包含水溶性长春瑞滨盐的稳定的固体药物组合物及其制备方法

摘要

本发明提供一种包含水溶性长春瑞滨盐的稳定的固体药物组合物及其制备方法，其中所述的药物组合物包含：(1)含活性成分长春瑞滨或其药学上可接受的盐或水合物、粘合剂及惰性核芯的载药微丸，(2)硬胶囊，及(3)包覆于硬胶囊表面的薄膜包衣层，其中该载药微丸是装载于该硬胶囊中，且该薄膜包衣层是由特定高分子材料形成的。本发明的固体药物组合物具有稳定性良好、生产成本低等优点。

说明书

技术领域

本发明涉及包含长春瑞滨或其盐的固体药物组合物及其制备方法。

背景技术

癌症是一种严重威胁人类健康的常见病，人类因癌症而引起的死亡率在所有疾病死亡率中居第二位，仅次于心脑血管疾病。癌症的治疗方法有手术治疗、放射治疗和化学治疗(药物治疗)。目前，化学治疗仍然是临床治疗癌症的主要手段。

抗癌化学治疗最初是以静脉内方式进行研发，支持这种给药途径的论点在于胃肠毒性较低、总的生物利用度较高及比口服途径潜在更低的患者内和患者间的暴露变异量。然而，静脉内途径存在许多严重缺点，例如：静脉通路的发病率，中心静脉通路的可能并发症(感染、血栓形成)，外溢的风险。

几年间，抗癌化学治疗的口服剂型由于为患者带来的真实利益而被逐渐发展。进一步来说，药学经济考虑在选择治疗策略中变得越来越重要，这也导致口服治疗的研发。

长春瑞滨或3’,4’-二去氢-4’-脱氧-8’-去甲长春花碱，特别是其二酒石酸盐是通过阻止微管蛋白的聚合来抑制细胞成长的长春花生物碱衍生物。长春瑞滨，且特别地其盐，长春瑞滨二酒石酸盐，在治疗非小细胞肺癌和乳癌中具有功效。不幸地，这种盐在固态下非常不稳定。

长春瑞滨溶液的口服剂型被研发并以Navelbine的商品名在市场上销售(WO03/101383)。其是包含溶解形式的长春瑞滨双酒石酸盐和包括聚乙二醇、甘油、乙醇和水的赋形剂混合物的软明胶胶囊。

CN1638745A公开了一种用于软胶囊的含有长春瑞滨酒石酸盐的口服医药组合物，其包含长春瑞滨酒石酸盐、乙醇、水、甘油及聚乙二醇。CN101134026公开一种改进处方的长春瑞滨软胶囊，其中含有长春瑞滨或酒石酸长春瑞滨、乙醇和聚乙二醇，不含水和甘油。其中所述的软胶囊解决了长春瑞滨静脉内给药时存在的静脉炎问题，又简化了软胶囊填充组合物的处方，利于工业制造，还改善了制剂的稳定性，减少了辅料对患者的不良作用。

然而，填充液体的软胶囊的研发被证实是困难的。一方面，液体组合物需要考虑胶囊的材料且在其被封包之后避免后者的分解现象。其也应该避免在赋形剂和活性成分之间产生不利的化学交互作用。最后，活性成分的生物活性不应该被严重折衷。

CN101087591A公开了一种长春花生物碱的水溶性衍生物在至少一种分子量为800至30000的聚乙二醇中的稳定的固体分散体。长春花生物碱的水溶性衍生物、特别是长春瑞滨、更特别是长春瑞滨双酒石酸盐的分散体的制备常始于混合该活性成分与熔融状态的聚乙二醇。为此，所述聚乙二醇将被预先加热至略高于其熔化温度的温度，使其成为液体状态，从而可与长春花生物碱的水溶性衍生物在搅拌下混合。该方法终止于所述分散体的冷却操作，使其成为固体状态。如果使用高摩尔质量的聚乙二醇，优选将其在增塑剂存在下加热，这将使得所述固体聚乙二醇成为液体状态而不超过80℃级别的温度。

