一种土壤和沉积物中多氯联苯的分散固相萃取气相色谱检测方法

摘要

本发明涉及一种土壤和沉积物中多氯联苯的分散固相萃取气相色谱检测方法，属于土壤和沉积物污染检测技术领域。本发明在土壤或沉积物样品中加入正己烷超声波萃取，当提取液颜色基本无色透明时，提取液旋转蒸发至干，加入正己烷，再加入50～200mg？N-丙基乙二胺固相吸附剂进行分散固相萃取，离心分层，取1μL进入气相色谱-电子捕获检测器检测，否则在超声波萃取后增加浓硫酸净化步骤。7种多氯联苯检出限为0.02～0.03μg/kg，回收率为72～115﹪，相对标准偏差(n＝5)为3.5～6.9﹪。本发明简单，灵敏，能快速实现土壤和沉积物中多氯联苯的批量检测。

说明书

技术领域

本发明属于土壤和沉积物污染检测技术领域，涉及一种土壤和沉积物中 PCB28、PCB52、PCB101、PCB118、PCB153、PCB138、PCB1807种“指示性 多氯联苯”单体的分散固相萃取气相色谱检测方法。

背景技术

多氯联苯作为一种典型的持久性有机污染物广泛的分布在水、大气、土 壤、底泥、生物体等环境介质中，对人体有较强的“三致作用”，曾被作为 热交换剂、润滑剂、变压器和电容器内的绝缘介质、增塑剂、石蜡扩充剂、 粘合剂、有机稀释剂、除尘剂、切割油以及无碳复写纸等重要的化工产品， 广泛应用于电力、塑料加工、化工和印刷等领域，给人类健康和生态环境构 成巨大威胁，是2001年5月《斯德哥尔摩公约》12种优先控制污染物之一。 尽管多氯联苯已停止使用多年，但由于其持久性和疏水性等特性导致其在环 境中残留并积累。土壤和底泥是多氯联苯在环境中迁移转化的重要载体、归 宿地和积蓄库。因此，分析测定土壤或底泥中多氯联苯就有十分重要的意义。

目前，国内外主要采用振荡萃取、索氏提取、超声波萃取、微波辅助萃 取、加速溶剂萃取、超临界流体萃取、亚临界水萃取等萃取技术，结合浓硫 酸磺化净化、固相萃取、凝胶渗透色谱、固相微萃取、顶空固相微萃取、分 散液液微萃取等一种或两种净化方法，再采用气相色谱电子捕获检测法、气 相色谱质谱法、气相色谱串联质谱法等技术进行土壤或底泥中多氯联苯检 测。

土壤或底泥样品基体复杂，前处理及净化步骤成为样品中多氯联苯残留 分析的关键。但振荡萃取、索氏提取等传统的萃取方法处理周期长、溶剂消 耗量大。微波辅助萃取、加速溶剂萃取、超临界流体萃取等仪器和技术成本 相对较高。而超声波萃取法不仅能有效地将结构稳定的有机物从固体样品中 萃取出来，且具有效率高、仪器价格便宜、操作简单等优点，目前用该法萃 取土壤或底泥中多氯联苯已有不少报道。凝胶渗透色谱净化设备相对昂贵， 处理周期较长，且需消耗大量洗脱溶剂。固相微萃取和顶空固相微萃取、萃 取头成本较高，萃取涂层易磨损，萃取后样品需要解析，使用寿命较短，多 次使用还存在交叉污染问题，且固相微萃取不能直接用于固体样品的处理， 必须先经液固萃取。分散液液微萃取主要适合简单液体基质样品，对于复杂 固体基质需要处理转化为液体基质，且易产生基质效应。因而，对于土壤或 底泥中的色素、油脂等杂质的去除，文献报道最多的是浓硫酸净化后再结合 固相萃取净化。浓硫酸净化法可以除去大多数的干扰杂质，但始终有杂质对 PCB52有干扰，有时对PCB28也会有干扰。虽然固相萃取法净化效果较好， 但操作复杂，需要进行萃取柱活化、上样、淋洗、洗脱等过程，耗时较长， 不适合批量化样品处理。分散固相萃取具有快速、简单、便宜、有效、可靠 和安全的特点，已逐步应用到各种农副产品和环境介质中各种有机污染物检 测。但查阅目前国内外文献，尚未有文献报道将分散固相萃取应用于土壤或 沉积物样品中多氯联苯分析净化。

发明内容

针对上述研究现状的不足，本发明根据土壤和沉积物中多氯联苯分析现 状，提供一种土壤和沉积物中多氯联苯的分散固相萃取气相色谱检测方法， 该方法依次包括样品的采集和制样，取样和超声波萃取，浓硫酸净化，浓缩 定容，分散固相萃取净化，气相色谱-电子捕获检测器检测，标准曲线绘制， 样品及回收率测定。

本发明方法包括以下步骤：

步骤(1).样品的采集和制样：

将待检测的土壤和沉积物样品置于冷冻干燥机中干燥12～24h，取出过 80～100目不锈钢筛，置于干燥器内待测；

所述的待检测的土壤和沉积物样品可采用洁净的铝箔包装并密封于聚 乙烯袋子中进行运输；

步骤(2).取样和超声波萃取：

称取10.00g待测样品，加入20～40mL正己烷，涡旋1～3min，以 400～500W功率于30～40℃超声波提取20～40min；当样品中含硫化合物 的背景干扰时，可加入1～3g铜粉超声脱硫，3000～6000r/m高速离心3～ 5min，取上清液，即为正己烷提取液；观察提取液颜色，若基本无色透明， 直接进行步骤(4)浓缩定容，即只需一步净化，否则进行步骤(3)浓硫酸 净化，即需两步净化；

所述的铜粉使用前先用稀盐酸处理以除去其表面氧化膜，再用蒸馏水冲 洗除去附在其表面的少量酸，最后用丙酮冲洗并在高纯氮气(v/v，99.99﹪) 流下吹干，以防铜粉被再次氧化；

