新型锝-99m标记的高级脂肪酸衍生物

摘要

一种新型锝-99m标记的高级脂肪酸衍生物，三羰基锝与高级脂肪酸环戊二烯相配位，所述与环戊二烯相连的脂肪酸中包括羰基和不饱和环状基团，可作为心肌显像剂使用，解决了现有技术中存在的锝-99m标记的高级脂肪酸衍生物应用于心肌显像剂时，肝本底高或者血本底高的缺点，从而提供了一种肝本底和血本底都较低，能够作为心肌显像剂应用于临床的新型锝-99m标记的高级脂肪酸衍生物。

说明书

技术领域

本发明涉及一种高级脂肪酸衍生物。具体地说是一种新型锝-99m标记的高级脂肪酸衍生物。

背景技术

心脑血管疾病包括心脏病、高血压、高血脂症等，目前已成为危害人们健康的主要疾病。在心脏病的防治过程中，放射性药物在心脏病的早期诊断方面具有重要作用，由于在心肌内，脂肪酸通过氧化分解的代谢形式释放能量，当心肌局部缺血时，心肌对脂肪酸的代谢和清除呈下降趋势，利用放射性元素标记的心肌代谢显像剂可用来对心肌缺血定位，测量反映心肌代谢功能的变化，检测心肌细胞存活的情况等，从而为临床诊断心血管疾病提供可靠的依据。

基于正电子发射X射线层析照相技术PET/单光子发射计算机化断层显像技术SPECT的放射性药物被认为是实现早期诊断的最佳途径，由于锝-99m具有半衰期合适、能量适中等优良的核性质，并且制备简单、无挥发性，同时，锝-99m核心种类很多、标记过程简单、利于进行药物设计，因此锝-99m是放射性药物研究的优选核素。80年代已应用于临床诊断的^99mTc-MIBI(                                                )心肌灌注显像对诊断心肌缺血及坏死有一定的准确性，但近年来研究表明这些方法不能很准确的评估出心肌细胞的存活力。

目前，国内研究的锝-99m标记的心肌代谢显像剂比较少, 且心肌摄取不高。 而国际上研究的锝-99m标记的心肌代谢显像剂实现了较高的心肌摄取。

2006年的期刊《同位素》中公开了文献《长链脂肪酸衍生物^99mTc-MAMA-(CH2)_nCOOH的制备和生物分布》，其中北京师范大学王学斌教授等以短链二酸和MAMA配体为起始原料，合成了一系列锝-99m核心标记的长链脂肪酸衍生物[^99mTc]-MAMA-(CH₂)_nCOOH (n=14,15,16,17)。正常小鼠的生物分布数据显示，5min时这类标记物在心肌中的摄取百分数依次为5.73%ID/g、5.52%ID/g、4.82%ID/g、4.03%ID/g（%ID/g为每克组织的放射性药物占总注射剂量的百分数）,但血液对放射性药物的摄取量高于心肌对放射性药物的摄取量即血本底较高，并且血清除较慢，不适合作为心肌显像剂进行应用。

2008年的期刊Applied Radiation and Isotopes中，褚泰伟等人通过[^99mTc(CO)₃(H₂O)₃]⁺核心与脂肪酸配体进行配合得到^99mTc(CO)₃-IUA和^99mTc(CO)₃-BPIUA ，遗憾的是这两种化合物和其它的锝标记的脂肪酸类似物一样，小鼠体内分布研究表明血/心比值比较高，即血液对放射性药物的摄取量高于心肌对放射性药物的摄取量，因此这两个化合物不适合用于心肌显像研究。

2007年的期刊Journal of Medicinal Chemistry 中公开了文献Technetium-99m-labeled long chain fatty acid analogues metabolized by β-oxidation in the heart，其中Yasushi Arano等首次报道了用[^99mTc]CpTT-PA进行心肌脂肪酸代谢测定，心肌代谢实验显示67%进入到心脏的[^99mTc]CpTT-PA被吸收，实现了较高的心肌摄取，但是10分钟后，心肌的摄取量为1.87%ID/g，肝的摄取量为7.56%ID/g，放射性药物在肝内的摄取量高于心肌，即形成了较高的肝本底，不利于心肌的显像。

2008年的，期刊Journal of Medicinal Chemistry 中公开了文献16-Cyclopentadienyl Tricarbonyl Tc 16-Oxo-hexadecanoic Acid: Synthesis and Evaluation of Fatty Acid Metabolism in Mouse Myocardium，其中，Yearn Seong Choe等在[^99mTc]CpTT-PA的结构基础上保留了与戊二烯环相连的羰基，合成了化合物[^99mTc]-CpTT-16-oxo-HAD 。动物实验表明：心肌摄取量较[^99mTc]CpTT-PA有所提高，但是1分钟时肝的摄取量达到了25.6 %ID/g, 肝本底偏高，直接影响心肌的显像。

因此，在现有技术中，锝-99m标记的高级脂肪酸显像剂的优点是有较高的心肌初始摄取和快速的心肌代谢；但锝-99m标记高级脂肪酸心肌显像剂在肝中的代谢较慢或者在血液中的代谢较慢，形成较高的肝本底或血本底，从而影响心肌的显像。因此，目前还没有一个锝-99m标记的高级脂肪酸显像剂进入到临床实验阶段。

发明内容

为此，本发明所要解决的技术问题在于现有技术中存在的锝-99m标记的高级脂肪酸衍生物应用于心肌显像剂时，存在肝本底高或者血本底高的缺点，从而提供了一种肝本底和血本底都较低，能够作为心肌显像剂应用于临床的新型锝-99m标记的高级脂肪酸衍生物。

为解决上述技术问题，本发明提供了一种如式（Ⅰ）所示的锝-99m标记的高级脂肪酸衍生物，

，n为大于等于10小于等于16的自然数，X为不饱和环状基团。

所述不饱和环状基团为芳香基团。

所述化合物的结构式为

，n为大于等于10小于等于16的自然数。

所述化合物为15-环戊二烯基三羰基锝-15-羰基十五酰基-5-噻吩-2-乙酸

、17-环戊二烯基三羰基锝-17-羰基十七酰基-5-呋喃-2-乙酸、17-环戊二烯基三羰基锝-17-羰基十七酰基-5-(N-甲基)吡咯-2-乙酸  或15-环戊二烯基三羰基锝-15-羰基十五酰基-4-苯乙酸。

所述锝-99m标记的高级脂肪酸衍生物作为心肌显像剂的应用。

制备所述锝-99m标记的高级脂肪酸衍生物的方法，包括以下步骤：

（1）将氯化亚砜、三氯氧磷或五氯化磷与长链脂肪烃二酸(II’)反应得到如式（Ⅱ）所示的长链脂肪烃二酰氯，所述长链脂肪烃二酸为十三碳直链脂肪烃二酸、十四碳直链脂肪烃二酸或十五碳直链脂肪烃二酸；

