中草药型青贮饲料生物添加剂及应用

摘要

本发明公开了中草药型青贮饲料生物添加剂及应用。本发明所提供的制备青贮饲料的方法，包括如下步骤：在青贮原料中添加青贮饲料添加剂后进行厌氧发酵，得到青贮饲料；所述青贮饲料添加剂的活性成分为下述a)或b的组合物：a)由当归、党参、黄芪和五味子组成的组合物；所述组合物中，当归、党参、黄芪和五味子混合在一起或分别独立包装；b)从所述a)的组合物中提取得到的水溶性物质。本发明制备的青贮饲料具有下述至少一种特性：1)粗蛋白含量高于对照；2)氨态氮与总氮的比值低于对照；3)中性洗涤纤维含量低于对照；4)酸性洗涤纤维含量低于对照；5)pH值低于对照。

说明书

技术领域

本发明涉及一种中草药型青贮饲料生物添加剂及应用，特别涉及由当归、党参、 黄芪和五味子组成的青贮饲料添加剂及其在制备青贮饲料中的应用。

背景技术

青贮是解决青饲料不易贮藏的一个有效而经济的措施。但是，自然状态下青饲料 的缓冲值高，可溶性碳水化合物含量低，自然状态下青贮比较困难。为此，国内外都 在研究怎样运用添加剂，提高青贮饲料的品质，加快青贮的发酵速度。近年来，国内 外学者对青贮饲料添加剂做了大量的研究，从单一添加剂来看主要有铵类化合物、有 机酸类、尿素和生物防腐剂等，这些添加物的作用都具有抑制微生物活动的作用，并 且提高青贮饲料营养品质，但许多产品由于成本高不能广泛被应用。目前在畜禽疾病 的预防与治疗中向饲料中添加抗生素、激素、化学合成药比较常见，虽然其效果明显， 但常常在产品中有残留，危害消费者健康，三致(致癌、致畸、致突变)现象严重，同 时易产生抗药性。为了得到高效、安全、无公害的畜产品，在畜禽饲料中添加中草药 成为一种新趋势，但目前国内外对中草药的研究水平都非常低，所应用的中草药存在 着剂型单一、质量粗糙、用药量大、成本高、使用不方便等缺点。中药粗粉在使用过 程中存在着只能混饲使用，尤其在集约化养殖的情况下使用非常不方便，从而大大限 制了中草药在防治动物疾病方面的规模化应用，并且中草药制剂的年产量也非常有限， 根本满足不了实际需要。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是将由当归、党参、黄芪和五味子组成的组合物作为 青贮饲料添加剂(中草药添加剂)与青贮原料共同发酵制备青贮饲料。

为解决上述技术问题，本发明提供了如下四个技术方案。

本发明所提供的第一个技术方案是制备青贮饲料的方法，该方法包括如下步骤： 在青贮原料中添加青贮饲料添加剂后进行厌氧发酵，得到青贮饲料；所述青贮饲料添 加剂的活性成分为下述a)或b)或c)的组合物：

a)由当归、党参、黄芪和五味子组成的组合物；所述组合物中，当归、党参、 黄芪和五味子混合在一起；

b)由当归、党参、黄芪和五味子组成的组合物；所述组合物中，当归、党参、 黄芪和五味子分别独立包装；

c)从所述a)或b)的组合物中提取得到的水溶性物质。

其中，所述青贮原料为制作青贮饲料的原料，即青饲料(也叫青绿饲料、绿饲料)， 是指可以用作饲料的植物新鲜茎叶，主要包括天然牧草、栽培牧草、田间杂草、菜叶 类、水生植物、嫩枝树叶等。所述青贮饲料是将青饲料在厌氧的条件下进行发酵得到 的饲料。当归为伞形科植物当归的根。黄芪，又名黄耆，为豆科草本植物蒙古黄芪、 膜荚黄芪的根。党参为桔梗科植物党参的根。五味子为木兰科植物五味子的果实。

