一种布南色林中间体III与其它中间体的高效液相色谱分离方法

摘要

本发明公开了一种布南色林中间体III与其它中间体的高效液相色谱分离方法，采用辛烷硅烷键和硅胶为填充剂的色谱柱（250mm×4.6mm,5μm），以不用比例的缓冲液、有机改性剂为流动相，在常温条件下快速分离布南色林中间体Ⅲ与其它中间体杂质。

说明书

 

技术领域

本发明属涉及一种高效液相色谱法，尤其是一种布南色林中间体III与其它中间体的高效液相色谱分离方法。

背景技术

   布南色林为一种抗精神药物，非典型性抗精神药物，与其他抗精神药物相比副作用反应少。中间体III分子式：C₁₇H₁₈OFN，化学名为(Z)-4-(4-氟苯基)-5,6,7,8,910-六氢环辛烷并[b]吡啶-2(1H)-酮，需要分离的中间体I， 中间体II、中间体III结构式分别为：

中间体Ⅰ

中间体II

中间体III

为了有效分离布南色林中间体III与其它中间体，进行准确控制布南色林中间体III的质量，目前还没有一种高效液相等度洗脱方式实现布南色林中间体III与其它中间体的有效分离。

发明内容

本发明的目的是提供一种布南色林中间体III与其它中间体的高效液相色谱分离方法，实现在通向合成目标化合物布南色林的过程中控制其中间体纯度的需要，从而达到对布南色林质量的准确控制。

本发明涉及的一种布南色林中间体III与其它中间体的高效液相分离方法，包括以下步骤：

(1) 取布南色林样品适量，用有机溶剂溶解布南色林样品，配制成每1ml含

布南色林0.5mg～1.0mg的样品溶液；

(2) 设置液相色谱仪的流动相，即A泵为有机改性剂，B泵为缓冲溶液，流

动相：缓冲溶液与有机改性剂的体积比为55: 45；

(3) 设置液相色谱仪的流动相流速0.6～1.2mL/min，检测波长224±3nm，

以及设置液相色谱仪色谱柱的柱温箱20℃～40℃；

(4) 取步骤(1)的样品溶液5-20μl注入经步骤(2)(3)设置的液相色谱仪，完成

布南色林中间体III与其它中间体的分离。

进一步地，所述步骤(1)的有机溶剂为甲醇或乙醇。

所述步骤(3)的流速为0.6～1.2mL/min，检测波长224±3nm。

所述的液相色谱仪采用辛烷硅烷键和硅胶为填充剂的色谱柱，色谱柱的规格

为长度250mm，内径4.6mm，粒度 5μm。

所述步骤(2)的有机改性剂为乙腈或甲醇。

所述步骤(2)的缓冲溶液为0.1%的磷酸水或磷酸盐水溶液。

本发明采用辛烷硅烷键和硅胶为填充剂的色谱柱，能有效分析分离布南色林中间体III与其它中间体；选择甲醇为溶剂，确保样品能完全溶解；选择进样体积10μL，提高了色谱峰的对称性；选择流速1.0mL/min，能提高分离度；选择流动相为有机改性剂乙腈和缓冲溶液0.1%磷酸水，实现布南色林中间体III与其它中间体的完全分离，从而确保了布南色林中间体及其制剂的质量可控，实现布南色林中间体在布南色林药物合成和制剂生产过程的质量控制。

附图说明

图1为实施例1高效液相色谱图；

图2为实施例2高效液相色谱图；

图3为实施例3高效液相色谱图。

具体实施方式

实施例1

采用岛津LC-20AT型号高效液相色谱仪、Welch Materials品牌辛烷硅烷键和硅胶为填充剂的色谱柱，色谱柱的规格为长度250mm、内径4.6mm、粒度 5μm。

一种布南色林中间体III与其它中间体的高效液相分离方法，包括以下步骤：

(1) 分别取布南色林中间体Ⅲ及中间体Ⅰ、Ⅱ各5mg，置于10mL容量瓶中，加入甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液；

