呋喃并吡啶基-取代的1,4-二氢吡啶衍生物及其使用方法

摘要

本发明涉及具有蛋白质酪氨酸激酶抑制活性的新型4-(呋喃并[3,2-c]吡啶-2-基)-1,4-二氢吡啶衍生物，涉及其制备方法，并涉及其用于治疗c-Met介导的疾病或c-Met介导的病况尤其是癌症和其它增殖性病症的用途。

说明书

本发明涉及具有蛋白质酪氨酸激酶抑制活性的新型4-(呋喃并[3,2-c]吡啶-2-基)-1,4-二氢吡啶衍生物，涉及其制备方法，并涉及其用于治疗c-Met介导的疾病或c-Met介导的病况尤其是癌症和其它增殖性病症的用途。

癌症是最常见的分布广的疾病之一。2002年全世界超过4.4百万人被诊断出患乳腺癌、结肠癌、卵巢癌、肺癌或前列腺癌 ，超过2.5百万人死于这些毁灭性疾病(Globocan 2002 Report, http://www-dep.iarc.fr/globocan/down-loads.htm)。仅仅在美国，预计2005年就有超过1.25百万新病例，超过500 000死于癌症。预计这些新病例中的大部分为结肠癌(约100 000)、肺癌(约170 000)、乳腺癌(约210 000)和前列腺癌(约230 000)。预计癌症的发病率和流行率两者在未来10年内增加大约15%，这反映出平均增长率为1.4% (美国癌症协会，Cancer Facts and Figures 2005；http://www. cancer.org/docroot/STT/content/STT_1x_cancer_Facts_Figures_2007.asp)。

有很多种可产生癌症的方式，这是其治疗困难的原因之一。一种方式是细胞通过癌蛋白的转化，所述癌蛋白起因于正常细胞蛋白的遗传突变，其导致非生理学激活这些蛋白质。从中产生多种癌蛋白的蛋白质的一个家族为酪氨酸激酶(例如src激酶)，尤其是受体酪氨酸激酶(RTK)。在过去二十多年，很多研究手段已证明了受体酪氨酸激酶(RTK)介导的信号传导在哺乳动物细胞生长的调节中的重要性。最近，用酪氨酸激酶的选择性小分子抑制剂作为抗致瘤剂在临床上获得了结果。

c-Met受体亦为受体酪氨酸激酶。1980年代早期鉴定了其致瘤潜力，1980年代早期时自化学诱导的人骨肉瘤细胞系分离出突变的Met，其含有在其N-末端与二聚化结构域融合的Met基因的激酶结构域[C.S. Cooper等，Nature 311: 29-33 (1984)]。

细胞Met蛋白为合成为单链190 kd前体的异二聚跨膜蛋白[G.A. Rodrigues等，Mol. Cell Biol. 11: 2962-70 (1991)]。前体在307位氨基酸残基后于细胞内裂解，形成由二硫键连接的50 kd α-链和145 kd β-链。α-链完全在细胞内，而β-链跨越质膜。β-链由N-末端sema结构域组成，所述结构域与α-链一起介导配体结合。β-链胞外域的其余部分由富含半胱氨酸的结构域和四个免疫球蛋白结构域组成，接着是跨膜区和胞内结构域。胞内结构域含有近膜结构域、激酶结构域和C-末端结构域，其介导下游信号传导。在配体结合后，诱导受体二聚化，并通过在近膜区(Y1003)、激活激酶环(Y1234和Y1235)和羧基末端结构域(Y1349和Y1356)的酪氨酸自磷酸化步骤的级联来激活激酶结构域。磷酸化的Y1349和Y1356包含用于结合下游c-Met信号传导所必需的衔接蛋白的多底物停泊位点[C. Ponzetto等，Cell 77: 261-71 (1994)]。c-Met信号传导的最关键的底物之一是支架衔接蛋白Gab1，其经由独特的磷酸酪氨酸结合位点(叫做mbs：met结合位点)与Y1349或Y1356结合，这产生特有的长时间持续的胞内信号。另一重要底物是衔接蛋白Grb2。视细胞环境而定，这些衔接蛋白介导各种胞内信号途径的激活，所述途径如经由ERK/MAPK、PI3K/Akt、Ras、JNK、STAT、NFκB和β-联蛋白进行信号传导的途径。

c-Met仅被肝细胞生长因子(HGF)及其剪接变体激活，HGF亦被称为分散因子，HGF是c-Met的唯一已知的生物学活性配体[L. Naldini等，Oncogene 6: 501-4 (1991)]。HGF具有独特的结构，所述结构显示出与纤溶酶原家族的蛋白酶的相似性。其由氨基末端结构域接着四个kringle结构域和不具酶活性的丝氨酸蛋白酶同源结构域组成。与c-Met相似，HGF被合成为惰性单链前体(前HGF)，其被丝氨酸蛋白酶(例如纤溶酶原激活物和凝结因子)在细胞内裂解，转化为二硫键连接的活性α-和β-链异二聚体。HGF以高亲和力结合硫酸乙酰肝素蛋白聚糖，这使得其主要与细胞外基质缔合并限制其扩散。晶体结构分析表明，HGF形成二聚体，其与c-Me结合时诱导受体的二聚化。

间充质细胞表达HGF，其与，尤其在上皮细胞中广泛表达的c-Me的t结合在包括上皮细胞、内皮细胞、神经元细胞和造血细胞在内的多种组织中导致多效作用。该作用通常包括以下现象中的一种或全部：i)刺激有丝分裂发生；通过其对肝细胞的促有丝分裂活性来鉴定HGF；ii)刺激入侵和迁移；在独立的实验方法中，基于其对细胞运动性("分散")的诱导将HGF鉴定为分散因子；和iii)刺激形态发生(小管发生)。HGF在胶原蛋白基质中诱导自犬肾细胞形成分支小管。此外，来自遗传修饰的小鼠和来自细胞培养实验的证据表明，c-Met起使生存受体(survival receptor)的作用，保护细胞免于细胞凋亡[N. Tomita等，Circulation 107: 1411-1417 (2003)；S. Ding等，Blood 101: 4816-4822 (2003)；Q. Zeng等，J. Biol. Chem. 277: 25203-25208 (2002)；N. Horiguchi等，Oncogene 21: 1791-1799 (2002)；A. Bardelli等，Embo J. 15: 6205-6212 (1996)；P. Longati等，Cell Death Differ. 3: 23-28 (1996)；E.M. Rosen, Symp. Soc. Exp. Biol. 47: 227-234 (1993)]。通过HGF协调实行这些生物学过程产生命名为“侵袭性生长”的特定遗传程序。

在正常情况下，c-Met和HGF对小鼠的胚胎发育必不可少，尤其是对胎盘和肝脏发育及对来自肢体节的成肌细胞的方向性迁移必不可少。c-Met或HGF基因的遗传破坏产生显示其独特相互作用的完全一样的表型。成年生物体内c-Met/HGF的生理学作用理解得较不充分，但实验证据提示它们参与伤口愈合、组织再生、造血作用和组织稳态。

癌蛋白TPR-MET的鉴定首先暗示c-Met可在肿瘤发生中起作用。另外的大量证据来自多种不同实验方法。在人和鼠细胞系中过表达c-Met或HGF诱导致瘤性和当在裸小鼠中表达时诱导转移表型。小鼠中转基因过表达c-Met或HGF诱导肿瘤发生。

最令人感兴趣的是，在散发性及遗传性乳头状肾癌(HPRC)以及其它癌症类型中业已鉴定c-Met错义突变或激活受体的突变，所述其它癌症类型如肺癌、胃癌、肝癌、头颈癌、卵巢癌和脑癌。值得注意的是，HPRC家族的特定c-Met突变隔离疾病，形成c-Met激活和人癌症之间的因果联系[L. Schmidt等，Nat. Genet. 16: 68-73 (1997)；B. Zbar等，Adv. Cancer Res. 75: 163-201 (1998)]。具最强转化活性的激活突变位于激活环(D1228N/H和Y1230H/D/C)和邻近的P+1环(M1250T)处。发现另外的较弱的突变靠近催化环并在激酶结构域的A叶内。此外，在肺肿瘤中观察到c-Met的近膜结构域中的一些突变，它们不直接激活激酶，而是通过使其抵抗遍在蛋白化和随后的降解来稳定该蛋白质[M. Kong-Beltran等，Cancer Res. 66: 283-9 (2006)；T.E. Taher等，J. Immunol. 169: 3793-800 (2002)；P. Peschard等，Mol. Cell 8: 995-1004 (2001)]。令人感兴趣的是， c-Met的体细胞突变与各种癌症侵袭性增加及广泛转移有关。尽管种系和体细胞突变频率低(低于5%)，但已观察到其它主要机理，其在缺乏突变时通过旁分泌或自分泌机理导致c-Met信号传导的反常。在源自间充质细胞的肿瘤如骨肉瘤或横纹肌肉瘤(其生理上产生HGF)及起源于外胚层的成胶质细胞瘤和乳癌中观察到旁分泌激活。

然而，最常见的病例是其中c-Met被过表达的癌，如在结肠癌、胰腺癌、胃癌、乳腺癌、前列腺癌、卵巢癌和肝癌中所观察的。过表达可例如通过基因扩增产生，如在胃和肺肿瘤细胞系中所观察的。最近在肺肿瘤细胞系中检测到c-Met的过表达，所述细胞系获得对EGF受体抑制的抗性[J.A. Engelmann等，Science 316: 1039-1043 (2007)]。一些过表达c-Met的上皮肿瘤亦共表达HGF，导致产生自分泌c-Met/HGF刺激环，藉此绕过对源自基质细胞的HGF的需要。

一般而言，发现不管具体的机理如何，在人癌症中c-Met的异常激活通常与差预后有关[J.G. Christensen等，Cancer Lett. 225: 1-26 (2005)]。

总而言之，进行了大量的验证c-Met作为重要的癌症靶标的体外和体内研究，可在http://www.vai.org/met [C. Birchmeier等，Nat. Rev. Mol. Cell Biol. 4: 915-25 (2003)]中查看综合列表。已经遵循几种策略在人肿瘤中减弱异常的Met信号传导，包括HGF拮抗剂和小分子抑制剂等。很多小分子抑制剂目前处于临床开发，例如ARQ-197 (Arqule)、foretinib (XL-880、Exelixis/GSK)和PH-2341066 (Pfizer)；最近已对它们进行评述[J.J. Cui, Expert Opin. Ther. Patents 17: 1035-45 (2007)]。

因此，待根据本发明解决的技术问题可视为提供对c-Met激酶具有有效抑制活性的备选化合物，由此提供用于治疗c-Met介导的疾病、尤其是癌症和其它增殖性病症的新治疗选择。

从EP 0 217 530-A1和EP 0 630 895-A1已知在4位荷有双环杂芳基的1,4-二氢吡啶衍生物，其可用作具钙激动剂或拮抗剂活性的心血管药物。在WO 2006/066011-A2中阐述了3-氰基-4-(杂)芳基-1,4-二氢吡啶，其作为甾族受体和钙通道活性二者的调节剂对治疗心血管疾病有价值。最近在WO 2008/071451-A1中揭示了某些拥有c-Met激酶抑制活性的3-氰基-4-杂芳基-1,4-二氢吡啶。

在一个方面，本发明涉及通式(I)的4-(呋喃并[3,2-c]吡啶-2-基)-1,4-二氢吡啶衍生物

     (I)，

其中

R¹为氢、(C₁-C₆)-烷基、(C₁-C₆)-烷基羰基、苯甲基或苯甲酰基，其中所述苯甲基和苯甲酰基的苯基部分分别可被独立选自以下的一个或两个残基取代：氟、氯、溴、氰基、甲基、二氟甲基、三氟甲基、乙基、甲氧基、二氟甲氧基和三氟甲氧基；

R²为氰基；

R³为任选被多达三个氟原子取代的(C₁-C₄)-烷基；

或

R²和R³连接，并与它们所连接的碳原子一起形成下式稠环：

其中

n为1或2的整数，

A为-CH₂-、-O-或-NR⁶-，其中R⁶为氢或(C₁-C₄)-烷基，

E为-O-、-NH-或-NCH₃-，

和

R⁷为氢或甲基；

R⁴为氢、(C₁-C₄)-烷基或环丙基；

R⁵为任选被多达三个氟原子取代的(C₁-C₆)-烷基，或为各自可被独立选自以下的一个或两个残基取代的苯基或吡啶基：氟、氯、溴、氰基、甲基、二氟甲基、三氟甲基、乙基、甲氧基、二氟甲氧基和三氟甲氧基；