所述a)和b)的组合物中，当归、党参、黄芪和五味子的质量比均可为下述1) -10)中的任一种：

1)1-3∶1-3∶1-3∶1-3；

2)1∶1∶1∶1；

3)3∶2∶2∶2；

4)3∶1∶1∶1；

5)2∶3∶2∶1；

6)2∶2∶1∶3；

7)2∶1∶3∶2；

8)1∶3∶1∶2；

9)1∶2∶3∶1；

10)1∶1∶2∶3。

上述制备青贮饲料的方法中，所述青贮饲料可为豆科牧草青贮饲料，如苜蓿属青 贮饲料；进一步，所述苜蓿属青贮饲料可为以苜蓿属中至少一种苜蓿作为青贮原料制 备的青贮饲料，如以紫花苜蓿(Medicago sativa)为青贮原料制备的青贮饲料。

上述方法制备的青贮饲料可具有下述至少一种特性：

1)粗蛋白含量高于对照；

2)氨态氮与总氮的比值低于对照；

3)中性洗涤纤维含量低于对照；

4)酸性洗涤纤维含量低于对照；

5)pH值低于对照；

所述对照为经过如下方法制备的饲料：除不加所述青贮饲料添加剂外，其它条件 (青贮原料和发酵条件)均与上述方法相同。

具有上述至少一种特性的青贮饲料可采用如下含水量的青贮原料、如下添加量的 青贮饲料添加剂进行制备：所述青贮原料的含水量可为60％-75％，如65％-70％或70％； 所述青贮饲料添加剂的添加量以所述a)或b)组合物的干重计，是含水量为60％-75％ (或65％-70％或70％)青贮原料质量的3％-6％。

所述厌氧发酵的温度可为15-30℃，所述厌氧发酵的时间可为30-90天，如45天。

本发明所提供的第二个技术方案是提供一种中草药型青贮饲料添加剂。

本发明所提供的中草药型青贮饲料添加剂，它的活性成分为下述a)或b)或c) 的组合物：

a)由当归、党参、黄芪和五味子组成的组合物；所述组合物中，当归、党参、 黄芪和五味子混合在一起；

b)由当归、党参、黄芪和五味子组成的组合物；所述组合物中，当归、党参、 黄芪和五味子分别独立包装；

c)从所述a)或b)的组合物中提取得到的水溶性物质。

上述青贮饲料添加剂的所述a)和b)组合物中，当归、党参、黄芪和五味子的 质量比可均为下述1)-10)中的任一种：

1)1-3∶1-3∶1-3∶1-3；

2)1∶1∶1∶1；

3)3∶2∶2∶2；

4)3∶1∶1∶1；

5)2∶3∶2∶1；

6)2∶2∶1∶3；

7)2∶1∶3∶2；

8)1∶3∶1∶2；

9)1∶2∶3∶1；

10)1∶1∶2∶3。

本发明所提供的第三个技术方案是制备上述青贮饲料添加剂的方法。该方法包括 制备所述青贮饲料添加剂的活性成分的步骤；其中，所述活性成分按照下述I)、II) 或III)的方法制备：

