一种辽东楤木叶片皂苷的超声提取方法

摘要

一种辽东楤木叶片皂苷的超声提取方法，它涉及一种辽东楤木叶片皂苷的提取方法。本发明要解决现有技术提取辽东楤木皂苷的方法存在耗时较长、溶剂消耗量较大、操作繁琐的问题。本发明的操作步骤如下：将辽东楤木叶片放入容器中，然后加入质量分数为40％～90％乙醇溶液，在频率为40kHz、功率为250W超声波作用下进行提取，提取温度40～90℃，提取时间15～90min，得到提取液，将得到的提取液经过滤→浓缩蒸干→脱脂→萃取→再蒸干即得到纯化的皂苷。本发明主要用于从辽东楤木叶片中提取皂苷。

说明书

技术领域

本发明涉及一种辽东楤木叶片皂苷的提取方法。 

背景技术

辽东楤木[Aralia elata(Miq.)Seem.]，又称龙牙(芽)楤木，俗称刺龙牙、刺嫩芽、刺老鸦、东北野香椿等，是一种食药兼用型的五加科(Araliaceae)楤木属(Aralia)植物，为多年生落叶小乔木。其食用器官为嫩芽，是深受国内外人们喜食的野生蔬菜；研究表明，辽东楤木植株根、茎、叶等器官均含有多种三萜皂苷，主要皂苷元为齐墩果酸，其具有增强体质、抗除疲劳、抗炎保肝、降血糖血脂、抗癌、抗病毒等作用，药用价值显著，因此可以作为生产中药制剂的原料。 

皂苷(saponin)别称：碱皂体、皂素、皂角苷或皂草苷，是能形成水溶液或胶体溶液并能形成肥皂状泡沫的植物糖苷统称，是一类结构较为复杂的苷类化合物，根据已知皂苷元的分子结构，可以将皂苷分为两大类，一类为甾体皂苷，另一类为三萜皂苷。楤木三萜皂苷化合物中皂苷单体种类较多，化学结构复杂，人工合成较为困难，现在主要从植物中提取获得。目前提取辽东楤木皂苷的方法主要有浸渍提取法、热回流提取法，浸渍提取法：每1g材料大约需80～120ml溶剂，多次提取，需时12～18h得到提取液，得到的提取液经纯化得到皂苷(纯化过程：得到的提取液经过滤→浓缩蒸干→脱脂→萃取→再蒸干得到纯化)；热回流提取法：每1g材料大约需60～120ml溶剂，三次以上提取，需时3～6h得到提取液，得到的提取液经纯化得到皂苷(纯化过程：得到的提取液经过滤→浓缩蒸干→脱脂→萃取→再蒸干得到纯化)；上述的两种方法采用大量的溶剂，造成提取液的量很大，会增加过滤和浓缩蒸干处理的时间和难度，且资源浪费严重，成本较高；因此现有提取辽东楤木皂苷的方存在耗时较长、溶剂消耗量较大、操作繁琐的问题。 

发明内容

本发明要解决现有技术提取辽东楤木皂苷的方法存在耗时较长、溶剂消耗量较大、操作繁琐的问题，而提供一种辽东楤木叶片皂苷的超声提取方法。 

一种辽东楤木叶片皂苷的超声提取方法，具体是按以下步骤完成：将辽东楤木叶片放入容器中，然后加入质量分数为40％～90％的乙醇溶液，在频率为40kHz、功率为250W超声波作用下进行提取，提取温度40～90℃，提取时间15～90min，得到提取液，将得到的提取液经过滤→浓缩蒸干→脱脂→萃取→再蒸干即得到纯化的皂苷；所述的辽东楤木叶片是在每年的8月1日～8月20日收集，并在40～100℃下烘干至恒重，然后粉碎过40目筛得到的；所述 辽东楤木叶片与乙醇溶液的质量比为1∶(10～60)。 

本发明的优点：一、本发明一次提取就完成整个提取过程，操作简便，提取时间至少缩短了2h、皂苷的提取率提高了0.66％；二、本发明利用超声波产生强烈的震动、巨大的加速度、强烈的空化效应和搅拌作用加速溶剂渗入样品中，促使皂苷快速溶解，以达到快速、高效提取的效果，减少了溶剂的浪费，能够最大程度地利用资源及降低成本。 

附图说明

图1是利用具体实施方式一制备的纯化皂苷配置的纯化皂苷溶液和齐墩果酸标准溶液分别与香草醛-高氯酸反应得到的化合物用紫外分光光度计进行全波长扫描得到紫外-可见吸收光谱曲线；图2是具体实施方式五得到的乙醇溶液质量分数与产物中皂苷含量的关系曲线；图3是具体实施方式六得到的称取步骤一制备的样品与加入乙醇溶液的质量比与产物中皂苷含量的关系曲线；图4是具体实施方式七得到的提取温度与产物中皂苷含量的关系曲线；图5是具体实施方式八得到的提取时间与产物中皂苷含量的关系曲线。 