（2）将所述长链脂肪烃二酰氯与二茂铁反应，生成一个氯被二茂铁取代的中间体，中间体结构如式（Ⅲ）所示； 

（3）将所述步骤（2）中得到的中间体与2-位不饱和环状基团乙酸甲酯反应，经分离后得到的固体为产物前体，产物前体的结构式如式（Ⅳ）所示；

（4）将所述产物前体与Na^99mTcO₄淋洗液、六羰基铬、三氯化铬、甲醇反应后水解得到产物如式（Ⅰ）所示的锝-99m标记的高级脂肪酸衍生物。

所述步骤（4）为，把Na^99mTcO₄淋洗液加入聚四氟高压罐中，用N₂吹干；分别加入步骤（3）中得到的产物前体、Cr(CO)₆、CrCl₃和甲醇后，密封聚四氟高压罐；油浴磁力搅拌；反应结束后，在冰浴下迅速冷却，然后在水浴下用N₂吹干；剩下的产物用二氯甲烷萃取，过滤，用N₂吹干二氯甲烷溶剂；残留物用甲醇溶解，并加入NaOH后在水浴下反应；冷却后，再加入HCl中和，用二氯甲烷萃取；用HPLC进行纯化、分析鉴定得到产物。

制备所述锝-99m标记的高级脂肪酸衍生物的方法，包括以下步骤：

（1）在冰浴条件下，将新蒸氯化亚砜、三氯氧磷或五氯化磷缓慢滴加到长链脂肪烃二酸(II’)中，滴加完毕后，继续搅拌5-10min，然后升温至80-95℃，回流6-12小时，生成长链脂肪烃二酰氯（II）；反应结束后，蒸除多余的SOCl₂，产物不作进一步纯化直接下一步反应，所述氯化亚砜与长链脂肪烃二酸（II’）为摩尔比为10:1-20:1，所述三氯氧磷或五氯化磷与长链脂肪烃二酸（II’）为摩尔比1.5:1-3:1；

（2）向步骤（1）中的产物长链脂肪烃二酰氯（II）中加入无水二氯甲烷溶解，得到长链脂肪烃二酰氯（II）的二氯甲烷溶液；在冰浴条件下，将含二茂铁的二氯甲烷溶液缓慢滴入上述长链脂肪烃二酰氯（II）的二氯甲烷溶液中；在N₂保护下，将无水AlCl₃缓慢加入混合液中，20-30 min加完, 在冰浴下继续搅拌1-2h，升至室温搅拌10-20min，生成中间体（III）；反应结束后，无需进一步纯化，直接进行下一步；

所述步骤（2）中，所述长链脂肪烃二酰氯（II）与所述二茂铁的摩尔比为1:1，使用无水AlCl₃作催化剂，所述二茂铁与所述无水AlCl₃的摩尔比为1:1至1:1.2；

（3）把步骤（2）中的产物置于冰水浴中，加入 2-位不饱和环状基团乙酸甲酯，在N₂保护下，将无水AlCl₃缓慢加入混合液中，10-20 min加完，在冰浴下搅拌1-2h，升至室温搅拌10-20min；反应结束后，缓慢加入盐酸，用二氯甲烷萃取，无水MgSO₄干燥，过滤，旋蒸；用体积比为10:1至2:1的石油醚和乙酸乙酯作为展开剂过硅胶柱，得到产物前体（Ⅳ）；

所述步骤（3）中，所述中间体（III）与所述2-位不饱和环状基团乙酸甲酯的摩尔比为1:1-1:1.5，使用无水AlCl₃或无水SnCl₂作催化剂，所述无水AlCl₃或无水SnCl₂与所述2-位不饱和环状基团乙酸甲酯的摩尔比为1:1.5至1:3；

（4）把放射性活度为740 MBq或370 MBq的Na^99mTcO₄淋洗液加入一个5mL聚四氟高压罐中，在70-100℃下用N₂吹干；分别加入所述产物前体（Ⅳ）、Cr(CO)₆、CrCl₃和甲醇后，密封聚四氟高压罐；在150-180℃油浴下，磁力搅拌50-60min；反应结束后，在冰浴下迅速冷却5-10min，然后在50-70℃水浴下用N₂吹干；剩下的产物用二氯甲烷萃取，过滤，用N₂吹干二氯甲烷溶剂；残留物用甲醇溶解，并加入NaOH后在70-80℃水浴下反应10-15 min；冷却后，再加入0.1mol/L的HCl中和，用二氯甲烷萃取；用HPLC进行纯化得到产物；

所述产物前体（IV）、六羰基铬、三氯化铬与甲醇的摩尔比为3.00-5.34 μmol ：4.82-9.64 μmol：1.60-3.21 μmol：6.18-9.89mmol。

所述步骤（3）中，所述2-位不饱和环状基团乙酸甲酯为2-噻吩乙酸甲酯、2-呋喃乙酸甲酯、2-吡咯乙酸甲酯或2-苯基乙酸甲酯。

制备所述锝-99m标记的高级脂肪酸衍生物的方法，包括以下步骤：

（1）在冰浴条件下，将15mL新蒸SOCl₂ 缓慢滴加到11mmol十五二酸中，滴加完毕后，继续搅拌10min，然后升温至90℃，回流12小时，生成产物十五二酰氯；反应结束后，蒸除多余的SOCl₂，产物不作进一步纯化直接下一步反应；

（2）向步骤（1）中的产物十五二酰氯中加入15mL无水二氯甲烷溶解，得到十五二酰氯的二氯甲烷溶液；在冰浴条件下，将15mL 含11mmol二茂铁的二氯甲烷溶液缓慢滴入上述十五二酰氯的二氯甲烷溶液中；在N₂保护下，将11.2mmol无水AlCl₃缓慢加入混合液中，30min加完, 在冰浴下继续搅拌1h，升至室温搅拌10min，生成15-二茂铁-15-羰基十五酰氯；反应结束后，无需进一步纯化，直接进行下一步；

（3）把步骤（2）中的产物置于冰水浴中，加入11mmol 2-噻吩乙酸甲酯，在N₂保护下，将11.2mmol无水AlCl₃缓慢加入混合液中，10min加完，在冰浴下搅拌1h，升至室温搅拌10min；反应结束后，缓慢加入30mL 1mol/L的盐酸，用二氯甲烷萃取，无水MgSO₄干燥，过滤，旋蒸；用体积比为10:1至2:1的石油醚和乙酸乙酯作为展开剂过硅胶柱，得到产物前体，产物前体为15-二茂铁-15-羰基十五酰基-5-噻吩-2-乙酸甲酯；