或

R⁴和R⁵连接并与它们所连接的氮原子及碳原子一起形成下式稠环

，

其中

G为-CH₂-或-O-。

本发明化合物亦可以其盐、水合物和/或溶剂化物的形式存在。

用于本发明目的的盐优选为本发明化合物的药学上可接受的盐(例如参见S. M. Berge等，" Pharmaceutical Salts ", J. Pharm. Sci.1977, 66, 1-19)。

药学上可接受的盐包括无机酸、羧酸和磺酸的酸加成盐，例如盐酸、氢溴酸、硫酸、磷酸、甲磺酸、乙磺酸、苯磺酸、甲苯磺酸、萘二磺酸、乙酸、丙酸、乳酸、酒石酸、苹果酸、柠檬酸、富马酸、马来酸和苯甲酸的盐。

药学上可接受的盐亦包括常规碱的盐，例如并优选碱金属盐(例如钠和钾盐)、碱土金属盐(例如钙和镁盐)和源自氨或有机胺的铵盐，例如阐述性并优选地乙胺、二乙胺、三乙胺、N,N-二异丙基乙胺、单乙醇胺、二乙醇胺、三乙醇胺、二甲基氨基-乙醇、胆碱、乙二胺、二环己胺、二苯甲基胺、N-甲基吗啉、N-甲基哌啶、二氢松香胺、精氨酸和赖氨酸。

本发明化合物或其盐的水合物为所述化合物或盐与水的化学计量的组合物，例如半水合物、单水合物或二水合物。

本发明化合物或其盐的溶剂化物为所述化合物或盐与溶剂的化学计量的组合物。

通过不对称中心的特性或通过阻遏旋转，本发明化合物可以异构体(对映异构体、非对映异构体)形式存在。可存在其中不对称中心呈(R)-、(S)-或(R,S)-构型的任何异构体。

亦应了解，当本发明化合物中存在两个或更多个不对称中心时，例示结构的数种非对映异构体和对映异构体通常是可能的，纯非对映异构体和纯对映异构体代表优选实施方案。

本发明化合物的所有异构体，不管其是分离的、纯的、部分纯的还是呈非对映异构体或外消旋混合物，都涵盖在本发明范围内。可通过本领域已知的标准技术完成所述异构体的纯化和所述异构体混合物的分离。例如，可通过色谱方法或结晶将非对映异构体混合物分离为单独的异构体，可通过手性相色谱方法或通过拆分将外消旋物分离为各自的对映异构体。

另外，按照本发明包括上述化合物的所有可能的互变异构形式。

除非另外指出，否则以下定义适用于在整个本说明书和权利要求中所用的取代基和残基：

(C₁-C₆)-烷基、(C₁-C₅)-烷基和(C₁-C₄)-烷基代表直链或分支饱和烃基，其分别具有1-6、1-5和1-4个碳原子。优选具有1-4个碳原子的直链或分支烷基。非限制性实例包括甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基、叔丁基、1-乙基丙基、正戊基、异戊基、新戊基、正己基和异己基。同样适用于诸如烷基羰基等基团。

(C₁-C₆)-烷基羰基代表具有1-6个碳原子的直链或分支烷基，其经由羰基[-C(=O)-]与分子的其余部分键合。非限制性实例包括乙酰基、正丙酰基、正丁酰基、异丁酰基、正戊酰基、新戊酰基、正己酰基和正庚酰基。

为简明目的，在整个本文件中相对于复数表述偏好使用单数表述，但如果未另外指出，通常意味着包括复数表述。例如，表述"一种在患者中治疗疾病的方法，所述方法包括给予患者有效量的式(I)化合物"，意在包括同时治疗不止一种疾病以及给予不止一种式(I)化合物。

在优选实施方案中，本发明涉及通式(I)化合物，其中

R¹为氢、甲基、乙酰基或苯甲酰基；

R²为氰基；

R³为甲基、二氟甲基或三氟甲基；

或

R²和R³连接并与它们所连接的碳原子一起形成下式稠环

其中R⁷为氢或甲基；

R⁴为氢或甲基；

R⁵为任选被多达三个氟原子取代的(C₁-C₄)-烷基，或为任选被独立选自以下的一个或两个残基取代的苯基：氟、氯、甲基和三氟甲基；

或

R⁴和R⁵连接并与它们所连接的氮原子和碳原子一起形成下式稠合吗啉环

。

在特别优选的实施方案中，本发明涉及通式(I)化合物，其中

R¹为氢或苯甲酰基；

R²为氰基；

R³为甲基、二氟甲基或三氟甲基；

或

R²和R³连接并与它们所连接的碳原子一起形成下式稠合内酯环

，

R⁴为氢；

和

R⁵为甲基、二氟甲基或三氟甲基，或为任选被氟或氯取代的苯基。

在残基的各自组合或优选组合中明确指出的残基的定义亦根据需要被其它组合的残基定义代替，而不管对残基指出的具体组合怎样。尤其优选两个或更多个上述优选范围的组合。

在另一实施方案中，本发明涉及用于制备通式(I)化合物的方法，所述通式(I)中R⁴为氢，R¹代表氢、(C₁-C₆)-烷基羰基或任选取代的苯甲酰基，所述方法的特征在于让式(II)呋喃并吡啶醛

     (II)，

其中

R^1A代表如上对R¹所定义的(C₁-C₆)-烷基羰基或任选取代的苯甲酰基，

[A]：与式(III)氰酮或其烯醇化钠

        (III)，

其中R⁵具有上文所定义的含义，

在酸、酸/碱组合和/或脱水剂存在下反应，得到式(IV)化合物

     (IV)，

其中R^1A和R⁵具有上文所定义的含义；

然后让后者与式(V)烯胺

       (V)，

其中R²和R³具有上文所定义的含义，

或与式(VI)酮

       (VI)，

其中R²和R³具有上文所定义的含义，

和氨来源例如乙酸铵缩合，得到式(I-A)化合物

     (I-A)，

其中R^1A、R²、R³和R⁵具有上文所定义的含义；

或者

[B]：在任选存在酸、碱和/或脱水剂下，与式(VI)酮

       (VI)，

其中R²和R³具有上文所定义的含义，

反应，得到式(VII)化合物

     (VII)，

其中R^1A、R²和R³具有上文所定义的含义；

然后让后者在任选存在酸下与式(VIII)烯胺腈(enaminonitrile)：

        (VIII)，

其中R⁵具有上文所定义的含义，

缩合，亦得到式(I-A)化合物

     (I-A)，

其中R^1A、R²、R³和R⁵具有上文所定义的含义；

任选接着水解裂解酰基R^1A，得到胺化合物(I-B)

     (I-B)，

其中R²、R³和R⁵具有上文所定义的含义；

并任选在合适时接着：(i)分离化合物(I-A)和(I-B)，由此获得其各自的对映异构体和/或非对映异构体，优选利用色谱方法进行分离；和/或(ii)通过用相应的溶剂和/或酸或碱处理，将化合物(I-A)和(I-B)转化为其各自的水合物、溶剂化物、盐和/或所述盐的水合物或溶剂化物。

方法变体[A] (II) + (III) → (IV)、(IV) + (V)/(VI) → (I-A)和[B] (II) + (VI) → (VII)、(VII) + (VIII) → (I-A)二者都可用如上所述的两个分开步骤进行，或通过用一锅法(one-pot procedure)进行，即无需明确分离各自的中间化合物(IV)和(VII)。在某些情况下，视单个反应物的反应性而定，实施化合物(II)、(III)和(V)/(VI) [A]或(II)、(VI)和(VIII) [B]的一瓶(one-flask)/三组分缩合反应来制备式(I-A)化合物亦可能是可行的[一般而言关于合成1,4-二氢吡啶，参见例如D.M. Stout, A.I. Meyers, Chem. Rev. 1982, 82, 223-243；H. Meier等，Liebigs Ann. Chem. 1977, 1888；H. Meier等，同前，1977, 1895；H. Meier等，同前，1976, 1762；F. Bossert等，Angew. Chem. 1981, 93, 755]。

用于反应(IV) + (VI) → (I-A)的合适的氨来源为例如：甲酸铵、乙酸铵、氯化铵或硫酸氢铵；优选乙酸铵。

通常在惰性溶剂中于+20℃到溶剂沸点的温度下在大气压力下实施工序(II) + (III) → (IV)、(IV) + (V)/(VI) → (I-A)、(II) + (VI) → (VII)和(VII) + (VIII) → (I-A)。

适于该目的的溶剂为例如：醇类，例如甲醇、乙醇、正丙醇、异丙醇、正丁醇、叔丁醇或正戊醇；烃类，例如己烷、环己烷、苯、甲苯或二甲苯；卤代烃类，例如二氯甲烷、三氯甲烷、四氯甲烷、三氯乙烷、1,2-二氯乙烷、氯苯或氯甲苯；醚类，例如四氢呋喃、1,4-二氧杂环己烷或1,2-二甲氧基乙烷；或其它溶剂，例如乙腈或乙酸。同样可能使用这些溶剂的混合物。优选在以下溶剂中于各自回流温度在大气压力下实施反应(II) + (III) → (IV)和(II) + (VI) → (VII)：二氯甲烷、甲苯、乙醇、正丙醇、异丙醇、正丁醇或正戊醇；优选在以下溶剂中亦于回流温度在大气压力下实施反应(IV) + (V)/(VI) → (I-A)和(VII) + (VIII) → (I-A)：正丙醇、异丙醇、正丁醇、正戊醇、二甲苯、乙酸或其混合物。

可在酸、酸/碱组合和/或惰性脱水剂例如分子筛存在下，有利地发生反应(II) + (III) → (IV)。合适的酸催化剂的实例为乙酸、三氟乙酸、甲磺酸、苯磺酸或对甲苯磺酸；合适的碱尤其为哌啶或吡啶。视组分的反应性而定，可在不含另外的辅助试剂的情况下实施(II) + (VI) → (VII)转化，或其可通过常规胺碱例如哌啶、酸例如乙酸和/或脱水剂例如分子筛来促进。类似地，可在不含另外的催化的情况下或在酸添加剂的帮助下实施反应(IV) + (V)/(VI) → (I-A)和(VII) + (VIII) → (I-A)；在后一情况下，乙酸优选既作为酸催化剂又作为溶剂或共溶剂使用。

在R^1A为任选取代的苯甲酰基情况下，优选通过让化合物(I-A)在高温(例如+50℃到+120℃)下与强酸例如氯化氢或溴化氢在冰乙酸溶液中接触，来进行裂解反应(I-A) → (I-B)。在R^1A为(C₁-C₆)-烷基羰基情况下，通常在碱性条件下通过在0℃到+60℃温度范围于质子溶剂或水混溶的溶剂(例如甲醇、乙醇、异丙醇、四氢呋喃、1,4-二氧杂环己烷或1,2-二甲氧基乙烷)中用含水碱金属氢氧化物例如氢氧化锂、氢氧化钠或氢氧化钾处理化合物(I-A)来实施水解。

或者，可如下制备式(I-A)化合物，其中R²为氰基，R³和R⁵二者都代表彼此完全相同的任选氟取代的(C₁-C₄)-烷基残基[即具有对称1,4-二氢吡啶亚结构的式(I-A)化合物]：通过在酸存在下让式(II)呋喃并吡啶醛

     (II)，

其中R^1A具有上文所定义的含义，

与两当量的式(V-A)氰基-烯胺

       (V-A),

其中

R^3A代表任选被多达三个氟原子取代的(C₁-C₄)-烷基，

缩合，得到式(I-A1)化合物

     (I-A1)，

其中R^1A和R^3A具有上文所定义的含义。

通常在质子有机溶剂中实施缩合反应(II) + (V-A) → (I-A1)，所述有机溶剂如醇类，例如甲醇、乙醇、正丙醇、异丙醇、正丁醇、叔丁醇或正戊醇；或乙酸。同样可能使用这些溶剂的混合物。有益于该转化的酸催化剂实例有乙酸、三氟乙酸、甲磺酸、苯磺酸和对甲苯磺酸。优选乙酸同时被用作酸催化剂和溶剂或共溶剂。

通常在+20℃到+150℃、优选+80℃到+125℃温度范围于大气压力下实施工序(II) + (V-A) → (I-A1)。

亦可如下制备具有式(I-A2)的本发明化合物：

     (I-A2),

其中R^1A、R⁵和n具有上文所定义的含义，

和

A¹代表-O-或-NR⁶-，其中R⁶具有上文所定义的含义；

：通过将呋喃并吡啶醛(II) 

