治疗与绝经、激素改变和关节炎相关的症状的组合物和方法

摘要

本发明提供了通过施用粒细胞集落形成刺激因子(G-CSF)，治疗或改善绝经症状和/或与激素改变相关的症状的组合物和方法。本发明还提供了使用G-CSF治疗或改善关节炎的组合物和方法。

说明书

相关申请的交叉引用

本申请要求在2008年7月22日提交的美国临时申请号61/082,761的优先权，其通过引用全文整合到本文中。

技术领域

本发明涉及通过施用粒细胞集落形成刺激因子(G-CSF)，治疗或改善绝经期症状和/或与激素改变相关的症状的组合物和方法。本发明还提供了使用G-CSF治疗或改善关节炎的组合物和方法。

发明背景

绝经期症状涉及由于雌性身体中的激素平衡改变和由于卵巢衰老导致的月经周期停止而发生的内分泌、肉体和心理的变化。绝经期症状包括多种不同且通常非常令人痛苦的症状，例如热潮红(hot flash)、头痛、关节疼痛、肌痛和全身不适。特别是，热潮红是频发的症状，超过50％的绝经女性经历过，并可在绝经后持续若干年。对一些女性，绝经症状是温和的，并且通过生活方式的改变或通过使用替代疗法是可控的，所述生活方式的改变包括更多的锻炼、饮食改变和压力控制，所述替代疗法例如针灸、按摩或捏脊疗法。然而，对于许多其它个体，症状是更加严重的，主要干扰日常活动或睡眠，需要更有效的治疗。

目前对绝经期症状的主要治疗是使用激素疗法，例如只用雌激素、雌激素结合孕酮，或植物雌激素。然而，雌激素的使用与潜在的严重健康风险相关，包括血凝块、心血管疾病、中风和当雌激素与孕酮一起使用时轻微增加的乳腺癌风险。由于考虑到这些副作用，和激素疗法实际上在患乳腺癌的女性中是禁用的，对治疗绝经期症状的替代药物的兴趣与日俱增。

已测试了多种已知的非激素活性剂治疗绝经期症状的效果(Nelson等，JAMA 295(17)：2057-71(2008))。其中，已发现来自称为选择性血清素(serotonin)重摄取抑制剂(SSRI)和血清素与去甲肾上腺素重摄取抑制剂(SNRI)的药物类别的抗抑郁剂在一些临床试验中缓解了热潮红，所述抗抑郁剂包括文拉法辛(Effexor)、帕罗西汀(Paxil)、氟西汀(Prozac)和西酞普兰(Celexa)等。然而，上述药物不如激素疗法有效，且已报道存在副作用例如恶心和失眠。已描述过与电压门控钙通道的α2δ亚基结合的化合物(例如加巴喷丁)作为热潮红、恶心、呕吐和发烧的治疗(见例如，美国专利号6,310,098)。加巴喷丁已批准作为抗癫痫剂，并已用于神经原性痛、不宁腿综合征、原发性震颤、双相性精神障碍和偏头痛(Morris GL，Epilepsia 40：S63-S70(1999))。与激素疗法相比，加巴喷丁对治疗热潮红仅中度有效，副作用包括嗜睡、眩晕和外周性水肿是常见的(Guttuso等，Obstet Gynecol，101：337-345(2003))。已报道了α-肾上腺素激动药——可乐定的自相矛盾的结果，它在一些试验中降低了热潮红，但在另一些中没有表现出效果。虽然这些药物似乎对热潮红具有一些效果，但是它们不如激素疗法有效，且都导致严重的副作用。降低热潮红的其它疗法被认为包括传统中药(WO 2007/081293)、亮氨酸(美国专利号6,245,812)、包括草药复合物的可摄入的材料(美国专利号5,874,084)和促黄体激素释放激素拮抗剂(美国专利号6,703,367)。然而，目前尚未彻底的评估过它们的功效和安全性。

可以通过选择性雌激素受体调节剂(SERMS)治疗除热潮红外的绝经症状，例如骨质疏松和升高的总胆固醇和LDL胆固醇水平，所述调节剂例如雷洛昔芬(美国专利号5,534,526)，其选择性的结合并激活一些组织(例如，骨)的雌激素受体，并阻断其它的(例如，乳腺和子宫)受体。虽然发现雷洛昔芬(Evista)对一些绝经症状是有益的，但它不降低热潮红，并与严重的副作用相关，例如静脉血栓栓塞事件。

因此，由于现有药物治疗通常与负面副作用相关或不能表现出一致的阳性结果，故需要鉴别对绝经症状的有效且安全的治疗。本文描述的发明满足了该需要，而且还提供了额外的好处。

