大黄，加水煎煮，合并滤液并浓缩，得到浓缩液；

2)在浓缩液加入乙醇，10℃以下静置至少8小时后过滤，回收乙醇，浓缩至相对密度 1.10～1.20，得浸膏；

3)将配比称取苏合香脂和人工牛黄，粉碎至120目以下，得药粉；

将浸膏和药粉混匀，烘干，粉碎，过120目筛，加入药学上可接受的赋形剂造成颗粒剂， 颗粒剂规格为每袋装3克，3.5g生药/1g颗粒剂。

实施例2

原料药组成：桂枝14份、丹参16份、太子参22份、生大黄17份、苏合香酯0.9份、 人工牛黄1.2份。

实施例3

原料药组成：桂枝15份、丹参14份、太子参18份、生大黄23份、苏合香酯1.3份、 人工牛黄0.8份。

实施例4

原料药组成：桂枝16份、丹参15份、太子参19份、生大黄19份、苏合香酯1.1份、 人工牛黄0.9份。

下面结合实验，进一步说明本发明的技术方案。

以下实验中使用的“本发明药物”，如无特别说明，均指实施例1制备得到的颗粒剂。

实验一：动物试验

为了表明本发明药物对脓毒症心功能障碍的药效，将本发明药物对不同重量、年龄、性 别的鼠进行动物试验。

1、毒性药理试验

清洁级NIH健康小鼠20只，(20±2)g，随机分为试验组和对照组，雌雄各半。

试验组：选用本发明药物，充分溶于48ml蒸馏水中，按照最大耐受量法，每次给药 0.4ml/10g(含生药20mg)，每日3次。

对照组：给予试验组同等剂量的蒸馏水。

给药后4小时恢复正常饲养，连续观察7天，每天观察有无死亡及其饮食、活动、毛色、 排泄等情况；于7天后随机解剖小鼠12只，灌药组8只(雌雄各半)，对照组4只(雌雄各 半)，观察其主要器官有无异常。

7天内未见小鼠死亡；其饮食、活动、毛色、排泄均未见明显异常；解剖小鼠，肉眼观 察灌药组各主要器官形态未见异常，与对照组无差别。实验得到动物口服最大耐受量(MTD) 为45g/kg；而正常临床用量为0.075g/kg；实验所得最大耐受量(MTD)是正常临床用量的 600倍。结果表明：本发明药物的毒性低，具有良好的安全性。

2、药效验证

SD大鼠60只，随机分为假手术组(n＝20)、模型组(n＝20)、试验组(n＝20)。试验组灌予本 发明的药物3ml(35mg颗粒剂/ml)，其余2组均灌予生理盐水3ml，各组灌药持续1周后造 模。

脓毒症模型通过大鼠盲肠结扎穿孔法获得。脓毒症模型：大鼠术前禁食12h，腹腔内注 射10％水合氯醛(0.3mg/100g)实施麻醉，于腹前正中作长约2cm切口，游离肠系膜和盲 肠，以30号丝线环形结扎盲肠根部，结扎完毕应仔细检查，保持肠道通路正常。在与肠系膜 相对的盲肠肠壁膜面用18号针头穿刺2处。针孔之间相距约1cm。轻轻挤压肠管使粪便自 穿刺点溢出，还纳肠管，逐层缝合关腹。术中密切观察大鼠生命体征，术毕腹壁皮下注射生 理盐水5ml/100g，进行液体复苏，注意暖箱保暖。术后自由进食食水。假手术组不结扎、穿 孔盲肠，余同上述。

观察评价在造模后四个时间点各组死亡率。

心脏彩超测定：将大鼠麻醉固定后送广东省中医院中心实验室行心脏彩超检查，测量缩 短分数(FS)、左室舒张末期内径(LVIDD)、左室收缩末期内径(LVDSD)、室间隔(IVS)活 动度、心输出量(CO)以及大鼠心脏射血分数(EF)等。每组数据均采连续3个心动周期的平 均值。