具体实施方式

具体实施方式一：本实施方式提供一种辽东楤木叶片皂苷的超声提取方法，具体是按以下步骤完成： 

将辽东楤木叶片放入容器中，然后加入质量分数为40％～90％的乙醇溶液，在频率为40kHz、功率为250W超声波作用下进行提取，提取温度40～90℃，提取时间15～90min，得到提取液，将得到的提取液经过滤→浓缩蒸干→脱脂→萃取→再蒸干即得到纯化的皂苷； 

本实施方式所述的辽东楤木叶片是在每年的8月1日～8月20日收集，并在40～100℃下烘干至恒重，然后粉碎过40目筛得到的。 

本实施方式所述辽东楤木叶片与乙醇溶液的质量比为1∶(10～60)。 

本实施方式一次提取就完成整个提取过程，操作简便，提取时间至少缩短了2h。 

本实施方式利用超声波产生强烈的震动、巨大的加速度、强烈的空化效应和搅拌作用加速溶剂渗入样品中，促使皂苷快速溶解，以达到快速、高效提取的效果，减少了溶剂的浪费，能够最大程度地利用资源及降低成本。 

将本实施方式制备的纯化皂苷用甲醇溶解并移至容量瓶中，定容、摇匀即得到纯化的皂苷溶液，分别采用齐墩果酸标准溶液和纯化的皂苷溶液与香草醛-高氯酸反应得到的化合物用紫外分光光度计进行全波长扫描，得到紫外-可见吸收光谱，如图1所示，通过图1可知齐墩果酸标准溶液与香草醛-高氯酸反应得到的化合物和纯化的皂苷溶液与香草醛-高氯酸反应得到的化合物的吸收光谱一致，根据齐墩果酸标准品的基本性质是：齐墩果酸与香草醛-高氯酸反应得到的化合物在540nm有最大吸收值，因为齐墩果酸标准溶液与香草醛-高氯酸反应得到的 化合物和纯化的皂苷溶液与香草醛-高氯酸反应得到的化合物的吸收光谱一致，且在540nm有最大吸收值，证明本实施方式得到的纯化皂苷是齐墩果酸类皂苷，并测得产物中皂苷含量为20～93mg·g^-1。 

具体实施方式二：本实施方式与具体实施方式一的不同点是：所述的辽东楤木叶片是在每年的8月1日～8月20日收集，并在50～80℃烘干至恒重，然后粉碎过40目筛得到的。其它与具体实施方式一相同。 

具体实施方式三：本实施方式与具体实施方式一或二之一不同点是：所述的辽东楤木叶片是在每年的8月1日～8月20日收集，并在55～65℃烘干至恒重，然后粉碎过40目筛得到的。其它与具体实施方式一或二相同。 

具体实施方式四：本实施方式与具体实施方式一至三之一不同点是：所述的辽东楤木叶片是在每年的8月1日～8月20日收集，并在60℃烘干至恒重，然后粉碎过40目筛得到的。其它与具体实施方式一或三相同。 

具体实施方式五：本实施方式与具体实施方式一至四之一不同点是：采用单因素实验证明乙醇溶液质量分数与产物中皂苷含量的关系，乙醇溶液质量分数的分别取40％、50％、60％、70％、80％和90％，所述的产物为纯化的皂苷。其它与具体实施方式一或四相同。 

本实施方式通过单因素实验得到的乙醇溶液质量分数与产物中皂苷含量的关系曲线，如图2所示，通过图2可知乙醇溶液的质量分数在60％～80％之间，得到的产物中皂苷含量最大。 

具体实施方式六：本实施方式与具体实施方式一至五之一不同点是：采用单因素实验证明称取步骤一制备的样品与加入乙醇溶液的质量比与产物中皂苷含量的关系，称取步骤一制备的样品与加入乙醇溶液的质量比分别为1∶10、1∶20、1∶30、1∶40、1∶50和1∶60，所述的产物为纯化的皂苷。其它与具体实施方式一或五相同。 

本实施方式通过单因素实验得到称取步骤一制备的样品与加入乙醇溶液的质量比与产物中皂苷含量的关系曲线，如图3所示，通过图3可知称取步骤一制备的样品与加入乙醇溶液的质量比1∶30～1∶60之间产物中皂苷含量变化很少。 