     (II)，

其中R^1A具有上文所定义的含义，

与式(VIII)烯胺腈

        (VIII)，

其中R⁵具有上文所定义的含义，

和式(IX)酮酯

        (IX)，

其中n和A¹具有上文所定义的含义，

T¹代表(C₁-C₄)-烷基，和

PG代表合适的羟基-或氨基-保护基，例如乙酰基、三甲基甲硅烷基、四氢吡喃基、叔丁氧基羰基或苯甲氧基羰基，

的三组分缩合反应，得到式(X)中间化合物

      (X)，

其中R^1A、R⁵、n、A¹、T¹和PG具有上文所定义的含义，

然后将该中间化合物脱保护并环化，产生式(I-A2)靶化合物。

优选在醇溶剂任选与酸催化剂例如乙酸组合中实施缩合反应(II) + (VIII) + (IX) → (X)，所述醇溶剂为例如甲醇、乙醇、正丙醇、异丙醇、正丁醇、叔丁醇或正戊醇。通常在+20℃到+150℃、优选+80℃到+125℃温度范围于大气压力下实施转化。

在工序(X) → (I-A2)中，通常通过本领域熟知的标准方法完成保护基PG的去除[参见例如T.W. Greene和P.G.M. Wuts, Pro-tective Groups in Organic Synthesis, Wiley, New York, 1999]。优选将乙酰基用作羟基-保护基。在该情况下，可通过用强酸的水溶液在高温(例如+50℃到+120℃)处理化合物(X)以一锅法实施脱保护和随后的内酯形成[在(I-A2)中A¹ = O ]，所述一锅法即无需分离脱保护的中间体，所述强酸为例如氯化氢、溴化氢或三氟乙酸。

对于氮保护，优选用叔丁氧基羰基(Boc)作为基团PG。可再次用一锅法或在两个分开步骤中实施通过用无水氯化氢或三氟乙酸进行标准处理而进行的脱保护，以及通过将中间体胺盐与常规碱接触而进行最终环化成内酰胺(I-A2) [A¹ = NR⁶]。

可通过用式(XI)化合物

      (XI)，

其中G具有上文所定义的含义，

代替式(VIII)烯胺腈[分别参照转化(VII) + (VIII) → (I-A)和(II) + (VIII) + (IX) → (X) → (I-A2)]，以非常类似于上述缩合反应的方法来制备具有下式(I-C)的本发明化合物：

     (I-C)，

其中R^1A、R²、R³和G具有上文所定义的含义。上文所规定的反应参数例如溶剂和酸催化剂类似地适用。

然后若需要的话可通过水解除掉酰基R^1A [参照转化(I-A) → (I-B)]将化合物(I-C)转化为对应的式(I-D)的4-氨基呋喃并吡啶基衍生物：

     (I-D)，

其中R²、R³和G具有上文所定义的含义。

可自下式(XII)内酰胺开始制备式(XI)的环外烯胺：

      (XII)，

其中G具有上文所定义的含义；

首先将式(XII)的内酰胺经由其式(XIII)的内酰亚胺醚衍生物

      (XIII)，

其中G具有上文所定义的含义，

与式(XIV)的氰基乙酸酯

       (XIV)，

其中

T²代表(C₁-C₄)-烷基或苯甲基，

缩合，得到式(XV)化合物

     (XV)，

其中G和T²具有上文所定义的含义；

式(XV)化合物在酯裂解及脱羧基后产生式(XI)的氰基-烯胺[参见以下反应流程5]。在随后的反应中通常以粗制材料的溶液使用该中间体，即无需进一步分离和纯化。

可如下制备其中R⁴为(C₁-C₄)-烷基或环丙基的式(I)化合物：通过将式(I-A)化合物在碱存在下与下式(XVI)化合物反应：

R^4A－Z      (XVI)，

其中

R^4A代表(C₁-C₄)-烷基或环丙基，和

Z代表离去基团，例如卤素、甲磺酸酯、三氟甲磺酸酯、甲苯磺酸酯或硫酸酯，

得到式(I-E)化合物

     (I-E)，

其中R^1A、R²、R³、R^4A和R⁵具有上文所定义的含义；

然后若需要的话可水解式(I-E)化合物，得到式(I-F)的4-氨基呋喃并吡啶基衍生物：

     (I-F)，

其中R²、R³、R^4A和R⁵具有上文所定义的含义[参照转化(I-A) → (I-B)]。

用于烷化反应(I-A) + (XVI) → (I-E)的惰性溶剂为例如：醚，例如二乙醚、甲基叔丁醚、四氢呋喃、1,4-二氧杂环己烷或1,2-二甲氧基乙烷；烃类，例如苯、甲苯、二甲苯、己烷或环己烷；卤代烃，例如二氯甲烷、三氯甲烷、四氯甲烷、1,2-二氯乙烷、三氯乙烷、四氯乙烷、氯苯或氯甲苯；或其它溶剂，例如乙腈、N,N-二甲基甲酰胺(DMF)、二甲基亚砜(DMSO)、N,N'-二甲基丙烯脲(DMPU)、N-甲基吡咯烷酮(NMP)或吡啶。使用这些溶剂的混合物亦是可行的。优选采用二氯甲烷、四氢呋喃、N,N-二甲基甲酰胺或其混合物。

适于工序(I-A) + (XVI) → (I-E)的碱尤其是碱金属或碱土金属的碳酸盐，例如碳酸锂、碳酸钠、碳酸钾、碳酸钙或碳酸铯；碱金属的氢化物，例如氢化钠或氢化钾；空间位阻的碱金属醇盐，例如叔丁醇钠或叔丁醇钾；空间位阻氨基碱金属，例如双(三甲基甲硅烷基)氨基锂、双(三甲基甲硅烷基)氨基钠或双(三甲基甲硅烷基)氨基钾或二异丙基氨基锂；或有机胺，例如三乙胺、N-甲基吗啉、N-甲基哌啶、N, N-二异丙基乙胺或吡啶。优选使用碳酸钾、碳酸铯、氢化钠或三乙胺。

反应(I-A) + (XVI) → (I-E)通常在大气压力下于-20℃到+100℃、优选0℃到+50℃的温度范围内实施。

可如下制备其中R¹为(C₁-C₆)-烷基或任选取代的苯甲基的式(I)化合物：通过让式(I-B)、(I-D)或(I-F)的化合物在合适的还原剂例如硼氢化钠存在下，分别与下式(XVII)的醛反应：

     (XVII)，

其中

R^1B代表氢、(C₁-C₅)-烷基或如上对R¹所定义的任选取代的苯基，

得到式(I-G)的化合物：

     (I-G)，

其中R^1B、R²、R³、R⁴和R⁵具有上文所定义的含义。

通常在质子溶剂例如水、甲醇、乙醇、异丙醇或其混合物中于0℃到+50℃温度范围内在大气压力下实施转化。在该N-烷化反应类型中常采用的还原剂为碱金属硼氢化物衍生物，例如硼氢化钠、硼氢化钾、氰基硼氢化钠或三乙酰氧基硼氢化钠，其任选与酸催化剂例如乙酸组合。

式(II)、(III)、(V)、(V-A)、(VI)、(VIII)、(IX)、(XII)、(XIV)、(XVI)和(XVII)化合物可市购、自文献已知或可从容易可得到的原料通过采用文献所述的标准方法来制备(对于其它参考文献，参见以下实验部分)。

可通过以下合成流程1－5来阐明本发明化合物的制备。在以下阐述实施例的实验部分提呈更详细的程序。

流程1

流程2

流程3

流程4

流程5

使用方法

可将本发明化合物用于抑制受体酪氨酸激酶的活性或表达，尤其是c-Met受体酪氨酸激酶的活性或表达。因此，预期式(I)化合物作为治疗剂是有价值的。因此，在另一实施方案中，本发明提供在需要治疗的患者中治疗与c-Met激酶活性有关或由其介导的病症的方法，所述方法包括给予患者有效量的如上所定义的式(I)化合物。在某些实施方案中，与c-Met激酶活性有关的病症为细胞增殖性病症，尤其是癌症。

按常规使用本文件通篇所述术语"治疗"，例如为对抗、减缓、降低、缓解、改善疾病或病症例如癌的病况的目的来管理或护理受试者。

术语"受试者"或"患者"包括能够罹患细胞增殖性病症或可以其它方式从给予本发明化合物受益的生物体，例如人和非人动物。优选的人包括如本文所述罹患或倾向于罹患细胞增殖性病症或相关状态的人患者。术语"非人动物"包括脊椎动物，例如哺乳动物，例如非人灵长类、绵羊、牛、狗、猫和啮齿动物，例如小鼠；和非哺乳动物，例如鸡、两栖动物、爬行动物等等。

术语"与c-Met相关或由其介导的病症"应包括与c-Met活性例如c-Met活动过强相关或牵涉c-Met活性的疾病和伴随这些疾病的病况。"与c-Met相关或由其介导的病症"实例包括由于异常高量的c-Met或c-Met突变造成的c-Met过度刺激而产生的病症，或由于异常高量的c-Met或c-Met突变造成的异常高量的c-Met活性而产生的病症。

术语"c-Met活动过强"是指在正常不表达c-Met的细胞中的c-Met表达，或正常不具有活性c-Met的细胞中的c-Met活性，或导致不想要的细胞增殖的c-Met表达增加，或导致组成性激活c-Met的突变。

术语"细胞增殖性病症"包括涉及不想要或不受控制的细胞增殖的病症。可利用本发明化合物来防止、抑制、阻止、降低、减轻、控制细胞增殖和/或细胞分裂等等，和/或产生细胞凋亡。该方法包括给予有需要的受试者一定量的本发明化合物或其药学上可接受的盐、异构体、多晶型物、代谢物、水合物或溶剂化物，所述受试者包括哺乳动物，包括人，所述量有效治疗或预防所述病症。

本发明上下文中的细胞增殖性或过度增殖性病症包括但不限于例如：银屑病、瘢痕疙瘩和影响皮肤的其它增生、子宫内膜异位、骨骼病症、血管原性疾病或血管增殖性病症、肺动脉高压、纤维化病症、系膜细胞增殖性病症、结肠息肉、多囊性肾病、良性前列腺增生(BPH)和实体瘤，例如乳腺癌、呼吸道癌、脑癌、生殖器癌、消化道癌、尿道癌、眼癌、肝癌、皮肤癌、头颈癌、甲状腺癌、甲状旁腺癌和其远端转移。这些病症亦包括淋巴瘤、肉瘤和白血病。

乳腺癌实例包括但不限于浸润性导管癌、浸润性小叶癌、原位管癌和原位小叶癌。

呼吸道癌实例包括但不限于小细胞肺癌和非小细胞肺癌以及支气管腺瘤和胸膜肺母细胞瘤。

脑癌实例包括但不限于脑干和下丘脑胶质瘤、小脑和大脑星形细胞瘤、成胶质细胞瘤、成神经管细胞瘤、室管膜瘤以及神经外胚层肿瘤和松果腺肿瘤。

雄性生殖器肿瘤包括但不限于前列腺癌和睾丸癌。雌性生殖器肿瘤包括但不限于子宫内膜癌、子宫颈癌、卵巢癌、阴道癌和外阴癌以及子宫肉瘤。

消化道肿瘤包括但不限于肛门癌、结肠癌、结肠直肠癌、食道癌、胆囊癌、胃癌、胰腺癌、直肠癌、小肠癌和唾液腺癌。

尿道肿瘤包括但不限于膀胱癌、阴茎癌、肾癌、肾盂癌、输尿管癌、尿道癌及遗传性和散发性乳头状肾癌。

眼癌包括但不限于眼内黑素瘤和视网膜母细胞瘤。

肝癌实例包括但不限于肝细胞癌(具有或不具有纤维板层型变体(fibrolamellar variant)的肝脏细胞癌)、胆管癌(肝内胆管癌)和混合肝细胞胆管癌。

皮肤癌包括但不限于鳞状细胞癌、卡波西肉瘤、恶性黑素瘤、梅克尔细胞皮肤癌和非黑素瘤皮肤癌。 

头颈癌包括但不限于喉癌、下咽骨癌、鼻咽癌、口咽癌、唇癌和口腔癌及鳞状细胞癌。

淋巴瘤包括但不限于AIDS相关的淋巴瘤、非霍奇金淋巴瘤、皮肤T-细胞淋巴瘤、伯基特(Burkitt)淋巴瘤、霍奇金氏病和中枢神经系统淋巴瘤。

肉瘤包括但不限于软组织肉瘤、骨肉瘤、恶性纤维组织细胞瘤、淋巴肉瘤和横纹肌肉瘤。

白血病包括但不限于急性髓性白血病、急性成淋巴细胞性白血病、慢性淋巴细胞性白血病、慢性髓细胞性白血病和毛细胞性白血病。

可用本发明化合物和方法治疗的纤维化增殖性病症即细胞外基质异常形成，包括肺纤维化、动脉粥样硬化、再狭窄、肝硬化和系膜细胞增殖性病症，包括肾病，例如肾小球肾炎、糖尿病性肾病、恶性肾硬化、血栓性微血管综合征(thrombotic microangiopathy syndrome)、移植排斥和肾小球病。