所述的一步净化为当提取液颜色基本无色透明时，样品净化只需要进行 分散固相萃取操作；

所述的两步净化为当提取液颜色不是基本无色透明时，样品需要同时进 行浓硫酸净化和分散固相萃取净化；

步骤(3).浓硫酸净化：

在步骤(2)得到的正己烷提取液中加入浓硫酸1～3mL，振荡1～3min， 静置分层，弃去下层浓硫酸废液，根据需要可多次加浓硫酸净化至浓硫酸层 无色，再用30g/L硫酸钠水溶液洗涤正己烷提取液至中性；

步骤(4).浓缩定容：

将正己烷提取液用无水硫酸钠脱水，再在水泵真空度0.08～0.09MPa、 水浴温度35～40℃，转速50～100rpm下，用旋转蒸发仪蒸发至干，加入正 己烷溶解、定容至1.0mL，得到正己烷溶解液；

步骤(5).分散固相萃取净化：

在1mL正己烷溶解液中加入50～200mgN-丙基乙二胺固相吸附剂，涡 旋30～60s，3000～6000r/m高速离心1～3min，取上清液；

步骤(6).气相色谱-电子捕获检测器检测：

进样针抽取上述上清液，按照设定好的气相色谱-电子捕获检测器条件 进行检测；色谱条件为：进样口温度为260℃；电子捕获检测器温度为300℃； 载气为高纯氮气(v/v，99.999﹪)，流速为1mL/min；进样体积为1μL； 进样方式为不分流进样，0.75min后，分流比为50:1；气相色谱柱升温程 序为：120℃保持1min，10℃/min升温至200℃，再以2℃/min升温至240℃， 最后以15℃/min升温至270℃，保持1min，总运行时间为32min。

所述的气相色谱柱选用规格为30m×0.25mm×0.25μm的CD-5MS毛细管 气相色谱柱，固定相为二苯基与二甲基聚硅氧烷的混合液，其中二苯基的质 量分数为5﹪，二甲基聚硅氧烷的质量分数为95﹪，能实现7种多氯联苯的 有效分离；

步骤(7).标准曲线绘制：以保留时间定性，外标法定量

保留时间定性时，将标准溶液按照上述步骤(6)的要求进行操作得到 标准溶液的气相色谱图，并与单个分析物的气相色谱图进行保留时间比较， 确定7种多氯联苯的保留时间；这7种多氯联苯的保留时间用以作为外标法 定量时，7种多氯联苯色谱峰识别的依据。

所述的标准溶液中溶质为多氯联苯，溶剂为正己烷，浓度均为10μg/L； 其中多氯联苯包括PCB28、PCB52、PCB101、PCB118、PCB153、PCB138、PCB180。

配制标准溶液的步骤可以是：取浓度为100μg/L的多氯联苯混合标准 使用液100μL，用正己烷定容至1mL,得到标准溶液。

外标法定量时，将六种不同加标浓度的标准曲线系列溶液，根据加入的 多氯联苯浓度和峰面积的对应关系建立标准曲线。

所述的标准曲线系列溶液中溶质为多氯联苯，溶剂为正己烷，浓度范围 均为1.25～100μg/L。

标准曲线系列溶液的配制步骤是：分别取浓度为100μg/L的多氯联苯 混合标准使用液12.5、25、50、100、500、1000μL，用正己烷定容至1mL， 得到六次加标浓度范围均为1.25～100μg/L的标准曲线系列溶液。

表1为本发明方法的线性回归方程、线性范围、相关系数和检出限。由 表1可知，各多氯联苯在相应的线性范围内，具有良好的线性关系，满足分 析方法要求。

表1本发明方法的线性回归方程，线性范围，相关系数和检出限

其中，a：y和x分别代表分析物的峰面积和分析物在1mL正己烷中的理论 浓度；b：线性范围代表分析物在标准曲线系列溶液中的浓度；

步骤(8).样品及回收率测定：

将采集到的实际样品，按照上述步骤(1)～(6)的要求进行操作，并 与上述步骤(7)得到的标准曲线比较，通过换算最终得到实际样品中7种 多氯联苯的含量；

将不同加标浓度的加标样品，按照上述步骤(2)～(6)的要求分别进 行五次平行操作，并与上述步骤(7)得到的标准曲线比较，通过换算最终 得到加标样品中7种多氯联苯的测定浓度；按照下式进行回收率计算：

$R=\frac{C_s-C_0}{C}\times 100\%;$

式中：R——回收率，﹪；

C_s——加标样品中7种多氯联苯的测定浓度，μg/kg；

C₀——实际样品中7种多氯联苯的浓度，μg/kg；

C——加标样品中7种多氯联苯的理论加标浓度，μg/kg；

所述的加标样品为经步骤(1)预处理后的实际样品中加入多氯联苯后 的样品。

本发明的有益效果：

本发明采用超声波萃取、分散固相萃取净化、气相色谱电子捕获检测法 测定土壤和沉积物中的多氯联苯，该方法操作简单，能快速完成样品前处理， 当提取液颜色基本无色透明时，选择一步净化(分散固相萃取净化)，否则 需要两步净化(浓硫酸净化+分散固相萃取净化)，其中分散固相萃取净化过 程只需要5min，结果准确，7种多氯联苯检出限为0.02～0.03μg/kg， 回收率为72～115﹪，相对标准偏差(n＝5)为3.6～6.9﹪，具有较高的灵 敏度和令人满意的回收率及重现性，能用于土壤和沉积物中多氯联苯的含量 测定。

附图说明

图1为7种多氯联苯标准溶液(10μg/L)的气相色谱图；

图2为实施例2舟山朱家尖甲菜地采集的土样(A)和加标舟山朱家尖 甲菜地采集的土样(B)的气相色谱图；

图3为实施例3舟山岱衢洋增殖放流海域采集的泥样(A)和加标舟山 岱衢洋增殖放流海域采集的泥样(B)的气相色谱图；

图4为样品分析流程图；

其中，1.PCB28；2.PCB52；3.PCB101；4.PCB118；5.PCB153；6.PCB138； 7.PCB180。

具体实施方式

下面结合具体实施例对本发明进行进一步描述，但本发明的保护范围并 不仅限于此：

下面实施例所使用的仪器设备主要有美国Varian公司生产的GC-450气 相色谱仪(配置电子捕获检测器)。

实施例1.

