优化的斑马鱼卵黄蛋白原基因及其表达载体和应用

摘要

本发明公开了优化的斑马鱼卵黄蛋白原VTG全基因及其表达载体和应用，属于生物工程技术领域。本发明是以斑马鱼(Danio rerio)卵黄蛋白原vtg1全基因(Danio rerio，vitellogenin 1，NCBI accession：NP_001038362 NP_739573 XP_691311)序列为模板，利用大肠杆菌优化密码子替换其19个大肠杆菌稀有密码子，消除其内部10个的NdeI，EcoliI，NotI，SacI和BamHI等核酸限制性内切酶的酶切位点，设计并合成了编码完整的斑马鱼卵黄蛋白原VTG的新基因nvtg1，构建了含该nvtg1基因的表达质粒和含该质粒的工程菌。首次实现斑马鱼卵黄蛋白原VTG的重组表达，VTG蛋白产量可以达到3mg/ml，Western实验表明其抗原性显著，实现了VTG蛋白在原核生物大肠杆菌中高效率表达，适合工业化生产。