一种防治烟草漂浮育苗大田种植期烟草花叶病发生的方法

摘要

本发明公开了一种防治烟草漂浮育苗大田种植期烟草花叶病发生的方法，包括移栽前7天对烟苗携带TMV情况检测，去除带毒率超过5%的烟苗；移栽前1~2天给烟苗喷施（体积比）0.5~5%的有机抗病毒剂1次，喷施量为每百平方米育苗盘60~120kg；移栽前，对种植地烟塘内施入有机抗病毒剂，施药量0.5~1.0kg/亩；对烟苗进行分拣，剔除弱苗，然后烟苗移栽；移栽后每6~7天给烟苗喷施（体积比）0.5~5%的有机抗病毒剂1次，喷施量15~40kg/亩，连续喷施3~4次。本发明结合烟草花叶病毒的传播特性，从育苗管理、种植地壤土处理到大田种植期管理各个不同阶段进行抗病毒处理，利用有机诱导抗病毒剂处理移栽到大田的烟苗，诱导烟苗的产生系统抗病性，保证烟草种植的安全性，达到预防TMV效果。

说明书

技术领域

    本发明属于烟草种植技术领域，进一步属于烟草漂浮育苗技术领域，具体涉及一种防治烟草漂浮育苗大田种植期烟草花叶病发生的方法。 

背景技术

烟草花叶病毒（TMV，Tobacco mosaic virus），是烟草花叶病等的病原体，属于烟草花叶病毒属（Tobamovirus）。TMV是一种大小为300 nm×18 nm的刚直杆状病毒，核酸为单分子正链RNA，RNA被两千多个结构稳定的蛋白质亚基包裹，其结构特性决定了TMV具有极高的稳定性。据报道，离体低温保存的TMV在数十年后仍然保持着侵染活性，在90℃条件下10min以上才能将病毒钝化。 

烟草是最容易感染TMV的茄科植物之一，目前，TMV引起的烟草花叶病在全世界范围内种烟地区广泛分布。感染TMV的烟草主要病症表现为：轻微花叶、重花叶、疱疹状花叶及黄化。苗期感染TMV会导致烟株矮化和畸形，大田期感染TMV的烟叶在发病后期被太阳照晒后容易产生坏死斑点。感染TMV的烟叶在烘烤后最突出的表现是叶片变薄、色泽变淡，即重量和质量都严重下降；内在品质分析结果表明：感染TMV的烟草叶片中全氮、全钾和蛋白质含量明显增加，而总糖、还原糖及施木克值显著下降。在早期发病严重的田块，TMV引起的产量和质量损失可高达90%以上。TMV寄主范围广。可侵染茄科、十字花科、葫芦科及豆科等36个科的400多种植物。所以，烟田中及烟田周边所采的植物样品均有可能成为TMV的初侵染源，另外，烟田中采集的土壤、周边的水源以及育苗盘和育苗基质若被感染，也可能成为侵染源。由于TMV稳定性极高、分布范围十分广泛、侵染范围十分广阔、传播途径多样化，造成了TMV的防控十分困难，加之病毒的分子变异及耐药性的产生，目前生产上使用和市场上销售的抗病毒制剂或药物的药效正在逐渐退化，只能在短期内预防TMV的感染和症状的蔓延，达不到有效控制花叶病的目的，花叶病一旦爆发，将无法从根本上减轻花叶病给烟草生产造成的损失。 

TMV主要以带毒汁液通过机械摩擦传染，田间通过病苗与健苗摩擦或农事操作造成的微伤口就足以让TMV进行再侵染。蝗虫、烟青虫等咀嚼式口器昆虫的迁飞也可造成TMV的普遍感染和传播。有研究表明在一些烟区，TMV的发生流行呈较快的上升趋势，优质烟生产区一些田块烟草花叶病毒病的发生率高达90%以上，花叶病已严重威胁到烤烟的安全生产，甚至引起一些烟农群体上访等社会性问题。 

烟苗移栽入田是烟草生产的一个关键步骤，烟苗根系离开苗床进入田地的过程中，由于需要将烟苗从苗床中人为地取出，这样就会给烟苗根系造成一定的损伤。烟苗移栽到大田的初期，烟苗根系的损伤、烟苗尚未完全成活，抗病能力弱以及植烟环境带毒的普遍性等多重因素的影响下，非常容易引起烟草花叶病毒的侵染、传播和扩散。因此，开发一种防治烟草漂浮育苗大田种植期烟草花叶病发生的方法，对于烟草安全生产非常必要。 