具体实施方式七：本实施方式与具体实施方式一至六之一不同点是：采用单因素实验证明提取温度与产物中皂苷含量的关系，提取温度分别为40℃、50℃、60℃、70℃、80℃和90℃，所述的产物为纯化的皂苷。其它与具体实施方式一或六相同。 

本实施方式通过单因素实验得到提取温度与产物中皂苷含量的关系曲线，如图4所示，通过图4可知提取温度为在50℃～80℃之间产物中皂苷含量差别不大，当提取温度为90℃时产物中皂苷含量减少。 

具体实施方式八：本实施方式与具体实施方式一至七之一不同点是：采用单因素实验证 明提取时间与产物中皂苷含量的关系，提取时间分别为15min、30min、45min、60min、75min和90min，所述的产物为纯化的皂苷。其它与具体实施方式一或七相同。 

本实施方式通过单因素实验得到提取时间与产物中皂苷含量的关系曲线，如图5所示，通过图5可知在提取时间45min～75min之间产物中皂苷含量最大。 

具体实施方式九：本实施方式与具体实施方式一至八之一不同点是：将辽东楤木叶片放入容器中，然后加入质量分数为60％～80％的乙醇溶液，在频率为40kHz、功率为250W超声波作用下进行提取，提取温度50～70℃，提取时间45～75min，得到提取液，将得到的提取液经过滤→浓缩蒸干→脱脂→萃取→再蒸干即得到纯化的皂苷；所述的辽东楤木叶片是在每年的8月1日～8月20日收集，并在60℃烘干至恒重，然后粉碎过40目筛得到的；所述辽东楤木叶片与乙醇溶液的质量比为1∶(30～50)。其它与具体实施方式一或八相同。 

具体实施方式十：本实施方式与具体实施方式九的不同点是：将辽东楤木叶片放入容器中，然后加入质量分数为60％的乙醇溶液，在频率为40kHz、功率为250W超声波作用下进行提取，提取温度50℃，提取时间45min，得到提取液，将得到的提取液经过滤→浓缩蒸干→脱脂→萃取→再蒸干即得到纯化的皂苷；所述辽东楤木叶片与乙醇溶液的质量比为1∶30。其它与具体实施方式九相同。 

通过紫外可见分光光度计测定得到本实施方式的产物中皂苷的含量为70.42mg·g^-1，即辽东楤木皂苷的提取效率为7.04％。 

具体实施方式十一：本实施方式与具体实施方式九的不同点是：将辽东楤木叶片放入容器中，然后加入质量分数为60％的乙醇溶液，在频率为40kHz、功率为250W超声波作用下进行提取，提取温度60℃，提取时间60min，得到提取液，将得到的提取液经过滤→浓缩蒸干→脱脂→萃取→再蒸干即得到纯化的皂苷；所述辽东楤木叶片与乙醇溶液的质量比为1∶40。其它与具体实施方式九相同。 

通过紫外可见分光光度计测定得到本实施方式的产物中皂苷的含量为78.53mg·g^-1，即辽东楤木皂苷的提取效率为7.85％。 

具体实施方式十二：本实施方式与具体实施方式九的不同点是：将辽东楤木叶片放入容器中，然后加入质量分数为60％的乙醇溶液，在频率为40kHz、功率为250W超声波作用下进行提取，提取温度70℃，提取时间75min，得到提取液，将得到的提取液经过滤→浓缩蒸干→脱脂→萃取→再蒸干即得到纯化的皂苷；所述辽东楤木叶片与乙醇溶液的质量比为1∶50。其它与具体实施方式九相同。 

通过紫外可见分光光度计测定得到本实施方式的产物中皂苷的含量为80.96mg·g^-1，即辽东楤木皂苷的提取效率为8.10％。 

具体实施方式十三：本实施方式与具体实施方式九的不同点是：将辽东楤木叶片放入容器中，然后加入质量分数为70％的乙醇溶液，在频率为40kHz、功率为250W超声波作用下进行提取，提取温度60℃，提取时间75min，得到提取液，将得到的提取液经过滤→浓缩蒸干→脱脂→萃取→再蒸干即得到纯化的皂苷；所述辽东楤木叶片与乙醇溶液的质量比为1∶30。其它与具体实施方式九相同。 

通过紫外可见分光光度计测定得到本实施方式的产物中皂苷的含量为82.58mg·g^-1，即辽东楤木皂苷的提取效率为8.26％。 

具体实施方式十四：本实施方式与具体实施方式九的不同点是：将辽东楤木叶片放入容器中，然后加入质量分数为70％的乙醇溶液，在频率为40kHz、功率为250W超声波作用下进行提取，提取温度70℃，提取时间45min，得到提取液，将得到的提取液经过滤→浓缩蒸干→脱脂→萃取→再蒸干即得到纯化的皂苷；所述辽东楤木叶片与乙醇溶液的质量比为1∶40。其它与具体实施方式九相同。 