关节炎是涉及关节的急性或慢性炎症的病况组，是由感染、创伤、退行性改变、代谢紊乱、自身免疫病或其它原因导致的。它以多种形式发生，例如骨关节炎、痛风和假痛风关节炎、强直性脊柱炎、银屑病关节炎、系统性红斑狼疮、脓毒性关节炎或类风湿关节炎。关节炎的常见症状包括在一个或多个关节的肿胀、僵硬和持续或反复的疼痛。在一些患某些类型的关节炎的患者中，症状还可以包括发烧、腺体肿胀、体重减轻、疲劳、感觉不适，甚至是来自器官(例如，肺、心或肾)异常的症状。

关节炎最常见的类型是骨关节炎。该类型的关节炎影响美国的估计2千1百万成年人。骨关节炎主要影响软骨，软骨是缓冲关节中骨末端的组织。在骨关节炎中，软骨开始磨损，并可完全磨损。骨关节炎可以导致关节疼痛和僵硬。当疾病影响脊柱和负重关节(膝关节和髋关节)时，残疾是最常见的结果。除热处理、体重控制和适当的运动与休息，以及膳食添加物外，降低患骨关节炎的患者中的疼痛和炎症的其它药物包括醋氨酚、非甾类抗炎药(双氯芬酸、布洛芬、napoxen或COX-2选择性抑制剂)、皮质类固醇(cortocosteroids)(目前是避免的)，和用于严重疼痛的麻醉药。

多种类型的关节炎构成了美国最常见的慢性病。对于一些类型的关节炎，尚未鉴别潜在的病因，从而仅开发了对症治疗。目前的治疗包括由于症状的变异导致的多种不同的药物治疗，其中许多是与风险相关的，且仅在某些患者群中有益。因此，需要发现对多种关节炎症状具有高疗效且具有低风险和副作用的药物治疗。本文描述的发明满足了该需要，而且还提供了额外的好处。

本文引用的所有参考文献，包括但不限于专利、专利申请和科学文献，在此以其全文整合。

发明概述

本发明提供了治疗和/或改善与绝经、激素改变和关节炎相关的症状的组合物和方法。因此，在一个方面，本发明提供了通过施用有效量的G-CSF，在需要其的个体内治疗、改善、缓解或预防与绝经相关的症状，或降低它们的频率的方法。在另一个方面，本发明涉及通过施用有效量的G-CSF，在需要其的个体内治疗、改善、缓解或预防与激素改变相关的症状，或降低这些症状的频率的方法。本发明还涵盖了通过施用有效量的G-CSF，在需要其的个体内缓解不适或缓和疼痛的方法，所述不适或疼痛是与绝经症状或由激素改变导致的症状相关的。

在任意上述方法中的个体可以是任意的哺乳动物个体，优选的是人个体。在一些实施方案中，需要其的个体是正经历绝经的雌性。在其它实施方案中，需要其的个体是绝经后的雌性。在其他实施方案中，需要其的个体是经历激素改变的雌性。在其它实施方案中，需要其的个体是经历激素改变的雄性。在这些个体中的绝经或激素改变可以是自然发生的，或者可以是药物诱导的或手术诱导的。在一个方面，治疗降低需要此类治疗的个体中的热潮红的频率。

在另一个方面，本发明提供了通过施用有效量的G-CSF，在需要其的个体内治疗、改善、缓解或预防关节炎的方法。本发明还考虑通过施用有效量的G-CSF，在需要其的个体内治疗、改善、缓解或预防与关节炎相关的症状的方法。本发明还涉及缓解与关节炎相关的不适或缓和与关节炎相关的疼痛的方法。在一个实施方案中，本发明提供了通过施用有效量的G-CSF，在需要其的个体内治疗、改善、缓解或预防骨关节炎的方法。在另一个优选的实施方案中，本发明涉及通过施用有效量的G-CSF，在需要其的个体内治疗、改善、缓解或预防关节疼痛的方法。本发明还提供了这样的方法，其中治疗改善与关节炎相关的一种或多种症状，其中所述症状选自关节疼痛、关节的功能受限、关节僵硬、肿胀、发红(redness)和发热。本发明还提供了这样的方法，其中治疗改善与关节炎相关的一种或多种症状，其中所述症状选自发烧、腺体肿胀、体重减轻和疲劳。

个体可以是任意的哺乳动物个体，优选的是人个体。在一个方面，需要其的个体是雌性。在另一个方面，需要其的个体是雄性。在一些方面，需要其的个体是正经历绝经和/或患骨关节炎的雌性。在其它方面，需要其的个体是绝经后的雌性或经历激素改变的患骨关节炎的雌性。在其它方面，需要其的个体是绝经后的雌性或经历激素改变的雌性或患骨关节炎的雌性。在一些方面，需要其的个体是正经历激素改变和/或患骨关节炎的雄性。