步骤(1).样品的采集和制样：

将采集的土壤和沉积物样品，用洁净的铝箔包装并密封于聚乙烯袋子 中，然后用便携式冷藏箱运回实验室，再将样品置于冷冻干燥机中干燥24h， 取出过100目不锈钢筛，置于干燥器内待测。

步骤(2).取样和超声波萃取：

称取10.00g待测样品，置于50mL离心管中，加入30mL正己烷，涡 旋2min，以480W功率于30℃超声波提取30min，当样品中含硫化合物的 背景干扰时，可加入1～3g铜粉超声脱硫，6000r/m高速离心5min；观 察提取液颜色，若基本无色透明，直接进行步骤(4)浓缩定容，即只需一 步净化，否则进行步骤(3)浓硫酸净化，即需两步净化。

所述的铜粉使用前先用稀盐酸处理以除去其表面氧化膜，再用蒸馏水冲 洗除去附在其表面的少量酸，最后用丙酮冲洗并在高纯氮气(v/v，99.99﹪) 流下吹干，以防铜粉被再次氧化。

所述的一步净化为，当提取液颜色基本无色透明时，样品净化只需要进 行分散固相萃取操作。

所述的两步净化为，当提取液颜色不是基本无色透明时，样品需要同时 进行浓硫酸净化和分散固相萃取净化。

在进行萃取方式的选择时，考虑到振荡萃取、索氏提取等传统的萃取方 法处理周期长、溶剂消耗量大。微波辅助萃取、加速溶剂萃取、超临界流体 萃取等仪器和技术成本相对较高。而超声波萃取法不仅能有效地将结构稳定 的有机物从固体样品中萃取出来，且具有效率高、仪器价格便宜、操作简单 等优点，目前用该法萃取土壤或底泥中多氯联苯已有不少报道。因此，本发 明选择超声波萃取法萃取土壤或底泥中的多氯联苯。

在进行净化方式选择时，考虑到GPC净化设备相对昂贵，处理周期较长， 且需消耗大量洗脱溶剂。固相微萃取和顶空固相微萃取，萃取头成本较高， 萃取涂层易磨损，萃取后样品需要解析，使用寿命较短，多次使用还存在交 叉污染问题，且固相微萃取不能直接用于固体样品的处理，必须先经液固萃 取。分散液液微萃取主要适合简单液体基质样品，对于复杂固体基质需要处 理转化为液体基质，且易产生基质效应。因而，对于土壤或底泥中的色素、 油脂等杂质的去除，文献报道最多的是浓硫酸净化后再结合固相萃取净化。 浓硫酸净化法可以除去大多数的干扰杂质，但始终有杂质对PCB52有干扰， 有时对PCB28也会有干扰。虽然固相萃取法净化效果较好，但操作复杂，需 要进行萃取柱活化、上样、淋洗、洗脱等过程，耗时较长，不适合批量化样 品处理。本发明采用分散固相萃取替代固相萃取过程，只需要在萃取浓缩液 中加入适量合适吸附剂吸附杂质，便可达到净化目的。整个分散固相萃取过 程最多只需要5min，而常规固相萃取通常需要50min，大大缩短前处理时 间。

当样品经过超声波萃取后，根据萃取液的颜色，灵活选择一步净化或两 步净化，这是根据大量样品测试经验而来。这是因为当萃取液颜色基本无色 透明时，加入浓硫酸净化后，浓硫酸层基本无色，此时无论是否进行浓硫酸 净化，影响分析物检测的均主要是PCB28和PCB52附近的杂质，而只要进行 分散固相萃取净化便可达到净化效果。

步骤(3).浓硫酸净化：

提取液中加入浓硫酸2mL，振荡2min，静置分层，弃去下层浓硫酸废 液，根据需要，可多次加浓硫酸净化至浓硫酸层无色，再用30g/L硫酸钠 水溶液洗涤正己烷提取液至中性。

步骤(4).浓缩定容：

将提取液用无水硫酸钠脱水后，在水泵真空度0.09MPa、水浴温度35℃ 下，转速80rpm，用旋转蒸发仪蒸发至干，加入正己烷溶解、定容至1.0mL， 得到正己烷溶解液。

步骤(5).分散固相萃取净化：

在1mL正己烷溶解液中加入50～200mgN-丙基乙二胺固相吸附剂，涡 旋30s，6000r/m高速离心2min，取上清液。

在进行分散固相萃取净化时，对固相吸附剂的种类和用量进行了优化。 比较了100mgN-丙基乙二胺吸附剂和100mgC18吸附剂的净化效果。结果 表明，C18吸附剂对PCB28、PCB52附近杂质净化没效果，PSA吸附剂能有效 消除杂质对PCB28、PCB52检测的干扰。这可能是因为N-丙基乙二胺吸附剂 能有效除去影响目标物检测的碳水化合物、脂肪酸、有机酸、酚类、糖类以 及一些极性色素的干扰，C18吸附剂主要用于去除脂肪和酯类等非极性干扰 物，而浓硫酸净化已除去大多数的色素和脂肪，且无论是否进行浓硫酸净化， PCB28、PCB52出峰位置均会存在一定程度的杂质干扰。接着，考察0～200mg 范围内N-丙基乙二胺吸附剂含量对净化效果的影响。结果表明，随着N-丙 基乙二胺吸附剂用量的增加，净化效果有所增加，当达到一定程度后，吸附 剂增加，回收率变化不大。但由于N-丙基乙二胺吸附剂会吸附一定的正己烷， PSA剂量增加，离心分离后，上清液减少，最终样品若经两步净化(浓硫酸净 化+分散固相萃取净化)时选择50～150mg，若经一步净化(仅散固相萃取净 化)时选择100～200mg，此时均既能达到较好的净化效果，又能保证较高的 回收率。