CN101730534公开了一种由水溶性长春瑞滨盐和至少一种稀释剂和一种润滑剂组成的药物组合物，该组合物为适于口服给药的固体剂型，较佳为明胶胶囊或片剂剂型。该剂型是由用于压片或用于明胶胶囊的常规赋形剂(稀释剂、粘合剂、流动剂、崩解剂、润滑剂)组成的固体剂型。

虽然上述固体剂型可能解决市售软胶囊剂型的问题，但仍然存在固体制剂工艺过程中的粉尘污染、交叉污染等问题，因此有需要提供减少污染问题又能降低生产成本，同时还具有良好储存稳定性的固体剂型。

发明内容

为了达成提高稳定性、减少工艺过程中的污染问题及降低生产成本的目的，本发明一方面提供了一种包含水溶性长春瑞滨盐的稳定的固体药物组合物，其包含：(1)含活性成分长春瑞滨或其药学上可接受的盐或水合物、粘合剂及惰性核芯的载药微丸，(2)硬胶囊，及(3)包覆于硬胶囊表面的薄膜包衣层，其中该载药微丸是装载于该硬胶囊中，且该薄膜包衣层是由特定高分子材料形成的。

在一个较佳具体实例中，所述长春瑞滨的药物可接受盐为酒石酸长春瑞滨或长春瑞滨双酒石酸盐。

在一个较佳具体实例中，所述粘合剂为纤维素衍生物，优选为羟丙甲基纤维素。

在一个较佳具体实例中，惰性核芯为以微晶纤维素或蔗糖为原料制成的微丸，较佳具有从100μm到1200μm的粒径。

在一个较佳具体实例中，所述载药微丸还包含增塑剂，优选为聚乙二醇。

在一个较佳具体实例中，所述胶囊为硬质明胶胶囊或HPMC植物胶囊。

在一个较佳具体实例中，所述特定高分子材料为HPMC、乙基纤维素、聚乙烯醇、欧巴代或尤特奇。

本发明另一方面还提供了上述包含水溶性长春瑞滨盐的稳定的固体药物组合物的制备方法，其包括下列步骤：

(1)提供惰性核芯；

(2)用适当溶剂配制包含活性成分长春瑞滨或其药物可接受盐、粘合剂的药物溶液，经流化床底喷工艺，将配制好的药物溶液均匀地包覆在步骤(1)所提供的惰性核芯上得到载药微丸；

(3)提供硬质明胶胶囊或HPMC植物胶囊；

(4)将步骤(2)所得到载药微丸填充到步骤(3)所提供的硬质明胶胶囊内或HPMC植物胶囊内，得到装载有载药微丸的硬胶囊；

(5)配制含特定高分子材料的包衣液，经高效包衣锅包衣工艺，将包衣液均匀地包覆在步骤(4)所得的硬胶囊上，在该硬胶囊表面上形成薄膜包衣层。

在一个较佳具体实例中，所述活性成分、粘合剂的溶剂为水、乙醇或乙醇水溶液。在一个更佳的具体实例中，所述活性成分的溶剂为水，且所述粘合剂的溶剂为乙醇水溶液。

本发明还提供了所述的固体药物组合物在制备抗肿瘤药物中的应用。

本发明的固体药物组合物具有良好的稳定性且生产成本较低。在无需冷冻的贮存条件下具有良好的长期储存稳定性且具有与市场上的“软胶囊”剂型的药物相同的生物利用度。本发明的固体药物组合物稳定性较基于PEG、甘油为主要基质的软胶囊剂型大为提高，却可避免软胶囊剂型在储存过程中的稳定性差、胶壳老化、溶出度降低、生物利用度变异大等缺点。此外，还有与注射剂相比的突出口服制剂的自主服药、更好的依从性等。

本发明采用常规的流化床制备工艺，自动化程度高；不需要昂贵的冷冻干燥工艺，生产成本相对较低；可避免其他固体制剂工艺过程中的粉尘污染等，避免交叉污染；有利于劳动防护。