(2)设置液相色谱仪的流动相，即A泵为有机改性剂，B泵为缓冲溶液，流动相：0.1%磷酸水与甲醇的体积比为55: 45

    (3)设置液相色谱仪的流动相流速0.6mL/min、检测波长223nm，以及设置液

相色谱仪色谱柱的柱温箱20℃；

(4)取步骤(1)的供试品溶液20μl注入经步骤(2)(3)设置的液相色谱仪，完成布南色林中间体Ⅲ与其它中间体的分离，记录色谱图，结果见附图1。

图1中保留时间为7.155min、8.301min的色谱峰分别为中间体Ⅱ、Ⅰ的色谱峰，保留时间为13.388min为布南色林中间体Ⅲ的色谱峰。中间体Ⅱ与中间体Ⅲ的分离度达到15，完全符合《2010版中国药典》分离度不小于1.5 的规定，表明布南色林中间体Ⅲ与其它中间体可以在同一色谱条件下达到很好的分离。  

实施例2

采用岛津LC-20AT型号高效液相色谱仪、Welch Materials品牌辛烷硅烷键和硅胶为填充剂的色谱柱，色谱柱的规格为长度250mm、内径4.6mm、粒度 5μm。

一种布南色林中间体III与其它中间体的高效液相分离方法，包括以下步骤：

(1) 分别取布南色林中间体Ⅲ及中间体Ⅰ、Ⅱ各8mg，置于10mL容量瓶中，加入甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液；

(2)设置液相色谱仪的流动相，即A泵为有机改性剂，B泵为缓冲溶液，流动相：0.1%磷酸水与乙腈的体积比为50: 50

    (3)设置液相色谱仪的流动相流速1.2mL/min、检测波长227nm，以及设置液

相色谱仪色谱柱的柱温箱40℃；

(4)取步骤(1)的供试品溶液5μl注入经步骤(2)(3)设置的液相色谱仪，完成布南色林中间体Ⅲ与其它中间体的分离，记录色谱图，结果见附图2。

图2中保留时间为5.970min、6.898min的色谱峰分别为中间体Ⅱ、Ⅰ的色谱峰，保留时间为9.605min为布南色林中间体Ⅲ的色谱峰。中间体Ⅱ与中间体Ⅲ的分离度达到12，完全符合《2010版中国药典》分离度不小于1.5 的规定，表明布南色林中间体Ⅲ与其它中间体可以在同一色谱条件下达到很好的分离。

实施例3

采用岛津LC-20AT型号高效液相色谱仪、Welch Materials品牌辛烷硅烷键和硅胶为填充剂的色谱柱，色谱柱的规格为长度250mm、内径4.6mm、粒度 5μm。

一种布南色林中间体III与其它中间体的高效液相分离方法，包括以下步骤：

(1) 分别取布南色林中间体Ⅲ及中间体Ⅰ、Ⅱ各10mg，置于10mL容量瓶中，加入甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液；

(2)设置液相色谱仪的流动相，即A泵为有机改性剂，B泵为缓冲溶液，流动相0.1%磷酸水与乙腈的体积比为55: 45

(3)设置液相色谱仪的流动相流速1.2mL/min、检测波长227nm，以及设置液

相色谱仪色谱柱的柱温箱25 ℃；

(4)取步骤(1)的供试品溶液10μl注入经步骤(2)(3)设置的液相色谱仪，完成布南色林中间体Ⅲ与其它中间体的分离，记录色谱图，结果见附图3。

图3中保留时间为6.737min、7.727min的色谱峰分别为中间体Ⅱ、Ⅰ的色谱峰，保留时间为11.310min为布南色林中间体Ⅲ的色谱峰。中间体Ⅱ与中间体Ⅲ的分离度达到16，完全符合《2010版中国药典》分离度不小于1.5 的规定，表明布南色林中间体Ⅲ与其它中间体可以在同一色谱条件下达到很好的分离。