一种盐酸法舒地尔化合物、其制备方法及其药物组合物

摘要

本发明属于医药技术领域，具体地说，涉及一种盐酸法舒地尔化合物、其制备方法及其药物组合物。所述的盐酸法舒地尔化合物为盐酸法舒地尔二水合物，其结构式如式(I)所示：本发明所述的药物组合物为注射剂，优选水针剂。本发明提供的盐酸法舒地尔化合物与现有技术相比具有较低的引湿性，从而提高了产品稳定性、有效性、安全性等内在品质；且与现有技术的盐酸法舒地尔晶型相比，本发明的盐酸法舒地尔晶型具有较好的吸收特性和生物利用度。

说明书

技术领域

本发明属于医药技术领域，具体地说，涉及一种盐酸法舒地尔化合物、其制备方法及 其药物组合物。

背景技术

盐酸法舒地尔(fasudil hydrochloride，1)，化学名称为六氢－1－(5－磺酰基异喹啉) －1(H)－1，4－二氮杂卓盐酸盐，是日本旭化成株式会社和名古屋大学合作开发的一种 新型异喹啉磺胺类衍生物。作为一种RHO激酶抑制剂和新型细胞内Ca²⁺拮抗剂，该药能 通过增加肌球蛋白轻链磷酸酶的活性扩张血管，降低内皮细胞的张力，改善脑组织微循环， 保护缺血脑组织，同时可拮抗炎性因子，保护神经抗凋亡，促进神经再生。1995年6月由 日本旭化成公司上市，2004年在中国上市，主要用于蛛网膜下腔出血后脑血管痉挛等引起 的缺血性脑血管疾病症状的改善，其临床应用范围还将不断扩展，市场前景看好。

CN102060845A公开了一种法舒地尔的Ⅲ晶型及其制备方法和用途，所述的盐酸法舒地 尔Ⅴ晶型，使用Cu-Ka辐射，以2θ角度表示的X-射线粉末衍射在6.480、13.620、14.780、 16.700、20.500、20.800、21.540、24.580、25.540度2θ处有峰有特征峰，本发明提供的制 备方法，本发明的盐酸法舒地尔晶型具有生物利用度高，药效显著，稳定性好，收率高， 纯度高等特点，适于工业生产，本发明还进一步公开了盐酸法舒地尔在改善和预防由多种 原因引起的缺血性脑血管疾病的应用。

CN101985444A涉及一种盐酸法舒地尔的V晶型及其制备方法和用途，所述的盐酸法 舒地尔V晶型，使用Cu-Ka辐射，以2θ角度表示的X-射线粉末衍射在6.260、8.300、14.020、 20.960、23.860、25.580、27.020有特征峰，本发明提供的制备方法有纯度高，杂质小，更 适于工业生产，本发明进一步公开了盐酸法舒地尔在改善和预防由多种原因引起的缺血性 脑血管疾病的应用。

CN102060844A涉及一种法舒地尔的Ⅳ晶型及其制备方法和用途，所述的盐酸法舒地尔 Ⅳ晶型，使用Cu-Ka辐射，以2θ角度表示的X-射线粉末衍射在约6.320、14.240、14.460、 17.040、22.640、22.940、25.400、25.700、28.100度2θ有特征峰，本发明提供的制备方法， 且该晶型在贮存和使用的正常温度下有高度物理稳定性、纯度高等特点，更适于工业生产， 发明进一步公开了盐酸法舒地尔在改善和预防由多种原因引起的缺血性脑血管疾病的应 用。

CN102199123A涉及一种法舒地尔的新晶型及其药物应用，其中盐酸法舒地尔的晶型， 其特征在于，具有以下光谱学特性，采用日本理学Rigaku Dmax-2500型X粉末衍射(XRD) 仪对样品的晶相进行分析，Cu Kα靶，管电压40kV，管电流100mA，其X粉末衍射具有 如下特征峰：在约6.780、14.700、16.620、17.480、20.440、20.740、24.52度2θ处有峰。

