抗流感病毒组合物及其饮食品、饲料及医药品

摘要

本发明提供：可容易获得、可日常经口摄取且安全性优异的抗流感病毒组合物及其饮食品、饲料、医药品。所述抗流感病毒组合物是由作为有效成分的乳果寡糖(β-D-半乳糖基-(1，4)-α-D-葡萄糖基-(1，2)-β-D-果糖苷)和载体构成的，具有流感病毒感染预防及/或症状减轻作用。由于通过预先摄取该组合物而发挥由本发明的抗流感病毒组合物带来的病毒感染的预防效果，因此，本发明的抗流感病毒组合物、包含该抗流感病毒组合物的饮食品、饲料、医药品具有不限流感的类型的优点。

说明书

技术领域

本发明涉及抗流感病毒组合物，更详细而言，涉及具有流感病毒感 染预防以及流感病毒感染后的症状减轻作用的新型抗流感病毒组合物、 包含该组合物的饮食品、饲料及医药品。本发明提供涉及抗流感病毒组 合物的新技术、新产品，所述抗流感病毒组合物使用可容易获得、可日 常经口摄取且安全性优异的乳果寡糖，可以预防流感病毒的感染或者减 轻感染后的症状。

背景技术

流感是由流感病毒(A型、B型、C型)感染而产生的急性炎症，多从 上呼吸道进一步波及到支气管等下呼吸道的炎症，另外，在呼吸道的症 状的同时，高热、倦怠感、头痛、肌肉痛、关节痛等全身症状非常明显。

与其它类型相比，A型流感由于引起世界的大流行而众所周知。近 年来，一般认为，类型不同的流感混杂而流行的情况不少，也报告有A 型、B型流感与肺炎、气管炎合并，或在五岁以下的少儿中并发脑炎、 脑病的实例。另一方面，在日本，伴随高龄者的增加，A型、B型流感 流行的影响大、心肺疾病患者也同样重症化的危险高。

在日本，作为抗流感病毒药，批准有盐酸金刚烷胺及奥司他韦等， 但担心出现副作用或耐性病毒，有效且安全性高的预防药或治疗药尚未 被开发。其原因在于流感病毒的多样的抗原性变异。人可以通过产生抗 原特异性抗体来进行生物体防御，但特异性抗体由于流感病毒的变异而 丧失其效力，成为流行的原因。

对流感病毒感染的预防而言，疫苗为主流，但疫苗是由流感的流行 状况或流行前的健康人具有的免疫状况预测流感病毒的抗原性而制造 的。但是，由于流感病毒如上所述容易引起抗原性变异，因此，疫苗的 抗原多与流行的病毒不一致，有时无法满足利用疫苗的预防效果。另外， 现在未规定必须对高龄者及儿童进行预防接种。

近年来，作为以食品成分作为有效成分的各种各样的抗病毒感染预 防剂，例如提出有源自蓼科植物的抗流感病毒原料及其用途，源自黑醋 栗果实的病毒预防、治疗剂，用于预防流感感染的医药及饮食品等。但 是，均未进行过量摄取或长期摄取时的安全性评价，一般难以获得的成 分也多(专利文献1，2，3)。

另一方面，β-D-半乳糖基-(1，4)-α-D-葡萄糖基-(1，2)-β-D-果 糖苷即乳果寡糖例如如现有文献中所记载的那样，是使源自微生物的β -呋喃果糖苷酶作用于含有蔗糖与乳糖的溶液，通过该β-呋喃果糖苷酶 的糖转移反应而工业性制造的寡糖(专利文献5)。

近年来，报告有乳果寡糖具有难消化性、双歧杆菌繁殖促进作用、 难腐蚀性、保湿性、矿物质吸收促进作用等机能。另外，乳果寡糖也作 为日本国消费者厅许可的特定保健用食品的功能成分被利用，是安全性 高且廉价的食品素材。

