萨热十三味鹏鸟丸在制备治疗骨质疏松症药物中的应用

摘要

本发明涉及一种藏药萨热十三味鹏鸟丸在制备治疗骨质疏松症药物中的应用，克服了现有技术应用方面的技术偏见，萨热十三味鹏鸟丸对模型大鼠的骨密度、骨生物力学指标、尿中HOP指标和血清生化指标均有显著的改善作用。萨热十三味鹏鸟丸可用于骨质疏松的治疗，尤其可用于雌激素缺少引起的骨质疏松的治疗。

说明书

技术领域                                              

本发明涉及一种藏药萨热十三味鹏鸟丸在制备治疗骨质疏松症药物中的应用，属于医药领域。

背景技术

骨质疏松即骨质疏松症，是由多种因素引发的疾病，以骨骼疼痛、易于骨折为特征。它与年龄、激素、遗传、营养摄入以及生活方式等因素有着密切的关系，其发病机制主要是破骨细胞的活性增强，而成骨细胞活性遭到抑制，骨的吸收速度超过形成速度，造成骨组织中的有机物和无机物减少。据报道，中国50岁以上人群中约有7000万人患有骨质疏松，其中女性发病率超过30%，随着老龄人口的持续增加，骨质疏松将成为越来越严重的公共健康威胁。

萨热十三味鹏鸟丸系藏族验方，组成为人工麝香、木香、藏菖蒲、铁棒锤、诃子、珊瑚、珍珠、丁香、肉豆蔻、沉香、磁石、甘草膏、禹粮石13味药材，具有消炎止痛，通经活络，醒脑开窍作用。用于中风，“白脉病”引起的口眼歪斜，麻木瘫痪，脉管炎，腱鞘炎，四肢关节不利，麻风等。

尽管萨热十三味鹏鸟丸的功能主治很多，但文献、专利等方面均未发现其可用于治疗骨质疏松症的研究。

发明内容

本发明是通过如下技术方案实现的：

萨热十三味鹏鸟丸在制备治疗骨质疏松症药物中的应用。

萨热十三味鹏鸟丸的组分在制备治疗骨质疏松症药物中的应用。

萨热十三味鹏鸟丸的组分在制备治疗骨质疏松症药物中的应用,采用萨热十三味鹏鸟丸去除银珠包衣的组分或其组分的提取物

优选的，本发明所述的骨质疏松症，是指雌激素不足导致的骨质疏松。

优选的，本发明所述的应用，其用法用量为一次5～6g，一日3次。

萨热十三味鹏鸟丸是《中华人民共和国卫生部药品标准：藏药第一册[S].1995年版》中记载的药品名称，标准号为WS3-BC-0330-95，市场可购。

萨热十三味鹏鸟丸的组分:麝香7.5g, 木香500g, 藏菖蒲65g, 铁棒锤50g, 诃子100g, 珊瑚40g, 珍珠25g, 丁香20g, 肉豆蔻75.5g, 沉香50g, 磁石25g, 甘草膏40g, 禹粮石250g。

制法:以上十三味，除麝香、珊瑚、珍珠、甘草膏外,其余共研成细粉,过筛。加入珊瑚、珍珠细粉，混匀。用麝香、甘草膏加适量水泛丸，再用银珠包衣，阴干，即得。

在萨热十三味鹏鸟丸的应用治疗领域，人们熟知其消炎止痛，通经活络，醒脑开窍作用。用于中风，“白脉病”引起的口眼歪斜，麻木瘫痪，脉管炎，腱鞘炎，四肢关节不利，麻风等。

为了更好地理解本发明的实质，本发明通过动物实验来进一步说明萨热十三味鹏鸟丸及其组分在制备治疗骨质疏松症药物中的应用。

本发明通过药理研究发现，萨热十三味鹏鸟丸对骨质疏松症模型大鼠的股骨、胫骨的骨密度、骨生物力学指标、血清中钙、BGP指标和尿中HOP指标具有一定疗效，表明萨热十三味鹏鸟丸可用于骨质疏松（尤其雌激素缺少引起的骨质疏松）的治疗。