但是，由于盐酸法舒地尔具有引湿性，吸湿后会引起结块、流动性下降、潮解、晶型 改变等理化性质的变化，从而影响产品稳定性、有效性、安全性等内在品质。然而现有技 术并未提出相应的解决方案，上述专利所涉及的晶型也未对此进行改善。

物质在结晶时由于受各种因素影响，使分子内或分子键合方式发生改变，致使分子或 原子在晶格空间排列不同，形成不同的晶体结构。药物多晶型现象是影响药品质量与临床 疗效的重要因素之一，因此在药物质量控制中，晶型是其中的一个重要质控指标。药物的 多晶型现象对产品的质量有着重要的影响。晶体结构不同的化合物，由于其分子排列有序 性的差异，分别处于不同的能量状态，通常无定型的药物具有较大的位能，粒子间的结合 强度较晶型小，总的单位表面自由能较大，粒子间表面易水化，从而造成与结晶性药物溶 解度的差异。不同晶型的晶胞内分子在空间构型、构象与排列不同，使其溶解性存在显著 差异，导致制剂在体内有不同的溶出速率，直接影响制剂在体内的吸收、分布、排泄和代 谢，最终因其生物利用度不同而导致临床药效的差异。如“奥美拉唑三种晶型在大鼠体内 的药代动力学比较”【奥美拉唑三种晶型在大鼠体内的药代动力学比较，高梅，陈芊茜，等. 中国药理学与毒理学，2011，(25)：107-108】通过一次性灌胃给予奥美拉唑晶C、晶D、 晶E200mg·kg^-1，并建立大鼠血浆样品中奥美拉唑的HPLC测定方法，对奥美拉唑三种晶 型(晶型C、D、E)在大鼠体内的药代动力学过程进行了比较，结果表明，晶型C具有较 好的吸收特性。

为克服上述缺陷，本发明人从盐酸法舒地尔原料药入手，进行了大量的试验，惊喜地 得到了一种不同于现有技术的盐酸法舒地尔化合物，该化合物与现有技术相比，具有较低 的引湿性。

发明内容

本发明的第一目的在于提供一种盐酸法舒地尔化合物，所述的盐酸法舒地尔化合物具有 较低的引湿性。

本发明的第二目的在于提供所述的盐酸法舒地尔化合物的制备方法。

本发明的第三目的在于提供一种含有上述盐酸法舒地尔化合物的药物组合物。

为实现本发明的第一目的，本发明采用如下技术方案：

一种盐酸法舒地尔化合物，其中，所述的盐酸法舒地尔化合物为盐酸法舒地尔二水合物， 其结构式如式(I)所示：

所述的盐酸法舒地尔化合物使用Cu-Kα射线测量得到的X射线粉末衍射图谱如图1所示。

图1中以2θ角表示在7.0°、10.2°、12.6°、20.9°、22.4°、23.3°、24.8°、27.2°、33.3°、36.7°、 37.2°、40.7°、42.8°、44.0°和45.0°处有特征峰，误差为±0.2°。

药物在结晶时，如果采用不同的溶剂和工艺，则药物分子在各晶型晶胞的排列数目和位 置及点阵形式不一样，形成不同的晶体结构，这种同一药物的晶体具有两种或两种以上的空 间结构和晶胞参数的现象，即药物的多晶型现象。药物的多晶型可呈现不同的物理和机械性 质，包括吸湿性、颗粒形状、密度、流动性和可压性等，进而可影响原料药及制剂的制备。

现有技术公开了盐酸法舒地尔的多种晶型，如III、IV、V晶型。需要说明的是，在X射 线粉末衍射图谱中，由结晶化合物得到的衍射谱图对于特定的晶型往往是特征性的，其中谱 带(尤其是在低角度)的相对强度可能会因为结晶条件、粒径和其它测定条件的差异而产生 的优势取向效果而变化。因此，衍射峰的相对强度对所针对的晶型并非是特征性的，判断是 否与已知的晶型相同时，更应该注意的是峰的相对位置而不是它们的相对强度。在X射线粉 末衍射图谱中通常用2θ角或晶面距d表示峰位置。经与现有技术的晶型进行比较后发现， 本发明所提供的盐酸法舒地尔二水合物的X-射线粉末衍射图谱与现有技术具有明显不同的峰 的相对位置，可见其是一种与现有技术不同的新晶型。