附图说明

图1为制备本发明固体药物组合物的工艺流程图；

图2为比格犬口服试验制剂(实施例1A药，实施例2B药)和市售软胶囊参比制剂(R药)血药浓度平均值—时间曲线。

具体实施方式

当用于本文，“长春瑞滨”一词包含长春瑞滨或其药学上可接受盐或水合物，例如酒石酸长春瑞滨、长春瑞滨双酒石酸盐，特别是酒石酸长春瑞滨。

本发明载药微丸可通过将包含长春瑞滨或其药物可接受盐、溶剂及粘合剂的药物溶液经流化床底喷工艺包覆在惰性核芯上得到。药物溶液视情况可添加其他辅料，例如增塑剂、助溶剂、抗粘剂。在一个较佳具体实例中，活性成分的溶剂为水，且粘合剂的溶剂为乙醇水溶液。

本发明固体药物组合物中硬胶囊外的薄膜包衣层可通过高效包衣锅包衣工艺，将含特定高分子材料的包衣液均匀地包覆在硬胶囊上得到。所述特定高分子材料包含HPMC、乙基纤维素、聚乙烯醇、或常见的薄膜包衣预混粉如欧巴代、尤特奇等。

可用于本发明的溶剂例子包括极性或非极性溶剂，较佳为极性溶剂，例如水、乙醇、丙酮或异丙醇或其混合物，优选为水、乙醇或乙醇水溶液。根据本发明一个具体实例，药物溶液的溶剂为水，包衣液的溶剂为乙醇水溶液。溶剂会在制备过程中被除去。

可用于本发明的粘合剂包括任何适合用于制备药物的粘合剂，例如纤维素衍生物，如羟丙甲基纤维素，或是聚维酮。

可用于本发明的增塑剂例子包括聚乙二醇，如PEG200～400，或柠檬酸三乙酯。

可用于本发明的助溶剂例子包括聚乙二醇、泊洛沙姆、羟丙基β环糊精等。

可用于本发明的抗粘剂例子包括滑石粉、二氧化硅等。

视需要，本发明药物组合物还可包含稳定剂、润滑剂、pH调节剂如柠檬酸、琥珀酸、酒石酸、富马酸、天冬氨酸及其盐等。

本发明采用流化床制备工艺，制得具有良好的稳定性且与市场上的“软胶囊”口服产品具有相同生物利用度的固体剂型。本发明制备工艺中关键的工艺步骤为将长春瑞滨或其药物可接受盐、粘合剂、增塑剂及溶剂的溶液均匀地沉积包覆在惰性微丸上。在填充明胶胶囊后，在胶囊表面均匀包覆一层薄膜，可避免人为更换或破坏胶囊内容物，也有助于提高稳定性。

现在参考图1的工艺流程图说明本发明药物组合物的制备方法。首先准备好惰性核芯，其可为以微晶纤维素或蔗糖为原料制备的微米粒子。另外按处方称取原料制备长春瑞滨药物溶液。然后将惰性核芯投入流化床中，将长春瑞滨药物溶液均匀地包覆在该惰性核芯上得到载药微丸，此步骤可视需要进行中间检测。将载药微丸填充至准备好的硬胶囊内，将已填充载药微丸的胶囊投入包衣锅中，将预先配制好的包衣液均匀地包覆在胶囊上，得到长春瑞滨包衣胶囊。

在本发明的方法中，微丸上药步骤的进风温度在约40℃，较佳是控制在35～45℃之间，可实施的关键工艺参数见表1。胶囊包衣步骤的进风温度在40℃以下，较佳是在30～38℃之间，可实施的关键工艺参数见表2。

表1.流化床微丸上药步骤关键工艺参数

关键工艺参数范围设置温度35～45℃进风风量600-800m³/h雾化压力0.22～0.30MPa

表2.胶囊包衣步骤关键工艺参数

关键工艺参数范围进风温度/℃30～38包衣进风量/m³/HR25～30雾化压力/mbar1700～1800扇面压力/mbar750～850

缩写：

AUC_(0-48)药时曲线下面积(0-48)

AUC_(0-∞)药时曲线下面积(0-∞)