（4）把0.2 mL Na^99mTcO₄淋洗液加入一个5mL聚四氟高压罐中，所述Na^99mTcO₄淋洗液的放射性活度为740 MBq，在70℃下用N₂吹干；分别加入5.34 μmol所述产物前体、9.64 μmolCr(CO)₆、3.21 μmol CrCl₃和300 μL甲醇后，密封聚四氟高压罐；在160℃油浴下，磁力搅拌60min；反应结束后，在冰浴下迅速冷却10min，然后在50℃水浴下用N₂吹干；剩下的产物用二氯甲烷萃取，过滤，用N₂吹干二氯甲烷溶剂；残留物用200 μL甲醇溶解，并加入50μL 0.3 mol/L的NaOH后在70℃水浴下反应10min；冷却后，再加入0.1mol/L的HCl中和，用二氯甲烷萃取；用HPLC进行纯化得到产物15-环戊二烯基三羰基锝-15-羰基十五酰基-5-噻吩-2-乙酸。

制备所述锝-99m标记的高级脂肪酸衍生物的方法，包括以下步骤：

（1）在冰浴条件下，将15mL新蒸SOCl₂ 缓慢滴加到11mmol十七二酸中，滴加完毕后，继续搅拌10min，然后升温至80-90℃，回流6-12个小时，生成产物十七二酰氯；反应结束后，蒸除多余的SOCl₂，产物不作纯化直接下一步反应；

（2）向步骤（1）得到的产物十七二酰氯中加入15mL无水二氯甲烷溶解，得到十七二酰氯的二氯甲烷溶液；在冰浴条件下，将15mL 含11mmol二茂铁的二氯甲烷溶液缓慢滴入上述十七二酰氯的二氯甲烷溶液中；在N₂保护下，将11.2mmol无水AlCl₃缓慢加入混合液中，30 min加完, 在冰浴下继续搅拌1h ，升至室温搅拌10min，生成17-二茂铁-17-羰基十七酰氯；反应结束后，无需进一步纯化，直接进行下一步；

（3）把步骤（2）得到的产物置于冰水浴中，加入11mmol2-呋喃乙酸甲酯，在N₂保护下，将11.2mmol无水SnCl₂缓慢加入混合液中，10min加完，在冰浴下搅拌1h，升至室温搅拌10min；反应结束后，缓慢加入30mL 1mol/L的盐酸，用二氯甲烷萃取，无水MgSO₄干燥，过滤，旋蒸；用体积比为10:1至2:1的石油醚和乙酸乙酯作为展开剂过硅胶柱，得到产物前体，产物前体是17-二茂铁-17-羰基十七酰基-5-呋喃-2-乙酸甲酯；

（4）把0.2 mLNa^99mTcO₄淋洗液加入一个5mL聚四氟高压罐中，所述Na^99mTcO₄淋洗液的放射性活度为740 MBq，在70-100℃下用N₂吹干；分别加入5.34μmol所述产物前体、9.64μmolCr(CO)₆、3.21 μmol CrCl₃和300 μL甲醇后，密封聚四氟高压罐；在150-160℃油浴下，磁力搅拌60min；反应结束后，在冰浴下迅速冷却5-10min，然后在50℃水浴下用N₂吹干；剩下的产物用二氯甲烷萃取，过滤，用N₂吹干二氯甲烷溶剂；残留物用200 μL甲醇溶解，并加入50μL 0.3mol/L NaOH后在70-80℃水浴下反应10min；冷却后，再加入0.1 mol/L HCl中和，用二氯甲烷萃取；用HPLC进行纯化得到产物17-环戊二烯基三羰基锝-17-羰基十七酰基-5-呋喃-2-乙酸。

制备所述锝-99m标记的高级脂肪酸衍生物的方法，包括以下步骤：

（1）在冰浴条件下，将15mL新蒸SOCl₂ 缓慢滴加到11mmol十七二酸中，滴加完毕后，继续搅拌10min，然后升温至80-95℃，回流6-12个小时，生成产物十七二酰氯；反应结束后，蒸除多余的SOCl₂，产物不作纯化直接下一步反应；

（2）向步骤（1）得到的产物十七二酰氯中加入15mL无水二氯甲烷溶解，得到十七二酰氯的二氯甲烷溶液；在冰浴条件下，将15mL 含11mmol二茂铁的二氯甲烷溶液缓慢滴入上述十七二酰氯的二氯甲烷溶液中；在N₂保护下，将11.2mmol无水AlCl₃缓慢加入混合液中，30 min加完, 在冰浴下继续搅拌1h，升至室温搅拌10min；反应结束后，无需进一步纯化，直接进行下一步；

（3）把步骤（2）得到的产物置于冰水浴中，加入11mmol2-(N-甲基)吡咯乙酸甲酯，在N₂保护下，将11.2mmol无水AlCl₃缓慢加入混合液中，10 min加完，在冰浴下搅拌1h，升至室温搅拌10min；反应结束后，缓慢加入30mL 1mol/L的盐酸，用二氯甲烷萃取，无水MgSO₄干燥，过滤，旋蒸；用体积比为10:1至2:1的石油醚和乙酸乙酯作为展开剂过硅胶柱，得到产物前体，产物前体为17-二茂铁-17-羰基十七酰基-5--(N-甲基)吡咯乙酸甲酯；

（4）把0.2 mLNa^99mTcO₄淋洗液加入一个5mL聚四氟高压罐中，所述Na^99mTcO₄淋洗液的放射性活度为740 MBq，在70-100℃下用N₂吹干；分别加入5.34μmol所述产物前体、9.64μmolCr(CO)₆、3.21μmol CrCl₃和300 μL甲醇后，密封聚四氟高压罐；在150-160℃油浴下，磁力搅拌60min；反应结束后，在冰浴下迅速冷却5-10min，然后在50℃水浴下用N₂吹干；剩下的产物用二氯甲烷萃取，过滤，用N₂吹干二氯甲烷溶剂；残留物用200 μL甲醇溶解，并加入50μL 0.3 mol/L 的NaOH后在70-80℃水浴下反应10min；冷却后，再加入150μL 0.1 mol/L HCl中和，用二氯甲烷萃取；用HPLC进行纯化得到产物17-环戊二烯基三羰基锝-17-羰基十七酰基-5-(N-甲基)吡咯-2-乙酸。

制备所述锝-99m标记的高级脂肪酸衍生物的方法，包括以下步骤：

（1）在冰浴条件下，将15mL新蒸SOCl₂ 缓慢滴加到11mmol十五二酸中，滴加完毕后，继续搅拌10min，然后升温至80-95℃，回流6-12个小时，生成产物十五二酰氯；反应结束后，蒸除多余的SOCl₂，产物不作进一步纯化直接下一步反应；

