一种测定桂利嗪固体制剂中桂利嗪含量的方法

摘要

本发明涉及医药制药技术领域，特别涉及一种测定桂利嗪固体制剂中桂利嗪含量的方法。本发明采用高效液相色谱法，直接以甲醇为流动相测定桂利嗪固体制剂或其内容物中桂利嗪的含量，并对该方法进行了方法学验证，相比较现有检测技术对本品含量的测定方法，该方法具有高效，便捷，准确等优点，同时更减少了人为操作的误差，提高了检测的准确性。

说明书

技术领域

本发明涉及医药制药技术领域，特别涉及一种测定桂利嗪固体制剂中桂利 嗪含量的方法。

背景技术

目前对于桂利嗪主药含量测定2010年版药典采用的是高氯酸滴定法，片 剂和胶囊剂含量测定2010年版药典采用的是紫外分光光度法。这两种检测方 法原料和制剂并不统一可能造成同一批原料做到制剂可能会存在一定的含量 误差，且此方法人为因素较大。

发明内容

本发明提供一种测定桂利嗪固体制剂中桂利嗪含量的方法，用以解决现有 技术中存在检测误差大、准确度不高等问题。

本发明所述的一种测定桂利嗪固体制剂中桂利嗪含量的方法包括检测桂 利嗪主药、桂利嗪片剂和桂利嗪胶囊内容物颗粒中桂利嗪的含量，所述桂利嗪 制剂为本公司采用高速湿法制粒自主所生产。

为解决上述技术问题，本发明采用如下的技术方案，一种测定桂利嗪固体 制剂中桂利嗪含量的方法，以桂利嗪对照品为对照，以甲醇为流动相，采用高 效液相色谱法测定桂利嗪固体制剂中桂利嗪的含量。

具体的，以桂利嗪对照品为对照，以甲醇为流动相，采用高效液相色谱法 在253nm波长处测定桂利嗪固体制剂中桂利嗪的含量。

更为具体的，所述含量的检测方法为：

(1)色谱条件及其系统适用性：色谱柱：C18柱250×4.6mm；流动相： 甲醇；流速：0.8～1.2ml/min；检测波长：253nm；进样量：10μl；柱温40～50℃； 系统适用性：理论板数按桂利嗪峰计算不低于1000；

(2)对照品溶液的配制：取桂利嗪对照品适量，精密称定，加甲醇配制成 每1ml含桂利嗪1.3ug的溶液，即得；

(3)供试品溶液的配制：精密称取桂利嗪制剂或其内容物，相当于桂利嗪 13mg(按照片重或丸重和制剂规格10mg进行折算)，称定，置100ml量瓶中， 加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀；精密量取1ml，置100ml量瓶中，加甲醇至 刻度，摇匀，即得；

(4)测定法：分别精密量取对照品溶液和供试品溶液各10μl，注入高效液 相色谱仪，测定桂利嗪含量；

优选的，所述流速为1.0ml/min。

优选的，所述柱温为45℃。

优选的，所述对照品溶液的配制为：取桂利嗪对照品13mg，精密称定， 置100ml量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀；精密量取1ml，置100ml 量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即得每1ml含桂利嗪1.3ug的溶液。

本发明有益效果如下：该方法使用高效液相色谱法，直接以甲醇为流动相； 高效，快捷，准确；减少了人为操作的误差；同时可为改进桂利嗪固体制剂的 配方及其对药品中桂利嗪的含量测定提供重要参考。

附图说明

图1为桂利嗪标准品的HPLC检测图谱；

图2为桂利嗪线性关系图和线性回归方程。

具体实施方式

下面结合说明书附图对本发明及其实施例作进一步详细描述。

为确保本发明含量测定方法的科学、合理、可行，发明人进行了一系列的 试验研究和考察。

一、试药(见表1)

表1

注：所用甲醇为色谱纯(Fisher公司)