具体实施方式

实施例1

萨热十三味鹏鸟丸在制备治疗骨质疏松症中的用途，组分:麝香7.5g, 木香500g, 藏菖蒲65g, 铁棒锤50g, 诃子100g, 珊瑚40g, 珍珠25g, 丁香20g, 肉豆蔻75.5g, 沉香50g, 磁石25g, 甘草膏40g, 禹粮石250g。制法:以上十三味，除麝香、珊瑚、珍珠、甘草膏外,其余共研成细粉,过筛。加入珊瑚、珍珠细粉，混匀。用麝香、甘草膏加适量水泛丸，再用银珠包衣，阴干，即得。其用法用量为一次5～6g，一日3次。

实施例2

萨热十三味鹏鸟丸在制备治疗治疗雌激素不足引发骨质疏松症中的用途，组分:麝香7.5g, 木香500g, 藏菖蒲65g, 铁棒锤50g, 诃子100g, 珊瑚40g, 珍珠25g, 丁香20g, 肉豆蔻75.5g, 沉香50g, 磁石25g, 甘草膏40g, 禹粮石250g。制法:以上十三味，除麝香、珊瑚、珍珠、甘草膏外,其余共研成细粉,过筛。加入珊瑚、珍珠细粉，混匀。用麝香、甘草膏加适量水泛丸，再用银珠包衣，阴干，即得。其用法用量为一次5～6g，一日3次。

实施例3

萨热十三味鹏鸟丸的组分在制备骨质疏松症中的用途，组分:麝香7.5g, 木香500g, 藏菖蒲65g, 铁棒锤50g, 诃子100g, 珊瑚40g, 珍珠25g, 丁香20g, 肉豆蔻75.5g, 沉香50g, 磁石25g, 甘草膏40g, 禹粮石250g。制法:以上十三味，除麝香、珊瑚、珍珠、甘草膏外,其余共研成细粉,过筛。加入珊瑚、珍珠细粉，混匀。用麝香、甘草膏加适量水泛丸，阴干，即得。其用法用量为一次5～6g，一日3次。

实施例4

萨热十三味鹏鸟丸的组分在制备治疗雌激素不足引发骨质疏松症中的用途，组分:麝香7.5g, 木香500g, 藏菖蒲65g, 铁棒锤50g, 诃子100g, 珊瑚40g, 珍珠25g, 丁香20g, 肉豆蔻75.5g, 沉香50g, 磁石25g, 甘草膏40g, 禹粮石250g。制法:以上十三味，除麝香、珊瑚、珍珠、甘草膏外,其余共研成细粉,过筛。加入珊瑚、珍珠细粉，混匀。用麝香、甘草膏加适量水泛丸，阴干，即得。其用法用量为一次5～6g，一日3次。

   实验例5：

一、材料

1、动物：SD大鼠，8月龄，山东鲁抗大鼠饲养中心提供(合格证号SLXK2008002)动物级别:清洁级。

2、药物：

尼尔雌醇片，北京四环制药有限公司生产，国药准字H11020123号，1mg/片，10片/盒。

萨热十三味鹏鸟丸，由青海金诃藏药提供，批次20131109。

萨热十三味鹏鸟丸组分,按照实验例3的组分和制法来制备得到的水泛丸（即不含银珠包衣）。

3、主要设备：（1）血清碱性磷酸酶试剂盒、血清钙离子试剂盒、血清无机磷试剂盒、尿羟脯氨酸、雌二醇、骨钙素试剂盒（均产自南京建成）;（2）上海恒平科学仪器有限公司产FA2004电子分析天平;（3）日本产Olympus光学显微镜;（4）美国Norland公司生产的XR-36型动态过滤双能X线骨密度诊断仪；（5）INSTRON-1195型万能材料试验机。