（2）向步骤（1）得到的产物十五二酰氯中加入15mL无水二氯甲烷溶解，得到十五二酰氯的二氯甲烷溶液；在冰浴条件下，将15mL 含11mmol二茂铁的二氯甲烷溶液缓慢滴入上述十五二酰氯的二氯甲烷溶液中；在N₂保护下，将11.2mmol无水AlCl₃缓慢加入混合液中， 30 min加完, 在冰浴下继续搅拌1h，升至室温搅拌10min，生成15-二茂铁-15-羰基十五酰氯；反应结束后，无需进一步纯化，直接进行下一步； 

（3）把步骤（2）得到的产物置于冰水浴中，加入11mmol苯乙酸甲酯，在N₂保护下，将11.2mmol无水AlCl₃缓慢加入混合液中，10min加完，在冰浴下搅拌1h，升至室温搅拌10min；反应结束后，缓慢加入30mL 1mol/L的盐酸，用二氯甲烷萃取，无水MgSO₄干燥，过滤，旋蒸；用体积比为10:1至2:1的石油醚和乙酸乙酯作为展开剂过硅胶柱，得到产物前体，产物前体为15-二茂铁-15-羰基十五酰基-4-苯乙酸甲酯； 

（4）把0.2 mLNa^99mTcO₄淋洗液加入一个5mL聚四氟高压罐中，所述Na^99mTcO₄淋洗液的放射性活度为740 MBq，在70-100℃下用N₂吹干；分别加入5.34μmol所述产物前体、9.64μmolCr(CO)₆、3.21μmol CrCl₃和300μL甲醇后，密封聚四氟高压罐；在150-160℃油浴下，磁力搅拌60min；反应结束后，在冰浴下迅速冷却5-10min，然后在50℃水浴下用N₂吹干；剩下的产物用二氯甲烷萃取，过滤，用N₂吹干二氯甲烷溶剂；残留物用200 μL甲醇溶解，并加入50μL 0.3 mol/L NaOH后在70-80℃水浴下反应10min；冷却后，再加入0.1 mol/L的 HCl中和，用二氯甲烷萃取；用HPLC进行纯化得到产物15-环戊二烯基三羰基锝-15-羰基十五酰基-4-苯乙酸。

本发明的上述技术方案相比现有技术具有以下优点。

（1）本发明中的新型锝-99m标记的高级脂肪酸衍生物，结合戊二烯环与羰基锝配位对系列直链脂肪酸和β-取代直链脂肪酸进行标记，得到的锝-99m标记的高级脂肪酸衍生物为中性，能够成功的进入心肌，并且还引入环戊二烯相连的脂肪酸羰基基团，降低了产物的脂溶性。锝-99m标记的茂环脂肪酸化合物在动物体内肝摄取过高的原因与化合物的脂溶性有关，现有技术中高级脂肪酸本身的脂溶性就很好，与锝原子配位的茂环又增加了标记物的酯溶性，导致肝的摄取增加，影响了心肌的显像效果。本发明中的化合物通过引入羰基，降低产物的脂溶性，降低了肝的摄取，提高心肌的摄取，使其在具有较优的心肌显像性能，既本发明中的化合物同时具有较高的心肌摄取性能、很低的肝本底摄取性能和较优的心肌显像性能。

（2）本发明中的新型锝-99m标记的高级脂肪酸衍生物，其中的噻吩取代基、呋喃取代基、吡咯取代基结构利于心肌对锝-99m标记的高级脂肪酸衍生物的摄取，能提高心肌的摄取量，有利于心肌的显像效果。

（3）本发明中的新型锝-99m标记的高级脂肪酸衍生物，其中的原料锝-99m比较廉价，高级脂肪酸本身在生物体内无毒，由于具有较高的心肌摄取性能、很低的肝本底摄取性能和较优的心肌显像性能，适合应用于心肌显像剂，具有较好的心肌显像效果。

（4）本发明的制备方法中，优选氯化亚砜与长链脂肪烃二酸反应，得到的长链脂肪烃二酰氯产率较高，几乎为100%。 

附图说明

为了使本发明的内容更容易被清楚的理解，下面根据本发明的具体实施例并结合附图，对本发明作进一步详细的说明，其中

图1  是产物前体CpOPTAM的¹HNMR谱图；

图2  是产物前体CpOPTAM的¹³CNMR谱图；

图3  是产物前体CpOPTAM的MS谱图；

图4  是Re-CpTTOPTAA的¹HNMR谱图；

图5  是Re-CpTTOPTAA的¹³CNMR谱图；

图6  是Re-CpTTOPTAA的MS谱图；

图7  是SD大鼠尾静脉注射^99mTc-CpTTOPTAA 30 min后的心肌匀浆提取物的radio-HPLC图；

图8  是^99mTc-CpTTOPTAA的radio-HPLC图；

图9  是SD大鼠尾静脉注射Re-CpTTOPTAA  30 min后的心肌匀浆提取物的质谱分析图。

具体实施方式

通过以下化合物对本发明进行说明：

实施例1

化合物一：15-环戊二烯基三羰基锝-15-羰基十五酰基-5-噻吩-2-乙酸 (^99mTc-CpTTOPTAA)

所述化合物一(^99mTc-CpTTOPTAA)的合成路线为：

所述化合物一的合成步骤为：

（1）   在冰浴条件下，将15mL新蒸SOCl₂ 缓慢滴加到11mmol十五二酸中，滴加完毕后，继续搅拌10min，然后升温至90℃，回流12个小时，发生如下反应，生成产物十五二酰氯。反应结束后，蒸除多余的SOCl₂，产物不作进一步纯化直接下一步反应；步骤（1）对应以下反应式：

（2）   向步骤（1）得到的产物中加入15mL无水二氯甲烷溶解，得到十五二酰氯的二氯甲烷溶液；在冰浴条件下，将15mL 含11mmol二茂铁的二氯甲烷溶液缓慢滴入上述十五二酰氯的二氯甲烷溶液中；在N₂保护下，将11.2mmol无水AlCl₃缓慢加入混合液中，30min加完，在冰浴下继续搅拌1h，升至室温搅拌10min；反应结束后，无需进一步纯化，直接进行下一步；步骤（2）对应以下反应式：

（3）   把步骤（2）得到的产物置于冰水浴中，加入11mmol2-噻吩乙酸甲酯，在N₂保护下，将11.2mmol无水AlCl₃缓慢加入混合液中，10min加完，在冰浴下搅拌1-2h，升至室温搅拌10min。反应结束后，缓慢加入30mL 1mol/L的盐酸，用二氯甲烷萃取，无水MgSO₄干燥，过滤，旋蒸。用体积比为10:1至2:1的石油醚和乙酸乙酯作为展开剂过硅胶柱，得到3.8g棕红色固体为产物前体，产率58.7%。步骤（3）对应以下反应式：