二、方法与结果

1、色谱条件：色谱柱：C18柱250×4.6mm；流动相：甲醇；流速：1.0ml/min； 检测波长：253nm；进样量：10μl；柱温45℃。

2、桂利嗪固体制剂中主药含量测定的方法验证

2.1检测限、定量限

2.1.1评价标准

检测限评价标准：信噪比为3:1，相对标准偏差不大于10.0％。

定量限评价标准：信噪比约10:1，相对标准偏差不大于10.0％。

2.1.2配制检测限供试液和定量限供试液

储备液：取桂利嗪对照品约13mg，精密称定，置100ml量瓶中，加甲醇 溶解并稀释至刻度，摇匀，作为储备液。

检测限供试液：取储备液逐步稀释至约为基线高度的3倍。

定量限供试液：取储备液逐步稀释至约为基线高度的10倍。

2.1.3测定法

a、避光操作，精密量取上述检测限供试液和限量性供试液各10ug，以信噪 比3:1时注入高效液相色谱仪，确定该浓度为最低检测浓度，将最低检测浓度 连续进样5次，按“1色谱条件”进行测定，记录色谱图中桂利嗪峰的峰面积， 结果表明：峰面积的RSD值为8.5％(见表2)，符合检测限评价标准。

表2 检测限结果

b、避光操作，精密量取上述定量限供试液和限量性供试液各10ug，以信噪 比10:1时注入高效液相色谱仪，确定该浓度为最低检测浓度，将最低检测浓度 连续进样5次，按“1色谱条件”进行测定，记录色谱图中桂利嗪峰的峰面积， 结果表明：峰面积的RSD值为0.392054％(见表3)，符合限量性评价标准。

表3 限量性结果

2.2线性

2.2.1供试液的制备

供试液储备液：精密称取桂利嗪对照品约20mg，置100ml量瓶中，加甲 醇使桂利嗪溶解，加甲醇稀释至刻度，摇匀；精密量取10ml，置250ml量瓶 中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，浓度为8ug/ml，作为供试液储备液。

供试液A：精密量取供试液储备液5.0ml，置200ml量瓶中，加甲醇稀释 至刻度，摇匀；精密量取5.0ml，置100ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀， 浓度为0.01ug/ml。

供试液B：精密量取供试液储备液1.0ml，置25ml量瓶中，加甲醇稀释至 刻度，摇匀，浓度为0.32ug/ml。

供试液C：精密量取供试液储备液2.0ml，置25ml量瓶中，加甲醇稀释至 刻度，摇匀，浓度为0.64ug/ml。

供试液D：精密量取供试液储备液3.0m，置25ml量瓶中，加甲醇稀释至 刻度，摇匀摇匀，浓度为0.96ug/ml。

供试液E：精密量取供试液储备液4.0ml，置25ml量瓶中，加甲醇溶解并 稀释至刻度，摇匀，浓度为1.28ug/ml。

供试液F：精密量取供试液储备液5.0ml，置25ml量瓶中，加甲醇稀释至 刻度，摇匀，浓度为1.60ug/ml。

供试液G：精密量取供试液储备液6.0ml，置25ml量瓶中，加甲醇稀释至 刻度，摇匀，浓度为1.92ug/ml。

分别取上述供试液A、B、C、D、E、F、G各10ug注入液相色谱仪，按 “1色谱条件”进行测定，记录色谱图，计算相关系数和线性方程(见表4)， 以桂利嗪供试液的量(mg/mL)为横坐标(X)，峰面积为纵坐标(Y)，绘制标准曲 线(见图2)，得到桂利嗪的回归方程为y＝32.425x-0.02486，结果表明：桂利嗪 的含量与峰面积呈良好的线性关系，可满足测定要求。

表4 相关系数和线性方程

2.3准确度、精密度、专属性实验

评价标准：回收率≥70.0％；RSD9≤10.0％；RSD6≤2.0％。

供试液储备液：精密称取桂利嗪对照品约20mg，置100ml量瓶，加甲醇， 振摇，使桂利嗪溶解，加甲醇稀释至刻度，摇匀，浓度为200ug/ml。

供试液1：精密量取储备液3.30ml，置10ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度， 摇匀，浓度为0.66ug/ml。

供试液2：精密量取储备液6.50ml，置10ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度， 摇匀，浓度为1.30ug/ml。

供试液3：精密量取储备液9.75ml，置10ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度， 摇匀，浓度为1.95ug/ml。