BLQ低于定量下限

CL_Z(CL_Z/F)血浆清除率

Conc.浓度

Calc.计算

C_max血浆药物峰浓度

CV变异系数

F(％)生物利用度(％)

h(s)/hr(s)小时

IS内标

Kg公斤

L升

LC-MS/MS液质联用

LLOQ定量下限

MRM多反应监测

MRT_(0-t)平均滞留时间(0-t)

mg毫克

min分钟

mL毫升

NA不适用

ng纳克

PO口服

QC质量控制样品

R相关系数

％RE相对偏差

T_1/2Z血浆半衰期

T_max血浆药物浓度达峰时间

μL微升

ULOQ定量上限

V_Z(V_Z/F)表观分布容积

HPMC羟丙基甲基纤维素

PEG聚乙二醇

TPGS維生素E聚乙二醇琥珀酸酯

为了进一步阐述本发明，下面给出一系列实施例。这些实施例完全是范例性的，它们仅用来对本发明进行更具体描述，并不对本发明的范围构成任何限制。本领域技术人员应该理解的是，在不偏离本发明的精神和范围下可以对本发明技术方案的细节和形式进行修改或替换，但这些修改和替换应视为落入本发明的保护范围内。

实施例1制备酒石酸长春瑞滨包衣胶囊A

根据图1工艺流程图制备本发明的酒石酸长春瑞滨包衣胶囊A。

表3酒石酸长春瑞滨胶囊处方A

注：处方中的水和乙醇在制备过程中被除去

工艺描述

a.物料预制备：按表3处方物料编号3称取羟丙甲基纤维素溶于处方量的纯化水中，配制浓度为3％，溶胀过夜备用；

b.配料：按表3处方称取酒石酸长春瑞滨置一个塑料袋中；微晶纤维素核芯置另一塑料袋中；将步骤a得到的羟丙甲基纤维素水溶液置一个不锈钢容器中；按处方物料编号4称取聚乙二醇-400置一个塑料瓶中；

c.将聚乙二醇-400、酒石酸长春瑞滨放入羟丙甲基纤维素水溶液的不锈钢容器中，搅拌使其溶解；

d.将微晶纤维素核芯投入流化床中，设置包衣参数，将酒石酸长春瑞滨溶液均匀地包在微晶纤维素核芯上；

e.中间体检测；

f.胶囊填充：根据测得的中间体颗粒中主药含量，计算应装颗粒的重量，装胶囊，得到酒石酸长春瑞滨胶囊；

g.中间体检测；

h.胶囊包衣：

1)物料预制备：按表3处方物料编号7称取羟丙甲基纤维素溶于处方量的纯化水和95％乙醇(1:1)中，配制浓度为6％，溶胀过夜备用；

2)配料：将步骤1)得到的羟丙甲基纤维素水溶液置一个不锈钢容器中；按表3处方物料编号8称取聚乙二醇-400置一个塑料瓶中；

3)在搅拌的状态下，将聚乙二醇-400加入羟丙甲基纤维素水溶液中，混合均匀，得到包衣液；

4)将步骤f得到的酒石酸长春瑞滨胶囊投入包衣锅中，设置包衣参数，将步骤h得到的包衣液均匀地包在酒石酸长春瑞滨胶囊上；

i.中间体检测；

j.包装；

k.成品检测。

实施例2制备酒石酸长春瑞滨包衣胶囊B

表4.酒石酸长春瑞滨胶囊处方B

注：处方中的水和乙醇在制备过程中被除去

工艺描述

类似于实施例1，按表4处方，根据图1工艺流程图制备本发明的酒石酸长春瑞滨包衣胶囊B。

实施例3制备酒石酸长春瑞滨包衣胶囊C

表5.酒石酸长春瑞滨胶囊处方C

注：处方中的水和乙醇在制备过程中被除去

工艺描述

类似于实施例1，按表5处方，根据图1工艺流程图制备本发明的酒石酸长春瑞滨包衣胶囊C。

实施例4本发明酒石酸长春瑞滨的未包衣胶囊与参比制剂的稳定性比较

以类似实施例1处方制备未包衣胶囊R7-A、R10-A、R11-A(表6)以及类似实施例2处方的未包衣胶囊R5、R12、R13、R14、R15(表7)样品。

表6.酒石酸长春瑞滨未包衣胶囊处方

表7.酒石酸长春瑞滨未包衣胶囊处方

工艺描述

类似于实施例1的a-g，按表6和表7处方，制备本发明的酒石酸长春瑞滨未包衣胶囊。

将上述制备的未包衣胶囊样品进行稳定性考察，放置条件为40℃/75％RH，分别于0天、2周、4周、8周、12周取样检测，同时将参比制剂(R药：市售酒石酸长春瑞滨软胶囊，)取出放于表面皿中，与自制样品同时置于40℃/75％RH进行平行试验，考察自制酒石酸长春瑞滨制剂的稳定性，结果见表8。