采集血清标本：沿腹正中线剪开腹腔，腹主动脉取血2ml，置肝素管中，离心取血清， 于-20℃冰箱保存。

采集心肌标本：打开胸腔，取出心脏，沿左心室冠状面直径最大处剪取2mm厚度心肌置 于10％甲醛固定、保存。研磨心肌：将剩余心肌去除左右心耳并大血管，置于冰水混合物中 研磨。研磨完成后置于离心管中，在4℃环境下，10000转/分匀浆。之后取上清液1ml于干 燥管中低温(-80℃)保存。

TnT、CK-MB和BNP的检测：取备用血清用放射免疫法测定，具体由广东省中医院中 心实验室负责。

采用硫代巴比妥酸(TBA)法测定丙二醛(MDA)含量，黄嘌呤氧化酶法测超氧化物歧化酶 (SOD)含量，DTNB直接法测定谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)含量，具体操作步骤严格按试 剂盒说明书进行。

采用ELISA法测定血清一氧化氮(nitricoxide，NO)、内皮素-1(endothelin-1，ET-1)、 6-酮-前列腺素1α(6-keto-prostaglandin1α，6-KPG_1α)含量。

所有计量资料均采用t检验，均由SPSS13.0软件包处理，以P<0.05表示有显著统计意义。

动物试验结果如表1、表2、表3、表4、表5、表6所示。

2.1、对脓毒症死亡率影响的对比研究

由表1看出，假手术组大鼠没有出现死亡；模型组四个时间点死亡率分别是10％、15％、 25％、45％；试验组大鼠死亡率较模型组低，在造模后第48h和72h两个时间点死亡率差异 有统计学意义(P<0.05)。

表1各组大鼠死亡率比较

组别 例数 12h(％) 24h(％) 48h(％) 72h(％) 假手术组 20 0(0) 0(0) 0(0) 0(0) 模型组 20 2(10)^*3(15)^*5(25)^*9(45)^*试验组 20 0(0) 1(5) 2(10)^#2(10)^#

注：*与假手术组比较P<0.05；^#与模型组比较P<0.05。

2.2、对脓毒症心功能障碍影响的对比研究

心功能的变化如表2所示，模型组和试验组与假手术组大鼠的LVDd、LVDs项比较有显 著统计意义(P<0.05)；IVSd方面，模型组和假手术组有统计学差异，而模型组和试验组间无 统计学差异；LVEF和FS方面，试验组和模型组比较有显著统计意义(P<0.05)。

表2：脓毒症大鼠造模后心功能变化情况

组别 LVDd(mm) LVDs(mm) IVSd(mm) LVEF(％) FS(％) 假手术组 7.15±0.33 4.34±0.43 1.09±0.02 69.9±4.25 38.5±1.28 模型组 8.20±0.61^*6.14±0.48^*0.63±0.05^*52.9±5.66^*30.3±1.19^*试验组 6.43±0.53^#3.65±0.40^#0.78±0.13 65.8±4.42^#39.6±1.28^#

注：*与假手术组比较P<0.05；^#与模型组比较P<0.05。

2.3、对脓毒症心肌损伤影响的对比研究

表3反应了心肌损伤标记物变化情况。模型组大鼠血清TnT、CK-MB和BNP浓度较假 手术组均有明显升高(P<0.05)，试验组大鼠血清TnT、CK-MB和BNP浓度在相同的时间点较 模型组显著降低(P<0.05)。

表3脓毒症大鼠造模后心肌损伤标记物变化

组别 TnT(ng/ml) CK-MB(IU/L) BNP(pg/ml) 假手术组 6.45±1.02 7.52±0.63 56.99±1.92 模型组 9.90±2.35^*24.11±1.41^*102.63±2.15^*试验组 7.07±1.07^#10.65±0.72^#64.78±1.13^#

注：*与假手术组比较P<0.05；^#与模型组比较P<0.05。

2.4、对脓毒症炎症介质影响的对比研究

表4反应了炎症介质变化情况。模型组大鼠血清IL-1β、IL-6、TNF-α和HMGB1浓度较 假手术组均有明显升高(P<0.05)，试验组大鼠血清IL-1β、IL-6、TNF-α和HMGB1浓度在同一 时间点较模型组显著降低(P<0.05)。