二、实验方法

    1、去卵巢模型鼠:1%戊巴比妥钠30mg/kg腹腔内麻醉，无菌操作，取腹部正中切口，进入腹腔，完整摘除双侧卵巢，彻底止血后，分两层依次缝合肌肉和皮肤，切除的卵巢均经病理学证实;假手术组切口同前，进入腹腔后切除左、右肠系膜各一段，其重量基本与两侧卵巢一致，取出双侧卵巢于体外放置1min后还纳，不去卵巢，止血缝合。伤口撒青霉素粉末，术后伤口无感染，按期愈合。

    2、动物分组及给药方法：术后90天将造模的SD大鼠随机分为去卵巢组、西药组、高剂量1组、低剂量1组，高剂量2组、低剂量2组，假手术组，共7组,每组10只。去卵巢组给予生理盐水灌胃，20ml/kg体重，每日一次，连续12周，假手术组处理同模型组。西药组灌胃尼尔雌醇12周，每周2次，每次1.2mg/kg。灌胃萨热十三味鹏鸟丸（水煎煮并浓缩成15mg生药/ml液）高剂量1组（300mg/kg）、低剂量1组（100mg/kg），灌胃萨热十三味鹏鸟丸组分（水煎煮并浓缩成15mg生药/ml液）高剂量2组（300mg/kg）、低剂量2组（100mg/kg），各灌胃20ml/kg体重，每日1次，连续12周。在同样环境中自由饮水、摄食12周，控制食量。

    3、测定方法和指标

    （1）骨密度测定：灌胃12周末以1%戊巴比妥钠30mg/kg腹腔内麻醉，麻醉后四肢展开平置于骨密度诊断仪平台上，扫描各组大鼠的全身，通过计算机系统中小动物软件分别测定股骨、胫骨的骨密度，精密度1.5%，准确度90%。

    （2）骨生物力学测定：取出右股骨，用生理盐水纱布包裹后置入-20℃保存，测定时取出放入生理盐水中，室温（20℃）下浸泡复温3h，采用三点弯曲试验方法，应用NSTRON-1195型万能材料试验机（英国）进行测试，置右股骨于跨距为10mm的支架上，以1mm/min的速度下压股骨中段，记录载荷―变形曲线，并测量股骨中段的内外径计算股骨截面惯性矩。骨结构力学参数:由载荷-变形曲线直接获得，最大载荷（kg）、弹性载荷（kg）、最大挠度（mm）、弹性挠度（mm）。

    （3）尿羟脯氨酸测定：实验结束前4d禁食并分别收集24h尿备用,用样本碱水解法测定尿羟脯氨酸（HOP）。

    （4）血清生化指标检测：空腹14h，股动脉采血7.0～8.0mL，分别按试剂盒操作说明测定血清钙离子、无机磷、雌二醇、骨钙素（BGP）、碱性磷酸酶（BALP）。

    所有数据经spss17.0软件统计处理，组间比较t检验。

三、实验结果

    1、对骨密度改变的比较：与假手术组比较,去卵巢组大鼠股骨、胫骨骨密度显著下降（P<0.05),说明骨质疏松实验动物造模成功。给药12w后,与去卵巢组比较,对于股骨骨密度，西药组、高剂量组和低剂量组均为极显著性差异(P<0.01)、对于胫骨的骨密度，西药组和低剂量组为显著性差异(P<0.05)，高剂量组为极显著性差异(P<0.01)。见表1。

    2、对股骨骨生物力学指标的影响：与假手术组比较, 去卵巢组大鼠右股骨骨生物力学指标最大负荷、弹性负荷和最大挠度均显著下降(P<0.05)，弹性挠度下降明显。给药12w后,与去卵巢组比较，对于最大负荷，西药组、低剂量组为显著性差异(P<0.05),而高剂量组为极显著性差异 (P<0.01)；对于最大挠度和弹性负荷，西药组与高剂量组均为显著性差异(P<0.05)，而低剂量组有改善趋势但无显著性差异(P＞0.05)。见表2。