表8酒石酸长春瑞滨制剂稳定性考察结果(放置条件：40℃/75％RH)

稳定性考察结果显示，放置8周后，参比制剂内容物总杂为4.02％，R10-A在小丸上药时加入了維生素C和TPGS，稳定性略差，而未加入维生素C和TPGS的R7-A、R11-A总杂均小于2％，明显优于参比制剂。与其他制剂相比，稳定性最好的为羟丙基β环糊精包合上药的小丸制剂，而羟丙基β环糊精比例最高的R15总杂仅为0.88％。

结果显示，基于类似实施例1处方的未包衣胶囊R7-A、R10-A、R11-A以及基于类似实施例2处方的未包衣胶囊R12、R13、R14、R15，在40℃/75％RH放置条件下的稳定性行为显著优于参比制剂。

实施例5本发明酒石酸长春瑞滨包衣胶囊稳定性测试

将基于实施例1处方工艺生产的HPMC包衣硬胶囊进行稳定性考察，其中所含酒石酸长春瑞滨为实施例4中对应处方R11-A的约四倍，其于30℃/65％RH放置条件的有关物质数据见表9。

表9实施例1自制制剂稳定性试验样品有关物质检测结果(放置条件：30℃/65％RH)

结果显示，本发明实施例1制备的酒石酸长春瑞滨胶囊A，在30℃/65％RH放置条件下6个月后总杂仅1.82％，稳定性佳，表明本发明硬胶囊经过包衣后可再提高稳定性。

实施例6酒石酸长春瑞滨胶囊动物体内药物动力学实验

(一)试验药物

试验制剂(A药)：实施例1制备的酒石酸长春瑞滨胶囊A

试验制剂(B药)：实施例2制备的酒石酸长春瑞滨胶囊B

参比制剂(R药)：市售酒石酸长春瑞滨软胶囊，

(二)给药方案和血样采集

本试验采用三交叉三周期三重拉丁方设计，每个周期之间清洗期为2周。研究选用健康Beagle犬12只，进行标记，随机分成三组，每组4只，进行单剂量(给药剂量为1粒胶囊，含20mg长春瑞滨)相对生物利用度实验。实验前禁食12h左右，自由饮水，服药后2h内禁止饮水，4h内禁食，受试期间进食统一餐。

给药时一组给予试验制剂(A药)，一组给予试验制剂(B药)，一组给予参比制剂(R药)。给药前先取空白血，给药时由有经验的饲养员将胶囊直接塞入会咽部，使Beagle犬自动吞咽并注入50mL清水送下，给药后0.25、0.5、0.75、1、1.5、2、4、6、8、12、24、36和48h于前肢内侧皮下静脉取血2mL，置于用含1.0mgEDTA-K2的40μLNaF(200mmol/L)抗凝化微量管中，离心分离血浆前血液样品一直置于湿冰上，采集后1h内所有的血液样品在13000rpm的条件下离心3min分离血浆，分离出的血浆样品保存在-20℃条件下直到运用LC-MS/MS检测分析。在整个样品处理过程中，样品要严格避光。经过2周的洗净期后交叉给药，以同样的过程取血。

(三)血药浓度测定方法及其评价

1.仪器：

API-3000质谱检测器(AppliedBiosystems，美国)以及Analyst色谱工作站(1.4.1版本，AppliedBiosystems，美国)，Agilent公司1100型高效液相色谱仪，包括G1312A四元泵，G1316A柱温箱，G1379A在线脱气机和CTCHTS型控温自动进样器(CTCAnalytics，瑞士)。

2.高效液相色谱和质谱条件:

