促进印度落芒草种子萌发的方法

摘要

本发明提供一种促进印度落芒草种子萌发的方法。该方法是用NaOH溶液浸泡印度落芒草种子，并于光照培养箱中、放置于纸质发芽床上进行萌发。该方法种子萌发率高、简单实用、成本低、便于广泛应用。

说明书

技术领域

本发明提供一种促进印度落芒草种子萌发的方法。涉及农业领 域。

背景技术

印度落芒草(Oryzopsis hymenoides)是禾木科落芒草属多年生、 密丛型、冷季型禾草，主要分布于美国西部、加拿大南部和墨西哥， 其种子蛋白质含量高可人食，可以建植牧场、放牧、防风固沙、美化 环境。印度落芒草作为干旱草原地区优良的禾本科牧草之一，抗旱性 和抗寒性较好，但种子的落粒性和休眠性限制其广泛利用。

目前，印度落芒草种子的休眠问题在国内外的研究较少，Kar-ling Tao(1974)等人用乙烯利和激动素的组合处理印度落芒草种子，其 萌发率超过了50％，但是激动素和乙烯利都是植物激素，成本较高， 难以用于工业化处理。

现有技术没有对于用NaOH溶液及H₂SO₄浸泡落芒草种子的报 道。印度落芒草种子会产生形态休眠和生理休眠，不容易萌发，Jones TA(2009)用低温层积处理来打破种子休眠，耗费时间长，大批量 种子不容易处理。(Jones T.A.Dynamics of Domancy-Status  Subpopulations of Indian Ricegrass Seed Held in Dry  Storage，Rangeland and Ecology & Management.2009，62(3)： 284-289.)

发明内容

发明人为解决上述现有技术中存在的问题，提供一种用NaOH溶 液浸泡落芒草种子，并于光照培养箱中、放置于发芽床上进行萌发的 方法，该方法种子萌发率高、简单实用、成本低、便于广泛应用。

为实现上述目的，本发明采用如下技术方案：

一种促进印度落芒草种子萌发的方法，该方法包括如下步骤：

1)挑选种子步骤，清水浸泡种子，挑选籽粒饱满种子；

2)消毒灭菌步骤，将步骤1)中挑选出的种子浸泡于NaClO溶 液，然后用清水冲洗；

3)浸润步骤，将步骤2)中经消毒灭菌后的种子在NaOH溶液 中浸润；

4)萌发步骤，将步骤3)中经过浸润的种子置于湿润的纸质发 芽床上，将发芽床放置于变温的光照培养箱中萌发。

通常采用纸质发芽床，也就是将滤纸放入培养皿底部，加水润湿 滤纸，将种子均匀摆放在滤纸上。

所述纸质发芽床为底部铺有2层滤纸的培养皿。

其中，所述步骤1)挑选种子步骤中，清水浸泡时间为30～90min。

所述步骤2)消毒灭菌步骤中的用于浸泡种子的NaClO溶液的质 量浓度为3-7％，浸泡时间为3-8min。

所述步骤3)浸润步骤中的用于浸泡种子的NaOH溶液的质量浓 度为15％～25％，更优选为20％，浸泡时间为10min～30min，优选为 20min。

所述步骤4)萌发步骤中的所述光照培养箱为20-30℃变温，12h 光照12h黑暗的光照培养箱。

所述20-30℃变温是指将12h光照培养时的温度设定为30℃，12h 黑暗培养时的温度设定为20℃。

本发明是用NaOH溶液浸泡种子，然后将种子置于润湿的纸质发 芽床上，将发芽床放置于光照培养箱中使种子萌发。经该方法处理后 的印度落芒草种子萌发率超过了50％，该方法不仅简单实用、成本低、 便于广泛应用，而且效果显著。

具体实施方式

下面结合实施例及实验例，对本发明进一步详细说明。但这些实 施例及实验例是用来例示本发明，这些并不能限定本发明的范围。

实施例1 印度落芒草种子的萌发

印度落芒草种子萌发方法如下：

将落芒草种子在清水中浸泡60min，挑选出籽粒饱满的种子，将 挑选出的种子在3％的NaClO溶液中浸泡8min，然后用清水冲洗。 取300粒种子，每100粒种子为一组，将3组种子分别浸泡于质量浓 度为15％的NaOH溶液中，浸泡10min。将上述处理过的种子均放置 于20-30℃的变温、12h光照12h黑暗的光照培养箱中萌发，种子置 于底部铺有2层滤纸的培养皿，加蒸馏水使滤纸完全浸湿，每天加适 量蒸馏水，保持滤纸湿润无水滴漏。