（4）   把0.2ml放射性活度为740 MBq 的Na^99mTcO₄淋洗液加入一个5mL聚四氟高压罐中，在70℃下用N₂吹干；分别加入5.34 μmol所述产物前体、9.64 μmolCr(CO)₆、3.21 μmol CrCl₃和300 μL甲醇后，密封聚四氟高压罐；在160℃油浴下，磁力搅拌60min；反应结束后，在冰浴下迅速冷却10min，然后在50℃水浴下用N₂吹干；剩下的产物用二氯甲烷萃取，过滤，用N₂吹干二氯甲烷溶剂；残留物用200 μL甲醇溶解，并加入50μL 0.3 mol/L的NaOH后在70℃水浴下反应10min；冷却后，再加入0.1mol/L的HCl中和，用二氯甲烷萃取；该产物用HPLC进行纯化、分析鉴定。使用Alltech C-18反相分析色谱柱（4.6mm×150mm, 5μm），放射性化合物用Flow-Count放射性检测器检测。流动相为20%的水（A相）和80%的乙腈（B相），流速为2mL/min，分析样品时的进样量为200μL，保留时间为16.42min。标记率可达20.0%。步骤（4）对应以下反应式：

通过以上步骤即可得到化合物一(^99mTc-CpTTOPTAA)。

所述化合物一也可以通过以下合成步骤制备：

（1）在冰浴条件下，将15mL新蒸SOCl₂ 缓慢滴加到11mmol十五二酸中，滴加完毕后，继续搅拌5min，然后升温至95℃，回流6个小时，发生如下反应，生成产物十五二酰氯。反应结束后，蒸除多余的SOCl₂，产物不作进一步纯化直接下一步反应；步骤（1）对应以下反应式：

（2）向步骤（1）得到的产物中加入15mL无水二氯甲烷溶解，得到十五二酰氯的二氯甲烷溶液；在冰浴条件下，将15mL 含11mmol二茂铁的二氯甲烷溶液缓慢滴入上述十五二酰氯的二氯甲烷溶液中；在N₂保护下，将11.2mmol无水AlCl₃缓慢加入混合液中，20min加完，在冰浴下继续搅拌2h，升至室温搅拌20min；反应结束后，无需进一步纯化，直接进行下一步；步骤（2）对应以下反应式：

（3）把步骤（2）得到的产物置于冰水浴中，加入11mmol2-噻吩乙酸甲酯，在N₂保护下，将11.2mmol无水AlCl₃缓慢加入混合液中，20min加完，在冰浴下搅拌1h，升至室温搅拌10min。反应结束后，缓慢加入20mL 1mol/L的盐酸，用二氯甲烷萃取，无水MgSO₄干燥，过滤，旋蒸。用体积比为10:1至2:1的石油醚和乙酸乙酯作为展开剂过硅胶柱，得到3.8g棕红色固体为产物前体，产率58.7%。步骤（3）对应以下反应式：

（4）   把0.2ml放射性活度为740 MBq 的Na^99mTcO₄淋洗液加入一个5mL聚四氟高压罐中，在100℃下用N₂吹干；分别加入5.34 μmol所述产物前体、9.64 μmolCr(CO)₆、3.21 μmol CrCl₃和300 μL甲醇后，密封聚四氟高压罐；在180℃油浴下，磁力搅拌50min；反应结束后，在冰浴下迅速冷却5min，然后在50℃水浴下用N₂吹干；剩下的产物用二氯甲烷萃取，过滤，用N₂吹干二氯甲烷溶剂；残留物用200 μL甲醇溶解，并加入50μL 0.3 mol/L的NaOH后在80℃水浴下反应15min；冷却后，再加入0.1mol/L的HCl中和，用二氯甲烷萃取；该产物用HPLC进行纯化、分析鉴定。使用Alltech C-18反相分析色谱柱（4.6mm×150mm, 5μm），放射性化合物用Flow-Count放射性检测器检测。流动相为20%的水（A相）和80%的乙腈（B相），流速为2mL/min，分析样品时的进样量为200μL，保留时间为16.42min。标记率可达25.0%。步骤（4）对应以下反应式：

通过以上步骤即可得到化合物一(^99mTc-CpTTOPTAA)。

实施例2

化合物二：17-环戊二烯基三羰基锝-17-羰基十七酰基-5-呋喃-2-乙酸 (^99mTc-CpTTOPFAA) 

所述化合物二(^99mTc-CpTTOPFAA)的合成路线为：

所述化合物二的合成步骤为：

（1）在冰浴条件下，将15mL新蒸SOCl₂ 缓慢滴加到11mmol十七二酸中，滴加完毕后，继续搅拌10min，然后升温至80-90℃，回流6-12个小时，发生如下反应，生成产物十七二酰氯。反应结束后，蒸除多余的SOCl₂，产物不作进一步纯化直接下一步反应。步骤（1）对应以下反应式：

（2）向步骤（1）得到的产物中加入15mL无水二氯甲烷溶解，得到十七二酰氯的二氯甲烷溶液；在冰浴条件下，将15mL 含11mmol二茂铁的二氯甲烷溶液缓慢滴入上述十七二酰氯的二氯甲烷溶液中；在N₂保护下，将11.2mmol无水AlCl₃缓慢加入混合液中，30min加完，在冰浴下继续搅拌1h，升至室温搅拌10min；反应结束后，无需进一步纯化，直接进行下一步；步骤（2）对应以下反应式：

（3）把步骤（2）得到的产物置于冰水浴中，加入11mmol2-呋喃乙酸甲酯，在N₂保护下，将11.2mmol无水SnCl₂缓慢加入混合液中，10min加完，在冰浴下搅拌1h，升至室温搅拌10min；反应结束后，缓慢加入30mL 1mol/L的盐酸，用二氯甲烷萃取，无水MgSO₄干燥，过滤，旋蒸；用体积比为10:1至2:1的石油醚和乙酸乙酯作为展开剂过硅胶柱，得到产物前体；步骤（3）对应以下反应式：

（4）把0.2ml放射性活度为740 MBq的Na^99mTcO₄淋洗液加入一个5mL聚四氟高压罐中，在70-100℃下用N₂吹干；分别加入5.34μmol所述产物前体、9.64μmolCr(CO)₆、3.21μmol CrCl₃和300μL甲醇后，密封聚四氟高压罐；在150-160℃油浴下，磁力搅拌60min；反应结束后，在冰浴下迅速冷却5-10min，然后在50℃水浴下用N₂吹干；剩下的产物用二氯甲烷萃取，过滤，用N₂吹干二氯甲烷溶剂；残留物用200 μL甲醇溶解，并加入50μL 0.3 mol/L NaOH后在70-80℃水浴下反应10min；冷却后，再加入0.1 mol/L HCl中和，用二氯甲烷萃取；步骤（4）对应以下反应式：