表4：脓毒症大鼠造模后炎症介质变化情况

组别 IL-1β(pg/ml) IL-6(pg/ml) TNF-α(pg/ml) HMGB1(pg/ml) 假手术组 40.34±6.53 29.15±2.32 72.97±5.18 2877.51±55.49 模型组 69.14±5.68^*63.24±5.21^*843.81±11.19^*12201.12±65.92^*试验组 52.65±4.41^#42.68±2.13^#89.6±7.33^#4134.02±25.31^#

注：*与假手术组比较P<0.05；^#与模型组比较P<0.05。

2.5、对脓毒症内皮功能影响的对比研究

表5反应了内皮功能相关的活性物质变化。模型组大鼠血管收缩活性物质ET-1水平显 著增加，而血管扩张因子NO，eNOS，6-KPG_1α水平显著减少，说明脓毒症大鼠内皮功能严 重失衡，与假手术组大鼠比较有显著性差异(P<0.05)。与模型组比较，治疗组大鼠血清ET-1含 量降低，NO，eNOS，6-KPG_1α水平增加，有显著性差异(P<0.05)。

表5：脓毒症大鼠造模后内皮功能情况

组别 NO(μmol/L) eNOS(U/L) ET-1(pg/ml) 6-KPG_1α(ng/L) 假手术组 34.19±3.51 33.14±4.43 49.9±3.25 99.54±6.28 模型组 19.21±3.61^*16.14±2.28^*92.9±4.96^*40.39±7.29^*试验组 36.77±2.93^#26.05±3.40^#65.8±6.12^#78.65±8.38^#

注：*与假手术组比较P<0.05；^#与模型组比较P<0.05。

2.6、对脓毒症氧化应激影响的对比研究

表6说明了各组大鼠氧化应激的情况。模型组大鼠心脏组织和血MDA含量较假手术对 照组明显增加(P<0.05)，而心脏组织SOD和GSH-Px活性则显著下降(P<0.05)，提示脓毒症 大鼠心脏氧化水平升高，处于氧化应激状态；而试验组大鼠与模型组比较，MDA含量下降， SOD和GSH-Px活性增加，差异具有显著性(P<0.05)。

表6：脓毒症大鼠造模后氧化应激情况

注：*与假手术组比较P<0.05；^#与模型组比较P<0.05。

综合上述结果可以知道，本发明药物能改善脓毒症引起的心脏功能的改变，减少心肌损 伤，抑制炎症反应，改善内皮功能，降低心肌氧化应激反应。

实验二：临床试验

为了进一步表明本发明药物对脓毒症心功能障碍的治疗效果，将本发明药物对50例脓毒 症心功能障碍患者进行系统临床观察，并选择病史、病情、年龄、性别及原治疗方法相当的 脓毒症心功能障碍患者50例为对照组。从广东省中医院重症医学科选择病例，参照2001年 在华盛顿由SCCM、ESICM、ACCP、ATS、SIS等共同组织国际脓毒症会议的定义,确诊的脓 毒症心功能障碍(LVEF<50％)患者，年龄在18－80岁。排除由以下原因引起的心功能障碍： 急性冠脉综合征、严重心力衰竭、心胸外科手术、胸外心脏按压、恶性心律失常或自身免疫 性疾病等。中医辨证属于气虚痰瘀者。

对照组：标准治疗，包括积极抗感染、循环支持(液体复苏、血管活性药物等)、呼吸支 持(氧疗、机械通气)、血糖控制、预防深静脉血栓形成等治疗；停用其他的任何中药(包括 中成药)；

试验组：在标准治疗的基础上，服用本发明的药物；

对试验组和对照组采用相同的方法定期检查，观察期治疗前、治疗第3天和第7天三个 时间点血清心肌损伤标记物和炎症介质水平，同时行评价心功能和血流动力学情况。

左心室整体收缩功能测定：受试者左侧卧位，根据心尖双平面Simpson’s法测定左室舒 张末容积(LVEDV)、左室收缩末容积(LVESV)、每搏输出量(SV)、每分输出量(CO)、左室 射血分数(LVEF)。