可通过给予本发明化合物治疗的人或其它哺乳动物的其它病况包括：肿瘤生长；视网膜病，包括糖尿病性视网膜病、缺血性视网膜静脉阻塞、早熟性视网膜病和年龄相关性黄斑变性；类风湿性关节炎、银屑病；和与表皮下水疱形成有关的大疱性病症，包括大疱性类天疱疮、多形性红斑和疱疹样皮炎。

亦可将本发明化合物用于预防及治疗气道及肺部疾病、胃肠道疾病以及膀胱和胆管疾病。

上述病症在人中业已被良好表征，但亦以相似的病因学存在于其它动物包括哺乳动物中，并可通过给予本发明药物组合物来治疗。

可作为单独的药剂或与一种或多种其它治疗剂组合给予式(I)化合物，其中所述组合不引起不能接受的有害作用。这种组合疗法包括给予含有式(I)化合物和一种或多种另外治疗剂的单一药物剂量制剂，以及给予在其各自的分开药物剂量制剂中的式(I)化合物和每一种另外的治疗剂。例如，可在单一口服剂量组合物例如片剂或胶囊剂中将式(I)化合物和治疗剂一起给予患者，或可在分开的剂量制剂中给予每一种药剂。

当使用分开的剂量制剂时，可基本同时(例如并行)或在分别错开的时间(例如序贯)给予式(I)化合物和一种或多种另外的治疗剂。

具体而言，可与其它抗肿瘤剂以固定组合或分开组合使用本发明化合物，所述其它抗肿瘤剂为例如烷化剂、抗代谢药、源自植物的抗肿瘤剂、激素治疗剂、拓扑异构酶抑制剂、喜树碱衍生物、激酶抑制剂、靶向药物、抗体、干扰素和/或生物反应调节剂、抗血管生成化合物和其它抗肿瘤药物。在这点上，以下物质为可与本发明化合物组合使用的第二药剂实例的非限制性名单：

● 烷化剂，包括但不限于：氮芥N-氧化物、环磷酰胺、异环磷酰胺、塞替派、雷莫司汀、尼莫司汀、替莫唑胺、六甲蜜胺、阿帕齐醌、brostallicin、苯达莫司汀(bendamustine)、卡莫司汀、雌莫司汀、福莫司汀、葡磷酰胺、马磷酰胺、苯达莫司汀(bendamustin)和二溴卫矛醇；铂配位的烷基化化合物包括但不限于顺铂、卡铂、依他铂、洛铂、奈达铂、奥沙利铂和沙铂；

● 抗代谢药，包括但不限于甲氨蝶呤、6-巯基嘌呤核苷、巯嘌呤、单独或与亚叶酸组合的5-氟尿嘧啶、替加氟、去氧氟尿苷、卡莫氟、阿糖胞苷(cytarabine)、阿糖胞苷十八烷基磷酸盐(cytarabine ocfosfate)、伊诺他滨、吉西他滨、氟达拉滨、5-氮杂胞苷、卡培他滨、克拉屈滨、氯法拉滨、地西他滨、依氟鸟氨酸、乙炔基胞苷(ethynylcytidine)、阿糖胞苷(cytosine arabinoside)、羟基脲、美法仑、奈拉滨、诺拉曲塞、ocfosfite、培美曲塞二钠(disodium premetrexed)、喷司他丁、培利曲索、雷替曲塞、triapine、三甲曲沙、阿糖腺苷、长春新碱和长春瑞滨；

● 激素治疗剂，包括但不限于依西美坦、醋酸亮丙瑞林(Lupron)、阿那曲唑、度骨化醇、法倔唑、福美坦、11-β羟基类固醇脱氢酶1抑制剂、17-α羟化酶/17,20裂合酶抑制剂例如乙酸阿比特龙(abiraterone acetate)、5-α还原酶抑制剂例如非那雄胺和依立雄胺、抗雌激素类例如枸橼酸他莫昔芬和氟维司群、Trelstar、托瑞米芬、雷洛昔芬、拉索昔芬、来曲唑、抗雄激素类例如比卡鲁胺、氟他胺、米非司酮、尼鲁米特、康士得(Casodex)和抗黄体酮类及其组合；

● 源自植物的抗肿瘤物质，包括例如选自有丝分裂抑制剂的那些物质，例如埃坡霉素，例如沙戈匹隆(sagopilone)、伊沙匹隆和埃坡霉素B、长春碱、长春氟宁、多西他赛和紫杉醇；

● 细胞毒性拓扑异构酶抑制剂，包括但不限于阿柔比星、多柔比星、安奈菲特、贝洛替康、喜树碱、10-羟基喜树碱、9-氨基喜树碱、二氟替康、伊立替康、托泊替康、艾特咔林、表柔比星、依托泊苷、伊沙替康、吉马替康、勒托替康、米托蒽醌、吡柔比星(pirambicin)、匹蒽醌、卢比替康、索布佐生、他氟泊苷及其组合；

● 免疫学药物包括：干扰素，例如干扰素α、干扰素α-2a、干扰素α-2b、干扰素β、干扰素γ-1a和干扰素γ-n1；和其它免疫增强剂，例如L19-IL2和其它IL2衍生物、非格司亭、蘑菇多糖、西佐喃(sizofilan)、Theracys、乌苯美司、阿地白介素、阿仑单抗、BAM-002、达卡巴嗪、达克珠单抗、地尼白介素、吉妥珠单抗、奥唑米星(ozogamicin)、替伊莫单抗(ibritumomab)、咪喹莫特、来格司亭、蘑菇多糖、黑素瘤疫苗(Corixa)、莫拉司亭、沙格司亭、他索纳明、替西白介素(tecleukin)、胸腺法新、托西莫单抗、Vimlizin、依帕珠单抗、米妥莫单抗、奥戈伏单抗(oregovomab)、帕尼单抗(pemtumomab)和Provenge；

● 生物反应调节剂为改变活生物体防御机制或改变生物反应例如组织细胞存活、生长或分化以将它们引向具有抗肿瘤活性的物质；所述物质包括例如云芝多糖、蘑菇多糖、西佐喃、溶血性链球菌制剂(picibanil)、ProMune和乌苯美司；

● 抗血管生成化合物，包括但不限于：阿维A、阿柏西普(aflibercept)、血管抑素(angiostatin)、脱氢膜海鞘素B (aplidine)、asentar、阿昔替尼(axitinib)、贝伐珠单抗、brivanib alaninat、西仑吉肽(cilengtide)、考布他汀、内皮抑素、芬维A胺、卤夫酮、帕唑帕尼(pazopanib)、雷珠单抗、瑞马司他、recentin、regorafenib、removab、revlimid、索拉非尼、角鲨胺、舒尼替尼、替拉替尼(telatinib)、沙利度胺、ukrain、伐他拉尼和vitaxin；

● 抗体，包括但不限于：曲妥珠单抗、西妥昔单抗、贝伐单抗、利妥昔单抗、ticilimumab、伊匹木单抗、鲁昔单抗、卡妥索单抗、阿塞西普(atacicept)、奥戈伏单抗和阿仑单抗；

● VEGF抑制剂，例如索拉非尼、regorafenib、贝伐单抗、舒尼替尼、recentin、阿西替尼、阿柏西普、替拉替尼、brivanib alaninate、瓦他拉尼、帕唑帕尼和雷珠单抗；

● EGFR (HER1)抑制剂，例如西妥昔单抗、帕尼单抗、vectibix、吉非替尼、厄洛替尼和凡德他尼(Zactima)；

● HER2抑制剂，例如拉帕替尼、曲妥珠单抗(tratuzumab)和培妥珠单抗；

● mTOR抑制剂，例如坦罗莫司、西罗莫司/雷帕霉素和依维莫司；

● c-Met抑制剂；

● PI3K和AKT抑制剂；

● CDK抑制剂，例如roscovitine和黄酮吡多；

● 纺锤体装配检查点抑制剂及靶向抗有丝分裂剂，例如PLK抑制剂、Aurora抑制剂(例如Hesperadin)、检查点激酶抑制剂和KSP抑制剂；

● HDAC抑制剂，例如帕比司他(panobinostat)、伏林司他、MS275、belinostat和LBH589；

● HSP90和HSP70抑制剂；

● 蛋白酶体抑制剂，例如硼替佐米和carfilzomib；

● 丝氨酸/苏氨酸激酶抑制剂，包括MEK抑制剂和Raf抑制剂，例如索拉非尼；

● 法尼基转移酶抑制剂，例如替匹法尼；

● 酪氨酸激酶抑制剂，包括例如达沙替尼、尼洛替尼(nilotibib)、regorafenib、波舒替尼、索拉非尼、贝伐单抗、舒尼替尼、西地尼布(cediranib)、阿西替尼、阿柏西普、替拉替尼、甲磺酸伊马替尼、brivanib alaninate、帕唑帕尼、雷珠单抗、瓦他拉尼、西妥昔单抗、帕尼单抗、维克替比、吉非替尼、厄洛替尼、拉帕替尼、曲妥珠单抗、帕妥珠单抗和c-Kit抑制剂；

● 维生素D受体激动剂；

● Bcl-2蛋白质抑制剂，例如奥巴克拉(obatoclax)、奥利美生钠和棉酚；

● 分化簇20受体拮抗剂，例如利妥昔单抗；

● 核糖核苷酸还原酶抑制剂，例如吉西他滨；

● 肿瘤坏死细胞凋亡诱导配体受体1激动剂，例如马帕木单抗；

● 5-羟色胺受体拮抗剂，例如rEV598、扎利罗登(xaliprode)、盐酸帕洛司琼、格拉司琼、Zindol和AB-1001；

● 整联蛋白抑制剂，包括α5-β1整联蛋白抑制剂，例如E7820、JSM 6425、伏洛昔单抗和内皮他丁 ；

● 雄激素受体拮抗剂，包括例如癸酸诺龙(nandrolone decanoate)、氟甲睾酮、Android、Prost-aid、andromustine、比卡鲁胺、氟他胺、apo-环丙孕酮(apo-cyproterone)、apo-氟他胺、氯地孕酮、色普龙(Androcur)、Tabi、环丙孕酮和尼鲁米特；

● 芳香酶抑制剂，例如阿那曲唑、来曲唑、睾内酯、依西美坦、氨鲁米特和福美坦；

● 基质金属蛋白酶抑制剂；

● 其它抗癌剂，包括例如阿利维A酸、聚肌胞、阿曲生坦、贝沙罗汀、硼替佐米、波生坦、骨化三醇、依昔舒林、福莫司汀、伊班膦酸、米替福新、米托蒽醌、I-天冬酰胺酶(I-asparaginase)、丙卡巴肼、达卡巴嗪、羟基脲、培门冬酶、喷司他丁、他扎罗汀、万珂(velcade)、硝酸镓、坎磷酰胺、darinaparsin和维A酸。

在优选实施方案中，本发明化合物可与化疗(即细胞毒性剂)、抗激素和/或靶向疗法例如其它激酶抑制剂(例如EGFR抑制剂)、mTOR抑制剂和血管生成抑制剂联合使用。

本发明化合物亦可与放射疗法和/或外科手术联合用于癌症治疗。

此外，式(I)化合物可照这样使用，或用于组合物中、用于研究和诊断中或用作分析参考标准品等，这在本领域众所周知。

药物组合物和治疗方法

在另一方面，本发明提供包含如上所定义的式(I)化合物连同药学上可接受的载体的药物组合物。

在又一方面，本发明提供用于制备药物组合物的方法。所述方法包括包含让至少一种如上所定义的式(I)化合物与至少一种药学上可接受的载体组合，并让所得到的组合形成合适的给药形式的步骤。

式(I)活性组分可在全身和/或局部起作用。为此目的，其可以以合适方式施用，例如经口、胃肠外、经肺、经鼻、舌下、经舌、含服、直肠、透皮、经结膜、经耳(otically)或作为植入物或支架施用。