本发明进一步通过引湿性试验，惊喜地发现本发明所提供的盐酸法舒地尔与现有技术相 比具有较低的引湿性。

研究表明，由于药物的不同晶型状态可以严重影响药物的临床治疗效果、药物毒副作用 及药品质量等。本发明人对大鼠灌胃给予不同晶型的盐酸法舒地尔以评价不同晶型在大鼠体 内的药代动力学，试验结果表明：与现有技术的盐酸法舒地尔晶型相比，本发明的盐酸法舒 地尔晶型具有较好的吸收特性和生物利用度。

为实现本发明的第二目的，本发明采用如下技术方案：

一种所述的盐酸法舒地尔化合物的制备方法，其中，所述的制备方法包括如下步骤：

1)将二甲基甲酰胺与水以1：3～5的体积比配制成混合溶液A；

2)取盐酸法舒地尔原料药，加入步骤1)所配制的混合溶液A，搅拌使全部溶解后向所 得溶液中加入活性炭脱色、过滤，得到澄清溶液；

3)将甲基异丁酮和异丙醇以1：3～4的体积比配制成混合溶液B；

4)室温下，在超声场下向步骤2)所得的澄清溶液中加入混合溶液B，加毕关闭超声场， 降温至0～5℃，静置0.5～3小时，析出晶体，经干燥得到所述的盐酸法舒地尔化合物。

本发明人经过大量的反复的试验，以市售的盐酸法舒地尔原料药为原料，不断改变包括 溶剂、反溶剂等试验条件，最终得到了一种与现有技术不同的盐酸法舒地尔化合物，其XRD 谱图表明，本发明提供的盐酸法舒地尔化合物的固体内部分子排列结构与现有技术中的盐酸 法舒地尔不同。

本发明所述盐酸法舒地尔化合物的制备方法中，加入活性炭脱色为本领域常用技术手段， 可以参见任何的脱色处理，本领域技术人员无需付出任何的创造性劳动，即可根据其自身掌 握的现有技术进行适当的选择，并实现本发明的目的。

上述制备方法中，其中，步骤2)中所述混合溶液A的体积与盐酸法舒地尔原料药的质 量的比为5～8ml：1g。

步骤4)中所述的超声场的功率为0.4～0.8KW。

步骤4)中混合溶液B的加入量为混合溶液A的体积的5～10倍。

为实现本发明的第三目的，本发明采用如下技术方案：

一种药物组合物，其中，所述的药物组合物含有本发明所述的盐酸法舒地尔化合物。

本发明中，所述的药物组合物可以制备成现有技术任何适宜的各种剂型，本发明优选注 射剂；更优选的，本发明的药物组合物为水针剂。

本发明中，所述药物组合物的各种剂型可以参考现有技术类似剂型进行制备，而无需本 领域技术人员付出更多的创造性劳动，即可实现本发明的目的。

本发明中，所述的药学上可接受的载体可以根据相应的剂型由本领域技术人员任意的选 择，或者经过简单的实验来获得所适合的辅料，而这种辅料种类、用量的选择无需本领域技 术人员付出更多的创造性劳动。

所述的制备方法还包括进一步将所得的药物组合物按照药学上可接受的方法制成水针 剂。

与现有技术相比，本发明具有如下优点：

本发明所提供的盐酸法舒地尔化合物与现有技术相比具有较低的引湿性，从而提高了产 品稳定性、有效性、安全性等内在品质；且与现有技术的盐酸法舒地尔晶型相比，本发明的 盐酸法舒地尔晶型具有较好的吸收特性和生物利用度。