实施例2 印度落芒草种子的萌发

印度落芒草种子萌发方法如下：

将落芒草种子在清水中浸泡90min，挑选出籽粒饱满的种子，将 挑选出的种子在7％的NaClO溶液中浸泡3min，然后用清水冲洗。 取300粒种子，每100粒种子为一组，将3组种子分别浸泡于质量浓 度为25％的NaOH溶液中，浸泡20min。将上述处理过的种子均放置 于20-30℃的变温、12h光照12h黑暗的光照培养箱中萌发，种子置 于底部铺有2层滤纸的培养皿，加蒸馏水使滤纸完全浸湿，每天加适 量蒸馏水，保持滤纸湿润无水滴漏。

实施例3 印度落芒草种子的萌发

印度落芒草种子萌发方法如下：

将落芒草种子在清水中浸泡60min，挑选出籽粒饱满的种子，将 挑选出的种子在5％的NaClO溶液中浸泡5min，然后用清水冲洗。 取300粒种子，每100粒种子为一组，将3组种子分别浸泡于质量浓 度为20％的NaOH溶液中，浸泡10min。将上述处理过的种子均放置 于20-30℃的变温、12h光照12h黑暗的光照培养箱中萌发，种子置 于底部铺有2层滤纸的培养皿，加蒸馏水使滤纸完全浸湿，每天加适 量蒸馏水，保持滤纸湿润无水滴漏。

实施例4 印度落芒草种子的萌发

印度落芒草种子萌发方法如下：

将落芒草种子在清水中浸泡60min，挑选出籽粒饱满的种子，将 挑选出的种子在5％的NaClO溶液中浸泡5min，然后用清水冲洗。 取300粒种子，每100粒种子为一组，将3组种子分别浸泡于质量浓 度为20％的NaOH溶液中，浸泡20min。将上述处理过的种子均放置 于20-30℃的变温、12h光照12h黑暗的光照培养箱中萌发，种子置 于底部铺有2层滤纸的培养皿，加蒸馏水使滤纸完全浸湿，每天加适 量蒸馏水，保持滤纸湿润无水滴漏。

实施例5 印度落芒草种子的萌发

印度落芒草种子萌发方法如下：

将落芒草种子在清水中浸泡30min，挑选出籽粒饱满的种子，将 挑选出的种子在5％的NaClO溶液中浸泡5min，然后用清水冲洗。 取300粒种子，每100粒种子为一组，将3组种子分别浸泡于质量浓 度为20％的NaOH溶液中，浸泡30min。将上述处理过的种子均放置 于20-30℃的变温、12h光照12h黑暗的光照培养箱中萌发，种子置 于底部铺有2层滤纸的培养皿，加蒸馏水使滤纸完全浸湿，每天加适 量蒸馏水，保持滤纸湿润无水滴漏。

观察实施例1至实施例5中经培养的种子，当种子胚根长出(大 于2mm)视为萌发，从培养第7天开始统计发芽势，每天记录萌发 数，第14天萌发结束。计数时取出已萌发的种子并记录腐败发霉种 子，使用SPSS软件进行单因素方差分析，求得种子的萌发率、结果 如表1所示。

表1

  实施例   萌发率

  实施例1   2.33±0.58   实施例2   3.67±1.15   实施例3   48.33±8.74   实施例4   51.67±4.16   实施例5   24.33±5.51

比较例1 印度落芒草种子的萌发

印度落芒草种子萌发方法如下：

将落芒草种子在清水中浸泡60min，挑选出籽粒饱满的种子，将 挑选出的种子在5％的NaClO溶液中浸泡5min，然后用清水冲洗。 取300粒种子，每100粒种子为一组，将3组种子分别浸泡于质量浓 度为10％的NaOH溶液中，浸泡30min。将上述处理过的种子均放置 于20-30℃的变温、12h光照12h黑暗的光照培养箱中萌发，种子置 于底部铺有2层滤纸的培养皿，加蒸馏水使滤纸完全浸湿，每天加适 量蒸馏水，保持滤纸湿润无水滴漏。

比较例2 印度落芒草种子的萌发

印度落芒草种子萌发方法如下：

将落芒草种子在清水中浸泡60min，挑选出籽粒饱满的种子，将 挑选出的种子在5％的NaClO溶液中浸泡5min，然后用清水冲洗。 取300粒种子，每100粒种子为一组，将3组种子分别浸泡于质量浓 度为30％的NaOH溶液中，浸泡30min。将上述处理过的种子均放置 于20-30℃的变温、12h光照12h黑暗的光照培养箱中萌发，种子置 于底部铺有2层滤纸的培养皿，加蒸馏水使滤纸完全浸湿，每天加适 量蒸馏水，保持滤纸湿润无水滴漏。

比较例3 印度落芒草种子的萌发

印度落芒草种子萌发方法如下：

将落芒草种子在清水中浸泡60min，挑选出籽粒饱满的种子，将 挑选出的种子在5％的NaClO溶液中浸泡5min，然后用清水冲洗。 取300粒种子，每100粒种子为一组，将3组种子分别浸泡于清水中， 浸泡30min。将上述处理过的种子均放置于20-30℃的变温、12h光照 12h黑暗的光照培养箱中萌发，种子置于底部铺有2层滤纸的培养皿， 加蒸馏水使滤纸完全浸湿，每天加适量蒸馏水，保持滤纸湿润无水滴 漏。

