一种耐盐碱石油烃降解菌的分离筛选方法

摘要

本发明提供一种从油污土壤中分离并筛选耐盐碱石油烃降解纯菌株的方法。首先从油田采集盐碱化石油烃污染土壤，按10％的量添加至原油为唯一碳源的无机盐培养基中，在恒温摇床上进行富集培养。然后取10％富集液接种于新鲜原油无机盐培养基中，相同条件连续驯化培养4～5次，驯化过程中培养基的pH、盐度和原油含量逐渐升高。取驯化完成之后的培养液梯度稀释后涂布于LB-琼脂平板，待菌落长出后，挑取不同形态的单菌落，并划线纯化，分离单菌。后将分离的单菌涂布于原油无机盐-琼脂平板，检测是否有菌落长出，若有菌落长出，说明该菌株为石油烃降解菌。测定单菌株石油烃降解率，并对其进行16S rDNA分子鉴定，确定菌株的种属关系。