附图说明

图1为本发明实施例1制得的盐酸法舒地尔化合物使用Cu-Kα射线测量得到的X-射 线粉末衍射图谱；

图2为本发明实施例1制得的盐酸法舒地尔化合物的TG图谱；

图3为大鼠灌胃给予4mg·kg^-1不同晶型的盐酸法舒地尔后不同时刻血浆中法舒地尔的 平均血药浓度-时间曲线。

具体实施方式

以下用实施例对本发明的技术方案作进一步的说明，将有助于对本发明的技术方案的 优点，效果有更进一步的了解，实施例不限定本发明的保护范围，本发明的保护范围由权 利要求来决定。

【实施例1】盐酸法舒地尔化合物

1)将二甲基甲酰胺与水以1：4的体积比配制成混合溶液A；

2)取盐酸法舒地尔原料药，加入步骤1)所配制的混合溶液A，其中所述混合溶液A的 体积与盐酸法舒地尔原料药的质量的比为7ml：1g，搅拌使全部溶解后向所得溶液中加入 0.1％g/ml活性炭脱色、过滤，得到澄清溶液；

3)将甲基异丁酮和异丙醇以1：3.5的体积比配制成混合溶液B；

4)室温下，在在功率为0.6KW的超声场下向步骤2)所得的澄清溶液中加入混合溶液B， 其中混合溶液B的加入量为混合溶液A的体积的7倍，加毕关闭超声场，降温至3℃，静置2 小时，析出晶体，经干燥得到所述的盐酸法舒地尔化合物。

所得的盐酸法舒地尔化合物采用美国Perkin-Elmer公司PE 2400Ⅱ元素分析仪，元素分 析(％)计算值：C(46.22)、H(6.05)、N(11.55)、S(8.80)、O(17.61)、Cl(9.77)， 元素分析(％)测定值为：C(46.23)、H(6.04)、N(11.57)、S(8.77)、O(17.63)、 Cl(9.76)；

将所得的盐酸法舒地尔化合物进行卡式水分测定，结果为9.91％。

所得的盐酸法舒地尔化合物使用Cu-Kα射线测量，得到如图1所示的X射线粉末衍射图 谱，X射线粉末衍射图谱中以2θ角表示在7.0°、10.2°、12.6°、20.9°、22.4°、23.3°、24.8°、 27.2°、33.3°、36.7°、37.2°、40.7°、42.8°、44.0°和45.0°处有特征峰，误差为±0.2°。

所得的盐酸法舒地尔化合物采用美国Perkin-Elmer公司PE Pyris Diamond TG热分析 仪得到的热重分析图如图2所示，热重分析实验表明：该实施例制备的盐酸法舒地尔化合 物含9.891％的水份，这与含2个结晶水(理论值为9.904％)的结果在误差范围之内。

以下为实施例2-7，制备方法同实施例1，其具体的工艺参数见表1：

表1

对实施例2至实施例7所制得的盐酸法舒地尔化合物采用美国Perkin-Elmer公司PE 2400Ⅱ元素分析仪进行元素分析、卡式水分测定以及使用Cu-Kα射线测量和采用美国 Perkin-Elmer公司PE Pyris Diamond TG热分析仪，结果与实施例1相似，得到的X射线 粉末衍射图谱(XRD)及热重分析(TG)图均与实施例1相似。

【制剂实施例1】盐酸法舒地尔注射液

处方：

制备方法：

取总配置量约85％的注射用水，在氮气保护下加入实施例1制得的盐酸法舒地尔二水合 物30g(以盐酸法舒地尔计)、16g氯化钠和10mL苯甲醇搅拌溶解，用0.1mol/L氢氧化钠溶 液调节pH值至6.0，加入总体积0.08％(g/mL)的活性炭，搅拌吸附10min，过滤脱炭，加 注射用水至2000mL，搅拌均匀，经0.22μm滤膜精滤，充氮灌封，121℃湿热灭菌20min，即 得所述的盐酸法舒地尔注射液。