I)将当归、党参、黄芪和五味子进行混合或进行独立包装，得到所述青贮饲料 添加剂的活性成分；

II)将当归、党参、黄芪和五味子按照下述1)-10)中的任一种质量比进行混合 或进行独立包装，得到所述青贮饲料添加剂的活性成分：

1)1-3∶1-3∶1-3∶1-3；

2)1∶1∶1∶1；

3)3∶2∶2∶2；

4)3∶1∶1∶1；

5)2∶3∶2∶1；

6)2∶2∶1∶3；

7)2∶1∶3∶2；

8)1∶3∶1∶2；

9)1∶2∶3∶1；

10)1∶1∶2∶3；

III)用水提取所述I)或II)的活性成分，收集水溶性物质，将该水溶性物质作 为所述青贮饲料添加剂的活性成分。

上述青贮饲料添加剂可为青贮饲料发酵促进剂。所述青贮饲料发酵促进剂是一种 在发酵前加入青贮原料中，与所述青贮原料一起进行厌氧发酵从而促进发酵的青贮饲 料添加剂。

本发明所提供的第四个技术方案是上述青贮饲料添加剂在制备青贮饲料中的应 用。

上述青贮饲料具体可为豆科牧草青贮饲料，如苜蓿属青贮饲料；进一步，所述苜 蓿属青贮饲料可为以苜蓿属中至少一种苜蓿作为青贮原料制备的青贮饲料，如以紫花 苜蓿(Medicago sativa)为青贮原料制备的青贮饲料。

实验证明，将由当归、党参、黄芪和五味子组成的组合物作为青贮饲料添加剂与 青贮原料共同发酵能够促进乳酸菌生长繁殖和提高青贮饲料的发酵品质，所制备的青 贮饲料，与不加所述青贮饲料添加剂的对照相比，其粗蛋白含量升高，和/或氨态氮与 总氮的比值降低，和/或中性洗涤纤维含量降低，和/或酸性洗涤纤维含量降低，和/ 或pH值降低。

本发明不仅对青贮饲料品质有所改善，还能使畜禽(如奶牛)通过采食加有中草 药添加剂的青贮饲料，提高其生产性能，预防和防治畜禽常见疾病的发生，以减少抗 生素的大量使用，生产相对绿色和有机的畜禽产品。

具体实施方式

下面以紫花苜蓿(Medicago sativa)作为青贮原料为例，阐明本发明的技术方案。

实施例1、青贮饲料添加剂的制备

本实施例提供的青贮饲料添加剂有两种，一种是中草药混合后作为活性成分的青 贮饲料添加剂A，另一种是中草药提取物作为活性成分的青贮饲料添加剂B。

本实施例制备的青贮饲料添加剂A共9种，名称分别是A1-A9。青贮饲料添加剂 A1-A9的组分相同，均是由当归、党参、黄芪和五味子组成的组合物，但是这四味中 药的配比不同。青贮饲料添加剂A1是将当归、党参、黄芪和五味子这四味中药按照1∶ 1∶1∶1的质量比组合成的组合物；青贮饲料添加剂A2是将当归、党参、黄芪和五味 子这四味中药按照3∶2∶2∶2的质量比组合成的组合物；青贮饲料添加剂A3是将当 归、党参、黄芪和五味子这四味中药按照3∶1∶1∶1的质量比组合成的组合物；青贮 饲料添加剂A4是将当归、党参、黄芪和五味子这四味中药按照2∶3∶2∶1的质量比 组合成的组合物；青贮饲料添加剂A5是将当归、党参、黄芪和五味子这四味中药按照 2∶2∶1∶3的质量比组合成的组合物；青贮饲料添加剂A6是将当归、党参、黄芪和 五味子这四味中药按照2∶1∶3∶2的质量比组合成的组合物；青贮饲料添加剂A7是 将当归、党参、黄芪和五味子这四味中药按照1∶3∶1∶2的质量比组合成的组合物； 青贮饲料添加剂A8是将当归、党参、黄芪和五味子这四味中药按照1∶2∶3∶1的质 量比组合成的组合物；青贮饲料添加剂A9是将当归、党参、黄芪和五味子这四味中药 按照1∶1∶2∶3的质量比组合成的组合物。

青贮饲料添加剂A1-A9中，这四味中药可以直接进行混合或分别独立包装。现在 以直接混合为例，阐明其制备方法。按照所需的质量配比，称取当归、党参、黄芪和 五味子这四味中药并进行混合，然后用中药粉碎机粉碎过40目筛(孔径0.45mm)， 得到青贮饲料添加剂A1-A9。

