从保和丸中提取橙皮苷的方法

摘要

本发明公开了一种从保和丸中提取橙皮苷的方法，包括以下步骤：步骤1：将黄芩粉碎后与硅藻土混合；步骤2：采用ASE萃取法萃取黄芩苷，收集萃取液，其中，ASE萃取法所采用的萃取溶剂为体积分数为70％的乙醇溶液；步骤3：将萃取液定容后进行离心分离得到含有黄芩苷的上清液。本发明的目的是提供一种萃取迅速、精度高的从保和丸中提取橙皮苷的方法。

说明书

技术领域

本发明涉及化学检测技术领域，特别是一种从保和丸中提取橙皮苷的方法。

背景技术

保和丸由焦山楂、六神曲(炒)、法半夏(制)、茯苓、陈皮、连翘、炒莱菔子、炒麦芽八味药材加工制成大蜜丸^[1]。具有消食、导滞、和胃的功能，主治食积停滞，脘腹胀满，嗳腐吞酸，不欲饮食^[2]。橙皮苷是保和丸的主要有效成分之一，2010版《中国药典》以橙皮苷作为质量评价的指标。原标准的含量测定采用索氏提取法回流时间长，需要消耗大量的溶剂；

发明内容

本发明的目的是提供一种萃取迅速、精度高、溶剂用量少的从保和丸中提取橙皮苷的方法。

本发明提供的技术方案为：一种从保和丸中提取橙皮苷的方法，包括以下步骤：

步骤1：将保和丸粉碎后与硅藻土混合；其中，粉碎后的保和丸中粉与硅藻土的重量比为1:1；

步骤2：采用ASE萃取法萃取橙皮苷，收集萃取液，其中，ASE萃取法所采用的萃取溶剂为甲醇；

步骤3：将萃取液定容后过滤即得含有橙皮苷的萃取液。

从上述的保和丸中提取橙皮苷的方法中，所述的步骤2中，萃取温度为90-120℃。

从上述的保和丸中提取橙皮苷的方法中，所述的步骤2中，萃取时间为5-10min。

从上述的保和丸中提取橙皮苷的方法中，所述的步骤2中，ASE萃取法的冲洗体积大于或等于100％萃取池的体积。

从上述的保和丸中提取橙皮苷的方法中，所述的步骤2中，萃取循环次数大于或等于2次。

从上述的保和丸中提取橙皮苷的方法中，所述的步骤2中，采用ASE350型加速溶剂萃取仪进行ASE萃取法操作，设定ASE350型加速溶剂萃取仪的系统压力为1700psi，氮气吹扫时间为60s。

从上述的保和丸中提取橙皮苷的方法中，所述的步骤3中，萃取液定容至25ml，摇匀后过滤即得含有橙皮苷的萃取液。

本发明在采用上述技术方案后，其具有的有益效果为：

本发明采用加速萃取技术能够有效的提高保和丸中橙皮苷的萃取效率，并保证较高的准确率，降低萃取溶剂用量，并且该提取方法不会对后面的检测产生任何不良影响。

附图说明

图1为本发明的实施例1的测试谱图；

图2为本发明的标准样的测试谱图；

图3为本发明对比例1的测试谱图。

具体实施方式

下面结合具体实施方式，对本发明的技术方案作进一步的详细说明，但不构成对本发明的任何限制。

实施例1：

本实施例所用到的仪器与耗材为：粉碎机、电子分析天平(XA205DU)：感量0.001g、加速溶剂萃取仪型号：ASE-350(10ml萃取池，50ml收集瓶)、容量瓶：25ml。

本实施例所用的保和丸为佛山冯了性医药有限公司生产，批号：140001。

萃取池中加硅藻土1.0g，精密称取保和丸(140001)中粉约0.5g，加硅藻0.5g混合均匀 后置5ml萃取池中；快速溶剂萃取条件的选择：温度：120℃，冲洗体积：100％，静态萃取时间：5分钟，循环次数：2次。溶剂：甲醇，萃取结束后，将萃取液转移至25ml容量瓶中，用甲醇稀释并定容至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。