步骤(6).气相色谱-电子捕获检测器检测：

进样针抽取上述上清液，按照设定好的气相色谱-电子捕获检测器条件 进行检测。色谱条件为：进样口温度为260℃；电子捕获检测器温度为300℃； 载气为高纯氮气(99.999﹪)，流速为1mL/min；进样体积为1μL；进样 方式为不分流进样，0.75min后，分流比为50:1；气相色谱柱升温程序为： 120℃保持1min，10℃/min升温至200℃，再以2℃/min升温至240℃，最 后以15℃/min升温至270℃，保持1min，总运行时间为32min。

所述的气相色谱柱选用规格为30m×0.25mm×0.25μm的CD-5MS毛细管 气相色谱柱，固定相为二苯基与二甲基聚硅氧烷的混合液，其中二苯基的质 量分数为5﹪，二甲基聚硅氧烷的质量分数为95﹪，能实现7种多氯联苯的 有效分离。

步骤(7).标准曲线绘制：以保留时间定性，外标法定量。

保留时间定性时，取浓度均为100μg/L的PCB28、PCB52、PCB101、 PCB118、PCB153、PCB138、PCB180的多氯联苯混合标准使用液100μL，用 正己烷定容至1mL,得到标准溶液，得到浓度均为10μg/L的标准溶液。 将标准溶液按照上述步骤(6)的要求进行操作得到标准溶液的气相色谱图， 并与单个分析物的气相色谱图进行保留时间比较，确定7种多氯联苯的保留 时间；这7种多氯联苯的保留时间用以作为外标法定量时，7种多氯联苯色 谱峰识别的依据。附图1为标准溶液的气相色谱图。

外标法定量时，分别取浓度为100μg/L的多氯联苯混合标准使用液 12.5、25、50、100、500、1000μL，用正己烷定容至1mL，得到六次加 标浓度范围均为1.25～100μg/L的标准曲线系列溶液。将六种不同加标浓 度的标准曲线系列溶液，根据加入的多氯联苯浓度和峰面积的对应关系建立 标准曲线。

表1为本发明方法的线性回归方程、线性范围、相关系数和检出限。由 表1可知，各多氯联苯在相应的线性范围内，具有良好的线性关系，满足分 析方法要求。

表1本发明方法的线性回归方程，线性范围，相关系数和检出限

其中，a：y和x分别代表分析物的峰面积和分析物在1mL正己烷中的理论 浓度。

b：线性范围代表分析物在标准曲线系列溶液中的浓度；

步骤(8).样品及回收率测定：

采集两种不同基质的实际样品(舟山朱家尖某菜地采集的土样和舟山岱 衢洋增殖放流海域采集的泥样)，按照上述步骤(1)～(6)的要求进行操 作，并与上述步骤(7)得到的标准曲线比较，通过换算最终得到待测样品 中7种多氯联苯的含量。

使用上述实际样品，按照(1)步骤的要求处理后，取10.00g，分别 加入12.5、100、1000μL的100μg/L多氯联苯混合标准使用液，配制成 低(0.125μg/kg)，中(1.00μg/kg)和高(10.0μg/kg)三种添加浓度水平 的加标样品，按照上述步骤(2)～(6)的要求分别进行五次平行操作，并 与上述步骤(7)得到的标准曲线比较，通过换算最终得到加标样品中7种 多氯联苯的测定浓度；按照下式进行回收率计算：

$R=\frac{C_s-C_0}{C}\times 100\%;$

式中：R——回收率，﹪；

C_s——加标样品中7种多氯联苯的测定浓度，μg/kg；

C₀——实际样品中7种多氯联苯的浓度，μg/kg；

C——加标样品中7种多氯联苯的理论加标浓度，μg/kg；

经检测，舟山朱家尖某菜地采集的土样和舟山岱衢洋增殖放流海域采集 的泥样中7种多氯联苯浓度均为未检出，不同基质实际样品(舟山朱家尖某 菜地采集的土样和舟山岱衢洋增殖放流海域采集的泥样)中不同加标浓度水 平的加标回收实验结果见表2。舟山朱家尖某菜地采集的土样和加标舟山朱 家尖某菜地采集的土样的气相色谱图见附图2，舟山岱衢洋增殖放流海域采 集的泥样和加标舟山岱衢洋增殖放流海域采集的泥样的气相色谱图见附图 3，整个样品分析流程图见附图4。

表3舟山朱家尖某菜地采集的土样和舟山岱衢洋增殖放流海域采集的泥样中 7种多氯联苯的加标回收率和方法的精密度(n＝5)

舟山岱衢洋增殖放流海域采集的 泥样

注：a.测定值的单位均为μg/kg

实施例2.舟山朱家尖甲菜地采集的土样中7种多氯联苯的测定

(1)样品的采集和制样：舟山朱家尖甲菜地采集的土样，用洁净的铝 箔包装并密封于聚乙烯袋子中，然后用便携式冷藏箱运回实验室，再将样品 置于冷冻干燥机中干燥24h，取出过100目不锈钢筛，置于干燥器内待测。

加标舟山朱家尖甲菜地采集的土样：向10.00g处理好的舟山朱家尖甲 菜地采集的土样，分别加入12.5、100、1000μL的100μg/L多氯联苯混 合标准使用液，配制成低(0.125μg/kg)，中(1.00μg/kg)和高(10.0μg/kg) 三种添加浓度水平的加标舟山朱家尖甲菜地采集的土样。