本实施例制备的青贮饲料添加剂B共9种，名称分别是B1-B9。青贮饲料添加剂 B1-B9的原料组分相同，均是由当归、党参、黄芪和五味子组成的组合物，但是这四 味中药的配比不同。青贮饲料添加剂B1是将当归、党参、黄芪和五味子这四味中药按 照1∶1∶1∶1的质量比混合后，用水进行提取得到的水溶性物质；青贮饲料添加剂 B2是将当归、党参、黄芪和五味子这四味中药按照3∶2∶2∶2的质量比混合后，用 水进行提取得到的水溶性物质；青贮饲料添加剂B3是将当归、党参、黄芪和五味子这 四味中药按照3∶1∶1∶1的质量比混合后，用水进行提取得到的水溶性物质；青贮饲 料添加剂B4是将当归、党参、黄芪和五味子这四味中药按照2∶3∶2∶1的质量比混 合后，用水进行提取得到的水溶性物质；青贮饲料添加剂B5是将当归、党参、黄芪和 五味子这四味中药按照2∶2∶1∶3的质量比混合后，用水进行提取得到的水溶性物质； 青贮饲料添加剂B6是将当归、党参、黄芪和五味子这四味中药按照2∶1∶3∶2的质 量比混合后，用水进行提取得到的水溶性物质；青贮饲料添加剂B7是将当归、党参、 黄芪和五味子这四味中药按照1∶3∶1∶2的质量比混合后，用水进行提取得到的水溶 性物质；青贮饲料添加剂B8是将当归、党参、黄芪和五味子这四味中药按照1∶2∶3∶ 1的质量比混合后，用水进行提取得到的水溶性物质；青贮饲料添加剂B9是将当归、 党参、黄芪和五味子这四味中药按照1∶1∶2∶3的质量比混合后，用水进行提取得到 的水溶性物质。

青贮饲料添加剂B1-B9的制备方法如下：按照所需的质量配比，称取当归、党参、 黄芪和五味子这四味中药并进行混合，加入是这四味中药总质量的5倍质量的水，浸过 中药液面，放置4℃水箱内24h后，以文火煮沸30min，过滤后，继续加入是这四味中药总 质量的5倍质量的水，文火煮沸30min后，再次过滤。将2次过滤后药液混合，在文火上 浓缩至1g/ml，即为100％中药原液，该100％中药原液即为青贮饲料添加剂B1-B9。

实施例2、用实施例1的青贮饲料添加剂A制备紫花苜蓿青贮饲料

一、材料

青贮饲料添加剂：实施例1的青贮饲料添加剂A1-A9。

青贮原料：取在初花期刈割的紫花苜蓿(Medicago sativa)鲜草进行晾晒，期间 进行多次不同时间的多点采样，用微波炉进行快速干燥，以使苜蓿含水率在70％，用 铡刀切至2cm，得到青贮原料。

二、实验方法

将青贮原料分为十组，分别为青贮饲料添加剂A1-A9实验组和对照组。上述十组 的青贮饲料添加剂添加量如下：青贮饲料添加剂A1按照1kg青贮原料(含水量70％) 中添加60g干重计的实施例1的青贮饲料添加剂A1的标准添加；青贮饲料添加剂A2 按照1kg青贮原料(含水量70％)中添加45g干重计的实施例1的青贮饲料添加剂A2 的标准添加；青贮饲料添加剂A3按照1kg青贮原料(含水量70％)中添加30g干重计 的实施例1的青贮饲料添加剂A3的标准添加；青贮饲料添加剂A4按照1kg青贮原料 (含水量70％)中添加40g干重计的实施例1青贮饲料添加剂A4的标准添加；青贮饲 料添加剂A5按照1kg青贮原料(含水量70％)中添加40g干重计的实施例1青贮饲料 添加剂A5的标准添加；青贮饲料添加剂A6按照1kg青贮原料(含水量70％)中添加 40g干重计的实施例1青贮饲料添加剂A6的标准添加；青贮饲料添加剂A7按照1kg 青贮原料(含水量70％)中添加35g干重计的实施例1青贮饲料添加剂A7的标准添加； 青贮饲料添加剂A8按照1kg青贮原料(含水量70％)中添加35g干重计的实施例1青 贮饲料添加剂A8的标准添加；青贮饲料添加剂A9按照1kg青贮原料(含水量70％) 中添加35g干重计的实施例1青贮饲料添加剂A9的标准添加；对照不添加任何物质。