【制剂实施例2】盐酸法舒地尔水针剂

取实施例2制得的盐酸法舒地尔二水合物2g(以盐酸法舒地尔计)，加入800ml的注射 用水，搅拌使完全溶解，用0.1mol/l的氢氧化钠和盐酸溶液调节pH至6.0，再加入注射用 水至1000ml。加入0.5g活性炭，搅拌15min脱碳过滤，所得滤液用0.22μm微孔滤膜精滤 除菌。中间体检验合格后灌封于2ml普通安瓿瓶中，121℃灭菌15min，得到盐酸法舒地尔水 针剂。

【制剂实施例3】盐酸法舒地尔水针剂

取实施例3制得的盐酸法舒地尔二水合物5g(以盐酸法舒地尔计)，加入800ml的注 射用水，搅拌使完全溶解，用0.1mol/l的氢氧化钠和盐酸溶液调节pH至6.0，再加入注射 用水至1000ml。加入0.5g活性炭，搅拌15min脱碳过滤，所得滤液用0.22μm微孔滤膜 精滤除菌。中间体检验合格后灌封于2ml普通安瓿瓶中，121℃灭菌15min，得到盐酸法舒 地尔水针剂。

【制剂实施例4】盐酸法舒地尔水针剂

取实施例4制得的盐酸法舒地尔二水合物10g(以盐酸法舒地尔计)，加入800ml的注 射用水，搅拌使完全溶解，用0.1mol/l的氢氧化钠和盐酸溶液调节pH至6.0，再加入注 射用水至1000ml。加入0.5g活性炭，搅拌15min脱碳过滤，所得滤液用0.22μm微孔滤 膜精滤除菌。中间体检验合格后灌封于2ml普通安瓿瓶中，121℃灭菌15min，得到盐酸法 舒地尔水针剂。

【制剂实施例5】盐酸法舒地尔水针剂

取实施例5制得的盐酸法舒地尔二水合物20g(以盐酸法舒地尔计)、10.5g氯化钠，加 入注射用水，搅拌使溶解，用0.1mol/L盐酸溶液80ml调节药液的pH至3.60，加入注射 用水至1500ml；在所得溶液中加入0.3g针用活性炭，搅拌15分钟，所得溶液使用滤芯孔 径为1μm过滤除去活性炭，再使用滤材孔径为0.22μm精滤，灌封，121℃热压灭菌15 分钟，灯检，即得盐酸法舒地尔水针剂。

【制剂实施例6】盐酸法舒地尔水针剂

取实施例6制得的盐酸法舒地尔二水合物40g(以盐酸法舒地尔计)、12.6g氯化钠，加 入注射用水，搅拌使溶解，用0.1mol/L盐酸溶液30ml调节药液的pH至3.90，加入注射 用水至1800ml；在所得溶液中加入2.5g针用活性炭，搅拌15分钟，所得溶液使用滤芯孔 径为1μm过滤除去活性炭，再使用滤材孔径为0.22μm精滤，灌封，121℃热压灭菌15 分钟，灯检，即得盐酸法舒地尔水针剂。