(2)取样和超声波萃取：称取10.00g上述步骤(1)处理好的舟山朱 家尖甲菜地采集的土样或加标舟山朱家尖甲菜地采集的土样，置于50mL离 心管中，加入30mL正己烷，涡旋2min，以480W功率于30℃超声波提取 30min，加入1g铜粉超声脱硫，6000r/m高速离心5min；提取液颜色较 黄，进行两步净化。

(3)浓硫酸净化：提取液中加入浓硫酸2mL，振荡2min，静置分层， 弃去下层浓硫酸废液，重复上述过程3次，至浓硫酸层无色，再用30g/L 硫酸钠水溶液洗涤正己烷提取液至中性。

(4)浓缩定容：将提取液用无水硫酸钠脱水后，在水泵真空度0.09MPa、 水浴温度35℃，转速80rpm下，用旋转蒸发仪蒸发至干，加入正己烷溶解、 定容至1.0mL，得到正己烷溶解液。

(5)分散固相萃取净化：在1mL正己烷溶解液中加入100mgN-丙基 乙二胺固相吸附剂，涡旋30s，6000r/m高速离心2min，取上清液。

(6)气相色谱-电子捕获检测器检测：进样针抽取上述步骤(5)得到 的上清液1μL，按照设定好的气相色谱-电子捕获检测器条件进行检测。 色谱条件为：进样口温度为260℃；电子捕获检测器温度为300℃；载气为 高纯氮气(v/v，99.999﹪)，流速为1mL/min；进样体积为1μL；进样方 式为不分流进样，0.75min后，分流比为50:1；气相色谱柱升温程序为： 120℃保持1min，10℃/min升温至200℃，再以2℃/min升温至240℃，最 后以15℃/min升温至270℃，保持1min，总运行时间为32min。

所述的气相色谱柱选用规格为30m×0.25mm×0.25μm的CD-5MS毛细管 气相色谱柱，固定相为二苯基与二甲基聚硅氧烷的混合液，其中二苯基的质 量分数为5﹪，二甲基聚硅氧烷的质量分数为95﹪，能实现7种多氯联苯的 有效分离。

(7)标准曲线绘制：以保留时间定性，外标法定量。保留时间定性时， 取浓度均为100μg/L的PCB28、PCB52、PCB101、PCB118、PCB153、PCB138、 PCB180的多氯联苯混合标准使用液100μL，用正己烷定容至1mL，得到 标准溶液，得到浓度均为10μg/L的标准溶液。将标准溶液按照上述步骤 (6)的要求进行操作得到标准溶液的气相色谱图，并与单个分析物的气相 色谱图进行保留时间比较，确定7种多氯联苯的保留时间；这7种多氯联苯 的保留时间用以作为外标法定量时，7种多氯联苯色谱峰识别的依据。附图 1为标准溶液的气相色谱图。

外标法定量时，分别取浓度为100μg/L的多氯联苯混合标准使用液 12.5、25、50、100、500、1000μL，用正己烷定容至1mL，得到六次加 标浓度范围均为1.25～100μg/L的标准曲线系列溶液。将六种不同加标浓 度的标准曲线系列溶液，根据加入的多氯联苯浓度和峰面积的对应关系建立 标准曲线。表1为本发明方法的线性回归方程、线性范围、相关系数和检出 限。由表1可知，各多氯联苯在相应的线性范围内，具有良好的线性关系， 满足分析方法要求。

(8)样品及回收率测定：舟山朱家尖甲菜地采集的土样按照上述步骤 (1)～(6)的要求进行操作后，与上述步骤(7)得到的标准曲线比较， 通过换算最终得到舟山朱家尖甲菜地采集的土样中7种多氯联苯的测定浓 度均为未检出。加标舟山朱家尖甲菜地采集的土样按照上述步骤(1)～(6) 的要求分别进行五次平行操作，并与上述步骤(7)得到的标准曲线比较， 通过换算最终得到加标舟山朱家尖甲菜地采集的土样中7种多氯联苯的测 定浓度，并计算回收率，五次平行测定的相对标准偏差。由表2可知，加标 舟山朱家尖甲菜地采集的土样回收率为72～107﹪，相对标准偏差(n＝5) 为3.5～5.8﹪，满足分析方法对回收率和重现性要求。

实施例3.舟山岱衢洋增殖放流海域采集的泥样中7种多氯联苯的测定

(1)样品的采集和制样：舟山岱衢洋增殖放流海域采集的泥样，用洁 净的铝箔包装并密封于聚乙烯袋子中，然后用便携式冷藏箱运回实验室，再 将样品置于冷冻干燥机中干燥24h，取出过100目不锈钢筛，置于干燥器内 待测。

加标舟山岱衢洋增殖放流海域采集的泥样：向10.00g处理好的舟山岱 衢洋增殖放流海域采集的泥样，分别加入12.5、100、1000μL的100μg/L 多氯联苯混合标准使用液，配制成低(0.125μg/kg)，中(1.00μg/kg)和 高(10.0μg/kg)三种添加浓度水平的加标舟山岱衢洋增殖放流海域采集的 泥样。

(2)取样和超声波萃取：称取10.00g上述步骤(1)处理好的舟山岱 衢洋增殖放流海域采集的泥样或加标舟山岱衢洋增殖放流海域采集的泥样， 置于50mL离心管中，加入30mL正己烷，涡旋2min，以480W功率于30℃ 超声波提取30min，6000r/m高速离心5min；提取液颜色基本无色透明， 进行一步净化。

(3)浓缩定容：将提取液用无水硫酸钠脱水后，在水泵真空度0.09MPa、 水浴温度35℃，转速80rpm下，用旋转蒸发仪蒸发至干，加入正己烷溶解、 定容至1.0mL，得到正己烷溶解液。