对于这些施用途径，可以以合适的施用形式给予式(I)活性组分。

有用的口服施用形式包括快速和/或以修饰形式释放活性组分的施用形式，例如片剂(非包衣和包衣片剂，例如用肠溶衣)、胶囊剂、糖包衣片剂、颗粒剂、丸剂、散剂、乳剂、混悬剂、溶液剂和气雾剂。

可用避免吸收步骤(静脉内、动脉内、心脏内、脊柱内或腰椎内)或用包含吸收(肌肉内、皮下、皮内、经皮或腹膜内)来实施胃肠外施用。有用的胃肠外施用形式包括注射和输注呈溶液剂、混悬剂、乳剂、冻干粉和无菌粉剂形式的制剂。

适于其它施用途径的形式包括：例如待经舌、舌下或含服给予的吸入用药物形式(包括粉末吸入器、喷雾器)、滴鼻剂、溶液剂或喷雾剂、片剂或胶囊剂；栓剂、耳朵及眼睛制剂、阴道胶囊剂、水性混悬剂(洗剂、震荡合剂)、亲脂混悬剂、软膏剂、乳膏剂、乳剂(milk)、糊剂、扑粉(dusting powder)、植入物或支架。

在优选实施方案中，提供呈适于口服给药形式的包含如上所定义的式(I)化合物的药物组合物。在另一优选实施方案中，提供呈适于静脉给药形式的包含如上所定义的式(I)化合物的药物组合物。

可将式(I)活性组分以本身已知的方式转化为已列举的施用形式。这用惰性无毒药学上合适的赋形剂来实施。这些尤其包括载体(例如微晶纤维素)、溶剂(例如液体聚乙二醇)、乳化剂(例如十二烷基硫酸钠)、分散剂(例如聚乙烯吡咯烷酮)、合成及天然生物聚合物(例如白蛋白)、稳定剂(例如抗氧化剂，例如抗坏血酸)、着色剂(例如无机色素，例如氧化铁)或味觉和/或气味矫正剂。

在另一实施方案中，本发明提供在需要治疗的患者中治疗细胞增殖性病症的方法，所述方法包括给予患者有效量的如上所定义的式(I)化合物。在某些实施方案中，细胞增殖性病症为癌症。

在又一方面，本发明提供如上所定义的式(I)化合物用于制备用于治疗或预防细胞增殖性病症的药物组合物的用途。在某些实施方案中，细胞增殖性病症为癌症。

当本发明化合物作为药物给予人和动物时，其可以以本身给予，或作为含有与药学上可接受的载体组合的例如0.1-99.5% (更优选0.5-90%)的活性成分的药物组合物给予。

不管所选择的给药途径怎样，通过本领域技术人员已知的常规方法将可以合适的水合形式使用的本发明化合物，和/或本发明药物组合物，配制成药学上可接受的剂型。

本发明药物组合物中活性成分的给予的实际剂量水平和时程可变化，以获得这样的量的活性成分，所述量有效对特定患者、组合物和给药模式达到所期需的治疗反应而对患者无毒。例示性剂量范围为每天0.01-100 mg/kg或每天0.1-150 mg/kg。

在某些实施方案中，本发明化合物可用于与常规癌症化学治疗的联合疗法。白血病和其它肿瘤的常规治疗方案包括辐射、药物或二者组合。

可由作为本领域技术人员的医师或兽医("主治临床医师")通过使用已知技术并通过观察在相似情况下所获得的结果，容易地确定本发明化合物的抗增殖治疗有效量或抗增殖预防有效量。剂量可视以下因素而变化：主治临床医师判断中患者的需求；正治疗病况的严重程度和正采用的具体化合物。在确定抗增殖治疗有效量或剂量及抗增殖预防有效量或剂量过程中，主治临床医师要考虑很多因素，包括但不限于：所涉及的特定细胞增殖性病症；具体药剂的药效学特点及其给药模式和途径；治疗的所期需时程；哺乳动物物种；其大小、年龄及一般健康；所涉及的特定疾病；所述疾病的受累程度或严重程度；个体患者的反应；所给予的具体化合物；给药模式；所给予制剂的生物利用度特点；所选择的给药方案；并行治疗的种类(即本发明化合物与其它共同给予的治疗剂的相互作用)；和其它相关情况。

可用小于所述化合物的最佳剂量的较小剂量开始治疗。此后，可通过小增量来增加剂量直到在所述情况下达到最佳效果。为了方便，若需要可将总日剂量分开并在一天中分份给予。可预期本发明化合物的抗增殖治疗有效量和抗增殖预防有效量自每天每千克体重约0.01毫克(mg/kg/天)到约100 mg/kg/天变化。

用于本发明的本发明化合物的优选剂量，为患者可耐受并且不出现严重副作用的最大剂量。阐述性地，以约0.01 mg/kg-约100 mg/kg体重、约0.01 mg/kg-约10 mg/kg体重或约0.1 mg/kg-约10 mg/kg体重的剂量来给予本发明化合物。上述数值的中间范围亦意欲为本发明部分。

除非另外指出，否则以下测试及实施例中的百分比为重量百分比；份数为重量份数。对液体/液体溶液报告的溶剂比率、稀释比率和浓度皆基于体积。

A.实施例

缩写和缩略词：

LC-MS和GC-MS方法：

方法1 (LC-MS)：

设备：具HPLC Waters Alliance 2795的Micromass ZQ；柱：Phenomenex Synergi 2.5μ MAX-RP 100A Mercury, 20 mm x 4 mm；洗脱液A：1 L水+ 0.5 mL 50%蚁酸；洗脱液B：1 L乙腈+ 0.5 mL 50%蚁酸；梯度：0.0 min 90% A → 0.1 min 90% A → 3.0 min 5% A → 4.0 min 5% A → 4.01 min 90% A；流速：2 mL/min；恒温箱：50℃；UV检测：210 nm.

方法2 (LC-MS)：

设备：具HPLC Waters UPLC Acquity的Micromass Quattro Premier；柱：Thermo Hypersil GOLD 1.9μ, 50 mm x 1 mm；洗脱液A：1 L水+ 0.5 mL 50%蚁酸；洗脱液B：1 L乙腈+ 0.5 mL 50%蚁酸；梯度：0.0 min 90% A → 0.1 min 90% A → 1.5 min 10% A → 2.2 min 10% A；恒温箱：50℃；流速：0.33 mL/min；UV检测：210 nm.

方法3 (LC-MS)：

设备：具HPLC Agilent 1100 Series的Micromass Quattro Micro；柱：Thermo Hyper-sil GOLD 3μ, 20 mm x 4 mm；洗脱液A：1 L水+ 0.5 mL 50%蚁酸；洗脱液B：1 L乙腈+ 0.5 mL 50%蚁酸；梯度：0.0 min 100% A → 3.0 min 10% A → 4.0 min 10% A → 4.01 min 100% A (流速2.5 mL/min) → 5.00 min 100% A；恒温箱：50℃；流速：2 mL/min；UV检测：210 nm.

方法4 (LC-MS)：

设备：Waters Acquity SQD UPLC System；柱：Waters Acquity UPLC HSS T3 1.8μ, 50 mm x 1 mm；洗脱液A：1 L水+ 0.25 mL 99%蚁酸；洗脱液B：1 L乙腈+ 0.25 mL 99%蚁酸；梯度：0.0 min 90% A → 1.2 min 5% A → 2.0 min 5% A；恒温箱：50℃；流速：0.40 mL/min；UV检测：210-400 nm.

方法5 (GC-MS)：

设备：Micromass GCT, GC 6890；柱：Restek RTX-35, 15 m x 200 μm x 0.33 μm；氦的恒定流速：0.88 mL/min；恒温箱：70℃；入口：250℃；梯度：70℃, 30℃/min → 310℃  (保持3 min)。

原材料和中间体：

实施例1A

呋喃并[3,2-c]吡啶-4-胺

让65.3 g (425毫摩尔) 4-氯呋喃并[3,2-c]吡啶[CAS注册号31270-80-1]在高压灭菌器中悬浮在600 ml氨水溶液(35%)中。加入2 g氯化铜(I)后，在150℃将反应混合物搅拌20 h。冷却到室温后，用二氯甲烷(3 x 400 ml)萃取混合物。将合并的有机相用浓盐水洗涤，经硫酸镁干燥，过滤，减压下浓缩，得到46.6 g (理论值的82%)粗标题化合物(通过GC测定的含量>95%)，其无需进一步就纯化用于下一步骤。

实施例2A

N-(呋喃并[3,2-c]吡啶-4-基)苯甲酰胺

将42.2 g (315毫摩尔)呋喃并[3,2-c]吡啶-4-胺(实施例1A)溶解于500 ml干燥的吡啶中。分部分加入71.3 g (315毫摩尔)苯甲酸酐后，将反应混合物加热回流3 h。冷却到室温后，将混合物倒入5000 ml水中。过滤出得到的沉淀，用水洗涤，干燥，得到71.3 g (理论值的95%)标题化合物，为褐色固体，其无需进一步纯化就用于下一步骤[参照J.B.M. Rewinkel等，Bioorg. Med. Chem. Lett.9, 2837-2842 (1999)]。

LC-MS (方法4): R_t = 0.67 min；MS (ESIpos): m/z = 239 (M+H)⁺

¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d₆): δ = 11.03 (s, 1H), 8.30 (d, 1H), 8.11-8.02 (m, 3H), 7.63 (m, 1H), 7.60-7.50 (m, 3H), 6.92 (s, 1H) ppm。

实施例3A

N-(2-甲酰基呋喃并[3,2-c]吡啶-4-基)苯甲酰胺

在惰性气体氛围下将7.13 g (30毫摩尔) N-(呋喃并[3,2-c]吡啶-4-基)苯甲酰胺(实施例2A)溶解于150 ml干燥的THF中。在-78℃逐滴加入26.4 ml (66毫摩尔)正丁基锂溶液(2.5 M，己烷中)，在该温度将混合物搅拌30 min。然后逐滴加入5.1 ml (66毫摩尔)干燥的N,N-二甲基甲酰胺。加入完成后，让混合物缓慢升温到室温，加入300 ml饱和氯化铵水溶液。用300 ml二乙醚萃取后，经硫酸镁干燥有机相，过滤，减压下浓缩，得到棕色固体。通过色谱法在硅胶上纯化该物质(洗脱液二氯甲烷/甲醇99:1 v/v)，得到5.2 g (理论值的65%)标题化合物，为淡黄色固体[比照J.B.M. Rewinkel等，Bioorg. Med. Chem. Lett.9, 2837-2842 (1999)]。

LC-MS (方法4): R_t = 0.80 min；MS (ESIpos): m/z = 267 (M+H)⁺

¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d₆): δ = 11.34 (s, 1H), 9.90 (s, 1H), 8.49 (d, 1H), 8.11 (m, 2H), 8.01 (s, 1H), 7.70-7.62 (m, 2H), 7.57 (m, 2H) ppm。

实施例4A

N-{2-(2-氰基-3-氧代丁-1-烯-1-基)呋喃并[3,2-c]吡啶-4-基}苯甲酰胺

回流下将1.50 g (5.63毫摩尔) N-(2-甲酰基呋喃并[3,2-c]吡啶-4-基)苯甲酰胺(实施例3A)、0.65 g (6.2毫摩尔) (1Z)-1-氰基丙-1-烯-2-油酸钠、0.4 ml (7.04毫摩尔)乙酸和56 μl (0.56毫摩尔)哌啶在含有4?分子筛的干燥的二氯甲烷(35 ml)中的混合物搅拌1 h。冷却后加入50 ml碳酸氢钠水溶液，让混合物在室温搅拌1 h。过滤掉分子筛，减压下浓缩滤液。用乙酸乙酯和饱和碳酸钠水溶液处理残留物。将有机层分离，用水洗涤，干燥，减压下浓缩，得到标题化合物(1.5 g, 理论值的80%)，为淡黄色固体，其无需进一步纯化就用于下一步骤。

LC-MS (方法3): R_t = 1.91 min；MS (ESIpos): m/z = 332 (M+H)⁺

¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d₆): δ = 11.34 (br. s, 1H), 8.47 (d, 1H), 8.41 (s, 1H), 8.11 (m, 2H), 7.93 (s, 1H), 7.66 (m, 2H), 7.57 (m, 2H), 2.55 (br. m, 3H) ppm。