对照溶液：精密量取1.0ml供试液2，置100ml量瓶中，加甲醇稀释至刻 度，摇匀，浓度为0.03ug/ml。

空白溶液：甲醇溶液，直接进样，在主峰附近无干扰。

取上述供试液1、供试液2、供试液3、对照溶液、空白溶液各10ug注入 液相色谱仪，按“1、色谱条件”进行测定记录色谱图，记录色谱图中桂利嗪峰 的峰面积，结果表明：峰面积的平均回收率为89.2，RSD9为4.8％，表明该方 法的准确度高、专属性高，仪器精密度良好(见表5)。

表5 准确度、精密度、专属性实验结果

从上述各汇总表和各检测数据中可以看出，该方法准确度、精密度、专属 性均符合规定，平均回收率为89.2％，RSD9为4.8％；线性相关系数r＝0.997； 均符合标准。该方法可以运用于测定桂利嗪固体制剂(包括桂利嗪主药、桂利 嗪片剂、桂利嗪胶囊)中桂利嗪含量的实际检验，可为改进桂利嗪固体制剂的 配方及其对药品中桂利嗪的含量测定提供重要参考。

3、样品含量检测

分别精准称量上海信谊万象药业不同批次生产的桂利嗪固体制剂(包括桂 利嗪片剂和桂利嗪胶囊内容物)，配制供试品溶液，各取10ug按“1、色谱条 件”进行测定记录色谱图，记录峰面积，根据上述“2.2线性”线性回归方程计 算桂利嗪含量(见表6)。

表6 样品含量检测

实施例1

桂利嗪片剂(上海信谊万象药业，10mg)中桂利嗪含量的测定

(1)色谱条件：色谱柱：C18柱250×4.6mm；流动相：甲醇；流速： 1.0ml/min；检测波长：253nm；进样量：10μl；柱温45℃。

(2)对照溶液：取桂利嗪对照品约13mg，精密称定，置100ml量瓶中， 加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀；精密量取1ml，置100ml量瓶中，加甲醇至 刻度，摇匀，作为对照溶液(1.3ug/ml)；

(3)样品溶液的配制：精密称取桂利嗪片剂，约相当于桂利嗪13mg，称 定，置100ml量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀；精密量取1ml，置100ml 量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，作为样品溶液；

(4)测定方法：精密量取上述对照溶液和样品溶液各10μl注入液相色谱仪， 记录色谱图，测定，即得。

实施例2

桂利嗪胶囊剂制内容物(上海信谊万象药业，10mg)中桂利嗪含量的测定

(1)色谱条件：色谱柱：C18柱250×4.6mm；流动相：甲醇；流速： 0.8ml/min；检测波长：253nm；进样量：10μl；柱温40℃。

(2)对照溶液：取桂利嗪对照品13mg，精密称定，置100ml量瓶中，加 甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀；精密量取1ml，置100ml量瓶中，加甲醇至刻 度，摇匀，作为对照溶液(1.3ug/ml)；

(3)样品溶液的配制：精密称取桂利嗪胶囊制剂内容物，相当于桂利嗪 13mg，称定，置100ml量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀；精密量取 1ml，置100ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，作为样品溶液；

(4)测定方法：精密量取上述对照溶液和样品溶液各10μl注入液相色谱仪， 记录色谱图，测定，即得。

实施例3

制备桂利嗪片剂和桂利嗪胶囊剂制的主药原料桂利嗪(市售)中桂利嗪含量的 测定

(1)色谱条件：色谱柱：C18柱250×4.6mm；流动相：甲醇；流速： 1.2ml/min；检测波长：253nm；进样量：10μl；柱温50℃。

(2)对照溶液：取桂利嗪对照品13mg，精密称定，置100ml量瓶中，加 甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀；精密量取1ml，置100ml量瓶中，加甲醇至刻 度，摇匀，作为对照溶液(1.3ug/ml)；

(3)样品溶液的配制：精密称取桂利嗪原料13mg，称定，置100ml量瓶 中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀；精密量取1ml，置100ml量瓶中，加甲 醇至刻度，摇匀，作为样品溶液；

(4)测定方法：精密量取上述对照溶液和样品溶液各10μl注入液相色谱仪， 记录色谱图，测定，即得。

显然，本领域的技术人员可以对本发明进行各种改动和变型而不脱离本发 明的精神和范围。这样，倘若本发明的这些修改和变型属于本发明权利要求及 其等同技术的范围之内，则本发明也意图包含这些改动和变型在内。