在任意的上述方法中，在一个方面，G-CSF施用的剂量是5mcg/kg体重。在另一个方面，G-CSF施用的剂量是5-10mcg/kg体重。在另一个方面，G-CSF施用的剂量是2-10mcg/kg体重。在另一个方面，G-CSF施用的剂量是2-20mcg/kg体重。在另一个方面，约每1至2个月施用1次G-CSF。在另一个方面，约每2至3个月施用1次G-CSF。在另一个方面，约每3至4个月施用1次G-CSF。

在任意的上述方法中，在一个方面，皮下或静脉内的施用G-CSF。在一些方面，肠胃外、肠内的(enterically)、局部的或通过吸入来施用G-CSF。在其它方面，G-CSF被配制在可商购的组合物非格司亭(Filgrastim)、培非司亭(Pegfilgrastim)或来格司亭(Lenograstim)中。在另一个方面，G-CSF存在于包含G-CSF和可药用的载体的药物组合物中。

发明详述

本发明是部分的基于这样的观察结果，即粒细胞集落形成刺激因子(G-CSF)能够治疗和/或改善与绝经、激素改变和/或关节炎相关的症状。

常规技术

除非另外指出，本发明的实践可以使用分子生物学(包括重组技术)、微生物学、细胞生物学、生物化学、核酸化学和免疫学的常规技术，均是本领域技术人员普遍已知的。此类技术在文献中得以全面的解释，例如：Molecular Cloning：A Laboratory Manual，第2版(Sambrook等，1989)和Molecular Cloning：A Laboratory Manual，第3版(Sambrook和Russel，2001)，(在本文中共同称为“Sambrook”)；Current Protocols in Molecular Biology(F.M.Ausubel等编著，1987，包括至2001的增刊)；PCR：The Polymerase Chain Reaction(Mullis等编著，1994)；Harlow和Lane(1988)Antibodies，A Laboratory Manual，Cold Spring Harbor Publications，New York；Harlow和Lane(1999)Using Antibodies：A Laboratory Manual Cold Spring Harbor Laboratory Press，Cold Spring Harbor，NY(在本文中共同称为“Harlow和Lane”)，Beaucage等编著，Current Protocols in Nucleic Acid Chemistry John Wiley & Sons，Inc.，New York，2000)；Casarett and Doull’s Toxicology The Basic Science of Poisons，C.Klaassen编著，第6版(2001)，和Vaccines，S.Plotkin和W.Orenstein编著，第3版(1999)。除非另外指出，本文使用的技术和科学术语都具有与本发明所属领域的普通技术人员普遍理解的相同的含义。

定义

出于解释本说明书的目的，可以使用下列定义，且当恰当时，以单数形式使用的术语也可以包括复数形式，反之亦然。在下文提及的任何定义与通过引用整合到本文中的任何文件抵触的事件中，下文提及的定义应为参照(control)。

如本文使用的，术语“绝经症状”包括但不限于一种或多种下列症状：热潮红；盗汗；头痛；偏头痛；眩晕；睡眠障碍；疲劳；蚁行感；恶心；呕吐；心悸；疼痛包括但不限于关节疼痛；骨密度丢失(骨质疏松)；肌痛；情绪波动；健忘；全身不适；血清脂类水平改变；排尿改变；体重获得和波动；皮肤、头发和眼睛改变；眼、口、鼻和阴道干燥；性交疼痛；以及性欲降低。

如本文使用的，“治疗”指试图改变个体的自然过程(natural course)的临床干预，可以在临床病理学过程之前或之中实施。治疗的理想效果包括：缓解与绝经、激素改变或关节炎相关的病况或症状；减少任何与绝经、激素改变或关节炎相关的病况或症状的直接或间接的病理学结果；减小进展速度；和改善或缓和来自与绝经、激素改变或关节炎相关的症状的不适和/或疼痛。在一些实施方案中，本发明的组合物和方法可用于试图减缓与绝经、激素改变或关节炎相关的症状的发展。在其它实施方案中，本发明的组合物和方法可用于试图减缓绝经、激素改变或关节炎的发展。