(4)分散固相萃取净化：在1mL正己烷溶解液中加入100mgN-丙基 乙二胺固相吸附剂，涡旋30s，6000r/m高速离心2min，取上清液。

(5)气相色谱-电子捕获检测器检测：进样针抽取上述步骤(5)得到 的上清液1μL，按照设定好的气相色谱-电子捕获检测器条件进行检测。 色谱条件为：进样口温度为260℃；电子捕获检测器温度为300℃；载气为 高纯氮气(v/v，99.999﹪)，流速为1mL/min；进样体积为1μL；进样方 式为不分流进样，0.75min后，分流比为50:1；气相色谱柱升温程序为： 120℃保持1min，10℃/min升温至200℃，再以2℃/min升温至240℃，最 后以15℃/min升温至270℃，保持1min，总运行时间为32min。

所述的气相色谱柱选用规格为30m×0.25mm×0.25μm的CD-5MS毛细管 气相色谱柱，固定相为二苯基与二甲基聚硅氧烷的混合液，其中二苯基的质 量分数为5﹪，二甲基聚硅氧烷的质量分数为95﹪，能实现7种多氯联苯的 有效分离。

(6)标准曲线绘制：以保留时间定性，外标法定量。保留时间定性时， 取浓度均为100μg/L的PCB28、PCB52、PCB101、PCB118、PCB153、PCB138、 PCB180的多氯联苯混合标准使用液100μL，用正己烷定容至1mL,得到标 准溶液，得到浓度均为10μg/L的标准溶液。将标准溶液按照上述步骤(5) 的要求进行操作得到标准溶液的气相色谱图，并与单个分析物的气相色谱图 进行保留时间比较，确定7种多氯联苯的保留时间；这7种多氯联苯的保留 时间用以作为外标法定量时，7种多氯联苯色谱峰识别的依据。附图1为标 准溶液的气相色谱图。

外标法定量时，分别取浓度为100μg/L的多氯联苯混合标准使用液 12.5、25、50、100、500、1000μL，用正己烷定容至1mL，得到六次加 标浓度范围均为1.25～100μg/L的标准曲线系列溶液。将六种不同加标浓 度的标准曲线系列溶液，根据加入的多氯联苯浓度和峰面积的对应关系建立 标准曲线。表1为本发明方法的线性回归方程、线性范围、相关系数和检出 限。由表1可知，各多氯联苯在相应的线性范围内，具有良好的线性关系， 满足分析方法要求。

(7)样品及回收率测定：舟山岱衢洋增殖放流海域采集的泥样按照上 述步骤(1)～(5)的要求进行操作后，与上述步骤(6)得到的标准曲线 比较，通过换算最终得到舟山岱衢洋增殖放流海域采集的泥样中7种多氯联 苯的测定浓度均为未检出。加标舟山岱衢洋增殖放流海域采集的泥样按照上 述步骤(1)～(5)的要求分别进行五次平行操作，并与上述步骤(6)得 到的标准曲线比较，通过换算最终得到加标舟山岱衢洋增殖放流海域采集的 泥样中7种多氯联苯的测定浓度，并计算回收率，五次平行测定的相对标准 偏差。由表2可知，加标舟山岱衢洋增殖放流海域采集的泥样回收率为88～ 115﹪，相对标准偏差(n＝5)为3.7～6.9﹪，满足分析方法对回收率和重 现性要求。

实施例4.舟山朱家尖乙菜地采集的土样中7种多氯联苯的测定

(1)样品的采集和制样：舟山朱家尖乙菜地采集的土样用洁净的铝箔 包装并密封于聚乙烯袋子中，然后用便携式冷藏箱运回实验室，再将样品置 于冷冻干燥机中干燥12h，取出过80目不锈钢筛，置于干燥器内待测。

加标朱家尖乙菜地采集的土样：向10.00g处理好的朱家尖乙菜地采集 的土样，分别加入12.5、100、1000μL的100μg/L多氯联苯混合标准使 用液，配制成低(0.125μg/kg)，中(1.00μg/kg)和高(10.0μg/kg)三种 添加浓度水平的加标朱家尖乙菜地采集的土样。

(2)取样和超声波萃取：称取10.00g上述步骤(1)处理好的朱家尖 乙菜地采集的土样或加标朱家尖乙菜地采集的土样，置于50mL离心管中， 加入20mL正己烷，涡旋1min，以400W功率于35℃超声波提取40min； 有含硫化合物的背景干扰，加入1g铜粉超声脱硫，3000r/m高速离心3min； 提取液颜色较黄，进行两步净化。

(3)浓硫酸净化：提取液中加入浓硫酸1mL，振荡1min，静置分层， 弃去下层浓硫酸废液，重复上述过程2次，至浓硫酸层无色，再用30g/L 硫酸钠水溶液洗涤正己烷提取液至中性。

(4)浓缩定容：将提取液用无水硫酸钠脱水后，在水泵真空度0.08MPa、 水浴温度40℃，转速100rpm下，用旋转蒸发仪蒸发至干，加入正己烷溶解、 定容至1.0mL，得到正己烷溶解液。

(5)分散固相萃取净化：在1mL正己烷溶解液中加入50mgN-丙基乙 二胺固相吸附剂，涡旋60s，3000r/m高速离心3min，取上清液。

(6)气相色谱-电子捕获检测器检测：进样针抽取上述步骤(5)得到 的上清液1μL，按照设定好的气相色谱-电子捕获检测器条件进行检测。 色谱条件为：进样口温度为260℃；电子捕获检测器温度为300℃；载气为 高纯氮气(v/v，99.999﹪)，流速为1mL/min；进样体积为1μL；进样方 式为不分流进样，0.75min后，分流比为50:1；气相色谱柱升温程序为： 120℃保持1min，10℃/min升温至200℃，再以2℃/min升温至240℃，最 后以15℃/min升温至270℃，保持1min，总运行时间为32min。