实施例5A

3-氨基-3-(4-氟苯基)丙-2-烯腈

在惰性气体氛围下让含0.390 ml (2.78毫摩尔)二异丙基胺的干燥THF (2 ml)溶液冷却到-70℃，逐滴加入1.74 ml (2.78毫摩尔)正丁基锂溶液(1.6 M，己烷中)。然后在10 min内缓慢加入含129 μl (2.45毫摩尔)乙腈的干燥THF (2 ml)溶液。在-70℃将得到的溶液再搅拌30 min，然后加入含200 mg (1.635毫摩尔) 4-氟苄腈的干燥THF (2 ml)溶液。让混合物升温到室温并搅拌1 h，缓慢加入水(4 ml)。用二氯甲烷(50 ml)萃取混合物若干次。经硫酸钠干燥合并的有机层，减压下浓缩，得到244 mg (理论值的92%)粗标题化合物，其无需进一步纯化就用于下一步骤。

LC-MS (方法4): R_t = 0.81 min；MS (ESIpos): m/z = 163 (M+H)⁺。

实施例6A

3-氨基-3-(4-氯苯基)丙-2-烯腈

用4-氯苄腈(500 mg, 3.598毫摩尔)按照实施例5A所述程序制备标题化合物，得到598 mg (理论值的93%)粗产物，其无需进一步纯化就用于下一步骤。

GC-MS (方法5): R_t = 6.38 min；MS (EIpos): m/z = 178 (M)⁺。

实施例7A

5-甲氧基-3,6-二氢-2H-1,4-嗪

让含1.2 g (11.9毫摩尔)吗啉-3-酮的二氯甲烷(70 ml)溶液冷却到0℃，用25 g (238毫摩尔)干燥碳酸钠处理。在0℃搅拌10 min后，于0℃加入6.14 g (41.5毫摩尔)三甲基氧四氟硼酸盐。让混合物升温到室温，搅拌6 h。加入水(100 ml)，分离有机层。用二氯甲烷萃取水相若干次，将合并的有机层用盐水洗涤，经硫酸钠干燥，减压下浓缩。由此获得的粗产物无需进一步纯化就用于下一步骤。

GC-MS (方法5): R_t = 3.36 min；MS (ESIpos): m/z = 116 (M+H)⁺。

实施例8A

(2E/Z)-氰基(吗啉3-亚基)乙酸叔丁酯

回流下将0.48 g (4.17毫摩尔) 5-甲氧基-3,6-二氢-2H-1,4-嗪(实施例7A)和0.61 g (4.34毫摩尔)氰基乙酸叔丁酯在THF (25 ml)中的混合物搅拌12 h。然后让混合物冷却到室温，减压下浓缩。通过快速色谱(硅胶, 洗脱液环己烷/乙酸乙酯3:1)纯化残留物，得到标题化合物，为白色固体(0.269 g, 理论值的27%)。

LC-MS (方法2): R_t = 0.99 min；MS (ESIpos): m/z = 225 (M+H)⁺

¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d₆): δ = 10.02 (br. s, 1H), 4.47 (s, 2H), 3.84 (t, 2H), 3.37 (m, 2H), 1.44 (s, 9H) ppm。

制备实施例：

实施例1

N-{2-[3,5-二氰基-2-(二氟甲基)-6-甲基-1,4-二氢吡啶-4-基]呋喃并[3,2-c]吡啶-4-基}-苯甲酰胺

回流下将200 mg (0.604毫摩尔) N-{2-(2-氰基-3-氧代丁-1-烯-1-基)呋喃并[3,2-c]吡啶-4-基}苯甲酰胺(实施例4A)和285 mg (2.41毫摩尔) 3-氨基-4,4-二氟丁-2-烯腈[可通过乙腈与2,2-二氟乙腈的Thorpe反应获得，参照Org. React.15, 1 (1967), 同前， 31, 1 (1984)]在2-丙醇(1 ml)中混合物搅拌12 h。冷却后减压下浓缩混合物，通过制备型RP-HPLC (乙腈/水+ 0.1% TFA梯度, 最终混合物90:10 v/v)直接纯化残留物，得到176 mg (理论值的67%)外消旋标题化合物。

LC-MS (方法2): R_t = 0.97 min；MS (ESIpos): m/z = 432 (M+H)⁺

¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d₆): δ = 11.40 (br. s, 1H), 10.37 (s, 1H), 8.36 (d, 1H), 8.08 (m, 2H), 7.72 (m, 1H), 7.67 (m, 1H), 7.57 (m, 2H), 7.12 (s, 1H), 6.87 (t, 1H, ²J_H,F = 51.8 Hz), 5.24 (s, 1H), 2.15 (s, 3H) ppm。

实施例2

N-{2-[3,5-二氰基-2-(4-氟苯基)-6-甲基-1,4-二氢吡啶-4-基]呋喃并[3,2-c]吡啶-4-基}-苯甲酰胺

在110℃将200 mg (0.604毫摩尔) N-{2-(2-氰基-3-氧代丁-1-烯-1-基)呋喃并[3,2-c]吡啶-4-基}苯甲酰胺(实施例4A)和117 mg (0.724毫摩尔) 3-氨基-3-(4-氟苯基)丙-2-烯腈(实施例5A)在乙酸(2 ml)中的混合物搅拌30 min。冷却后，减压下浓缩混合物，通过制备型RP-HPLC (乙腈/水+ 0.1% TFA梯度, 最终混合物90:10 v/v)直接纯化残留物，得到235 mg (理论值的82%)外消旋标题化合物。

LC-MS (方法4): R_t = 0.99 min；MS (ESIpos): m/z = 476 (M+H)⁺

¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d₆): δ = 11.32 (br. s, 1H), 10.02 (s, 1H), 8.35 (d, 1H), 8.09 (m, 2H), 7.73-7.62 (m, 4H), 7.57 (m, 2H), 7.45-7.35 (m, 2H), 7.08 (s, 1H), 5.16 (s, 1H), 2.15 (s, 3H) ppm。

实施例3

N-{2-[3,5-二氰基-2-(4-氯苯基)-6-甲基-1,4-二氢吡啶-4-基]呋喃并[3,2-c]吡啶-4-基}-苯甲酰胺

在110℃将200 mg (0.604毫摩尔) N-{2-(2-氰基-3-氧代丁-1-烯-1-基)呋喃并[3,2-c]吡啶-4-基}苯甲酰胺(实施例4A)和129 mg (0.724毫摩尔) 3-氨基-3-(4-氯苯基)丙-2-烯腈(实施例6A)在乙酸(2 ml)中的混合物搅拌30 min。冷却后减压下浓缩混合物，通过制备型RP-HPLC (乙腈/水+ 0.1% TFA梯度, 最终混合物90:10 v/v)直接纯化残留物，得到197 mg (理论值的64%)外消旋标题化合物。

LC-MS (方法4): R_t = 1.04 min；MS (ESIpos): m/z = 492 (M+H)⁺

¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d₆): δ = 11.29 (br. s, 1H), 10.04 (s, 1H), 8.35 (d, 1H), 8.09 (m, 2H), 7.73-7.61 (m, 6H), 7.57 (m, 2H), 7.06 (s, 1H), 5.16 (s, 1H), 2.15 (s, 3H) ppm。

实施例4

N-[2-(3,5-二氰基-2,6-二甲基-1,4-二氢吡啶-4-基)呋喃并[3,2-c]吡啶-4-基]苯甲酰胺

在110℃将69 mg (0.260毫摩尔) N-(2-甲酰基呋喃并[3,2-c]吡啶-4-基)苯甲酰胺(实施例3A)和43 mg (0.52毫摩尔) (2Z)-3-氨基丁-2-烯腈在乙酸(4.5 ml)中的混合物搅拌45 min。冷却后减压下浓缩反应混合物。用乙酸乙酯和饱和碳酸钠水溶液处理残留物。将有机层分离，用盐水和水洗涤，经硫酸钠干燥，减压下浓缩，得到标题化合物(45 mg, 理论值的43%)，为淡黄色固体。

LC-MS (方法4): R_t = 0.84 min；MS (ESIpos): m/z = 396 (M+H)⁺

¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d₆): δ = 11.05 (s, 1H), 9.74 (s, 1H), 8.30 (d, 1H), 8.09 (m, 2H), 7.65-7.50 (m, 4H), 6.80 (s, 1H), 4.94 (s, 1H), 2.07 (s, 6H) ppm。

实施例5

4-(4-氨基呋喃并[3,2-c]吡啶-2-基)-2,6-二甲基-1,4-二氢吡啶-3,5-二腈

在100℃将43 mg (0.11毫摩尔) N-[2-(3,5-二氰基-2,6-二甲基-1,4-二氢吡啶-4-基)-呋喃并[3,2-c]吡啶-4-基]苯甲酰胺(实施例4)的乙酸(3 ml)溶液用0.2 ml盐酸(37%)处理，并搅拌24 h。然后再加入0.2 ml盐酸(37%)，在100℃继续搅拌48 h。冷却后加入饱和碳酸钠水溶液，直到达到中性pH。用乙酸乙酯萃取混合物，将有机层用盐水和水洗涤，经硫酸钠干燥，减压下浓缩。通过制备型薄层色谱(二氧化硅，洗脱液二氯甲烷/甲醇10:1 v/v)纯化粗产物，得到标题化合物(5.6 mg, 理论值的18%)，为白色固体。

LC-MS (方法4): R_t = 0.54 min；MS (ESIpos): m/z = 292 (M+H)⁺

¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d₆): δ = 9.68 (s, 1H), 7.77 (d, 1H), 6.88 (s, 1H), 6.79 (d, 1H), 6.48 (s, 2H), 4.81 (s, 1H), 2.06 (s, 6H) ppm。

实施例6

4-(4-氨基呋喃并[3,2-c]吡啶-2-基)-2-(二氟甲基)-6-甲基-1,4-二氢吡啶-3,5-二腈

自176 mg (0.41毫摩尔) N-{2-[3,5-二氰基-2-(二氟甲基)-6-甲基-1,4-二氢吡啶-4-基]呋喃并[3,2-c]吡啶-4-基}苯甲酰胺(实施例1)按照实施例5所述程序制备标题化合物，通过RP-HPLC (甲醇/水+ 0.1% TFA梯度，最终混合物100%甲醇)纯化后得到22 mg (理论值的16%)外消旋产物。

LC-MS (方法4): R_t = 0.56 min；MS (ESIpos): m/z = 328 (M+H)⁺

¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d₆): δ = 10.28 (s, 1H), 7.79 (d, 1H), 6.97 (s, 1H), 6.86 (t, 1H, ²J_H,F = 51.84 Hz), 6.81 (d, 1H), 6.54 (br. s, 2H), 5.06 (s, 1H), 2.13 (s, 3H) ppm。

实施例7

N-{2-[3,5-二氰基-2-甲基-6-(三氟甲基)-1,4-二氢吡啶-4-基]呋喃并[3,2-c]吡啶-4-基}-苯甲酰胺

回流下将200 mg (0.604毫摩尔) N-{2-(2-氰基-3-氧代丁-1-烯-1-基)呋喃并[3,2-c]吡啶-4-基}-苯甲酰胺(实施例4A)和329 mg (2.41毫摩尔) (2E)-3-氨基-4,4,4-三氟丁-2-烯腈[CAS注册号33561-24-9；按照A.W. Lutz, 美国专利号3,635,977和亦 C.G. Krespan, J. Org. Chem.34, 42-45 (1969)制备]在2-丙醇(1 ml)中的混合物搅拌12 h。冷却后减压下浓缩混合物，通过制备型RP-HPLC (乙腈/水+ 0.1% TFA梯度, 最终混合物90:10 v/v)直接纯化残留物，得到171 mg (理论值的63%)外消旋标题化合物。

LC-MS (方法4): R_t = 0.95 min；MS (ESIpos): m/z = 450 (M+H)⁺

¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d₆): δ = 11.29 (br. s, 1H), 10.59 (s, 1H), 8.36 (d, 1H), 8.09 (m, 2H), 7.72-7.62 (m, 2H), 7.57 (m, 2H), 7.09 (s, 1H), 5.31 (s, 1H), 2.17 (s, 3H) ppm。

实施例8

4-(4-氨基呋喃并[3,2-c]吡啶-2-基)-2-甲基-6-(三氟甲基)-1,4-二氢吡啶-3,5-二腈

自140 mg (0.31毫摩尔) N-{2-[3,5-二氰基-2-甲基-6-(三氟-甲基)-1,4-二氢吡啶-4-基]呋喃并[3,2-c]吡啶-4-基}苯甲酰胺(实施例7)按照实施例5所述程序制备标题化合物，通过RP-HPLC (甲醇/水+ 0.1% TFA梯度, 最终混合物100%甲醇)纯化后得到29 mg (理论值的27%)外消旋产物。