该产物用HPLC进行纯化、分析鉴定。使用Alltech C-18反相分析色谱柱（4.6mm×150mm, 5μm），放射性化合物用Flow-Count放射性检测器检测。流动相为20%的水（A相）和80%的乙腈（B相），流速为2mL/min，分析样品时的进样量为200μL，保留时间为17.02min。标记率可达18.5%。

通过以上步骤即可得到化合物二(^99mTc-CpTTOPFAA)。

实施例3

化合物三：17-环戊二烯基三羰基锝-17-羰基十七酰基-5-(N-甲基)吡咯-2-乙酸 

 (^99mTc-CpTTOPMPAA) 

所述化合物三(^99mTc-CpTTOPMPAA)的合成路线为：

所述化合物三的合成步骤为：

（1）在冰浴条件下，将15mL新蒸SOCl₂ 缓慢滴加到11mmol十七二酸中，滴加完毕后，继续搅拌10min，然后升温至80-95℃，回流6-12个小时，发生如下反应，生成产物十七二酰氯；反应结束后，蒸除多余的SOCl₂，产物不作进一步纯化直接下一步反应；步骤（1）对应以下反应式：

（2）向步骤（1）得到的产物中加入15mL无水二氯甲烷溶解，得到十七二酰氯的二氯甲烷溶液；在冰浴条件下，将15mL 含11mmol二茂铁的二氯甲烷溶液缓慢滴入上述十七二酰氯的二氯甲烷溶液中；在N₂保护下，将11.2mmol无水AlCl₃缓慢加入混合液中，30min加完，在冰浴下继续搅拌1h，升至室温搅拌10min；反应结束后，无需进一步纯化，直接进行下一步；步骤（2）对应以下反应式：

（3）把步骤（2）得到的产物置于冰水浴中，加入11mmol2-(N-甲基)吡咯乙酸甲酯，在N₂保护下，将11.2mmol无水AlCl₃缓慢加入混合液中，10 min加完，在冰浴下搅拌1h，升至室温搅拌10min；反应结束后，缓慢加入30mL 1mol/L的盐酸，用二氯甲烷萃取，无水MgSO₄干燥，过滤，旋蒸；用体积比为10:1至2:1的石油醚和乙酸乙酯作为展开剂过硅胶柱，得到产物前体；步骤（3）对应以下反应式：

（4）把0.2ml放射性活度为740 MBq的Na^99mTcO₄淋洗液加入一个5mL聚四氟高压罐中，在70-100℃下用N₂吹干；分别加入5.34 μmol所述产物前体、9.64 μmolCr(CO)₆、3.21 μmol CrCl₃和300 μL甲醇后，密封聚四氟高压罐；在150-160℃油浴下，磁力搅拌60min；反应结束后，在冰浴下迅速冷却5-10min，然后在50℃水浴下用N₂吹干；剩下的产物用二氯甲烷萃取，过滤，用N₂吹干二氯甲烷溶剂；残留物用200 μL甲醇溶解，并加入50μL 0.3 mol/L 的NaOH后在70-80℃水浴下反应10min；冷却后，再加入0.1 mol/L HCl中和，用二氯甲烷萃取；步骤（4）对应以下反应式：

该产物用HPLC进行纯化、分析鉴定。使用Alltech C-18反相分析色谱柱（4.6mm×150mm, 5μm），放射性化合物用Flow-Count放射性检测器检测。流动相为20%的水（A相）和80%的乙腈（B相），流速为2mL/min，分析样品时的进样量为200μL，保留时间为17.00min。标记率可达17.6%。

通过以上步骤即可得到化合物三(^99mTc-CpTTOPMPAA)。

实施例4

化合物四：15-环戊二烯基三羰基锝-15-羰基十五酰基-4-苯乙酸 (^99mTc-CpTTOPPAA) 

所述化合物四(^99mTc-CpTTOPPAA)的合成路线为：

所述化合物四的合成步骤为：

（1）在冰浴条件下，将15mL新蒸SOCl₂ 缓慢滴加到11mmol十五二酸中，滴加完毕后，继续搅拌10min，然后升温至80-95℃，回流6-12个小时，发生如下反应，生成产物十五二酰氯；反应结束后，蒸除多余的SOCl₂，产物不作进一步纯化直接下一步反应；步骤（1）对应以下反应式：

（2）向步骤（1）得到的产物中加入15mL无水二氯甲烷溶解，得到十五二酰氯的二氯甲烷溶液；在冰浴条件下，将15mL 含11mmol二茂铁的二氯甲烷溶液缓慢滴入上述十五二酰氯的二氯甲烷溶液中；在N₂保护下，将11.2mmol无水AlCl₃缓慢加入混合液中，30min加完，在冰浴下继续搅拌1h，升至室温搅拌10min；反应结束后，无需进一步纯化，直接进行下一步；步骤（2）对应以下反应式：

（3）把步骤（2）得到的产物置于冰水浴中，加入11mmol苯乙酸甲酯，在N₂保护下，将11.2mmol无水AlCl₃缓慢加入混合液中，10min加完，在冰浴下搅拌1h，升至室温搅拌10min；反应结束后，缓慢加入30mL 1mol/L的盐酸，用二氯甲烷萃取，无水MgSO₄干燥，过滤，旋蒸；用体积比为10:1至2:1的石油醚和乙酸乙酯作为展开剂过硅胶柱，得到产物前体；步骤（3）对应以下反应式：

（4）把0.2ml放射性活度为740 MBq的Na^99mTcO₄淋洗液加入一个5mL聚四氟高压罐中，在70-100℃下用N₂吹干；分别加入5.34 μmol所述产物前体、9.64 μmolCr(CO)₆、3.21 μmol CrCl₃和300μL甲醇后，密封聚四氟高压罐；在150-160℃油浴下，磁力搅拌60min；反应结束后，在冰浴下迅速冷却5-10min，然后在50℃水浴下用N₂吹干；剩下的产物用二氯甲烷萃取，过滤，用N₂吹干二氯甲烷溶剂；残留物用200μL甲醇溶解，并加入50μL 0.3 N NaOH后在70-80℃水浴下反应10 min；冷却后，再加入0.1 mol/L的HCl中和，用二氯甲烷萃取；步骤（4）对应以下反应式：

该产物用HPLC进行纯化、分析鉴定。使用Alltech C-18反相分析色谱柱（4.6mm×150mm, 5μm），放射性化合物用Flow-Count放射性检测器检测。流动相为20%的水（A相）和80%的乙腈（B相），流速为2mL/min，分析样品时的进样量为200μL，保留时间为18.32min。标记率可达21.0%。

