一种包含exendin-4的温度敏感型水凝胶及其注射剂

摘要

本发明涉及一种含exendin-4的温度敏感型水凝胶，其包含作为有效成分的exendin-4和作为药物缓释载体的两亲性共聚物，其中两亲性共聚物由聚酯和聚乙二醇组成，优选为PLGA-PEG-PLGA。本发明所述温度敏感型水凝胶在室温下为液体，在37℃为固体水不溶性凝胶，可用于治疗糖尿病，其不仅具有良好的释药性，而且环保、刺激性小、应用方便、效果明显。与大剂量exendin-4制剂相比，本发明水凝胶的优点是能在体内形成凝胶，操作简单，显示出持续释放特征，提高生物利用率，减少给药次数，增强病人的依从性。

说明书

技术领域

本发明涉及药物制剂领域，具体而言，本发明涉及包含促胰岛 素分泌素(exendin-4)的温度敏感型水凝胶及其注射剂。

背景技术

糖尿病是一种严重威胁人类健康与生命的疾病，全世界糖尿病 患者已超过1.5亿，其中2型糖尿病患者占90％。在我国2型糖尿病 患者将近4000万，随着生活水平的提高，发病率也越来越高，而糖 尿病所引起的一系列并发症更是严重影响着患者的生活质量。

促胰岛素分泌素-1(glucagon-like peptide-1，GLP-1)具有降低 血糖，促进胰岛素分泌，促进胰岛β细胞生长、增殖和分化并抑制其 凋亡等作用，曾一度被作为有效治疗2型糖尿病的希望所在，但因其 半衰期极短(仅2分钟)(Murielle M J.Current Opinion in Pharmacology 2006，6：598-605)，限制了临床应用。Exendin-4是从美 国西南部大沙漠的赫拉大毒蜥唾液腺中分离出来的一种天然多肽，属 于GLP-1类似物，含有39个氨基酸肽，属肠促胰岛素分泌物，与哺 乳动物的GLP-1的氨基酸序列具有53％的同源性，其调节血糖的能 力与GLP-1相似，并在多种动物模型中表现出了与GLP-1类似的抗 糖尿病作用，但其半衰期明显延长，达4小时左右(Máire E等. Pharmacology&Therapeutics 2007(113)546-593)。Exendin-4通过 刺激胰岛β细胞的增殖与分化，降低胃排空的速率，促进饱食感等机 制达到降低、控制血糖的作用，在治疗2型糖尿病方面具有广阔的前 景。

Exendin-4还可以利用基因工程方法制备(例如，参见ZL 200410052039.4)：通过人工合成exendin-4的DNA序列，然后将序 列插入到表达质粒pET32a(+)，再转化大肠杆菌DH5α构建而成， 再经表达、纯化、发酵等一系列生物技术得到最终产物。这样制得的 产品存放在低温下(2～8℃)是稳定的。重组exendin-4作为国家一 类新药，临床上主要用于糖尿病的治疗，如所有的蛋白质类药物一样， exendin-4在循环系统中被快速消除，为了保持治疗有效的血药浓度， 常常要大剂量或频繁给药，这种方法不方便并且具有潜在的副作用 (Chung Y M等.Biomacromolecules，2002，3(3)：511-516.)。

Exendin-4的氨基酸序列为：

His Gly Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Leu Ser Lys Gln Met Glu Glu Glu Ala Val Arg Leu Phe Ile Glu Trp Leu Lys Asn Gly Gly Pro Ser Ser Gly Ala Pro Pro Pro Ser

简写为：HGEGTFTSDL SKQMEEEAVR LFIEWLKNGG PSSGAPPPS

药物控制释放体系就是将药物制成一定的剂型，控制药物在人 体内的释放度，使药物按照设计的剂量、在要求的时间范围内以一定 的速度在体内缓慢释放，以达到治疗疾病的目的。这种药物释放系统 包括可注射的油、乳液、悬浮液、脂质体、微粒(微囊或微球)、植 入或凝胶系统等(Baker R W等.Plenmu，NewYork，1974，15-71.)。 Amylin和Alkermes公司正在合作研发exendin-4微球缓释剂型 (exenatide LAR)，仅需一月给药1次，可明显提高临床依从性 (US20090239796)。

