家蚕强健性品种鉴定的方法及所用的环境敏感性家蚕胚子

摘要

本发明公开了一种家蚕强健性品种鉴定的方法，包括下述步骤：对不同品种/个体的家蚕分别依次进行以下步骤1)～步骤4)：1)、选用活性蚕卵；2)、获得环境敏感性家蚕胚子--反转终了期己

说明书

技术领域

本发明涉及一种家蚕品种的辅助选育方法，具体地说，是涉及一种环境敏感性家蚕胚子 及利用该环境敏感性胚子进行家蚕强健性品种鉴定的方法。

背景技术

家蚕品种是蚕业生产中最基本的生产资料，也是决定蚕茧产量、质量的最基本因素，提 高家蚕品种的强健性，是蚕桑生产最经济、最有效的增产增效措施之一。随着我国城乡一体 化进程的发展和农村产业结构的调整，农村优势劳动力向城市转移，养蚕劳动者素质与技术 普遍不高，生产条件发生了根本性的变化，加上粗放型、省力化养蚕技术的推广使用，蚕业 生产上迫切需要强健好养，抗病、抗逆性强的家蚕品种。另一方面，家蚕作为实验材料及生 物反应器的优异特性正逐步得到社会的肯定，利用家蚕生产具有高科技含量的生物制品已经 取得重大进展，迫切需要有一种能周年进行饲养的强健性蚕品种。传统的强健性蚕品种的选 育大多采用诱发鉴定方法，即人工创造所需的不良环境(高温多湿、接触低温、添食各种病 毒、病菌及微量农药或污染物)；或给予沾水叶、日照不足叶、高氮肥桑叶等不良饲料，促使 参加鉴定的家蚕品种暴露出遗传本质差异，达到筛选鉴定的目的，但这种方法需要将家蚕饲 养至上簇、结茧及化蛹，通过调查这些性状了解该品种的强健性，时间周期长，而且浪费大 量的人力物力。

而家蚕胚胎期不同发育阶段根据形态的不同，可以分为(甲：滞育后期、乙1：滞育期 后、乙2：伸展期、丙1：最长期前、丙2：最长期、丁1：肥厚期、丁2：突起发生期、戊1： 突起发达前期、戊2：突起发达后期、戊3：缩短期、己1反转期、己2：反转终了期、己3： 气管形成期、己4：眼点期、己5：转青期)等胚子，但是利用家蚕的不同胚子对环境的敏感 性的不同从而实现家蚕品种强健性鉴定的方法，目前尚没有。

发明内容

本发明要解决的技术问题是提供一种环境敏感性家蚕胚子及利用该环境敏感性胚子进行 家蚕强健性品种鉴定的方法。该方法主要涉及家蚕胚子形态识别及异常环境诱导技术，调查 环境敏感性家蚕胚子进行异常环境处理后的孵化率。

为解决上述技术问题，本发明提供一种环境敏感性家蚕胚子，为反转终了期己₂的蚕卵。

本发明还同时提供了一种家蚕强健性品种鉴定的方法，包括下述步骤：

对不同品种/个体的家蚕分别依次进行以下步骤1)～步骤4)：

1)、选用活性蚕卵；

2)、获得环境敏感性家蚕胚子；

3)、对环境敏感性家蚕胚子进行异常环境诱导处理；

4)、催青至孵化后调查孵化率；

备注说明：催青为本行业的常规技术；

5)、将不同品种/个体的家蚕的孵化率进行对比，孵化率高的品种/个体为家蚕强健性品种/ 个体。

备注说明：

强健性个体(品种)对高温多湿、低温、各种病原微生物及微量农药等不良环境的抵抗性 较强，可以作为强健性品种留种。

本发明的强健性是以“结茧率”作为指标来判断的。

作为本发明的家蚕强健性品种鉴定的方法的改进：

所述步骤3)的异常环境诱导处理为：将环境敏感性家蚕胚子进行放射性处理或于42℃高 温冲击处理2小时；所述放射性处理为5Gygamma-射线辐照。

作为本发明的家蚕强健性品种鉴定的方法的进一步改进：

所述环境敏感性家蚕胚子为反转终了期己₂的蚕卵。

作为本发明的家蚕强健性品种鉴定的方法的进一步改进：

所述孵化率为二日孵化率。

本发明充分利用了不同时期的胚子对环境的敏感性不同，现发现一种对环境敏感的家蚕 胚子，与品种强健性有一定的关系，可能开发出新的鉴定家蚕品种强健性的方法。

本发明提供了环境敏感性家蚕胚子及利用该环境敏感性胚子进行家蚕强健性品种鉴定的 方法，该方法主要涉及家蚕胚子形态识别及异常环境诱导技术，调查环境敏感性家蚕胚子进 行异常环境处理后的孵化率。

本发明的有益效果在于：

用环境敏感性家蚕胚子为标记胚子，并进行放射线辐照或高温冲击处理，通过观察处理 后的孵化率高低，可以准确有效的选择强健性个体，从而大幅度的改进家蚕强健性状，提高 育种效率。传统的育种方法需要饲养至上簇、结茧及化蛹，然而调查其生存率。选育周期长、 选择效率不高；而且饲养至上簇及化蛹等需要浪费大量的人力物力。而应用本发明的方法只 要将蚕卵保护至蚕卵反转终了期己₂，对该时期的蚕卵通过放射线或高温等处理，选择处理后 孵化率高的个体(品种)，其家蚕强健性就高，从而提高选种效率40-60％。