所述的气相色谱柱选用规格为30m×0.25mm×0.25μm的CD-5MS毛细管 气相色谱柱，固定相为二苯基与二甲基聚硅氧烷的混合液，其中二苯基的质 量分数为5﹪，二甲基聚硅氧烷的质量分数为95﹪，能实现7种多氯联苯的 有效分离。

(7)标准曲线绘制：以保留时间定性，外标法定量。保留时间定性时， 取浓度均为100μg/L的PCB28、PCB52、PCB101、PCB118、PCB153、PCB138、 PCB180的多氯联苯混合标准使用液100μL，用正己烷定容至1mL，得到 标准溶液，得到浓度均为10μg/L的标准溶液。将标准溶液按照上述步骤 (6)的要求进行操作得到标准溶液的气相色谱图，并与单个分析物的气相 色谱图进行保留时间比较，确定7种多氯联苯的保留时间；这7种多氯联苯 的保留时间用以作为外标法定量时，7种多氯联苯色谱峰识别的依据。

外标法定量时，分别取浓度为100μg/L的多氯联苯混合标准使用液 12.5、25、50、100、500、1000μL，用正己烷定容至1mL，得到六次加 标浓度范围均为1.25～100μg/L的标准曲线系列溶液。将六种不同加标浓 度的标准曲线系列溶液，根据加入的多氯联苯浓度和峰面积的对应关系建立 标准曲线。

(8)样品及回收率测定：朱家尖乙菜地采集的土样按照上述步骤(1)～ (6)的要求进行操作后，与上述步骤(7)得到的标准曲线比较，通过换算 最终得到朱家尖乙菜地采集的土样中7种多氯联苯的测定浓度均为未检出。 加标朱家尖乙菜地采集的土样按照上述步骤(1)～(6)的要求分别进行五 次平行操作，并与上述步骤(7)得到的标准曲线比较，通过换算最终得到 加标朱家尖乙菜地采集的土样中7种多氯联苯的测定浓度，并计算回收率， 五次平行测定的相对标准偏差。加标朱家尖乙菜地采集的土样回收率为76～ 110﹪，相对标准偏差(n＝5)为3.9～6.4﹪，满足分析方法对回收率和重 现性要求。

实施例5.舟山朱家尖丙菜地采集的土样中7种多氯联苯的测定

(1)样品的采集和制样：舟山朱家尖丙菜地采集的土样用洁净的铝箔 包装并密封于聚乙烯袋子中，然后用便携式冷藏箱运回实验室，再将样品置 于冷冻干燥机中干燥20h，取出过100目不锈钢筛，置于干燥器内待测。

加标朱家尖乙菜地采集的土样：向10.00g处理好的朱家尖丙菜地采集 的土样，分别加入12.5、100、1000μL的100μg/L多氯联苯混合标准使 用液，配制成低(0.125μg/kg)，中(1.00μg/kg)和高(10.0μg/kg)三种 添加浓度水平的加标朱家尖丙菜地采集的土样。

(2)取样和超声波萃取：称取10.00g上述步骤(1)处理好的朱家尖 丙菜地采集的土样或加标朱家尖丙菜地采集的土样，置于50mL离心管中， 加入40mL正己烷，涡旋3min，以500W功率于40℃超声波提取20min； 有含硫化合物的背景干扰，加入3g铜粉超声脱硫，3000r/m高速离心5min； 提取液颜色基本无色，进行两步净化。

(3)浓硫酸净化：提取液中加入浓硫酸3mL，振荡3min，静置分层， 弃去下层浓硫酸废液，重复上述过程2次，至浓硫酸层无色，再用30g/L 硫酸钠水溶液洗涤正己烷提取液至中性。

(4)浓缩定容：将提取液用无水硫酸钠脱水后，在水泵真空度0.09MPa、 水浴温度40℃，转速50rpm下，用旋转蒸发仪蒸发至干，加入正己烷溶解、 定容至1.0mL，得到正己烷溶解液。

(5)分散固相萃取净化：在1mL正己烷溶解液中加入150mgN-丙基 乙二胺固相吸附剂，涡旋60s，6000r/m高速离心1min，取上清液。

(6)气相色谱-电子捕获检测器检测：进样针抽取上述步骤(5)得到 的上清液1μL，按照设定好的气相色谱-电子捕获检测器条件进行检测。 色谱条件为：进样口温度为260℃；电子捕获检测器温度为300℃；载气为 高纯氮气(v/v，99.999﹪)，流速为1mL/min；进样体积为1μL；进样方 式为不分流进样，0.75min后，分流比为50:1；气相色谱柱升温程序为： 120℃保持1min，10℃/min升温至200℃，再以2℃/min升温至240℃，最 后以15℃/min升温至270℃，保持1min，总运行时间为32min。

所述的气相色谱柱选用规格为30m×0.25mm×0.25μm的CD-5MS毛细管 气相色谱柱，固定相为二苯基与二甲基聚硅氧烷的混合液，其中二苯基的质 量分数为5﹪，二甲基聚硅氧烷的质量分数为95﹪，能实现7种多氯联苯的 有效分离。

(7)标准曲线绘制：以保留时间定性，外标法定量。保留时间定性时， 取浓度均为100μg/L的PCB28、PCB52、PCB101、PCB118、PCB153、PCB138、 PCB180的多氯联苯混合标准使用液100μL，用正己烷定容至1mL，得到 标准溶液，得到浓度均为10μg/L的标准溶液。将标准溶液按照上述步骤 (6)的要求进行操作得到标准溶液的气相色谱图，并与单个分析物的气相 色谱图进行保留时间比较，确定7种多氯联苯的保留时间；这7种多氯联苯 的保留时间用以作为外标法定量时，7种多氯联苯色谱峰识别的依据。