发明内容

本发明的目的在于提供一种防治烟草漂浮育苗大田种植期烟草花叶病发生的方法。 

本发明目的是这样实现的，包括移栽前烟苗病毒病检测、移栽苗处理、种植地处理和移栽后管理，具体为： 

A、在烟苗移栽前7天，对烟苗携带TMV情况进行检测，带毒率超过5%的育苗盘内烟苗弃之不用；

B、移栽苗处理：在烟苗移栽前1~2天给烟苗喷施（体积比）0.5~5%的有机抗病毒剂1次，喷施量为每百平方米育苗盘60~120Kg；

C、种植地处理：在烟苗移栽前，对种植地烟塘内土壤施入有机抗病毒剂，施药量为0.5~1.0 Kg/亩； 

D、烟苗移栽：对烟苗进行分拣，剔除弱苗，然后按技术规范进行烟苗移栽；

E、移栽后管理：烟苗移栽后每6~7天给烟苗喷施（体积比）0.5~5%的有机抗病毒剂1次，喷施量为15~40Kg/亩，连续喷施3~4次。

现有技术表明，有机诱导抗病剂可以使植物获得系统抗病性，是植物抵抗病原物侵染的一种生物特性。也就是说，植物被一些生物或非生物的刺激源（诱导物）诱导产生新的、广谱的系统抗性，从而对病原物侵染以及其他病菌的侵染均具有很强的抗性，该抗性水平可扩展到整个植株。多肽宝、AHO、分子量在500-1500的几丁聚糖、柴胡皂苷A或银杏内酯B属于有机诱导抗病剂，所述的多肽宝主要成分为青霉菌灭活菌丝体，能诱导植物产生系统抗病能力，须与烟株根部充分接触，通过根部吸心活性成份才能发挥作用，因此使用时要拌入基质中；所述的AHO为3-羟基-3丙酮基-吲哚酮(3-acetonyl-3-hydroxyoxindole)能刺激或诱导植物获得系统抗病性生物因子， AHO具有较强的抗TMV活性，经深入研究发现，该化合物不是直接作用于病毒而是诱导植物的防卫反应，而且这种诱导依赖于SA信号途径；分子量在500-1500的几丁聚糖，主要成分为（1,4）-2-氨基-2-脱氧-β-D-葡聚糖，能诱导植物产生系统抗病能力。柴胡皂苷A从伞行科柴胡属Bupleurum DC．植物的根中提取，银杏内酯B从银杏中提取。 

本发明结合烟草花叶病毒的传播特性，从育苗管理、种植地壤土处理到大田种植期管理各个不同阶段进行抗病毒处理，利用有机诱导抗病毒剂移栽到大田种植的烟苗对花叶病毒感染时机进行阻断，从而保证了烟草种植的安全性，达到了预防的技术效果。 

具体实施方式

下面对本发明作进一步的说明，但不以任何方式对本发明加以限制，基于本发明教导所作的任何变更或改进，均属于本发明的保护范围。 

本发明其特征在于包括移栽前烟苗病毒病检测、移栽苗处理、种植地处理和移栽后管理，具体为： 

A、在烟苗移栽前7天，对烟苗携带TMV情况进行检测，带毒率超过5%的育苗盘内烟苗弃之不用；

B、移栽苗处理：在烟苗移栽前1~2天给烟苗喷施（体积比）0.5~5%的有机抗病毒剂1次，喷施量为每百平方米育苗盘60~120Kg；

C、种植地处理：在烟苗移栽前，对种植地烟塘内施入有机抗病毒剂，施药量为0.5~1.0 Kg/亩； 

D、烟苗移栽：对烟苗进行分拣，剔除弱苗，然后按技术规范进行烟苗移栽；

E、移栽后管理：烟苗移栽后每6~7天给烟苗喷施（体积比）0.5~5%的有机抗病毒剂1次，喷施量为15~40Kg/亩，连续喷施3~4次。

作为优选实施方式： 

A步骤所述的检测TMV的方法是按五点法抽取烟苗总数的1~2%烟苗，采用酶联免疫吸附测定法对烟苗携带检测TMV情况进行检测。

D、E步骤所述的移栽和有机抗病毒剂喷施过程中，对手和工具进行消毒处理，所使用的消毒液为（重量比）5~20%的脱脂牛奶和（重量比）0.1~1%的Tween 20或（重量比）0.1~1.0%的次氯酸钠。 