通过以上步骤即可得到化合物四(^99mTc-CpTTOPPAA)。

对比例

对比化合物：15-环戊二烯基三羰基锝-15-羰基十五羧酸  (^99mTc-CpTTOPDA)

所述对比化合物(^99mTc-CpTTOPDA)的合成路线为：

所述对比化合物的合成步骤为：

（1）在冰浴条件下，将10-15mL新蒸SOCl₂ 缓慢滴加到11mmol十五二酸中，滴加完毕后，继续搅拌5-10min，然后升温至80-95℃，回流6-12个小时，发生如下反应，生成产物十五二酰氯。反应结束后，蒸除多余的SOCl₂，产物不作进一步纯化直接下一步反应。步骤（1）对应以下反应式：

（2）向步骤（1）得到的产物中加入10-15mL无水二氯甲烷溶解，得到十五二酰氯的二氯甲烷溶液。在冰浴条件下，将15mL 含11mmol二茂铁的二氯甲烷溶液缓慢滴入上述十五二酰氯的二氯甲烷溶液中。在N₂保护下，将11.2mmol无水AlCl₃缓慢加入混合液中， 20-30 min加完, 在冰浴下继续搅拌1-2h，升至室温搅拌10-20min。反应结束后，无需进一步纯化，直接进行下一步。步骤（2）对应以下反应式：

（3）在冰浴下，向步骤（2）所得产物中缓慢加入10 ml甲醇和2ml三乙胺的混合溶液。在100 ℃下搅拌1-2h。停止反应，旋蒸的粗产品。向粗产品中缓慢加入20-30mL 1mol/L的盐酸，用二氯甲烷萃取，饱和食盐水洗3次，再用无水MgSO₄干燥，过滤，旋蒸。用展开剂石油醚：乙酸乙酯=10:1～2:1梯度过硅胶柱，得到棕红色固体为产物前体，产率50.0%。步骤（3）对应以下反应式：

（4) 把放射性活度为740 MBq （20mCi） (或370 MBq（10mCi）)的Na^99mTcO₄淋洗液加入一个5mL聚四氟高压罐中，在70-100℃下用N₂吹干；分别加入3.00-5.34 μmol所述产物前体、4.82-9.64 μmolCr(CO)₆、1.60-3.21 μmol CrCl₃和250-400 μL甲醇后，密封聚四氟高压罐；在160-180℃油浴下，磁力搅拌50-60min；反应结束后，在冰浴下迅速冷却5-10min，然后在50-70℃水浴下用N₂吹干；剩下的产物用二氯甲烷萃取，过滤，用N₂吹干二氯甲烷溶剂；残留物用150-200 μL甲醇溶解，并加入50-100 μL 0.3 N NaOH后在70-80℃水浴下反应10-15 min；冷却后，再加入0.1 N HCl中和，用二氯甲烷萃取；该产物用HPLC进行纯化、分析鉴定。使用Alltech C-18反相分析色谱柱（4.6mm×150mm, 5μm），放射性化合物用Flow-Count放射性检测器检测。流动相为20%的水（A相）和80%的乙腈（B相），流速为2mL/min，分析样品时的进样量为200μL，保留时间为19.09min。标记率可达98.0%。步骤（4）对应以下反应式：

通过以上步骤即可得到对比化合物(^99mTc-CpTTOPDA)。

以化合物一为例做以下性能测试

结构表征：

由于使用放射性元素标记后的化合物不能通过核磁共振及质谱实验判断化合物的结构，因此，在表征使用放射性元素标记的化合物的结构时，通常选择与该放射性元素同一主族、性质相似的元素代替放射性元素，通过完全相同的合成方法得到产物，对此不含放射性元素的产物进行核磁共振及质谱实验，通过得到的谱图判断产物结构，即可以判断使用放射性元素标记的化合物的结构。

以实施例1为例，选择铼Re代替锝-99m，在合成步骤中得到产物前体CpOPTAM之后，用NaReO₄代替Na^99mTcO₄参与反应，即得到产物Re-CpTTOPTAA，如下反应式所示，对CpOPTAM和Re-CpTTOPTAA进行核磁共振及质谱实验，得到CpOPTAM的¹HNMR，¹³CNMR，MS谱图和Re-CpTTOPTAA的¹HNMR，¹³CNMR，MS谱图，如附图1，2，3，4，5，6所示。

通过上述谱图可以判断通过上述步骤得到的产物前体和产物分别为CpOPTAM和Re-CpTTOPTAA，即可以判断通过本发明中的合成方法得到的产物为^99mTc-CpTTOPTAA。

将分离纯化后的标记化合物水溶液在电泳液为0.02 M 的PBS (pH = 7.4)，Us = 150V，Is = 18mA，Ts = 4h下，新华一号纸为支持体，测定各化合物的电荷性质。2小时后取出纸条，将纸条正中间留1cm剪成三段，并记录各段的放射性计数。

电泳2 h 后，停留在原点，说明化合物一为电中性。

电中性的化合物能够成功进入心肌，保证了心肌的摄取量。

将标记化合物加入SD鼠血清在室温下放置3个小时，标记率用HPLC分析。HPLC分析结果表明标记化合物一 ^99mTc-CpTTOPTAA在SD鼠血清里的标记率在3小时内无明显变化，说明标记化合物体内外稳定。

对化合物二、化合物三、化合物四进行同样的性能测试，所得结论相同。

对化合物一和对比例做以下对比试验

在测量脂水分配系数时，选择pH7.4的PBS溶液和正辛醇为有机溶剂，采用多次取出有机相重新与水相平衡的方法对有机相进行洗涤，可洗掉少量的放射性杂质（由于0.1%的放射性杂质可使logP降低1个数量级）。计算分配系数P（即每克正辛醇内的放射性计数与每克PBS 中的放射性计数比值）。

质量法计算该化合物的脂水分配系数：logP=log[(有机相计数×0.827×水相质量)/ (水相计数×有机相质量)]。化合物一及对比例的脂水分配系数如下表所示：

脂水分配系数越大，亲脂性越强，对比例的亲脂性大于化合物一的亲脂性，因此相对于对比例而言，化合物一的肝摄取降低，心肌摄取增加，有利于心肌显像。

小鼠体内代谢分析

将1mCi的化合物一^99mTc-CpTTOPTAA和对比例^99mTc-CpTTOPDA分别通过尾静脉注射到雌性SD大鼠（210g-250g）体内，Ci为放射性活度单位，30 min后将大鼠断头处死取出心脏，用生理盐水洗净，置于硬质塑料管中，加入4 mL体积比为2:1:1 的 CHCl₃、CH₃OH、0.03 N NaOH的混合溶液后匀浆，涡旋混合3 min，在4000 rpm的转速下离心分离3-5 min，分别取出上、下层清液。残渣加入4 mL上述比例混合溶液后重复上述操作，取出上、下层清液与前一次分别合并，每个样品重复3次。分别测量水层（上层）、有机层（下层）和残渣的计数，水层用HCl酸化（PH=5-6），经过0.2 μm 的滤膜过滤，旋蒸浓缩待用。在注射^99mTc-CpTTOPTAA和^99mTc-CpTTOPDA 30min时，在匀浆SD大鼠心肌的放射性分布如下表 。