标准样的准备 

精密称取橙皮苷对照品19.45mg，置于250ml量瓶中，用甲醇溶解(必要时超声处理)并稀释至刻度，摇匀(即橙皮苷浓度为74.14μg/ml)，精密量取5ml，置10ml量瓶中，用流动相稀释至刻度，摇匀，即得(每1ml含橙皮苷37.07μg)。

对比例1

本对比例为药典记录的方法，具体为：取保和丸(140001)，剪碎，混匀，取约2.5g,精密称定，加硅藻土适量，研匀，置于索氏提取器中，加石油醚(60℃-90℃)80ml，加热回流2-3小时，弃去石油醚，药渣挥干，加甲醇80ml，加热回流至提取液无色，放冷，滤过，滤液置100ml量瓶中，用少量甲醇分次洗涤容器，洗液滤入同一量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，加流动相至刻度，摇匀，即得。

检测

采用U-3000液相色谱仪进行检测，检测参数为：

色谱柱：kinete x2.6μXB-C18100A 100×4.60mm柱，流动相：甲醇—7％醋酸(37:63)，流速：0.7ml/min，柱温：40℃，检测波长：283nm，进样量：5μl。

实施例1和标准样的检测结果如下图1和图2。图3为对比例1得到的谱图，本方法分离所得到的样品能够得到清晰的完整的图谱，与对比例1的分离方法得到的样品测试谱图具有高度重合性。

实施例2

本实施例与实施例1的步骤相同，不同的地方在于，在85-120℃的范围内考察了萃取效 率。具体结果见下表表1。

表1温度影响提取率结果表

实施例3

本实施例与实施例1的步骤相同，不同的地方在于，在1-4次的循环次数的范围内考察了萃取效率。具体结果见下表表2。

表2循环次数的影响表

类别 1次 2次 3次 4次 含量/(mg/丸) 3.20 18.31 20.51 20.51

实施例4

本实施例与实施例1的步骤相同，不同的地方在于，在3-10min的静态萃取时间的范围内考察了萃取效率。具体结果见下表表3。

表3静态萃取时间的影响表

时间 3min 5min 7min 10min 含量/(mg/丸) 5.45 18.28 20.51 20.51

实施例5

本实施例与实施例1的步骤相同，不同的地方在于，在0-150％的相当于萃取池体积的冲洗体积的范围内考察了萃取效率。具体结果见下表表3。

表4冲洗体积的影响表

冲洗体积 0 40％ 80％ 100％ 120％ 150％ 含量/(mg/丸) 18.01 18.18 18.29 18.31 18.31 18.31

通过实施例2-5可以看出，从操作时间和成本角度考虑，本发明的ASE萃取法的最优参数如实施例1。

其他实验条件对HPLC检测的影响 

1、线性范围的考察

分别吸取上述标准样溶液(浓度：74.14μg/ml),分别稀释成3.707μg/ml、18.535μg/ml、37.070μg/ml、55.605μg/ml、74.140μg/ml，注入HPLC仪测定，以对照品浓度为横坐标，以峰面积为纵坐标，绘制标准曲线，进行线性回归。橙皮苷浓度在3.707～74.14μg/ml范围内与峰面积线性关系良好，回归方程为：Y＝14.421X-7.4373，R²＝0.9998。

2、溶剂对实验的影响

取缺保和丸的阴性对照样品，按实施例1的方法制备阴性对照品溶液，并按上述检测方法的色谱条件进行测定结果表明阴性对照中在与橙皮苷相同的位置上无吸收峰，表明溶剂对本品含量测定无阴性干扰。

3、重现性测试 

取同一批号样品，按实施例1所述的方法，制备6份供试品溶液，按上述检测方法的色谱条件进行测定结果，计算得橙皮苷的RSD为1.0％。如表5所示，结果表明，本试验方法重现性良好。

表5重现性试验结果

本方法分离精度高，重复性好，用时短，有利于简化分析人员的操作。

以上所述的仅为本发明的较佳实施例，凡在本发明的精神和原则范围内所作的任何修改、等同替换和改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。