所述的有机抗病毒剂为有机诱导抗病毒剂。 

B步骤所述的有机抗病毒剂为AHO或几丁聚糖；C步骤所述的有机抗病毒剂为多肽宝或AHO；E步骤所述的有机抗病毒剂为AHO、几丁聚糖、柴胡皂苷A或银杏内酯B；所述的几丁聚糖的分子量为500~1500。 

所述的有机抗病毒剂为水剂、乳剂、颗粒剂、可湿性粉剂、水分散粒剂。 

实施例1 

在烟苗移栽前7天，对烟苗按五点法抽取烟苗总数的1%烟苗，采用酶联免疫吸附测定法对烟苗携带检测TMV情况进行检测，带毒率超过5%的育苗盘内烟苗弃之不用。在烟苗移栽前1天给烟苗喷施1次（体积比）0.5%的AHO，喷施量为每百平方米育苗盘60Kg；在烟苗移栽前，对种植地烟塘内施入多肽宝，施药量为0.5Kg/亩；烟苗移栽前应对烟苗进行分拣，剔除弱苗，然后按技术规范进行烟苗移栽；烟苗移栽后每6天给烟苗喷施1次（体积比）0.5%的分子量为500~1500的几丁聚糖，喷施量为15Kg/亩，连续喷施3次。所述的移栽和有机抗病毒剂喷施过程中，对手和工具进行消毒处理，所使用的消毒液为（重量比）5%的脱脂牛奶和（重量比）0.1%的Tween 20。

实施例2 

在烟苗移栽前7天，对烟苗按五点法抽取烟苗总数的2%烟苗，采用酶联免疫吸附测定法对烟苗携带检测TMV情况进行检测，带毒率超过5%的育苗盘内烟苗弃之不用。在烟苗移栽前2天给烟苗喷施（体积比）5%的分子量为500~1500的几丁聚糖1次，喷施量为每百平方米育苗盘120Kg；在烟苗移栽前，对种植地烟塘内施入AHO，施药量为1.0 Kg/亩；烟苗移栽前应对烟苗进行分拣，剔除弱苗，然后按技术规范进行烟苗移栽；烟苗移栽后每7天给烟苗喷施1次（体积比）5%的柴胡皂苷A，喷施量为40Kg/亩，连续喷施4次。所述的移栽和有机抗病毒剂喷施过程中，对手和工具进行消毒处理，所使用的消毒液为（重量比）20%的脱脂牛奶和（重量比）1%的Tween 20。

实施例3 

在烟苗移栽前7天，对烟苗按五点法抽取烟苗总数的1%烟苗，采用酶联免疫吸附测定法对烟苗携带检测TMV情况进行检测，带毒率超过5%的育苗盘内烟苗弃之不用。在烟苗移栽前1天给烟苗喷施1次（体积比）1%的AHO，喷施量为每百平方米育苗盘70Kg；在烟苗移栽前，对种植地烟塘内施入多肽宝，施药量为0.7 Kg/亩；烟苗移栽前应对烟苗进行分拣，剔除弱苗，然后按技术规范进行烟苗移栽；烟苗移栽后每6天给烟苗喷施1次（体积比）1%的AHO，喷施量为30Kg/亩，连续喷施3次。所述的移栽和有机抗病毒剂喷施过程中，对手和工具进行消毒处理，所使用的消毒液为（重量比）15%的脱脂牛奶和（重量比）0.1%的次氯酸钠。

实施例4 

在烟苗移栽前7天，对烟苗按五点法抽取烟苗总数的2%烟苗，采用酶联免疫吸附测定法对烟苗携带检测TMV情况进行检测，带毒率超过5%的育苗盘内烟苗弃之不用。在烟苗移栽前2天给烟苗喷施（体积比）2%的分子量为500~1500的几丁聚糖1次，喷施量为每百平方米育苗盘80Kg；在烟苗移栽前，对种植地烟塘内施入AHO，施药量为0.8 Kg/亩；烟苗移栽前应对烟苗进行分拣，剔除弱苗，然后按技术规范进行烟苗移栽；烟苗移栽后每7天给烟苗喷施1次（体积比）2%的银杏内酯B，喷施量为25Kg/亩，连续喷施4次。所述的移栽和有机抗病毒剂喷施过程中，对手和工具进行消毒处理，所使用的消毒液为（重量比）10%的脱脂牛奶和（重量比）0.5%的次氯酸钠。