与微球缓释制剂相比，近几年发展起来的凝胶控制释放体系对 于减小药物用量，控制药物作用区域，提高药物的生物利用度以及降 低其毒副作用等均是一种非常好的给药方式。凝胶控制释放药物具有 以下优势和特点：1)聚合物水溶液在室温下呈液体状，粘度小，具 有流动性，可以过滤除菌；2)各种药物可以用简单混合的方法进行 装载，载药量高，而且不使用有机溶剂，有利于药物活性的保持；3) 采用注射的方式给药，减少了给药次数，病人顺应性强；药物与聚合 物溶液的混合物以液体形式注入体内，可以适应体内不同的空腔形 状，不存在溶液游走，有利于药物的定点释放；4)可生物降解水凝 胶在人体内可以被缓慢降解成小分子产物而被吸收，注入人体后不需 要通过手术取出。

用于药物缓释载体的天然及半天然可注射高分子水凝胶由于其 良好的生物相容性、天然可降解性、来源广泛、低廉的价格等特点而 广受关注。目前，常见的天然及半天然的可注射性高分子水凝胶材料 有壳聚糖类、纤维素类、透明质酸类、海藻酸盐类等；用于药物缓释 载体的合成可注射高分子水凝胶根据其降解性可以分为两大类：一类 是不可降解合成高分子水凝胶，包括聚N-异丙基丙烯酰胺、聚环氧 乙烷和聚环氧丙烷嵌段共聚物；一类是可降解合成高分子水凝胶，包 括聚乙二醇(PEG)/聚酯可降解嵌段共聚物和聚有机磷睛等(Baker R W等.Plenmu，NewYork，1974，15-71.)。

可注射聚乙二醇(PEG)/聚酯共聚物由于含有脂肪族聚酯，因此 具有可降解性。聚酯主要包括乙交酯(GA)、己内酯(CL)、丙交酯(LA) 等。这方面的研究以美国的Kim S W组、韩国的Jeong B课题组和 Lee DS课题组最为杰出。可注射的聚乙二醇(PEG)/聚酯共聚物水凝 胶无生理毒性、无抗原性和免疫原性，与组织和血液具有良好的生物 相容性，可降解，凝胶持续时间长，因而成为颇具应用前景的可注射 水凝胶材料之一(Veronese F.M等.Drug Discov.Today 2005，10， 1451-1458)。Qiao等(Mingxi Qiao.Pharmazie.2008，63(1)：27-30.) 利用PLGA-PEG-PLGA共聚物(PLGA为聚乙醇酸和羟基乙酸的共聚 物，PEG为聚乙二醇)为生物缓释载体，制成IL-2温度敏感型水凝 胶制剂，监测IL-2的释放过程，结果发现，IL-2的体外释放超过20 天，其释放率随着共聚物浓度的升高而降低，在整个释放过程中，IL-2 能保持57-90％的生物活性；在抗癌的动物试验中，IL-2温敏敏感型 水凝胶制剂表现出良好的抗癌效果。

发明内容

本发明的目的是提供一种包含exendin-4的温度敏感型水凝胶。 所述温度敏感型水凝胶包含：作为有效成分的exendin-4和作为缓释 载体的两亲性共聚物，其中两亲性共聚物是由聚酯和聚乙二醇组成的 嵌段共聚物。其中所述exendin-4分散在所述两亲性共聚物中，并且 所述水凝胶在室温(术语“室温”是指10℃-30℃，参见《中国药典》 2005版凡例部分)下为液体，在37℃为固体水不溶性凝胶。

优选地，所述exendin-4在所述水凝胶中的浓度为0.1-100 mg/ml，更优选为约0.5-50mg/ml，最优选为约1-10mg/ml；所述两 亲性共聚物在所述水凝胶中的浓度为100-400mg/ml，更优选为 150-250mg/ml。

所述两亲性共聚物的数均分子量可为500-28000，优选为 600-16000，更优选为1000-8000。其中所述聚酯的数均分子量可为 500-30000，优选为800-20000，更优选为1000-10000；聚乙二醇的数 均分子量可为200-20000，优选为300-10000，更优选为500-3000。