综上所述，本发明提供的方法，能够在家蚕卵反转终了期己₂，通过放射线或高温等处理， 通过处理后孵化率高低就可以判断该品种是否强健，大大缩短品种选育的周期，从而减少人 力物力的浪费。

具体实施方式

实施例1、一种环境敏感性家蚕胚子及利用该环境敏感性胚子进行家蚕强健性品种鉴定 的方法，该方法以至少2种的家蚕(具体为按简易催青法将解除滞育的蚕卵催青至反转终了期 己₂)作为待测对象。

备注说明：按简易催青法将解除滞育的蚕卵催青至反转终了期己₂为现有技术，简易催 青法例如可按照已经公开发表于《DB33T217.4-2007》的桑蚕种第4部分桑蚕种繁育技术规 程进行。

具体如下：

对每个品种的家蚕均依次进行如下步骤1)～4)：

1)、活性蚕卵的准备：将活性化的、保存在冷库中的蚕卵取出，或家蚕交尾后的母蛾(雌 性成虫)所产蚕卵进行冷藏或即时浸酸处理得到具有活性的蚕卵；

2)、敏感性家蚕胚子的获得：将上述具有活性的蚕卵按简易催青法催青至反转终了期己₂， 得到目的环境敏感性家蚕胚子(以下简称：敏感性家蚕胚子)；

3)、放射线辐照诱导处理：对上述敏感性家蚕胚子分别进行5Gygamma-射线辐照诱导处 理，放射线辐照诱导处理后继续按简易催青法催青，直至孵化。

4)、孵化率的调查：孵化后调查第一天、第二天的孵化卵数及不孵化卵数，按孵化率＝孵 化个体数/总处理个体数，计算二日孵化率(实用孵化率)。

备注说明：上述孵化个体数是指第一天的孵化卵数+第二天的孵化卵数。

5)、根据步骤4)所得结果进行判断：

将步骤4)所得的每种家蚕(特指放射线辐照诱导处理后的家蚕)所对应的孵化率进行 比对，发现gamma-射线辐照处理后孵化率高的品种，其5龄起蚕结茧率也高，相关系数为 0.925(表1)，因此选择最大的孵化率所对应的家蚕为家蚕相对强健品种。

表1

因此，采用本发明上述处理后孵化率高的品种即是强健性品种，其对高温多湿、接触低 温、添食各种病毒、病菌及微量农药或污染物等不良环境的抵抗性强，可以作为强健性品种 留种。

备注说明：结茧率与家蚕的生存率有关，而影响家蚕的生存率的因素是是否耐高温多湿、 接触低温、添食各种病毒、病菌及微量农药或污染物等不良环境，也就是说结茧率是作为家 蚕是否强健的指标之一。

对比例1-1、将实施例1中的“反转终了期己₂”改成“转青期己5”，其余等同于实施例 1。

对比例1-2、将实施例1中的“反转终了期己₂”改成“突起发达前期戊1”，其余等同于 实施例1。

最终所得结果如上表1所述。

对比例1-3、将实施例1中的gamma-射线辐照的剂量由5Gy改成3Gy，其余等同于实施 例1。最终所得的相关系数仅为0.805。

对比例1-4、将实施例1中的gamma-射线辐照的剂量由5Gy改成8Gy，此时导致家蚕胚 子出现小批量死亡的现象；不利用后续实验的进行。

实施例2、一种环境敏感性家蚕胚子及利用该环境敏感性胚子进行家蚕强健性品种鉴定 的方法，该方法以至少2种家蚕(具体为按简易催青法将解除滞育的蚕卵催青至反转终了期己 ₂)作为待测对象。

具体如下：

对每个品种的家蚕均依次进行如下步骤1)～4)：

1)、活性蚕卵的准备：将活性化的保存在冷库中的蚕卵取出，或家蚕交尾后的母蛾(雌性 成虫)所产蚕卵进行冷藏或即时浸酸处理得到具有活性的蚕卵；

2)、敏感性家蚕胚子的获得：将上述具有活性的蚕卵按简易催青法催青至反转终了期己₂， 得到目的环境敏感性家蚕胚子；

3)、高温诱导处理：对上述敏感性家蚕胚子分别进行42℃(相对湿度为80％-85％)、2小时 的高温处理，高温处理后继续按简易催青法催青，直至孵化。

4)、孵化率的调查：孵化后调查第一天、第二天的孵化卵数及不孵化卵数，按孵化率＝孵 化个体数/总处理个体数计算一日孵化率及二日孵化率。

5)、根据步骤4)所得结果进行判断：

将步骤4)所得的每种家蚕(特指“42℃高温冲击2hr”处理后的家蚕)所对应的孵化率 进行比对，

发现高温冲击处理后孵化率高的品种，5龄起蚕结茧率也高，相关系数为0.919(表2)， 选择最大的孵化率所对应的家蚕为家蚕相对强健品种。

表2

对比例2-1、将实施例2中的“反转终了期己₂”改成“转青期己5”，其余等同于实施例 1。

对比例2-2、将实施例1中的“反转终了期己₂”改成“突起发达前期戊1”，其余等同于 实施例1。

最终所得结果如上表2所述。

对比例2-3、将实施例2中的处理温度由42℃改成37℃，其余等同于实施例1。最终所 得的相关系数仅为0.755。

对比例2-4、将实施例2中的处理温度由42℃改成50℃，此时导致家蚕胚子出现小批量 死亡的现象；不利用后续实验的进行。

最后，还需要注意的是，以上列举的仅是本发明的具体实施例。显然，本发明不限于以上 实施例，还可以有许多变形。本领域的普通技术人员能从本发明公开的内容直接导出或联想 到的所有变形，均应认为是本发明的保护范围。