通过紫外可见分光光度计测定得到本实施方式的产物中皂苷的含量为92.71mg·g^-1，即辽东楤木皂苷的提取效率为9.27％。 

具体实施方式十五：本实施方式与具体实施方式九的不同点是：将辽东楤木叶片放入容器中，然后加入质量分数为70％的乙醇溶液，在频率为40kHz、功率为250W超声波作用下进行提取，提取温度50℃，提取时间60min，得到提取液，将得到的提取液经过滤→浓缩蒸干→脱脂→萃取→再蒸干即得到纯化的皂苷；所述辽东楤木叶片与乙醇溶液的质量比为1∶50。其它与具体实施方式九相同。 

通过紫外可见分光光度计测定得到本实施方式的产物中皂苷的含量为84.20mg·g^-1，即辽东楤木皂苷的提取效率为8.42％。 

具体实施方式十六：本实施方式与具体实施方式九的不同点是：将辽东楤木叶片放入容器中，然后加入质量分数为80％的乙醇溶液，在频率为40kHz、功率为250W超声波作用下进行提取，提取温度70℃，提取时间60min，得到提取液，将得到的提取液经过滤→浓缩蒸干→脱脂→萃取→再蒸干即得到纯化的皂苷；所述辽东楤木叶片与乙醇溶液的质量比为1∶30。其它与具体实施方式九相同。 

通过紫外可见分光光度计测定得到本实施方式的产物中皂苷的含量为74.47mg·g^-1，即辽东楤木皂苷的提取效率为7.45％。 

具体实施方式十七：本实施方式与具体实施方式九的不同点是：将辽东楤木叶片放入容器中，然后加入质量分数为80％的乙醇溶液，在频率为40kHz、功率为250W超声波作用下进行提取，提取温度50℃，提取时间75min，得到提取液，将得到的提取液经过滤→浓缩蒸 干→脱脂→萃取→再蒸干即得到纯化的皂苷；所述辽东楤木叶片与乙醇溶液的质量比为1∶40。其它与具体实施方式九相同。 

通过紫外可见分光光度计测定得到本实施方式的产物中皂苷的含量为78.93mg·g^-1，即辽东楤木皂苷的提取效率为7.89％。 

具体实施方式十八：本实施方式与具体实施方式九的不同点是：将辽东楤木叶片放入容器中，然后加入质量分数为80％的乙醇溶液，在频率为40kHz、功率为250W超声波作用下进行提取，提取温度60℃，提取时间45min，得到提取液，将得到的提取液经过滤→浓缩蒸干→脱脂→萃取→再蒸干即得到纯化的皂苷；所述辽东楤木叶片与乙醇溶液的质量比为1∶50。其它与具体实施方式九相同。 

通过紫外可见分光光度计测定得到本实施方式的产物中皂苷的含量为78.53mg·g^-1，即辽东楤木皂苷的提取效率为7.85％。 

具体实施方式十至具体实施方式十八以乙醇溶液的质量分数，提取的温度，提取的时间和称取步骤一制备的样品与加入乙醇溶液的质量比为因素水平的L₉(3⁴)正交试验检测，通过正交试验分析得到最佳的组合为：乙醇的质量分数为70％，称取步骤一制备的叶片样品与加入乙醇溶液的质量比为1∶50，提取的温度为70℃，提取的时间为75min。 

具体实施方式十九：本实施方式提供一种辽东楤木叶片皂苷的超声提取方法，具体是按以下步骤完成： 

将辽东楤木叶片放入容器中，然后加入质量分数为70％的乙醇溶液，在频率为40kHz、功率为250W超声波作用下进行提取，提取温度70℃，提取时间75min，得到提取液，将得到的提取液经过滤→浓缩蒸干→脱脂→萃取→再蒸干即得到纯化的皂苷； 

本实施方式所述的辽东楤木叶片是在每年的8月1日～8月20日收集，并在60℃烘干至恒重，然后粉碎过40目筛得到的； 

本实施方式所述辽东楤木叶片与乙醇溶液的质量比为1∶50。 

将本实施方式制备的纯化皂苷用甲醇溶解并移至容量瓶中，定容、摇匀即得到纯化的皂苷溶液，通过紫外可见分光光度计测得到产物中皂苷的含量为92.77mg·g^-1，即辽东楤木皂苷的提取效率为9.28％，与现有方法提取辽东楤木叶片的最大提取率为8.62％相比提高了0.66％。