优选地，在所述温度敏感型水凝胶的所述缓释载体中还分散有 缓冲剂、稳定剂、防腐剂中的一种或多种。

所述exendin-4为exendin-4多肽或其同工型、突变体、融合蛋 白、功能衍生物、其活性片段。

在所述两亲性共聚物中，聚酯及聚乙二醇嵌段构型优选为聚酯- 聚乙二醇-聚酯或聚乙二醇-聚酯-聚乙二醇，更优选为聚酯-聚乙二醇- 聚酯。其中聚酯与聚乙二醇的重量比可为9-6∶1-4，优选为9-7∶1-3， 更优选为9-8∶1-2。

所述聚酯包括但不限于聚乳酸(PLA)、聚乙醇酸和羟基乙酸 的共聚物(PLGA)、外消旋聚乳酸(D，L-PLA)、外消旋聚乙醇酸 和羟基乙酸共聚物(D，L-PLGA)、端羧基聚乳酸(PLA-COOH)、 端羧基聚乙醇酸和羟基乙酸共聚物(PLGA-COOH)中的任意一种或 多种的共聚物，优选为PLA和PLGA，更优选为PLGA。

当聚酯选用PLGA时，聚乙醇酸与羟基乙酸的重量比可为15-1∶ 1，优选为9-1∶1，更优选为5-1∶1。

所述两亲性共聚物包括但不限于PLA-PEG-PLA、 PLGA-PEG-PLGA、PEG-PLA-PEG、PGE-PLGA-PEG；优选为 PLGA-PEG-PLGA和PEG-PLGA-PEG，更优选为PLGA-PEG-PLGA。

优选地，所述PLGA-PEG-PLGA共聚物在所述水凝胶中的浓度 为100-400mg/ml，更优选为150-250mg/ml。

所述缓冲剂包括但不限于磷酸盐缓冲液、Tris-HCl缓冲液、枸 橼酸盐缓冲液、醋酸盐缓冲液，优选为磷酸盐缓冲液；所述缓冲剂在 所述水凝胶中的浓度为5-100mM，优选为20mM；其pH值范围为 5.0-8.0，优选为5.5-6.6。

所述稳定剂包括但不限于甘露醇、甘氨酸、山梨醇、海藻糖中 的一种或多种；其在所述水凝胶中的浓度为1-5mg/ml。所述稳定剂 优选为3mg/ml的甘氨酸，其中所述甘氨酸能够使exendin-4在所需 的贮存时间(例如6到12个月)内保持稳定。所述海藻糖还能增加 蛋白质多肽类药物的生物活性。

所述防腐剂包括但不限于苯甲酸钾、间甲酚、苯甲酸、苯酚中 的一种或多种；其在所述水凝胶中的浓度为0.1-0.2mg/ml。所述防腐 剂优选为0.1mg/ml的苯甲酸钾。

优选地，本发明所述包含exendin-4的温度敏感型水凝胶由下列 组分组成：

Exendin-4            1mg/ml

PLGA-PEG-PLGA共聚物  150mg/ml

pH6.0磷酸盐缓冲液    20mM

甘氨酸               3mg/ml

苯甲酸钾             0.1mg/ml

优选地，本发明所述包含exendin-4的温度敏感型水凝胶由下列 组分组成：

Exendin-4            1mg/ml

PLGA-PEG-PLGA共聚物  200mg/ml

pH6.0磷酸盐缓冲液    20mM

甘氨酸               3mg/ml

苯甲酸钾             0.1mg/ml

优选地，本发明所述包含exendin-4的温度敏感型水凝胶由下列 组分组成：

Exendin-4        1mg/ml

PLGA-PEG-PLGA共聚物    250mg/ml

pH6.0磷酸盐缓冲液      20mM

甘氨酸                 3mg/ml

苯甲酸钾               0.1mg/ml

本发明所述的包含exendin-4的温度敏感型水凝胶可通过以下方 法制备：取PLGA-PEG-PLGA共聚物于玻璃容器中，加入缓冲液， 搅拌下溶解，配制成不同浓度的PLGA-PEG-PLGA共聚物；另取 exendin-4的缓冲溶液与聚合物缓冲溶液混匀。

此外，还可将本发明所述的包含exendin-4的温度敏感型水凝胶 进一步经过无菌条件的过滤步骤，例如在将PLGA-PEG-PLGA水凝 胶维持在低粘度的温度下(如：4℃)用0.22微米膜进行过滤除菌。 将得到的溶液装到小瓶、安瓿、针筒中，制成注射剂。