色谱条件：Agela公司VenusilXBPPhenylcolumn(100mm×2.1mm,5μm)；流动相A(0.1％甲酸水溶液，含2mM醋酸铵)：B(0.1％甲酸的甲醇)＝30：70；流速0.35mL/min；柱温40℃；进样量5μL。

质谱条件：离子源为电喷雾电离(ESI)源；检测方式：正离子检测；扫描方式：多反应监测(MRM)；喷射电压：5500V；离子源温度：550℃；气帘气流速为:10L/min，雾化气流速为：8L/min，碰撞气流速为:4L/min，扫描时间0.2s，用于定量和定性的离子条件见表10。

表10.质谱参数表

Q1(m/z)Q3(m/z)CE(V)DP(V)EP(V)CXP(V)长春瑞滨779.50658.50341301015华法林309.10163.2020751015

本发明试验制剂A药、B药与参比制剂R药的主要药动学参数及生物利用度结果汇总与表11和表12。

表11.比格犬口服试验制剂(A药)和参比制剂(R药)后药动学参数和生物利用度

表12.比格犬犬口服试验制剂(B药)和参比制剂(R药)后药动学参数和生物利用度

12只犬口服试验制剂A后的药动学参数分别为：AUC_0-48h为185.6±76.6ng/mL*h,AUC_0-∞为196.6±81.4ng/mL*h,C_max为24.5±11.6ng/mL，T_max为0.958±0.424h。12只犬口服试验制剂B后的药动学参数分别为：AUC_0-48h为179.1±73.3ng/mL*h,AUC_0-∞为195.9±92.3ng/mL*h,Cmax为23.6±8.4ng/mL，T_max为1.000±0.337h。12只犬口服参比制剂制剂R后的药动学参数分别为：AUC_0-48h为187.3±90.5ng/mL*h,AUC_0-∞为199.5±101.5ng/mL*h,Cmax为25.2±9.4ng/mL，T_max为0.854±0.419h。

将试验制剂(A药、B药)与参比制剂(R药)的AUC进行对数转换，并作双单侧t检验和置信区间法的检验，结果表明，试验制剂(A)AUC_0-48h的90％可信限落在参比制剂(R药)93.8％～111.1％的范围内，AUC_0-∞的90％可信限落在参比制剂93.5％～112.8％的范围内，C_max的90％可信限落在参比制剂82.5％～111.1％的范围内，T_max采用非参检验无显着性差异，故试验制剂(A药)与参比制剂(R药)生物等效。试验制剂(A药)平均相对生物利用度为103.6％±18.1％(n＝12，以AUC_0-48h计算)。将试验制剂(B药)与参比制剂(R药)的AUC进行对数转换，并作双单侧t检验和置信区间法的检验，结果表明，试验制剂(B药)AUC_0-48h的90％可信限落在参比制剂(R药)89.7％～106.2％的范围内，AUC_0-∞的90％可信限落在参比制剂90.7％～109.4％的范围内，C_max的90％可信限落在参比制剂80.9％～109.0％的范围内，T_max采用非参检验无显着性差异，故试验制剂(B药)与参比制剂(R药)生物等效。试验制剂(B药)平均相对生物利用度为99.1％±17.9％(n＝12，以AUC_0-48h计算)。

由以上结果可知，试验制剂(A药、B药)和参比制剂(R药)体内有着相似的药动学行为，预示未来本发明制剂上市后在临床上应该也有着与市售参比制剂相当的疗效。

本发明从稳定性、动物PK两方面出发，对酒石酸长春瑞滨进行剂型和处方的筛选以及优化，最终得到稳定性优于参比制剂，同时又能与参比制剂在比格犬体内生物等效的酒石酸长春瑞滨包衣硬胶囊剂型。本发明经包衣的硬胶囊剂型增进了硬胶囊的稳定性，而且解决了软胶囊剂型在储存过程中的稳定性差、胶壳老化、溶出度降低、生物利用度变异大等缺点。此外，本发明采用常规的流化床制备工艺，自动化程度高；不需要昂贵的冷冻干燥工艺，生产成本相对较低；可避免其他固体制剂工艺过程中的粉尘污染等，避免交叉污染；有利于劳动防护。