例如，在其它的现有文献中，报告有以乳果寡糖(Lactosucrose)作 为有效成分的甲壳类及鱼类的病毒感染预防治疗剂(专利文献4)。但是， 该文献的病毒感染预防治疗剂以甲壳类及鱼类的特定的感染病为对象， 在该文献中并未记载或暗示关于流感病毒的感染预防作用及感染时的 症状减轻作用，即使看其它的现有文献，也未发现乳果寡糖对抗流感病 毒的作用的报告例。

鉴于这些现有技术，在本技术领域中，期望开发可通过日常经口摄 取来预防流感感染以及减轻感染时的症状并且安全且获得容易的新的 物质，强烈要求开发以这样的物质作为有效成分的用于预防流感病毒感 染的组合物、饮食品、饲料及医药等。

现有技术文献

专利文献

专利文献1日本特开2010-270098号公报

专利文献2日本特开2009-269861号公报

专利文献3日本特开2007-169200号公报

专利文献4日本特开平10-45605号公报

专利文献5日本特开平3-27285号公报

发明内容

发明要解决的课题

在这样的状况下，本发明人等鉴于上述现有技术以开发有效成分为 安全且容易获得的物质、可日常经口摄取且可预防流感病毒感染以及减 轻感染时的症状的新的流感病毒组合物为目标进行了潜心研究，结果发 现乳果寡糖具有减轻流感病毒感染时的症状的作用，可以通过以乳果寡 糖作为有效成分的抗流感病毒组合物实现期待的目标。

即，本发明人等进行了潜心研究，结果得到乳果寡糖具有流感病毒 感染时的症状减轻作用的见解，以至完成了本发明。本发明的目的在于 提供：可容易获得、可日常经口摄取且安全性优异的抗流感病毒组合物、 包含该抗流感病毒组合物的饮食品、饲料及医药品。

用于解决课题的手段

用于解决上述课题的本发明由以下的技术手段构成。

(1)抗流感病毒组合物，其特征在于，其为由作为有效成分的乳果 寡糖(β-D-半乳糖基-(1，4)-α-D-葡萄糖基-(1，2)-β-D-果糖苷)和载 体构成的组合物，具有流感病毒感染预防及/或症状减轻作用。

(2)饮食品，其特征在于，由上述(1)所述的抗流感病毒组合物和作 为饮食品所容许的其它成分或材料构成。

(3)如上述(2)所述的饮食品，其中，上述饮食品为特定保健用食品、 保健功能食品、营养功能食品或健康食品。

(4)饲料，其特征在于，由上述(1)所述的抗流感病毒组合物和作为 饲料所容许的其它成分或材料构成。

(5)医药品，其特征在于，由上述(1)所述的抗流感病毒组合物和药 学上所容许的其它成分或材料构成。

接着，对本发明进行更详细的说明。

本发明的抗流感病毒组合物的特征在于，由作为有效成分的乳果寡 糖和载体构成。作为以乳果寡糖作为有效成分的抗流感病毒组合物的使 用形态，在不破坏本发明的作用效果的范围内，通常可以从糖浆、含蜜 结晶粉末、含水结晶、非晶质固体中适当选择，但并不限定于这些，可 根据使用目的而形成任意的形态。另外，作为乳果寡糖，除合成品以外， 可以利用市售品，例如可以利用由盐水港精糖株式会社出售的含乳果寡 糖食品(商品名“Origonookage”、商品名“Origonookage double  support”、商品名“LS-55P”等)。

作为本发明的抗流感病毒组合物中的乳果寡糖的含量，只要是能够 使包括人的动物摄取并发挥作用的含量即可，通常作为有效成分的乳果 寡糖和载体的比例为在每单位固体成分中为1～100％(w/w)，优选为10～ 100％(w/w)，更优选为20～100％(w/w)。

本发明的抗流感病毒组合物是可用作由该抗流感病毒组合物和作 为饮食品所容许的其它成分或材料构成的饮食品，另外，可用作由该抗 流感病毒组合物和作为饲料所容许的其它成分或材料构成的饲料，进 而，可用作由该抗流感病毒组合物和药学上所容许的其它成分或材料构 成的医药品。