比较例4 印度落芒草种子的萌发

印度落芒草种子萌发方法如下：

将落芒草种子在清水中浸泡60min，挑选出籽粒饱满的种子，将 挑选出的种子在5％的NaClO溶液中浸泡5min，然后用清水冲洗。取 300粒种子，每100粒种子为一组，将3组种子分别浸泡于质量浓度 为30％的H₂SO₄溶液中，浸泡5min。将上述处理过的种子均放置于 20-30℃的变温、12h光照12h黑暗的光照培养箱中萌发，种子置于底 部铺有2层滤纸的培养皿，加蒸馏水使滤纸完全浸湿，每天加适量蒸 馏水，保持滤纸湿润无水滴漏。

比较例5 印度落芒草种子的萌发

印度落芒草种子萌发方法如下：

将落芒草种子在清水中浸泡60min，挑选出籽粒饱满的种子，将 挑选出的种子在5％的NaClO溶液中浸泡5min，然后用清水冲洗。取 300粒种子，每100粒种子为一组，将3组种子分别浸泡于质量浓度 为60％的H₂SO₄溶液中，浸泡5min。将上述处理过的种子均放置于 20-30℃的变温、12h光照12h黑暗的光照培养箱中萌发，种子置于底 部铺有2层滤纸的培养皿，加蒸馏水使滤纸完全浸湿，每天加适量蒸 馏水，保持滤纸湿润无水滴漏。

比较例6 印度落芒草种子的萌发

印度落芒草种子萌发方法如下：

将落芒草种子在清水中浸泡60min，挑选出籽粒饱满的种子，将 挑选出的种子在5％的NaClO溶液中浸泡5min，然后用清水冲洗。取 300粒种子，每100粒种子为一组，将3组种子分别浸泡于质量浓度 为98％的H₂SO₄溶液中，浸泡5min。将上述处理过的种子均放置于 20-30℃的变温、12h光照12h黑暗的光照培养箱中萌发，种子置于底 部铺有2层滤纸的培养皿，加蒸馏水使滤纸完全浸湿，每天加适量蒸 馏水，保持滤纸湿润无水滴漏。

比较例7 印度落芒草种子的萌发

印度落芒草种子萌发方法如下：

将落芒草种子在清水中浸泡60min，挑选出籽粒饱满的种子，将 挑选出的种子在5％的NaClO溶液中浸泡5min，然后用清水冲洗。 取300粒种子，每100粒种子为一组，将3组种子分别和石英砂置于 研钵中研磨10min，磨破种皮，取出种子，将种子用清水洗净晾干。 将上述处理过的种子均放置于20-30℃的变温、12h光照12h黑暗的 光照培养箱中萌发，种子置于底部铺有2层滤纸的培养皿，加蒸馏水 使滤纸完全浸湿，每天加适量蒸馏水，保持滤纸湿润无水滴漏。

比较例8 印度落芒草种子的萌发

印度落芒草种子萌发方法如下：

将落芒草种子在清水中浸泡60min，挑选出籽粒饱满的种子，将 挑选出的种子在5％的NaClO溶液中浸泡5min，然后用清水冲洗。 取300粒种子，每100粒种子为一组，将3组种子分别用磨砂纸压磨， 完全去除种皮，将种子用清水洗净晾干。将上述处理过的种子均放置 于20-30℃的变温、12h光照12h黑暗的光照培养箱中萌发，种子置 于底部铺有2层滤纸的培养皿，加蒸馏水使滤纸完全浸湿，每天加适 量蒸馏水，保持滤纸湿润无水滴漏。

观察比较例1至比较例10中经培养的种子，当种子胚根长出(大 于2mm)视为萌发，从培养第7天开始统计发芽势，每天记录萌发 数，第14天萌发结束。计数时取出已萌发的种子并记录腐败发霉种 子，使用SPSS软件进行单因素方差分析，求得种子的萌发率、结果 如表2所示。

表2

  比较例   萌发率   比较例1   15.00±2.65   比较例2   5.33±2.08   比较例3   0   比较例4   4.33±1.53   比较例5   8.33±2.58   比较例6   20.33±2.08   比较例7   19.33±4.16   比较例8   42.00±5.29

由表1和表2可知使用20％NaOH打破种子的休眠效果最好，种 子萌发率最高，而10％和30％NaOH以及H₂SO₄打破种子休眠的效果 较差，促进种子萌发效果不明显。

本发明是用NaOH溶液浸泡种子，然后将种子置于润湿的纸质发 芽床上，将发芽床放置于光照培养箱中使种子萌发。经该方法处理后 的印度落芒草种子萌发率最高可达到51.67％，该方法不仅简单实用、 成本低、便于广泛应用，而且效果显著。