将青贮饲料添加剂A1-A9与青贮原料混合均匀，并快速装入100ml聚乙烯离心管 中，每个离心管装入70g，并用锤头将其压实，盖上橡胶塞，在橡胶塞上面插入一个 带针头的塑料导管，然后将此导管的另一端插入水中，使产生的青贮气体排到水中， 保持青贮离心管中的厌氧环境。等其排完气体后，将导管拆下，针口用蜡油封口，在 20-30℃放置45天，进行取样分析。实验重复三次，每次实验上述十组每组设3个管。

对于青贮品质的分析分以下几个指标：pH值，干物质，氨态氮，粗蛋白，中性洗 涤纤维，酸性洗涤纤维，有机酸。

反应青贮品质各指标的测定方法如下：

(1)干物质测定：

用烘箱烘干法测定：取青贮原料或青贮饲料鲜样称重记下重量，在烘箱中65℃干 燥48h直到恒重，并记录所称的重量以计算干物质(DM)含量。

(2)pH值测定：

准确称取剪碎的青贮10.0g，加入90mL蒸馏水搅拌均匀后用组织搅碎机搅拌1分 钟。定性滤纸和四层纱布过滤，用pH测定仪测定滤液的pH值。

(3)氨态氮/总氮值的测定(Broderick和Kang，1980)采用苯酚-次氯酸钠比色法 测定：

苯酚试剂：将0.05g亚硝基铁氰化钠(Na₂Fe(CN)₅·NO·2H₂O，297.95，化学纯(25g)) 溶解在0.5L蒸馏水中，再加入11mL苯酚溶液或9.9g结晶苯酚(C₆H₅O，94.11，Phenol A.R.，500g，分析纯)，定容到1L后贮存在棕色的玻璃试剂瓶中。

次氯酸钠试剂：将5gNaOH溶解在2/3L的蒸馏水中，再加入20.1gNa₂HPO₄加热至 溶解。冷却后加入14.7ml含8.5％活性氯的次氯酸钠溶液(74.44，分析纯，活性氯不 低7％)并混匀，定容到1L。

标准氨溶液：称取0.6607g经100℃24小时烘干的(NH₄)₂SO₄(132.14，化学纯)溶 于蒸馏水中，并定容至100ml，配制成100mmol/L的氨储备液，将上述储备液稀释配 制成1.0，2.0，3.0，4.0，5.0mmol/L五种不同浓度梯度的标准液。

简要操作步骤：向每只试管中加入50ul经适当倍数稀释的样本液或标准液，空白 为50ul蒸馏水；向每支试管中加入2.5ml的苯酚试剂，摇匀；再向每只试管中加入 2ml次氯酸钠试剂，并混匀；将混合液在95℃水浴中加热显色反应5分钟；冷却后， 630nm波长下比色。

(4)酸性洗涤纤维(ADF)、中性洗涤纤维(NDF)测定采用范氏洗涤纤维法测定；

NDF药品的配制(一个纤维袋0.5g样品)：称取1.86g乙二胺四乙酸二钠 (EDTA，372.24)，0.68g硼酸钠(Na₂B₄O₇？10H₂O，化学纯381.37)，3g十二烷基硫酸钠 (化学纯288.38)，1ml乙二醇乙醚(化学纯90.12)；0.456g无水磷酸氢二钠(化学 纯141.96)，0.5g无水亚硫酸钠。溶入100ml蒸馏水中。

简要操作步骤：称量滤袋的重量去皮后，称量0.4500-0.5500g样品放入滤袋，用 封口机在距离袋口4mm处封口。准确称量一个空白滤袋，将滤袋放置在滤袋架上，放 入纤维分析仪中，放入重锤确保最上层滤袋可以浸没在液面下，在开始前要向纤维仪 内加入4.0ml的Alpha-淀粉酶，在B口处放入淀粉酶加液(8.0ml的Alpha-淀粉酶稀 释至250ml)。纤维仪洗涤过，将滤袋取出，在105℃完全干燥2-4小时，冷却称重。