检测心肌损伤标志物cTnl和BNP以及炎症介质IL-1β、IL-6和TNF-α：静脉采血，置于 含有1/10体积0.109mol/L枸椽酸钠抗凝液(1份抗凝液+9份全血)的硅化玻璃管中，3000rpm 离心10分钟，收集上层液，使用ELISA法检测。

血流动力学监测使用动脉轮廓法(pulseindicatorcontinuouscardiacoutput,PiCCO)。右侧 锁骨下静脉置入深静脉导管，右侧股动脉置入PiCCO动脉温度压力导管，监测分别连接至 PHILIPSPiCCO监护仪。经中心静脉导管注入0℃的0.9％氯化钠液30mL,进行PiCCO监测。 分别于治疗前、治疗第3天和第7天三个时间点测定并记录心指数(CI)、全心舒张末容量指 数(GEDVI)、体循环阻力指数(SVRI)等血流动力学指标和血管外肺水指数(EVLWI)。

安全性检测包括：一般体检项目；血、尿、粪便常规化验，于试验前后各检查1次；肝 功能、肾功能化验，试验前后各检查1次；心肌酶学检查。对试验期间出现的不良反应，应 将其症状、程度、出现时间、持续时间、处理措施、经过等记录于观察表，并且在综合考虑 合并症的基础上，评价其与试验药物的相关性，并由医师详细记录。

数据用SPSS10.0软件处理，数据结果以表示，计数资料用卡方检验；符合正态分 布的计量资料采用t检验，P<0.05则认为差异具有统计学意义。

临床试验结果如表7、表8、表9、表10、表11、表12、表13所示。

1、对脓毒症心功能障碍患者的心功能影响的对比

表7为试验组与对照组治疗前后对脓毒症心功能障碍患者的心功能影响的对比，从表中 可以看出，治疗后第7天试验组患者的LVEF、SV、CO值较对照组高(P<0.05)，由此可见， 本发明药物在改善脓毒症心功能等方面有显著的疗效。

表7：两组脓毒症心功能障碍患者心功能情况比较

注：*与对照组比较P<0.05。

2、对脓毒症心功能障碍患者的心肌损伤标记物影响的对比

两组治疗前心肌损伤标志物比较无差异，治疗后各检测时间点对照组cTnl及BNP均有 所上升，而治疗组在相应的时间点cTnl及BNP均明显下降，比较有统计学差异(P<0.05)。

表8两组脓毒症心功能障碍患者心肌损伤标记物变化

注：*与对照组比较P<0.05。

3、对脓毒症心功能障碍患者炎症介质影响的对比研究

表9试验组与对照组治疗前后血浆炎症介质水平的对比，从表中可以看出，试验组IL-1β、 IL-6和TNF-α水平较对照组均有明显降低(P<0.05)。由此可见，本发明药物可有效抑制炎症 反应。

表9：脓毒症心功能障碍患者炎症介质变化情况

注：*与假手术组比较P<0.05；^#与模型组比较P<0.05。

4、对脓毒症心功能障碍患者血流动力学影响的对比研究

对照组患者CI呈下降趋势，而试验组在治疗第3天有所下降，但治疗后第7天逐步恢复 正常，且与对照组比较有统计学差异(P<0.05)。提示本发明药物可稳定患者心排出量。

试验组和对照组GEDVI均呈上升趋势，而试验组各时间点变化不明显。

对照组SVRI在治疗后第3天明显下降，第7天有所恢复正常；而试验组保持稳定，提 示本发明药物可稳定患者外周血管阻力。

试验组ELVWI保持逐步下降的趋势，在第7天与对照组比较有统计学差异。提示本发明 药物抑制心功能障碍的可能与降低血管外肺水相关。

表10：两组脓毒症心功能障碍患者血流动力学的比较

注：*与假手术组比较P<0.05；^#与模型组比较P<0.05。

5、对脓毒症心功能障碍患者的不良反应

临床使用过程中，本发明药物无过敏等不良反应，安全性好。试验组2例患者用药3天 后出现轻度腹泻，无恶心呕吐、胸闷、皮疹等其他不适。