可表达乙酰酯酶的大肠埃希氏菌及利用其制备乙酰酯酶的方法

摘要

本发明公开了一种可表达乙酰酯酶的大肠埃希氏菌，菌株中包括一种可表达乙酰酯酶的重组载体pKK223-3-ybaC，及利用该菌株液态发酵制备乙酰酯酶的方法为：将大肠埃希氏菌JM110（pKK223-3-ybaC）接种于氨苄LB液体培养基中于37℃、150rpm全温振荡培养箱中活化培养3d，吸取200μL菌悬液接种于氨苄LB液体培养基中于37℃、180rpm全温振荡培养箱中进行发酵，37℃过夜培养后加入终浓度为0.6mmol/L的IPTG，共计发酵5d，将发酵产物1000g，4℃低温离心8min，上清液即为乙酰酯酶粗酶液。本方法所需培养基简单，发酵条件为好氧发酵，易于控制，所制备的乙酰酯酶粗酶液酶活力高，最高可达42.66U/mL，此外，本发明所制备的乙酰酯酶有较高的温度耐受性，最适反应温度为51℃。