ADF药品的配制：称取20g十六烷三甲基溴化氨(CTAB，化学纯364.47)溶于1000ml 0.5mol/L硫酸溶液中(0.5mol/L硫酸：取55.74ml浓硫酸加入蒸馏水定容至1L)。

简要操作步骤：称量滤袋的重量去皮后，称量0.4500-0.5500g样品放入滤袋，用 封口机在距离袋口4mm处封口。准确称量一个空白滤袋，将滤袋放置在滤袋架上，放 入纤维分析仪中，放入重锤确保最上层滤袋可以浸没在液面下。纤维仪洗涤过，将滤 袋取出，在105℃完全干燥2-4小时，冷却称重。

(5)粗蛋白质的测定：采用凯式定氮法

含溴甲酚绿和甲基红指示剂的1％的硼酸溶液：将100g硼酸(Boric  acid，61.83，H₃BO₃，分析纯，(500g))溶于10升蒸馏水配成1％硼酸溶液。添加100ml 溴甲酚绿(Bromo cresol green，C₂₁H₁₄O₅Br₄S，698.02，(5g))溶液(100mg溴甲酚绿溶 于100ml乙醇)。添加70ml甲基红溶液(100mg溶于100ml乙醇)。0.1N HCl：16.6ml 盐酸加入1000ml蒸馏水中。再加入40％NaOH；催化剂为K₂SO₄∶CuSO₄＝15∶1。

简要的操作步骤：将草样烘干草样粉碎过1mm筛，称量草样5.0g左右，将其放入 消煮管中加5.0g的催化剂和10.0ml的浓硫酸，放在消煮炉上，于410℃下消煮1小 时左右，消煮好后冷却，用凯式定氮仪测定。

(6)有机酸的测定：

测定乳酸、乙酸、丙酸、丁酸、乙醇、挥发性脂肪酸(VFA)测定用Agilent1100 液相色谱系统：将滤液用0.45微米的滤膜过滤，再用SHIMADZE-10A型高效液相色谱 (KC-811column，Shodex，Shimadzu，日本；柱温50℃；流速11ml/min；波长 210nm；SPD-M10AVP检测器；流动相：3mmol/L高氯酸；进样量5ul。测定乳酸、乙酸、 丙酸和丁酸含量。

简要的操作步骤：准确称取剪碎的青贮10.0g，加入90mL蒸馏水搅拌均匀后用组 织搅碎机搅拌1分钟。定性滤纸和四层纱布过滤，再用滤器将滤液过滤，可放在-20℃ 的条件下备用，用液相色谱仪测定。

试验所得数据用Excel软件处理，并用SPSS17.0软件中的单因素方差分析程序对 数据进行方差分析和多重比较。

三、实验结果

实验结果如表1所示：

表1青贮饲料添加剂A1-A9的试验结果

注：处理中，CK表示对照，1-9分别对应青贮饲料添加剂A1-A9；其它各列数值 后面的英文字母表示差异显著程度，具有至少一个相同字母的处理间在0.05水平无显 著差异，没有相同字母的处理间在0.05水平有显著差异。

结果表明，1-9组的pH值显著低于对照，2-9的干物质显著高于对照，1、3、7、 8、9的氨态氮/总氮显著低于对照，1、2、5、6、7、8、9的中性洗涤纤维显著低于对 照，6和7的酸性洗涤纤维显著低于对照。

实施例3、用实施例1的青贮饲料添加剂B制备紫花苜蓿青贮饲料

一、材料

青贮饲料添加剂：实施例1的青贮饲料添加剂B1-B9。

青贮原料：取在初花期刈割的紫花苜蓿(Medicago sativa)鲜草进行晾晒，期间 进行多次不同时间的多点采样，用微波炉进行快速干燥，以使苜蓿含水率在70％，用 铡刀切至2cm，得到青贮原料。