作为本发明抗流感病毒组合物或由该抗流感病毒组合物和药学上 所容许的其它成分构成的医药品的投药或摄取方法，可以为任意方法， 但通常优选口服途径。作为投药或摄取的量，考虑投药或摄取方法、适 用的动物的种类等而适当确定即可，每天通常在0.001～10g/kg体重的 范围内投药或摄取作为有效成分的乳果寡糖即可。

对于由该抗流感病毒组合物和食品学上所容许的其它成分构成的 饮食品或由该抗流感病毒组合物和饲料学上所容许的其它成分构成的 饲料，能够以与通常的饮食品或饲料同样的摄取形态进行摄取。

在人的情况下，确认有乳果寡糖的最大无作用量为0.6～0.8g/kg 体重，因此，超过该范围的摄取有可能引起腹泻，因此需要注意。另外， 本发明的抗流感病毒组合物也可应用于具有与人同样的免疫系统的脊 椎动物全体，例如可配合在鸭类、鸡、猪等的饲料或饵料中。

发明效果

根据本发明，其起到如下特别的作用效果。

(1)可提供以容易获得、可日常经口摄取且安全性优异的乳果寡糖 作为有效成分的新的抗流感病毒组合物。

(2)通过利用本发明的抗流感病毒组合物，可预防流感病毒感染或 者减轻感染后的症状。

(3)可提供包含含有乳果寡糖作为有效成分的抗流感病毒组合物的 饮食品、饲料或者医药品。

(4)由于可通过预先摄取该组合物而发挥利用本发明抗流感病毒组 合物的病毒感染预防效果，因此，本发明的抗流感病毒组合物具有不限 流感的类型的优点。

(5)利用包含本发明的抗流感病毒组合物的饮食品、医药品，可降 低罹患季节性流感的可能性。

附图说明

图1表示乳果寡糖的致死量流感感染时的体重下降抑制作用；

图2表示乳果寡糖的致死量流感感染时的生存率上升作用；

图3表示乳果寡糖的轻微的流感感染时的体重下降抑制作用。

具体实施方式

以下，示出实施例对本发明进行具体说明，但本发明并不受这些实 施例任何限定。

实施例1

在本实施例中，进行致死量感染中的抗流感病毒作用试验(体内试 验)。

(1)受试试验的投药和流感病毒感染

使用乳果寡糖作为受试试样，调查对于致死量的流感病毒感染小鼠 的流感病毒感染预防作用。使用的流感病毒株为流感病毒A(PR8株： H1N1，以下为PR8)。该流感病毒价使用MDCK细胞(源自狗肾的细胞)并 用溶菌斑法进行测定，为3.8×10⁷PFU/mL。

具体而言，将BALB/c小鼠(5周龄、雌性)分为下记2组(各21只)， 给各组的小鼠在麻醉下经鼻接种(经鼻感染)致死量的 PR8(300PFU/10μL/只)，在从感染的4周前开始到感染后16天后共计 40天期间，第一组作为对照，使其自由摄取AIN-93G饲料，使第2组自 由摄取5％乳果寡糖饲料。

<小鼠受试组>

第一组：对照组[AIN-93G饲料]

第二组：乳果寡糖组

(2)流感病毒感染预防的评价

对各受试组的小鼠而言，从感染前(感染日)至16天后，记录体重 和死亡数。体重的推移用将感染日的体重设为100％且以相对于感染日的 体重的比例表示。另外，摘出从感染开始生存到16天后的小鼠的肺并 测量重量后，进行病理组织分析，根据炎症面积将评分用5级评价，即 5：炎症面积8成以上、4：炎症面积6成以上～低于8成、3：炎症面 积3成以上～低于6成、2：炎症面积1成以上～低于3成、1：炎症面 积低于1成、0：无炎症面积的5级进行评价。