“接受治疗”包括初始治疗和/或继续治疗。如本文中使用的，“治疗”是获得有益或理想结果的方式，优选的包括临床结果。出于本发明的目的，有益的或理想的临床结果包括但不限于一种或多种以下的：一种或多种症状的改善、病况和/或疾病的程度的减少、稳定的(即，不恶化的)病况和/或疾病的状态、阻止病况和/或疾病的扩散、阻止与绝经、激素改变或关节炎相关的症状的发生或复发、疾病状态或与本文所述的病况相关症状的改善、(部分或全部的)缓解、疾病和/或症状的发病的降低、稳定的(即，不恶化的)疾病状态或与本文所述的病况相关的症状。

“有效量”指在所需的剂量和时间段，至少有效的实现理想的治疗或预防结果的量。可以以一次或多次施用来提供有效量。

“治疗有效量”是至少使特定症状产生可测量的改善所需的最小浓度，所述症状例如与绝经、激素改变或关节炎相关的症状。在本文中，治疗有效量可以随因素而改变，例如患者的疾病状态、年龄、性别和体重。治疗有效量还是治疗的有益效果超过G-CSF的任何毒性或有害效果的量。

如本文中使用的，“药物”是治疗临床病况(例如，绝经、激素改变或关节炎)的症状的活性药。在一个实施方案中，药物用于治疗与绝经、激素改变或关节炎相关的症状。此类药物也可认为是“治疗剂”，且就此而言，“有效治疗绝经、激素改变或关节炎的治疗剂”及其语法变体在本文中使用时指这样的活性剂，当以有效量提供所述活性剂时，如临床所示已知或临床医师预期将在患绝经、激素改变或关节炎的个体中提供治疗性益处。在一个实施方案中，所述词组包括任何这样的活性剂，所述活性剂被生产商作为临床可接受的活性剂销售，或被有执照的临床医师作为临床可接受的活性剂使用，当以有效量提供所述活性剂时，预期将在患绝经、激素改变或关节炎的个体中提供治疗性的效果。

“个体”是脊椎动物，优选的哺乳动物，更优选的人。哺乳动物包括但不限于农场动物、竞技动物、宠物、灵长类、小鼠和大鼠。“个体”还可以包括在用于实验性测试不同疾病的动物模型(例如，关节炎的小鼠模型)中使用的任何动物。

如本文中使用的，单数形式(“a”、“an”和“the”)包括复数的指代，除非另外指出。

提及“约”时，本文中的值或参数包括(且描述了)这样的实施方案，即指所述值或参数本身。例如，称为“约X”的描述包括了“X”的描述。

发明的方法

本发明提供了通过向个体施用有效量的粒细胞集落形成刺激因子(G-CSF)，在需要其的个体中治疗和/或改善与绝经、激素改变和/或关节炎相关的症状的方法。

粒细胞集落形成刺激因子(G-CSF)

粒细胞集落形成刺激因子通过与特异的细胞表面受体结合作用于造血细胞，刺激增殖、分化定型和一些末端细胞的功能激活的糖蛋白。G-CSF是谱系特异性的集落刺激因子，由单核细胞、成纤维细胞和内皮细胞产生。它调节骨髓内的嗜中性粒细胞的生产，并影响嗜中性粒细胞祖先的增殖和分化。此外，通过抗体介导的细胞性细胞毒性(Souza等，Science 232：61-65(1986))，G-CSF可以显著的增加嗜中性粒细胞在体外杀死肿瘤细胞的能力。

G-CSF是可商购的，以非格司亭(Amgen和Merck)、培非司亭(Amgen)和来格司亭(Chugai)的名字。非格司亭用于预防与中性白细胞减少相关的感染性并发症，所述中性白细胞减少是体内嗜中性粒细胞数量的减少。中性白细胞减少可以在接受化疗或进行骨髓移植的癌症患者中发展出。中性白细胞减少还可以由于未知原因在成体或婴儿中发生。非格司亭还用于将捐献骨髓的健康患者中，如果所述患者的白细胞计数较低。

除了通过嗜中性粒细胞的抗感染性作用外，G-CSF/非格司亭还被报道通过单核细胞导致抗炎性免疫调节作用(Boneberg等，Interscience Conference on Antimicrobial Agents and Chemotherapy，Sep 26-29；39：386；Abstract No.1604(1999)。用G-CSF/非格司亭处理的健康志愿者表现出在应答G-CSF/非格司亭处理时，减弱的释放TNF-α、IL-12、IL-1β和IFN-γ，使其能够用于中性白细胞减少性感染和非中性白细胞减少性感染。此外，在帮助繁殖和增强繁殖适合度的过程中，G-CSF表现出预防自然流产或移植失败(美国专利公开2007/0071716)。值得注意的是，近期关于G-CSF在炎性关节病中的作用的研究揭示G-CSF缺陷型小鼠免于患慢性和急性关节炎，提示G-CSF作为治疗炎性关节病例如类风湿性关节炎的靶(Lawlor等，PNAS，101(31)：11398-11403(2004))。