    3、对去除卵巢大鼠尿羟脯氨酸和血清生化指标的影响：与假手术组比较,去卵巢组大鼠骨血清生化指标和尿羟脯氨酸含量显著下降(P<0.05),提示骨质疏松大鼠出现了骨形成减少的病理变化。给药12w后, 与去卵巢组比较,对于HOP，西药组与高剂量组均为显著性差异(P<0.05)，而低剂量组有改善趋势但无显著性差异(P＞0.05)；对于血清生化指标，西药组对于血清磷和BGP表现为极显著性差异(P<0.01)，西药组对于血钙、BALP和HOP与高剂量组一致，为显著性差异(P<0.05)，而低剂量组对于HOP和血清生化指标有改善趋势但无显著性差异(P＞0.05)。见表3。

表1、对去除卵巢大鼠骨密度的影响

组别N     股骨BMD胫骨BMD假手术组100.218±0.0080.191±0.013去卵巢组100.175±0.006#0.171±0.008#西药组100.211±0.011**0.189±0.013*低剂量1组100.201±0.008**0.182±0.015*高剂量1组100.208±0.015**0.195±0.010**低剂量2组100.205±0.007**0.183±0.016*高剂量2组100.213±0.013**0.196±0.011**

注：与假手术组比较，# p＜0.05；与去卵巢组比较*p＜0.05，** p＜0.01。

表2、对去除卵巢大鼠股骨骨生物力学的影响

注：与假手术组比较，# p＜0.05；与去卵巢组比较*p＜0.05，** p＜0.01。

表3、对去除卵巢大鼠尿羟脯氨酸和血清生化指标的影响( x±s)

注：与假手术组比较，# p＜0.05；与去卵巢组比较*p＜0.05，** p＜0.01。

表3、对去除卵巢大鼠HOP和血清生化指标的影响

组别N钙mmol/l磷mmol/lBGP(ng/ml)BALP(U/dl)HOP(mml·g/Cr)假手术组102.28±0.101.64±0.091.94±0.6342.39±10.630.329±0.058去卵巢组102.01±0.111.21±0.09#2.79±0.50#25.79±9.80#0.147±0.034#西药组102.34±0.08*1.71±0.10**1.86±0.65**36.02±9.36*0.253±0.049*低剂量1组102.14±0.091.41±0.122.35±0.4633.45±10.380.196±0.066高剂量1组102.32±0.11*1.62±0.14*2.19±0.41*38.49±7.84*0.308±0.058*低剂量2组102.25±0.071.43±0.102.41±0.4033.48±10.390.238±0.021高剂量2组102.38±0.12*1.62±0.11*2.21±0.36*38.49±7.31*0.312±0.026*

注：与假手术组比较，# p＜0.05；与去卵巢组比较*p＜0.05，** p＜0.01。

四、结论

萨热十三味鹏鸟丸低剂量组和高剂量组对于去卵巢骨质疏松模型大鼠的股骨、胫骨的骨密度均有显著的改善作用，作用效果与雌二醇相当；对于骨生物力学指标中的最大负荷有更为显著的改善，且高剂量组的统计学效果为极显著性差异（P＜0.01）；对于最大挠度和弹性负荷，低剂量组有改善趋势而无显著性差异，高剂量组有显著性差异（P＜0.05）；对于血清中钙、BGP指标和尿中HOP指标，高剂量组与西药组效果相当，均为显著性差异（P＜0.05），对于磷、BGP指标，高剂量组为显著性差异（P＜0.05），西药组为极显著性差异（P＜0.01）。上述结果表明，萨热十三味鹏鸟丸可用于骨质疏松（尤其雌激素缺少引起的骨质疏松）的治疗。

萨热十三味鹏鸟丸也可与其他治疗骨质疏松症的药物联合使用，例如骨肽片、阿伦膦酸盐、降钙素、钙剂和维生素D中的一种或多种。