对于对照组和乳果寡糖组间的体重推移的差异，使用SPSS  statics(SPSS Japan、统计分析软件)，用重复的分散分析进行评价。 另外，对体重推移而言，进行统计处理直至体重降低率最低的10天后 为止。对于对照组和乳果寡糖组间的生存率的差异，使用SPSS statics 并通过时序检验进行评价。对于肺病理组织炎症评分，使用SPSS  statics并通过非配对t检验进行评价。

(体重推移)

从感染开始经时测定体重，求出相对于该测定值的感染日的体重的 比例，结果如图1所示，乳果寡糖组的体重降低与对照组相比，显著缓 慢。

(生存率)

生存率如图2所示，对照组在感染16天后约为14％，与此相对，在 乳果寡糖组中，显示约57％的生存率，生存率显著上升。

(肺的重量及炎症评分)

将从感染开始生存到16天后的小鼠的肺的重量及炎症评分示于表 1。对肺重量而言，与照组相比，乳果寡糖组为低值。根据肺病理组织 分析的结果，生存小鼠的肺均为间质性肺炎，对炎症评分而言，对照组 为4.3，与此相对，乳果寡糖组为3.4，确认到炎症评分降低。

表1

肺的重量及炎症评分

平均值±标准偏差

实施例2

在本实施例中，进行轻微感染中的抗流感病毒作用试验(体内试 验)。

(1)受试试样的投药和流感病毒感染

作为受试试样，使用乳果寡糖，调查对于轻微的流感病毒感染小鼠 的流感病毒感染预防作用。

具体而言，将BALB/c小鼠(5周龄、雌性)分为下述2组(各9只)， 对各组的小鼠在麻醉状态下各经鼻接种(经鼻感染)致死量1/4的 PR8(75PFU/10μL/只)，在从感染的2周前开始到感染后7天后共计21 天期间，第一组作为对照，使其自由摄取AIN-93G饲料，使第2组自由 摄取5％乳果寡糖饲料。

<小鼠受试组>

第一组：对照组[AIN-93G饲料]

第二组：乳果寡糖组

(2)流感病毒感染预防作用的评价

以全部的小鼠为对象、从感染前(感染日)直至七天后，记录小鼠的 体重和死亡数。体重推移以将感染日的体重设为100％且相对于感染日体 重的比例表示。另外，在感染7天后采取生存的全部的小鼠的肺，测定 重量，以及用溶菌斑法对肺的流感病毒价进行定量。

(肺的病毒价)

将MDCK细胞以0.5×10⁶细胞/孔接种于12孔板，培养一夜后，去 除培养基，用PBS(-)将细胞清洗3次。然后，在其中添加包含病毒的肺 匀浆，在37℃下培养1小时，由此使病毒吸附在细胞上，去除剩余的病 毒液，进而，添加包含0.8％琼脂糖、2μg/mL乙酰胰蛋白酶(acetyl  trypsin)的E-MEM培养基。

接着，用琼脂糖固化后，在35℃的5％的碳酸恒温箱内培养2～3天。 将形成的溶菌斑用结晶紫溶液进行染色，观察褪成白色的溶菌斑，求出 溶菌斑数。溶菌斑数换算成每1只小白鼠(个体)的溶菌斑数。

对于对照组和乳果寡糖组的体重推移的差异，使用SPSS statics 并通过以组和感染后天数为因子的两因素方差分析进行评价，在确认到 显著的差的情况下，通过多重比较(邓尼特检验)对组间差进行评价。肺 重量使用SPSS statics并通过非配对t检验进行评价，流感病毒价使 用SPSS statics并用曼-惠特尼U检验进行评价。

(死亡数)

从感染到五天后，对照组有一只死亡，与此相对，在乳果寡糖组中， 没有死亡的小鼠。

(体重推移)

从感染时开始经时测定体重，求出该测定值的相对于感染日的体重 的比例，结果如图3所示，乳果寡糖组的体重下降与对照组相比，从感 染4天后开始到7天后，显著地显示高值，即表示可显著抑制体重下降。