本发明所述的水凝胶是指能自身组成含有大量水分的三维结构 的亲水聚合物的交联网状物。其在室温下为水溶液，在活体内可转变 为固态凝胶，固态凝胶不仅能延长药物释放时间，还可维持较高的药 物浓度，并能增加药物的敏感性。

PLGA-PEG-PLGA共聚物能在水溶液中形成胶束，在较高浓度 和/或提高温度时，PLGA-PEG-PLGA共聚物因胶束间的相互作用使 胶束结合形成液晶态(凝胶)而经历胶凝(溶液向凝胶转变)过程； 然后在更高温度时，凝胶再融化。PLGA-PEG-PLGA共聚物的相转变 温度取决于其在水中的浓度。通常，当共聚物浓度范围从10％(g/ml) 变到40％(g/ml)时，在5-40℃温度时发生溶液向凝胶转变，而在温度 40-70℃时发生凝胶向溶液转变。因此，本发明所述的 PLGA-PEG-PLGA共聚物具有在人体温度下显示有胶凝(溶液向凝胶 转变)的性能。PLGA-PEG-PLGA无生理毒性、抗原性和免疫原性， 与组织和血液具有良好的生物相容性，可降解，凝胶持续时间长，给 药方便，能大大提高患者的依从性，能广泛的应用于临床。

本发明所述的包含exendin-4的温度敏感型水凝胶用于治疗糖尿 病，不仅具有良好的释药性，而且环保、刺激性小、应用方便、效果 明显。与大剂量exendin-4制剂相比，本发明水凝胶的优点是能在体 内形成凝胶，操作简单，显示出持续释放特征，提高生物利用率，减 少给药次数，增强病人的依从性。

Exendin-4给药的标准剂量范围为每人每天10-20μg(微克)。 因此，使用本发明所述的包含exendin-4的温度敏感型水凝胶治疗2 型糖尿病时，可每周给药一次或每两周给药一次，优选给药量为每人 每周一次1-140μg exendin-4，更优选为每人每周一次10-100μg exendin-4。

本发明水凝胶可制成注射剂，通过肌肉内和皮下途径注射。

附图说明

图1 Exendin-4从含有150mg/ml、200mg/ml、250mg/ml的 PLGA-PEG-PLGA的温度敏感型水凝胶中释放7天的药物释放曲线 比较。

图2Exendin-4从含有200mg/ml PLGA-PEG-PLGA的温度敏感 型水凝胶中释放的整个药物释放曲线。

图3Exendin-4水凝胶37℃各周期生物活性剂量反应图示。

图4Exendin-4水凝胶37℃各周期生物活性变化图示。

图5.Exendin-4温度敏感型水凝胶药效学试验中db/db小鼠血糖 的变化情况。

具体实施方式

以下通过具体实施方式的描述并结合图对本发明作进一步说 明，但这并非是对本发明的限制，本领域技术人员根据本发明的基本 思想，可以做出各种修改或改进，但是只要不脱离本发明的基本思想， 均在本发明的范围之内。

实施例中Exendin-4为自制生产，其制备工艺参见中国专利 200410052039.4；其余试剂均为商购：

PLGA-PEG-PLGA(MW＝6000)，购于成都有机化学研究所， 批号20081124；

NaH₂PO₄·2H₂O，购于广州市金华大化学试剂有限公司，批号 20061020；

Na₂HPO₄·12H₂O，购于广州市金华大化学试剂有限公司，批号 20050425；

甘氨酸，购于上海源聚生物科技有限公司，批号20040726。

苯甲酸，购于广州化学试剂有限公司，批号20050816。

实施例1：

称取0.88g Na₂HPO₄·12H₂O，2.74g NaH₂PO₄·2H₂O，1.0g苯甲酸 钾，30.0g甘氨酸，用800ml超纯水溶解，调pH为6.0，定容至1000 ml，用0.25mM微孔滤膜过滤，制备成200mM的磷酸盐缓冲液， 置于4℃冰箱中保存。

在置于冰浴的聚丙烯管中，将称量的6g PLGA-PEG-PLGA (MW＝6000)共聚物，缓慢加入到冷却的(0-4℃)20ml超纯水中， 在磁力搅拌(400-600rpm)下直到聚合物完全溶解，使其充分溶胀分 散，配制成浓度为300mg/ml的PLGA-PEG-PLGA共聚物，置于4 ℃冰箱中待用。