实施例5 

在烟苗移栽前7天，对烟苗按五点法抽取烟苗总数的1%烟苗，采用酶联免疫吸附测定法对烟苗携带检测TMV情况进行检测，带毒率超过5%的育苗盘内烟苗弃之不用。在烟苗移栽前1天给烟苗喷施1次（体积比）3%的AHO，喷施量为每百平方米育苗盘90Kg；在烟苗移栽前，对种植地烟塘内施入多肽宝，施药量为0.9Kg/亩；烟苗移栽前应对烟苗进行分拣，剔除弱苗，然后按技术规范进行烟苗移栽；烟苗移栽后每6天给烟苗喷施1次（体积比）3%的分子量为500~1500的几丁聚糖，喷施量为35Kg/亩，连续喷施3次。所述的移栽和有机抗病毒剂喷施过程中，对手和工具进行消毒处理，所使用的消毒液为（重量比）15%的脱脂牛奶和（重量比）0.5%的Tween 20。

实施例6 

在烟苗移栽前7天，对烟苗按五点法抽取烟苗总数的2%烟苗，采用酶联免疫吸附测定法对烟苗携带检测TMV情况进行检测，带毒率超过5%的育苗盘内烟苗弃之不用。在烟苗移栽前2天给烟苗喷施（体积比）4%的分子量为500~1500的几丁聚糖1次，喷施量为每百平方米育苗盘100Kg；在烟苗移栽前，对种植地烟塘内施入AHO，施药量为0.6Kg/亩；烟苗移栽前应对烟苗进行分拣，剔除弱苗，然后按技术规范进行烟苗移栽；烟苗移栽后每7天给烟苗喷施1次（体积比）4%的银杏内酯B，喷施量为33Kg/亩，连续喷施4次。所述的移栽和有机抗病毒剂喷施过程中，对手和工具进行消毒处理，所使用的消毒液为（重量比）15%的脱脂牛奶和（重量比）0.5%的次氯酸钠。

针对上述实施例进行的现场对比试验。 

试验时间：2010年7月至11月 

试验地点：云南省烟草公司昆明市公司试验站

试验品种：红花大金元

按照实施例1~6设置处理组1~6和常规方式移栽的对照组7。苗期取样及TMV病毒检测方法：在移栽当天对所有处理的烟苗进行抽样，每个处理抽取22-24个样，其中处理组330个样，对照组331个，一共抽取661个样。全部采用ELISA进行检测。

田间调查方法：9月底进行首次喷药，每6~7天喷1次，连续4次。第二次施药当天调查发病基数，以后每隔10天调查1次病情，大田期共调查5次。调查记载标准按照按《GB-T 23222-2008 烟草病虫害分级及调查方法》进行病情分级、计算发病率和病情指数。防治效果根据如下公式计算。 

。 

数据处理方法：田间数据均采用Excel和DPS软件进行整理、分析，方差分析前对病指数据进行标准化转换（100-病指），数值越大，则病情越轻。 

生产管理措施：7月中旬播种，8月下旬间苗、定苗， 8月底剪叶第1次，剪苗前喷施第1次，每次剪苗前喷施1次，共三次。移栽时，剔除有TMV典型症状的烟株，栽后33天进行中耕除草，栽后40天烟株进入旺长期。 

表1. 处理组各处理与清水对照的防治效果（单位：%） 

处理方式栽后12d栽后19d栽后26d1栽后33d栽后40d处理组198.1672.1863.9158.9547.21处理组295.1878.1971.6669.5352.29处理组369.8156.2150.7848.2338.91处理组471.1459.6541.4739.1731.62处理组574.8863.6954.3748.2938.12处理组681.1369.6451.9849.8231.65对照组7（病指）11.0233.6634.5757.0267.12

注：表中“+”表示增加，“－”表示减少。下同。

表2. 栽后40d各处理组烟株抗TMV的差异显著性分析 (LSD法) 

处理方式均值5%显著水平1%极显著水平处理组170.61aA处理组269.78aAB处理组356.69abABC处理组460.27abABC处理组562.41abABC处理组666.35abABC对照组732.88"　 bcde""BCDE"