(肺重量以及病毒价)

将感染七天后的肺重量以及病毒价示于表2。对肺重量而言，与对 照组相比，乳果寡糖组为低值。对肺的病毒价而言，与对照组相比，乳 果寡糖组显著地显示低值。

表2

肺的重量及病毒价

平均值±标准偏差

*P＜0.05时有显著差异

实施例3

在本实施例中，进行成人的流感病毒感染预防作用试验(人体试 验)。

在推荐日常持续摄取含乳果寡糖食品的企业A中，调查流感病毒罹 患者数、有无预防接种。调查以过去5年间为对象、与厚生劳动省公表 资料、“2010年度及2008年度流感预防接种需求预测”3基础分析表 1：以接种率、罹患率所记载的成人的流感病毒罹患率(诊断)进行了比 较。

1)受试食品

将日常可获得的含乳果寡糖食品(商品名“Origonookage”)设为受 试食品。本食品每单位固体成分包含42％～47％乳果寡糖。

2)试验方法

在推荐日常持续摄取含乳果寡糖食品的企业A中，以该企业出席的 员工和家族为对象，说明调查问卷的内容，对得到同意的101名志愿者 (男性69名、女性32名)进行了以下的问卷调查。

需要说明的是，调查对象设为健康成人(20岁以上且低于65岁)。 另外，问卷设为包含调查年的5季，季节性流感发病的定义是将在医疗 机构接受诊断，由医生诊断为季节性流感的情况设为发病。另外，流感 季节是指自每年第36周(8月末～9月初)开始的1年。

(调查问卷的调查内容)

A“Origonookage”摄取情况(每天、每周4～6天、每周2～3天、 每周1天、无摄取)

B有无预防接种

C有无季节性流感发病

(结果的分析方法)

在回收的调查问卷中，删除A、B、C中任意者均未记入的情况，有 效回答数为100名。在100名中、5季度中的季节性流感发病总数为9 例。对5季度中的“Origonookage”摄取状况、季节性流感发病数、预 防接种率进行总结，结果如表3所示。

表3

Origonookage摄取状况、季节性流感发病数、预防接种率

由所得的数据，对除未摄取Origonookage的数据以外，即一周之 中一天以上摄取Origonookage标本求出各季度中的流感出现率，使用 厚生劳动省公开资料、“2010年度及2008年度流感预防接种需求预测” 3基础分析表1：以接种率、罹患率所记载的成人的流感病毒罹患率(诊 断)进行出现率的比较检定。将其结果示于表4。

表4

每周摄取一次以上寡糖的人的流感罹患状况

将2009～2010、2007～2008、2006～2007季度的出现率与厚生劳 动省数据进行比较，结果，在2009～2010、2006～2007季度中，在危 险率5％时确认到显著的差异。

另外，对厚生劳动省公开资料中的预防接种率而言，2009～2010 季度为35.55％、2007～2008季度为26.19％、2006～2007季度为20.95％， 与企业A的预防接种率无较大差异，因此，一般认为预防接种的影响小。

由这些结果显示，在一周摄取一次以上寡糖的成人中，感染流感的 可能性低。

产业上的可利用性

综上所述，本发明涉及抗流感病毒组合物，根据本发明，使用可容 易获得、可日常经口摄取且安全性优异的乳果寡糖可预防流感病毒感染 或者减轻感染后的症状。另外，根据本发明，可制备并提供包含含有以 乳果寡糖作为有效成分的抗流感病毒组合物的饮食品、饲料或者医药 品。另外，由于可以通过预先摄取该组合物而发挥利用本发明的抗流感 病毒组合物的病毒感染预防效果，因此，具有不限流感的类型的优点。 本发明作为提供具有流感病毒感染时的症状减轻作用的抗流感病毒组 合物、包含该组合物的饮食品、饲料、医药品的发明是有用的。