实施例2：

取1.5ml实施例1配制的300mg/ml PLGA-PEG-PLGA，置于离 心管中，然后分别加入10mg/ml的exendin-4水溶液300μl，同时加 入实施例1配制的pH6.0的200mM磷酸盐缓冲液300μl，用冰浴超 纯水补齐3ml，在添加过程中，离心管一直置于振荡器上，振荡频 率为100-200rpm，使其混合均匀，分装成平行3管，置于4℃冰箱过 夜。最终PLGA-PEG-PLGA共聚物的浓度为150mg/ml，exendin-4 的浓度为1.0mg/ml。

实施例3：

与实施例2操作相同，取2ml实施例1配制的300mg/ml PLGA-PEG-PLGA，置于离心管中，然后分别加入10mg/ml的 exendin-4水溶液300μl，同时加入实施例l配制的pH6.0的200mM 磷酸盐缓冲液300μl，用冰浴超纯水补齐3ml，在添加过程中，离心 管一直置于振荡器上，振荡频率为100-200rpm，使其混合均匀，分 装成平行3管，置于4℃冰箱过夜。最终PLGA-PEG-PLGA共聚物的 浓度为200mg/ml，exendin-4的浓度为1.0mg/ml。

实施例4：

与实施例2操作相同，取2.5ml实施例1配制的300mg/ml PLGA-PEG-PLGA，置于离心管中，然后分别加入10mg/ml的 exendin-4水溶液300μl，同时加入实施例1配制的pH6.0的200mM 磷酸盐缓冲液300μl，在添加过程中，离心管一直置于振荡器上，振 荡频率为100-200rpm，使其混合均匀，分装成平行3管，置于4℃冰 箱过夜。最终PLGA-PEG-PLGA共聚物的浓度为250mg/ml，exendin-4 的浓度为1.0mg/ml。

实施例5：Exendin-4的7天释放试验

分别取实施例2-4制备的装有exendin-4与PLGA-PEG-PLGA共 聚物混合液的离心管，竖直放置于离心管架中，然后将离心管架置于 37℃摇床杂交仪中。待溶液完全形成乳白色凝胶(约30分钟)后， 缓慢加入预热至37℃的缓释介质(20mM的磷酸盐缓冲液)2ml，于 37℃摇床杂交仪(摇速为75V/min)中进行释放试验(试验方法参见 Wei Wang，et al.Acceleration of diabetic wound healing with chitosan-crosslinked collagen sponge containing recombinant human acidic fibroblast growth factor in healing-impaired STZ diabetic rats. Life Sciences，82(2008)，190-204)，分别于1h，2h，4h，6h，8h，1d， 2d，3d，4d，5d，6d，7d取出全部缓释介质，再补充等量同温空白 缓释介质(20mM的磷酸盐缓冲液)2ml。将上述于不同时间点获取 的样品分别经0.22μm微孔滤膜过滤并离心，用高效液相色谱法 (HPLC)测定样品中exendin-4含量，计算exendin-4的累积释放百分 率，以累积释放百分率对时间作图，得到exendin-4释放曲线。试验 重复3次，取平均值。Exendin-4从含有150mg/ml、200mg/ml、250 mg/ml的PLGA-PEG-PLGA的温度敏感型水凝胶中释放7天的药物 释放曲线比较见图1。结果表明，随着聚合物浓度增加，释放速度降 低。Exendin-4在浓度为150mg/ml、200mg/ml、250mg/ml的共聚 物中第7天的平均累积释放百分量达到76％、61％、49％。