外标法定量时，分别取浓度为100μg/L的多氯联苯混合标准使用液 12.5、25、50、100、500、1000μL，用正己烷定容至1mL，得到六次加 标浓度范围均为1.25～100μg/L的标准曲线系列溶液。将六种不同加标浓 度的标准曲线系列溶液，根据加入的多氯联苯浓度和峰面积的对应关系建立 标准曲线。

(8)样品及回收率测定：朱家尖丙菜地采集的土样按照上述步骤(1)～ (6)的要求进行操作后，与上述步骤(7)得到的标准曲线比较，通过换算 最终得到朱家尖丙菜地采集的土样中7种多氯联苯的测定浓度均为未检出。 加标朱家尖丙菜地采集的土样按照上述步骤(1)～(6)的要求分别进行五 次平行操作，并与上述步骤(7)得到的标准曲线比较，通过换算最终得到 加标朱家尖丙菜地采集的土样中7种多氯联苯的测定浓度，并计算回收率， 五次平行测定的相对标准偏差。加标朱家尖丙菜地采集的土样回收率为73～ 105﹪，相对标准偏差(n＝5)为3.2～6.3﹪，满足分析方法对回收率和重现 性要求。

实施例6.舟山岱衢洋增殖放流海域采集的泥样中7种多氯联苯的测定

(1)样品的采集和制样：舟山岱衢洋增殖放流海域采集的泥样，用洁 净的铝箔包装并密封于聚乙烯袋子中，然后用便携式冷藏箱运回实验室，再 将样品置于冷冻干燥机中干燥24h，取出过100目不锈钢筛，置于干燥器内 待测。

加标舟山岱衢洋增殖放流海域采集的泥样：向10.00g处理好的舟山岱 衢洋增殖放流海域采集的泥样，分别加入12.5、100、1000μL的100μg/L 多氯联苯混合标准使用液，配制成低(0.125μg/kg)，中(1.00μg/kg)和 高(10.0μg/kg)三种添加浓度水平的加标舟山岱衢洋增殖放流海域采集的 泥样。

(2)取样和超声波萃取：称取10.00g上述步骤(1)处理好的舟山岱 衢洋增殖放流海域采集的泥样或加标舟山岱衢洋增殖放流海域采集的泥样， 置于50mL离心管中，加入40mL正己烷，涡旋2min，以400W功率于40℃ 超声波提取20min，6000r/m高速离心5min；提取液颜色基本无色透明， 进行一步净化。

(3)浓缩定容：将提取液用无水硫酸钠脱水后，在水泵真空度0.08MPa、 水浴温度40℃，转速80rpm下，用旋转蒸发仪蒸发至干，加入正己烷溶解、 定容至1.0mL，得到正己烷溶解液。

(4)分散固相萃取净化：在1mL正己烷溶解液中加入200mgN-丙基 乙二胺固相吸附剂，涡旋30s，6000r/m高速离心2min，取上清液。

(5)气相色谱-电子捕获检测器检测：进样针抽取上述步骤(5)得到 的上清液1μL，按照设定好的气相色谱-电子捕获检测器条件进行检测。 色谱条件为：进样口温度为260℃；电子捕获检测器温度为300℃；载气为 高纯氮气(v/v，99.999﹪)，流速为1mL/min；进样体积为1μL；进样方 式为不分流进样，0.75min后，分流比为50:1；气相色谱柱升温程序为： 120℃保持1min，10℃/min升温至200℃，再以2℃/min升温至240℃，最 后以15℃/min升温至270℃，保持1min，总运行时间为32min。

所述的气相色谱柱选用规格为30m×0.25mm×0.25μm的CD-5MS毛细管 气相色谱柱，固定相为二苯基与二甲基聚硅氧烷的混合液，其中二苯基的质 量分数为5﹪，二甲基聚硅氧烷的质量分数为95﹪，能实现7种多氯联苯的 有效分离。

(6)标准曲线绘制：以保留时间定性，外标法定量。保留时间定性时， 取浓度均为100μg/L的PCB28、PCB52、PCB101、PCB118、PCB153、PCB138、 PCB180的多氯联苯混合标准使用液100μL，用正己烷定容至1mL,得到标 准溶液，得到浓度均为10μg/L的标准溶液。将标准溶液按照上述步骤(5) 的要求进行操作得到标准溶液的气相色谱图，并与单个分析物的气相色谱图 进行保留时间比较，确定7种多氯联苯的保留时间；这7种多氯联苯的保留 时间用以作为外标法定量时，7种多氯联苯色谱峰识别的依据。

外标法定量时，分别取浓度为100μg/L的多氯联苯混合标准使用液 12.5、25、50、100、500、1000μL，用正己烷定容至1mL，得到六次加 标浓度范围均为1.25～100μg/L的标准曲线系列溶液。将六种不同加标浓 度的标准曲线系列溶液，根据加入的多氯联苯浓度和峰面积的对应关系建立 标准曲线。

(7)样品及回收率测定：舟山岱衢洋增殖放流海域采集的泥样按照上 述步骤(1)～(5)的要求进行操作后，与上述步骤(6)得到的标准曲线 比较，通过换算最终得到舟山岱衢洋增殖放流海域采集的泥样中7种多氯联 苯的测定浓度均为未检出。加标舟山岱衢洋增殖放流海域采集的泥样按照上 述步骤(1)～(5)的要求分别进行五次平行操作，并与上述步骤(6)得 到的标准曲线比较，通过换算最终得到加标舟山岱衢洋增殖放流海域采集的 泥样中7种多氯联苯的测定浓度，并计算回收率，五次平行测定的相对标准 偏差。加标舟山岱衢洋增殖放流海域采集的泥样回收率为79～112﹪，相对 标准偏差(n＝5)为3.2～6.5﹪，满足分析方法对回收率和重现性要求。

上述实施例并非是对于本发明的限制，本发明并非仅限于上述实施例， 只要符合本发明要求，均属于本发明的保护范围。