心脏提取物分析用Alltech C-18反相分析色谱柱（4.6mm×150mm, 5μm）和Flow-Count放射性检测器检测分析过滤的水层（用HCl酸化，PH=5-6），流动相为20%的水（A相）和80%的乙腈（B相），流速为1mL/min。对^99mTc-CpTTOPTAA和^99mTc-CpTTOPDA进行相同条件的色谱分析。

水层提取物经过HCl酸化（PH=5-6）、滤膜过滤和旋蒸浓缩后，用Alltech C-18反相分析色谱柱分析^99mTc-CpTTOPTAA并与^99mTc-CpTTOPTAA的radio-HPLC分析比较，分别如图7 SD大鼠尾静脉注射^99mTc-CpTTOPTAA 30 min后的心肌匀浆提取物的radio-HPLC图和图8 ^99mTc-CpTTOPTAA的radio-HPLC图所示，图7中有两个较大的保留时间峰，第一个峰为3.95min和第二个7.57min的峰相差3.62 min，与图8对照，基本可以判断出第一个峰是代谢产物峰、第二个峰为^99mTc-CpTTOPTAA峰。与图8相比，在30min时心脏提取物的第二个峰与^99mTc-CpTTOPTAA的保留时间基本一致，但第二个峰^99mTc-CpTTOPTAA比较低，而第一个峰代谢产物峰明显高很多，峰面积约占99%，说明此时心肌摄取比较低而代谢产物滞留比较多清除慢，同时表明^99mTc-CpTTOPTAA在心肌里确实发生了代谢。

用radio-HPLC对^99mTc-CpTTOPTAA的心肌代谢产物进行分析，如图8所示。用非放射性铼标记的前体Re-CpTTOPTAA代替放射性化合物^99mTc-CpTTOPTAA，通过尾静脉注射到雌性体重为210g-250g的SD大鼠体内30min时后，运用质谱对匀浆心脏提取物进行分析，如图9 SD大鼠尾静脉注射Re-CpTTOPTAA 30 min后的心肌匀浆提取物的质谱分析图所示。结果表明，^99mTc-CpTTOPTAA在心肌里发生一次alpha-氧化生成少一个α-碳的^99mTc-CpTTOPTCA并陷落在线粒体内，达到延长^99mTc-CpTTOPTCA在心肌里的滞留时间，有利于SPECT扫描、显像。

小鼠体内分布实验

所用小鼠为昆明雌性SD鼠(18-20g)，由北医三院动物实验中心提供。本实验分为五个时相，每个时相用5只小鼠。由尾部静脉注射0.1mL10μCi的^99mTc-CpTTOPTAA的生理盐水溶液，分别在1min，5min，15min。30min，60min断椎处死。分别取小鼠的血、脑、心、肝、脾、肺、肾、肌、骨各脏器称重，并用阱型γ自动探测器测其放射性计数。计算不同时相各脏器的每克组织百分注射剂量%ID/g。

^99mTc-CpTTOPTAA在小鼠体内分布实验的结果见下表：

所用小鼠为昆明雌性SD鼠(18-20g)，由北医三院动物实验中心提供。本实验分为五个时相，每个时相用5只小鼠。由尾部静脉注射0.1mL10μCi的^99mTc-CpTTOPDA的生理盐水溶液，分别在1min，5min，15min。30min，60min断椎处死。分别取小鼠的血、脑、心、肝、脾、肺、肾、肌、骨各脏器称重，并用阱型γ自动探测器测其放射性计数。计算不同时相各脏器的每克组织百分注射剂量%ID/g。^99mTc-CpTTOPDA小鼠生物分布结果见下表：

化合物一^99mTc-CpTTOPTAA和对比化合物^99mTc-CpTTOPDA的结构相对比较接近，化合物一^99mTc-CpTTOPTAA初始心肌摄取为9.39±1.1%IDg^-1，比对比化合物^99mTc-CpTTOPDA 7.85±0.66 %IDg^-1略高；两者的心肌摄取都呈逐渐下降趋势且在5min内表现为快速的心肌清除；两者均表现为快速血清除且速度趋势也比较接近，但是在5min内化合物一^99mTc-CpTTOPTAA在血液中的含量下降5.39倍，而后者在血液中的含量只下降2.65倍，由此可见化合物一^99mTc-CpTTOPTAA的血清除速度更快。两个化合物在心肌与血液中的摄取比值前者高（最高心/血为5.7）高于后者（最高心/血为3.53），故化合物一^99mTc-CpTTOPTAA有更低的血本底。

从肝对两个配合物的摄取情况来看，对比化合物 ^99mTc-CpTTOPDA的初始摄取是化合物一^99mTc-CpTTOPTAA的2.6倍。在15 min时，化合物一^99mTc-CpTTOPTAA有最大摄取值而对比化合物^99mTc-CpTTOPDA在30 min时有最大摄取值，两者的肝摄取都比较高而且呈递增趋势，心肝比值都比较低，两者的心肝比值均呈现递减趋势。由于化合物一^99mTc-CpTTOPTAA比对比化合物^99mTc-CpTTOPDA的结构多了一个与羰基相连的噻吩基团而降低了脂溶性，因此化合物一^99mTc-CpTTOPTAA在肝脏中的摄取也就明显的低一些。

小鼠注射^99mTc-CpTTOPTAA 1min后，心肌摄取值达到9.39+1.1 %ID/g，初始摄取值较高，心/血值为2.1，心/肝值为0.91。血清除较快，1min为4.47+0.61%ID/g；5min后，为0.83+0.07%ID/g。在正常小鼠体内的生物分布结果表明^99mTc-CpTTOPTAA具有较高的初始心肌摄取和较快的心肌清除，心/血值较高，心/肝值相对于现有技术有了提高，有利于获得更高的靶/非靶比值，靶/非靶比值放映的是药物在心与非心组织里的分布情况。 

显然，上述实施例仅仅是为清楚地说明所作的举例，而并非对实施方式的限定。对于所属领域的普通技术人员来说，在上述说明的基础上还可以做出其它不同形式的变化或变动。这里无需也无法对所有的实施方式予以穷举。而由此所引伸出的显而易见的变化或变动仍处于本发明创造的保护范围之中。