实施例6：Exendin-4的24天释放试验

与实施例5操作相同，取实施例3制备的装有exendin-4与聚合 物(200mg/ml PLGA-PEG-PLGA)混合液的离心管，竖直放置于离 心管架中，然后将离心管架置于37℃摇床杂交仪中。待溶液完全形 成乳白色凝胶(约30分钟)后，缓慢加入预热至37℃的缓释介质 (PBS)2ml，于37℃摇床杂交仪(摇速为75V/min)中进行释放试 验(试验方法参见Wei Wang，et al.Acceleration of diabetic wound healing with chitosan-crosslinked collagen sponge containing recombinant human acidic fibroblast growth factor in healing-impaired STZ diabetic rats.Life Sciences，82(2008)，190-204)，分别于1h，2h， 4h，6h，8h，1d，2d，3d，4d，5d，6d，7d，8d，9d，10d，13d，17d， 24d取出全部缓释介质，再补充等量同温空白缓释介质(20mM的磷 酸盐缓冲液)2ml。将上述于不同时间点获取的样品分别经0.22μm 微孔滤膜过滤并离心，用高效液相色谱法(HPLC)测定样品中 exendin-4含量，计算exendin-4的累积释放百分率，以累积释放百分 率对时间作图，得到exendin-4释放曲线。试验重复3次，取平均值。 Exendin-4从含有200mg/ml PLGA-PEG-PLGA的温度敏感型水凝胶 中释放的整个释放曲线见图2。结果表明，exendin-4在水凝胶中释放， 最初有个快速释放期，原因是部分exendin-4没有和水凝胶完全结合 所致，1天后，exendin-4在水凝胶中呈曲线释放，到第17天左右累 计释放率超过90％，具有长效缓释的效果。

实施例7：Exendin-4活性测定

与实施例5操作相同，取实施例3制备的装有exendin-4与聚合 物(200mg/ml PLGA-PEG-PLGA)混合液的离心管，竖直放置于离 心管架中，然后将离心管架置于37℃摇床中。待溶液完全形成乳白 色凝胶(约30分钟)后，缓慢加入预热至37℃的缓释介质(PBS) 2ml，于37℃摇床杂交仪(摇速为75V/min)中进行释放试验(试验方 法参见Wei Wang，et al.Acceleration of diabetic wound healing with chitosan-crosslinked collagen sponge containing recombinant human acidic fibroblast growth factor in healing-impaired STZ diabetic rats. Life Sciences，82(2008)，190-204)，分别于第1、3、7及14天取出全 部缓释介质，再补充等量同温空白缓释介质(20mM的磷酸盐缓冲 液)2ml。将上述于不同时间点获取的样品分别经0.22μm微孔滤膜 过滤并离心，通过检测exendin-4与细胞表面的GLP-1受体结合所产 生cAMP的量，对exendin-4的活性进行测定(测定方法参见中国专 利200610076398.2)，同时通过HPLC检测其释放量。结果见图3、 图4。其中图3的结果表明：exendin-4的活性具有剂量依赖关系，第 1，3，7天样品没有显著性差异，第14天与1，3，7天具有显著性 差异，说明exendin-4在7-14天开始失活；图4的结果表明：在第1， 3，7天取样的exendin-4活性没有显著差异，说明在7天内exendin-4 活性仍保持完好；而14天exendin-4活性略有下降，说明exendin-4 在7-14天时开始失活。

实施例8：Exendin-4水凝胶的药效学实验

实验药品：实施例3制备的PLGA-PEG-PLGA共聚物浓度为250 mg/ml，exendin-4浓度为1.0mg/ml的水凝胶，使用注射用水稀释。

实验动物：6周龄的db/db小鼠，共30只。

实验分组：将30只小鼠随机分为5组，即：

exendin-4对照组(exendin-4给药量0.2μg/kg，每天一次；简称 对照组)；

PLGA-PEG-PLGA凝胶组(无exendin-4，每周一次；简称凝胶 组)；

exendin-4水凝胶大剂量组(exendin-4给药量4μg/kg，每周一次； 简称大剂量组)；

exendin-4水凝胶中剂量组(exendin-4给药量2μg/kg，每周一次； 简称中剂量组)；

exendin-4水凝胶小剂量组(exendin-4给药量1μg/kg，每周一次； 简称小剂量组)。

实验方法：将实验动物在温度25℃、相对湿度60％、自由饮水、 定时定量的环境中饲养一周，然后皮下注射给药，每次给药前禁食4 小时。给药后于0h、1h、2h、4h、8h、1d、2d、3d、4d、5d、6d、 7d、8d、10d、12d、14d取小鼠尾静脉血进行快速血糖测定(所用血 糖仪及血糖试纸均为强生公司生产)。

实验结果：实验结果见图5，其中exendin-4水凝胶组均可明显 降低血糖；与对照组相比，exendin-4水凝胶组降低血糖稍迟，但8 小时左右即可达到显著降低血糖的作用，12小时之后血糖一直维持 在正常水平，三个剂量组之间没有显著差异；凝胶组的动物血糖没有 明显变化。