二、实验方法

将青贮原料分为十组，分别为青贮饲料添加剂B1-B9实验组和对照组。上述十组 的青贮饲料添加剂添加量如下：青贮饲料添加剂B1按照1kg青贮原料(含水量70％) 中添加60g以当归、党参、黄芪和五味子这四味中药原料的总质量(干重)计的实施 例1的青贮饲料添加剂B1的标准添加；青贮饲料添加剂B2按照1kg青贮原料(含水 量70％)中添加45g以当归、党参、黄芪和五味子这四味中药原料的总质量(干重) 计的实施例1的青贮饲料添加剂B2的标准添加；青贮饲料添加剂B3按照1kg青贮原 料(含水量70％)中添加30g以当归、党参、黄芪和五味子这四味中药原料的总质量 (干重)计的实施例1的青贮饲料添加剂B3的标准添加；青贮饲料添加剂B4按照1kg 青贮原料(含水量70％)中添加40g以当归、党参、黄芪和五味子这四味中药原料的 总质量(干重)计的实施例1青贮饲料添加剂B4的标准添加；青贮饲料添加剂B5按 照1kg青贮原料(含水量70％)中添加40g以当归、党参、黄芪和五味子这四味中药 原料的总质量(干重)计的实施例1青贮饲料添加剂B5的标准添加；青贮饲料添加剂 B6按照1kg青贮原料(含水量70％)中添加40g以当归、党参、黄芪和五味子这四味 中药原料的总质量(干重)计的实施例1青贮饲料添加剂B6的标准添加；青贮饲料添 加剂B7按照1kg青贮原料(含水量70％)中添加35g以当归、党参、黄芪和五味子这 四味中药原料的总质量(干重)计的实施例1青贮饲料添加剂B7的标准添加；青贮饲 料添加剂B8按照1kg青贮原料(含水量70％)中添加35g以当归、党参、黄芪和五味 子这四味中药原料的总质量(干重)计的实施例1青贮饲料添加剂B8的标准添加；青 贮饲料添加剂B9按照1kg青贮原料(含水量70％)中添加35g以当归、党参、黄芪和 五味子这四味中药原料的总质量(干重)计的实施例1青贮饲料添加剂B9的标准添加； 对照不添加任何物质。

将青贮饲料添加剂B1-B9与青贮原料混合均匀，并快速装入100ml聚乙烯离心管 中，每个离心管装入70g，并用锤头将其压实，盖上橡胶塞，在橡胶塞上面插入一个 带针头的塑料导管，然后将此导管的另一端插入水中，使产生的青贮气体排到水中， 保持青贮离心管中的厌氧环境。等其排完气体后，将导管拆下，针口用蜡油封口，在 20-30℃放置45天，进行取样分析。实验重复三次，每次实验上述十组每组设3个管。

对于青贮品质的分析分以下几个指标：pH值，干物质，氨态氮，粗蛋白，中性洗 涤纤维，酸性洗涤纤维，有机酸。这些指标的检测方法均与实施例2相同。

试验所得数据用Excel软件处理，并用SPSS17.0软件中的单因素方差分析程序对 数据进行方差分析和多重比较。

三、实验结果

实验结果如表2所示：

表2青贮饲料添加剂B1-B9的试验结果

注：处理中，CK表示对照，1-9分别对应青贮饲料添加剂B1-B9；其它各列数值 后面的英文字母表示差异显著程度，具有至少一个相同字母的处理间在0.05水平无显 著差异，没有相同字母的处理间在0.05水平有显著差异。

结果表明，1-9中，只有9的pH值与对照差异显著，其余与对照差异均不显著， 1-9的干物质显著高于对照，1-5，7-9的氨态氮/总氮显著低于对照，1、2、3、5的中 性洗涤纤维显著低于对照，1、2、5的酸性洗涤纤维显著低于对照。