LC-MS (方法4): R_t = 0.62 min；MS (ESIpos): m/z = 346 (M+H)⁺

¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d₆): δ = 10.64 (br. s, 1H), 7.80 (d, 1H), 7.02 (s, 1H), 6.84 (d, 1H), 6.64 (br. s, 2H), 5.15 (s, 1H), 2.15 (s, 3H) ppm。

实施例9

4-(4-氨基呋喃并[3,2-c]吡啶-2-基)-2-(4-氟苯基)-6-甲基-1,4-二氢吡啶-3,5-二腈

自235 mg (0.494毫摩尔) N-{2-[3,5-二氰基-2-(4-氟-苯基)-6-甲基-1,4-二氢吡啶-4-基]呋喃并[3,2-c]吡啶-4-基}苯甲酰胺(实施例2)按照实施例5所述程序制备标题化合物，通过RP-HPLC (甲醇/水+ 0.1% TFA梯度, 最终混合物100%甲醇)纯化后得到52.4 mg (理论值的28%)外消旋产物。

LC-MS (方法4): R_t = 0.69 min；MS (ESIpos): m/z = 372 (M+H)⁺

¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d₆): δ = 9.96 (s, 1H), 7.79 (d, 1H), 7.65 (m, 2H), 7.40 (m, 2H), 7.01 (s, 1H), 6.86 (d, 1H), 6.66 (br. s, 2H), 4.98 (s, 1H), 2.13 (s, 3H) ppm。

实施例10

4-(4-氨基呋喃并[3,2-c]吡啶-2-基)-2-(4-氯苯基)-6-甲基-1,4-二氢吡啶-3,5-二腈

自197 mg (0.40毫摩尔) N-{2-[3,5-二氰基-2-(4-氯-苯基)-6-甲基-1,4-二氢吡啶-4-基]呋喃并[3,2-c]吡啶-4-基}苯甲酰胺(实施例3)按照实施例5所述程序制备标题化合物，通过RP-HPLC (甲醇/水+ 0.1% TFA梯度, 最终混合物100%甲醇)纯化后得到47 mg (理论值的30%)外消旋产物。

LC-MS (方法4): R_t = 0.75 min；MS (ESIpos): m/z = 388 (M+H)⁺

¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d₆): δ = 10.09 (s, 1H), 8.51 (br. s, 2H), 7.89 (d, 1H), 7.64 (m, 4H), 7.35 (d, 1H), 7.33 (s, 1H), 5.20 (s, 1H), 2.15 (s, 3H) ppm。

实施例11

N-{2-[3,5-二氰基-2,6-双(二氟甲基)-1,4-二氢吡啶-4-基]呋喃并[3,2-c]吡啶-4-基}苯甲酰胺

将200 mg (0.75毫摩尔) N-(2-甲酰基呋喃并[3,2-c]吡啶-4-基)苯甲酰胺(实施例3A)的乙酸(1.3 ml)溶液用200 mg (1.69毫摩尔) 3-氨基-4,4-二氟丁-2-烯腈[可通过乙腈与2,2-二氟乙腈的Thorpe反应获得，参照Org. React.15, 1 (1967), 同前，31, 1 (1984)]的1-丁醇(1.0 ml)溶液处理。将混合物加热到回流温度达2 h。冷却后减压下浓缩反应混合物，用乙酸乙酯和饱和碳酸氢钠水溶液处理残留物。将有机层分离，用盐水和水洗涤，经硫酸钠干燥，减压下浓缩。通过制备型RP-HPLC (甲醇/水+ 0.1% TFA梯度, 最终混合物100%甲醇)纯化残留物，产生28 mg (理论值的8%)标题化合物。

LC-MS (方法4): R_t = 0.94 min；MS (ESIpos): m/z = 468 (M+H)⁺

¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d₆): δ = 11.29 (br. s, 1H), 11.02 (br. s, 1H), 8.36 (d, 1H), 8.09 (m, 2H), 7.67 (m, 2H), 7.56 (m, 2H), 7.11 (s, 1H), 6.89 (t, 2H), 5.43 (s, 1H) ppm。

实施例12

N-[2-(7,9-二氰基-6-甲基-1,3,4,8-四氢吡啶并[2,1-c][1,4]嗪-8-基)呋喃并[3,2-c]吡啶-4-基]苯甲酰胺

将162 mg (0.724毫摩尔) (2E/Z)-氰基(吗啉3-亚基)乙酸叔丁酯(实施例8A)在6 M盐酸(21 ml)中的混合物加热到100℃达1 h。冷却到室温后，减压下浓缩溶液，让残留的固体溶解于乙酸(4 ml)中。加入200 mg (0.604毫摩尔) N-{2-(2-氰基-3-氧代丁-1-烯-1-基)-呋喃并[3,2-c]-吡啶-4-基}苯甲酰胺(实施例4A)，在100℃将混合物搅拌0.5 h。冷却后减压下浓缩反应混合物，用乙酸乙酯和饱和碳酸氢钠水溶液处理残留物。将有机层分离，用盐水和水洗涤，经硫酸钠干燥，减压下浓缩。通过制备型RP-HPLC (甲醇/水+ 0.1% TFA梯度, 最终混合物100%甲醇)纯化残留物，产生161 mg (理论值的58%)外消旋标题化合物。

LC-MS (方法4): R_t = 0.87 min；MS (ESIpos): m/z = 438 (M+H)⁺

¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d₆): δ = 11.30 (br. s, 1H), 8.34 (d, 1H), 7.66 (m, 2H), 7.57 (m, 2H), 7.00 (s, 1H), 5.07 (s, 1H), 4.63-4.51 (m, 2H), 4.0-3.6 (m, 4H), 2.28 (s, 3H) ppm。

实施例13

N-[2-(5-氰基-3,6-二甲基-4,7-二氢[1,2]唑并[5,4-b]吡啶-4-基)呋喃并[3,2-c]吡啶-4-基]苯甲酰胺

在90℃让200 mg (0.604毫摩尔) N-{2-(2-氰基-3-氧代丁-1-烯-1-基)呋喃并[3,2-c]吡啶-4-基}苯甲酰胺(实施例4A)、59 mg (0.604毫摩尔) 3-甲基-1,2-唑-5-胺和痕量粉末状4?分子筛在2-丙醇(2 ml)中的混合物搅拌12 h。冷却后减压下浓缩混合物，通过制备型RP-HPLC (甲醇/水+ 0.1% TFA梯度, 最终混合物100%甲醇)直接纯化残留物，得到64 mg (理论值的26%)外消旋标题化合物。

LC-MS (方法3): R_t = 1.68 min；MS (ESIpos): m/z = 412 (M+H)⁺

¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d₆): δ = 11.3 (br. s, 1H), 11.1 (s, 1H), 8.31 (d, 1H), 8.08 (m, 2H), 7.66 (m, 2H), 7.56 (m, 2H), 6.96 (s, 1H), 5.41 (s, 1H), 2.18 (s, 3H), 1.97 (s, 3H) ppm。

实施例14

N-[2-(3-氰基-2-甲基-5-氧代-1,4,5,7-四氢呋喃并[3,4-b]吡啶-4-基)呋喃并[3,2-c]吡啶-4-基]苯甲酰胺

在90℃将200 mg (0.75毫摩尔) N-(2-甲酰基呋喃并[3,2-c]吡啶-4-基)苯甲酰胺(实施例3A)、85 mg (1.033毫摩尔) 3-氨基丁-2-烯腈和177 mg (0.939毫摩尔) 4-(乙酰氧基)-3-氧代丁酸乙酯[Tetrahedron 1978, 34, 1453-1455]的1-丙醇(4 ml)溶液搅拌12 h。然后加入浓盐酸(185 μl)和水(560 μl)，在100℃继续搅拌20 min。冷却后减压下浓缩反应混合物，用乙酸乙酯和饱和碳酸氢钠水溶液处理残留物。将有机层分离，用盐水和水洗涤，经硫酸钠干燥，减压下浓缩。通过制备型RP-HPLC (甲醇/水+ 0.1% TFA梯度, 最终混合物100%甲醇)纯化残留物，产生96 mg (理论值的31%)外消旋标题化合物。

LC-MS (方法4): R_t = 0.74 min；MS (ESIpos): m/z = 413 (M+H)⁺

¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d₆): δ = 11.02 (br. s, 1H), 10.37 (br. s, 1H), 8.28 (d, 1H), 8.08 (m, 2H), 7.63 (m, 1H), 7.54 (m, 3H), 6.75 (s, 1H), 5.05-4.85 (m, 3H), 2.15 (s, 3H) ppm。

实施例15

N-{2-[3-氰基-2-(4-氟苯基)-5-氧代-1,4,5,7-四氢呋喃并[3,4-b]吡啶-4-基]呋喃并[3,2-c]吡啶-4-基}苯甲酰胺

自200 mg (0.75毫摩尔) N-(2-甲酰基呋喃并[3,2-c]吡啶-4-基)-苯甲酰胺(实施例3A)、167 mg (1.033毫摩尔) 3-氨基-3-(4-氟苯基)丙-2-烯腈(实施例5A)和177 mg (0.939毫摩尔) 4-(乙酰氧基)-3-氧代丁酸乙酯[Tetrahedron 1978, 34, 1453-1455]按照实施例14所述程序制备标题化合物，通过RP-HPLC (甲醇/水+ 0.1% TFA梯度, 最终混合物100%甲醇)纯化后得到193 mg (理论值的52%)外消旋产物。

LC-MS (方法4): R_t = 0.89 min；MS (ESIpos): m/z = 493 (M+H)⁺

¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d₆): δ = 11.33 (br. s, 1H), 10.33 (br. s, 1H), 8.33 (d, 1H), 8.09 (m, 2H), 7.73-7.62 (m, 4H), 7.57 (m, 2H), 7.42 (m, 2H), 7.04 (s, 1H), 5.23 (s, 1H), 5.04-4.92 (m, 2H) ppm。

实施例16

N-{2-[3-氰基-2-(4-氯苯基)-5-氧代-1,4,5,7-四氢呋喃并[3,4-b]吡啶-4-基]呋喃并[3,2-c]吡啶-4-基}苯甲酰胺

自200 mg (0.75毫摩尔) N-(2-甲酰基呋喃并[3,2-c]吡啶-4-基)-苯甲酰胺(实施例3A)、184 mg (1.033毫摩尔) 3-氨基-3-(4-氯苯基)丙-2-烯腈(实施例6A)和177 mg (0.939毫摩尔) 4-(乙酰氧基)-3-氧代丁酸乙酯[Tetrahedron 1978, 34, 1453-1455]按照实施例14所述程序制备标题化合物，通过RP-HPLC (甲醇/水+ 0.1% TFA梯度, 最终混合物100%甲醇)纯化后得到124 mg (理论值的29%)外消旋产物。

LC-MS (方法2): R_t = 1.04 min；MS (ESIpos): m/z = 509 (M+H)⁺

¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d₆): δ = 11.33 (br. s, 1H), 10.66 (s, 1H), 8.33 (d, 1H), 8.08 (m, 2H), 7.70-7.62 (m, 6H), 7.57 (m, 2H), 7.04 (s, 1H), 5.24 (s, 1H), 5.04-4.92 (m, 2H) ppm.