【试验例1】引湿性比较试验

药品的引湿性是指在一定温度及湿度条件下该物质吸收水分多少的特性。

试验样品：分别按照本发明实施例1至实施例7的方法制得的盐酸法舒地尔化合物；

对照样品1：按照CN101985444A实施例1的方法制得的盐酸法舒地尔晶型V；

对照样品2：按照CN102225929A实施例1的方法制得的盐酸法舒地尔三个半水合物；

对照样品3：按照CN103864760A实施例1的方法制得的盐酸法舒地尔晶型。

分别取上述样品适量，照《中国药典》(2005年版)二部附录XIX J药物引湿性试验 指导原则进行试验。

具体测定方法如下：

1、取一定量供试品置一已精密称重(m₁)的具塞玻璃称量瓶(外径为50mm， 高为15mm)中，精密称定(m₂)。

2、把称量瓶口置于适宜的25℃±1℃恒温干燥器(下部放置氯化铵或硫酸铵饱和溶液) 或人工气候箱(设定温度为25℃±1℃)，相对湿度为(80％±2％)内。

3、放置24小时。

4、盖好称量瓶盖子，精密称重(m₃)。

增重百分率＝(m₃-m₂)/(m₂-m₁)×100％

5、引湿性特征描述与引湿增重的界定

极具引湿性：引湿增重不小于15％。

有引湿性：引湿增重小于15％且不小于2％。

略有引湿性：引湿增重小于2％且不小于0.2％。

潮解：吸收足量水分形成液体。

试验结果见表2：

表2、盐酸法舒地尔引湿性检查结果

样品 引湿性(％) 实施例1 3.32 实施例2 3.38 实施例3 3.34 实施例4 3.36 实施例5 3.40 实施例6 3.42 实施例7 3.39 对照样品1 13.13 对照样品2 13.19 对照样品3 13.26

上述试验结果表明，本发明的盐酸法舒地尔化合物与现有技术相比具有较低的引湿性。

对本发明其它实施例所制备的盐酸法舒地尔化合物也进行了上述引湿性比较试验，其 获得的结果相似。

【试验例2】盐酸法舒地尔不同晶型在大鼠体内的药代动力学比较

1、药物

试验药：本发明实施例1制得的盐酸法舒地尔二水合物；

对照药1：按照CN101985444A实施例1的方法制得的盐酸法舒地尔晶型V；

对照药2：按照CN102225929A实施例1的方法制得的盐酸法舒地尔三个半水合物。

2、方法

取不同晶型的盐酸法舒地尔药物适量，用适量生理盐水配制成浓度1.0g·L^-1的药液(以 碱基计)。

2.1、给药方案与样品采集

健康雄性Wistar大鼠18只，随机分为3组。给药前禁食12h，自由饮水。分别以4mg·kg^-1的不同晶型的盐酸法舒地尔灌胃，于给药前(0h)和给药后0.033、0.083、0.250、0.500、 0.750、1.000、2.000、3.000、4.000、6.000、8.000和12.000h经大鼠眼眶静脉采血约0.4mL， 置于涂有肝素的EP管中，离心10min(3500r·min^-1)，分离血浆，于-70℃冰箱中保存待测。

2.2血浆中法舒地尔的浓度测定

采用LC-MS/MS法测定大鼠血浆和组织中法舒地尔的浓度。采用迪马公司Diamonsil  C₁₈色谱柱(150mm×4.6mm，5μm)进行分离，流动相：甲醇-水-甲酸(体积比为80:20:0.1)， 流速：0.6mL·min^-1。样品经乙酸乙酯萃取后，采用大气压化学电离(APCI)源的正离子化 方式，碰撞诱导解离(collision-induced disso-ciation,CID)电压分别为35ev(法舒地 尔)和25ev(苯海拉明)，以选择反应监测(select reaction monitoring,SRM)方式进行 扫描定量，用于定量分析的离子反应分别为m/z292→m/z99(法舒地尔)和m/z256→m/z167 (苯海拉明)。扫描时间：0.3s。

其他参照“盐酸法舒地尔在大鼠体内的吸收与分布”【张春红，刘有平，等.盐酸法舒 地尔在大鼠体内的吸收与分布[J].沈阳药科大学学报，2011，28(11)：906-911】。

3、结果

大鼠灌胃给予4mg·kg^-1不同晶型的盐酸法舒地尔后不同时刻血浆中法舒地尔的平均血 药浓度-时间曲线见图3。

从图3可以看出，本发明的盐酸法舒地尔晶型的Cmax值优于对照药1和对照药2的 盐酸法舒地尔晶型，采用梯形法计算出AUC，结果表明本发明的盐酸法舒地尔晶型的AUC 值显著优于对照药1和对照药2的盐酸法舒地尔晶型。表明本发明的盐酸法舒地尔晶型具 有较好的吸收特性和生物利用度。