实施例17

N-[2-(3,5-二氰基-1,2,6-三甲基-1,4-二氢吡啶-4-基)呋喃并[3,2-c]吡啶-4-基]苯甲酰胺

让100 mg (0.253毫摩尔) N-[2-(3,5-二氰基-2,6-二甲基-1,4-二氢吡啶-4-基)呋喃并[3,2-c]吡啶-4-基]苯甲酰胺(实施例4)的DMF (1.4 ml)溶液冷却到0℃，在该温度加入99 mg (0.30毫摩尔)碳酸铯。搅拌30 min后，于室温逐滴加入19 μl (0.30毫摩尔)碘甲烷，在室温过夜搅拌混合物。此后再加入碘甲烷(20 μl)，室温继续再搅拌48 h。然后让反应混合物过滤，通过制备型RP-HPLC (乙腈/水+ 0.1% TFA, 等度洗脱40:60 v/v)直接纯化滤液，得到5.6 mg (理论值的5%)标题化合物。

LC-MS (方法4): R_t = 0.72 min；MS (ESIpos): m/z = 410 (M+H)⁺

¹H-NMR (400 MHz,乙腈-d₃): δ = 8.24 (m, 1H), 8.15 (m, 2H), 8.04 (br. s, 1H), 7.66 (m, 1H), 7.56 (m, 3H), 7.04 (s, 1H), 4.81 (s, 1H), 4.13 (s, 3H), 2.09 (s, 6H) ppm。

自相应苯甲酰胺(分别为实施例11、12、14和16)以与实施例5中所述程序类似的方法制备以下化合物；通过制备型RP-HPLC用乙腈/水+ 0.1% TFA梯度实施纯化。

B.生物学活性评估

可通过本领域熟知的体外、离体和体内测定来完成本发明化合物的活性显示。例如，为显示本发明化合物的活性，可利用以下测定。

c-Met受体酪氨酸激酶活性测定(NADH读出)：

使用重组人c-Met蛋白(Invitrogen, Carlsbad, California, USA)。使用肽KKKSPGEYVNIEFG (JPT, Germany)作为激酶反应的底物。为了测定，将1 μL测试化合物在DMSO中的51倍浓缩溶液吸到白色384-孔微量滴定板(Greiner Bio-one, Frickenhausen, Germany)。加入25 μL的c-Met (最终浓度30 nM)和丙酮酸激酶/乳酸脱氢酶(Roche Diagnostics, Mannheim, Germany；最终浓度8 mg/L)在测定缓冲液[3-(N-吗啉代)丙磺酸(MOPS), 50 mM, pH 7；MgCl₂, 10 mM；牛血清白蛋白(BSA), 0.01%；Triton X 100, 0.01%；DTT, 2 mM]中的溶液，让混合物在室温孵育5 min。然后通过加入25 μL三磷酸腺苷(ATP, 最终浓度30 μM)、底物(最终浓度100 μM)、烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NADH, 最终浓度50 μM)和二流苏糖醇(DTT, 最终浓度2 mM)在测定缓冲液中的溶液，来开始激酶反应，让得到的混合物在32℃孵育100 min反应时间。

随后，通过测量NADH荧光的降低来评估磷酸化底物的量。因此，在荧光读数器例如Tecan Ultra (Tecan, M?nnedorf, Switzerland)中测量340 nm激发后在465 nm处的荧光发射。将数据标准化(无抑制剂的酶反应= 0%抑制；没有酶但有所有其它测定组分= 100%抑制)。通常在同一个微量滴定板中以介于10 μM-1 nM (10 μM、3.1 μM、1.0 μM、0.3 μM、0.1 μM、0.03 μM、0.01 μM、0.003 μM、0.001 μM；以51倍浓缩储液的水平通过1:3系列稀释在测定前制备稀释系列)的9个不同浓度、每个浓度一式二份测定测试化合物，用内部软件计算IC₅₀值。

本发明化合物当在本测定中试验时，显示以小于10 μM、优选小于1 μM的IC₅₀值抑制c-Met酪氨酸激酶活性的能力。

一些代表性的IC₅₀值列入下表中：

c-Met受体酪氨酸激酶均相时间分辨荧光测定(备选形式)：

使用在昆虫细胞(SF21)中表达和通过Ni-NTA亲和色谱和连续大小排阻色谱(Superdex 200)纯化的人c-Met (氨基酸960–1390) N-末端His6-标记的重组激酶结构域。或者，可使用市购c-Met (Millipore)。使用生物素化的聚Glu,Tyr (4:1)共聚物(# 61GT0BLC, Cis Biointernational, Marcoule, France)作为激酶反应的底物。

为了测定，将50 nL的测试化合物在DMSO中的100倍浓缩溶液吸入到黑色低体积384-孔微量滴定板(Greiner Bio-one, Frickenhausen, Germany)。加入2 μL的c-Met在测定缓冲液[25 mM Hepes/NaOH, pH 7.5；5 mM MgCl₂；5 mM MnCl₂；2 mM二硫苏糖醇；0.1% (v/v) Tween 20 (Sigma)；0.1% (w/v)牛血清白蛋白]中的溶液，让混合物在22℃孵育15 min，以在开始激酶反应前让测试化合物与酶预结合。然后通过加入3 μL三磷酸腺苷(ATP, 16.7 μM；在5 μL测定体积中的最终浓度为10 μM)和底物(2.27 μg/mL, 在5 μL测定体积中的最终浓度为1.36 μg/mL，约 30 nM)在测定缓冲液中的溶液来开始激酶反应，让得到的混合物在22℃孵育30 min反应时间。视酶批次的活性调整测定中的c-Met浓度，其适当地选择以使测定在线性范围内；典型的酶浓度在约0.03 nM (在5 μL测定体积中的最终浓度)的范围内。通过加入5 μL HTRF检测试剂[40 nM链霉亲和素-XLent和2.4 nM PT66-Eu-螯合物，铕螯合物标记的抗磷酸酪氨酸抗体(Perkin-Elmer)]在EDTA水溶液[100 mM EDTA、0.2% (w/v)牛血清白蛋白，在50 mM HEPES/NaOH, pH 7.5中]中的溶液，来终止反应。

让得到的混合物在22℃孵育1 h，以使生物素化的磷酸化肽与链霉亲和素-XLent和PT66-Eu-螯合物结合。随后通过测量从PT66-Eu-螯合物到链霉亲和素-XLent的共振能量转移来评估磷酸化的底物的量。因此，在HTRF读数器例如Rubystar (BMG Labtechnologies, Offenburg, Germany)或Viewlux (Perkin-Elmer)中测量在350 nm激发后于620 nm和665 nm处的荧光发射。将665 nm和622 nm的发射比率当作磷酸化底物的量的衡量。将数据标准化(无抑制剂的酶反应= 0%抑制；没有酶但有所有其它测定组分= 100%抑制)。通常在同一个微量滴定板中以介于20 μM-1 nM (20 μM、6.7 μM、2.2 μM、0.74 μM、0.25 μM、82 nM、27 nM、9.2 nM、3.1 nM和1 nM；以100倍浓缩储液水平通过1:3系列稀释在测定前制备稀释系列)的10个不同浓度、每个浓度一式二份测定测试化合物，用内部软件通过4参数拟合计算IC₅₀值。

本发明化合物当在本测定中试验时，显示以小于10 μM、优选小于1 μM的IC₅₀值抑制c-Met酪氨酸激酶活性的能力。

一些代表性的IC₅₀值列入下表中：

磷酸化-c-Met测定(Phospho-c-Met assay)：

这是在无生长因子刺激下使用MKN-45肿瘤细胞(胃癌，购自ATCC)的基于细胞的ELISA样测定[Meso Scale Discovery (MSD), Gaithersburg, MD, USA]。让细胞在完全生长培养基(10 000个细胞/孔)中在第一天铺板在96-孔板上。第二天在无血清培养基中药物处理2小时后，洗涤细胞，然后裂解(60 μl/孔，用MSD推荐的裂解缓冲液)，在-80℃冷冻。同样在第2天，用MSD封闭溶液A于4℃在MSD磷酸化-Met板上过夜封闭非特异性抗体结合位点。第3天，在冰上融化冷冻的裂解物，用Tris-缓冲的盐水 + 0.05% Tween 20 (TBST)洗涤一次后将25 μl裂解物转移到MSD磷酸化-Met板上振荡1小时。移走未结合的蛋白质后，以抗体稀释缓冲液(按照MSD方案)中的5 nM最终浓度将来自MSD的Sulfa-TAG抗Met抗体加入到板中振荡1小时。然后用TBST缓冲液洗涤板三次，再加入1x MSD读取缓冲液。然后在MSD Discovery Workstation设备上读取板。将包括含10 μM参考化合物的孔(最小信号)和无任何药物处理的DMSO孔(最大信号)在内的原始数据输入到Analyze 5程序中用于确定IC₅₀值。

细胞磷酸化-c-Met测定：

让接种在384-孔微量滴定板(9000个细胞/孔)的人胃腺癌细胞(MKN45, 购自ATCC)在25 μl完全生长培养基中于37℃、5% CO₂孵育24 h。第2天，在含有0.1% FCS的血清降低的培养基中药物处理2小时后，洗涤并裂解细胞。用Tris-缓冲的盐水 + 0.05% Tween 20 (TBST)洗涤一次后，将裂解物转移到含预结合的c-Met捕获抗体[购自Mesoscale Discovery (MSD), Gaithersburg, MD, USA]的BSA封闭的板中振荡1小时。遵照MSD方案，以抗体稀释缓冲液中5 nM的最终浓度将 Sulfa-TAG抗磷酸化-c-Met检测抗体加入到板中室温振荡1小时。用Tris缓冲液洗涤孔后，加入1x读取缓冲液，在Sector Imager 6000 (购自Mesoscale)上测量板。用Marquardt-Levenberg拟合从剂量反应曲线计算IC₅₀值。

体外肿瘤细胞增殖测定：

用于测试本发明化合物的粘附肿瘤细胞增殖测定涉及由Promega开发的称为Cell Titre-Glo的读取[B.A. Cunningham, " A Growing Issue: Cell Proliferation Assays. Modern kits ease quantification of cell growth (生长问题：细胞增殖测定。现代试剂盒使定量测定细胞生长容易)", The Scientist 2001, 15 (13), 26；S.P. Crouch等，" The use of ATP bioluminescence as a measure of cell proliferation and cytotoxicity (利用ATP生物发光作为细胞增殖和细胞毒性的测量)", Journal of Immunological Methods 1993, 160, 81-88]。发光信号的产生对应于存在的ATP量，所述量与代谢活性(增殖)细胞的数目成正比。

将H460细胞(肺癌，购自ATCC)在含10%胎牛血清的完全培养基中以3000个细胞/孔铺板在96-孔板上，于37℃孵育24小时。铺板后24小时，在最终0.2% DMSO浓度的系列稀释液中以10 nM-20 μM的最终浓度范围加入测试化合物。加入测试化合物后让细胞于37℃在完全生长培养基孵育72小时。在第4天，用Promega Cell Titre-Glo Luminescent^?测定试剂盒裂解细胞，将100 μl底物/缓冲液混合物加入到各孔中，混合，室温孵育8分钟。在光度计上读取样品以测量来自各孔的细胞裂解液中存在的ATP的量，所述量与该孔中活细胞数目对应。24小时孵育时读取的值作为第0天减去。为了测定IC₅₀值，可利用线性回归分析来测定用该测定方式产生细胞增殖的50%抑制的药物浓度。可将本方案施用到不同目的细胞系，所述细胞系包括但不限于CAKI-1、MNK-45、GTL-16、HCC2998、K562、H441、K812、MEG01、SUP15和HCT116。

尽管已参考具体实施方案揭示了本发明，但显然本领域其他技术人员可想出本发明其它实施方案和变化，而不背离本发明的真实精神和范围。随附权利要求意欲理解为包括所有这类实施方案和等同变化。

C.与药物组合物有关的实施例

可如下阐明本发明药物组合物：

无菌静脉注射溶液:

可用无菌注射用水制备所期需的本发明化合物的5 mg/ml溶液，若需要的话则调整pH。为了以1-2 mg/ml给予，用无菌5%葡萄糖稀释所述溶液，将该溶液作为静脉输注液在约60分钟内给予。

用于静脉注射给药的冻干粉：

可用以下物质制备无菌制剂：(i) 100－1000 mg所期需的本发明化合物作为冻干粉、(ii) 32－327 mg/ml柠檬酸钠和(iii) 300－3000 mg右旋糖酐40。用无菌注射用盐水或5%葡萄糖将制剂重构至10-20 mg/ml浓度，其可用盐水或5%葡萄糖进一步稀释至0.2-0.4 mg/ml，作为静脉推注或通过静脉输注在15－60分钟内给予。

肌肉内混悬液：

可制备以下溶液或混悬液用于肌肉内注射：

50 mg/ml所期需的水不溶的本发明化合物；5 mg/ml羧甲基纤维素钠；4 mg/mL TWEEN 80；9 mg/ml氯化钠；9 mg/ml苯甲醇。

硬壳胶囊剂：

通过向标准两件套硬明胶胶囊(galantine capsule)各自填入100 mg粉状活性成分、150 mg乳糖、50 mg纤维素和6 mg硬脂酸镁，来制备大量单位胶囊剂。

软明胶胶囊剂：

制备活性成分在可消化油例如大豆油、棉籽油或橄榄油中的混合物，并借助容积式泵注射到融化的明胶中，形成含有100 mg活性成分的软明胶胶囊剂。洗涤胶囊并干燥。可让活性成分溶解于聚乙二醇、甘油和山梨糖醇的混合物中，以制备水混溶的药物混合物。

片剂：

通过常规程序制备大量片剂，以使剂量单位为100 mg活性成分、0.2 mg胶态二氧化硅、5 mg硬脂酸镁、275 mg微晶纤维素、11 mg淀粉和98.8 mg乳糖。可施加合适的水性和非水性包衣以增加适口性、改善优雅性和稳定性或延迟吸收。