因此，在一个方面，本发明提供了通过向个体施用有效量的G-CSF，在需要其的个体内治疗、改善、缓解或预防绝经症状，或降低它们的频率的方法。在本发明优选的方面，个体是人个体。经历绝经的女性或绝经后的女性体验的、且本发明提供治疗的常见症状包括但不限于：热潮红；盗汗；头痛；偏头痛；眩晕；睡眠障碍；疲劳；蚁行感；恶心；呕吐；心悸；疼痛包括但不限于关节疼痛；骨密度丢失(骨质疏松)；肌痛；情绪波动；健忘；全身不适；血清脂类水平改变；排尿改变；体重获得和波动；皮肤、头发和眼睛改变；眼、口、鼻和阴道干燥；性交疼痛；以及性欲降低。

特别的，热潮红是非常频发的症状，并对许多绝经女性的日常生活具有强烈的影响。热潮红或潮红(flush)的特征是突然感觉温暖至强烈的热扩散至面部和上部身体。通常表现为可见的皮肤潮红，并通常与出汗相关，可以持续若干秒至若干分钟。一些女性还经历快速的心搏(心悸)、恶心、眩晕、焦虑或感觉虚弱。热潮红的原因尚未清楚的了解。根据目前的理论，下丘脑中的内啡肽浓度下降伴随降低的雌激素生产，增强了去甲肾上腺素和5-羟色胺的释放，导致不适当的散热机制(Nelson等，JAMA，295(17)：2057-71(2008))。

绝经症状可以由雌性的自然绝经导致，或由药物诱导的或手术诱导的事件导致。在一些情况下，自然的绝经可以是过早的，开始于早至35岁上下(mid-30s)。手术诱导的绝经指由于各种妇科原因，实施双侧卵巢切除术(手术去除卵巢)或子宫切除术(手术去除子宫)导致的绝经。在子宫切除术的情况下，当保留了一侧或两侧卵巢时，卵巢可以持续生产激素至正常的绝经年龄，或者它们可以比预期更快的停止生产激素。此外，绝经症状可以由药物诱导的绝经导致。药物诱导的绝经指出于妇科癌症(乳腺癌、宫颈癌、卵巢癌或阴道癌)或必须阻断雌激素和孕酮分泌以阻止疾病发展的任何妇科疾病的原因，而接受激素疗法的雌性患者中的绝经。药物诱导的绝经还可以发生于当卵巢被放射、化疗或其它药物严重破坏时。

本发明还涵盖了通过向个体施用有效量的G-CSF，在需要其的个体内治疗、改善、缓解或预防与激素改变相关的症状，或降低这些症状的频率的方法。激素水平的改变也发生在除绝经雌性以外的个体上，可以导致多种与上述绝经症状相似的症状。在本发明优选的方面，个体是人个体。在另一个方面，个体是经历激素改变的女人。在另一个方面，个体是经历激素改变的男人。

激素改变可以在雌性或雄性中自然的导致，或由手术或药物诱导。例如，接受激素剥夺治疗或经睾丸切除术的雄性中的激素水平具有降低的睾酮水平。在雄性中与上述治疗相关的典型症状包括但不限于热潮红、乳房触痛和乳房组织的生长、骨质疏松、贫血、降低的精神敏度(mental acuity)、肌肉质量丢失、增重、疲劳、HDL降低和抑郁。

本发明还提供了通过向个体施用有效量的G-CSF，在需要其的个体内治疗、改善、缓解或预防关节炎或关节炎症状的方法。在本发明优选的方面，个体是人个体。在另一个方面，个体是经历关节炎或关节炎症状的女人。在另一个方面，个体是同时经历关节炎或关节炎症状以及绝经症状的女人。在另一个方面，个体是经历关节炎或关节炎症状的男人。在另一个方面，个体是同时经历关节炎或关节炎症状以及激素改变的男人。

关节炎可以以若干种形式发生，包括但不限于骨关节炎、痛风关节炎、假痛风关节炎、强直性脊柱炎、银屑病关节炎、系统性红斑狼疮和脓毒性关节炎。关节炎的原因取决于关节炎的形式，而各种类型的区别大部分在于它们的特征、治疗和预后。它们相似在于具有影响关节、肌肉、韧带、软骨、腱的倾向，许多具有影响内部身体区域的潜力。关节炎的症状包括关节的疼痛和功能受限。关节炎中关节的炎症的特征是关节僵硬、肿胀、发红和发热。发炎关节中还可以存在触痛，以及在一些情况下存在关节的弹响(snapping)，观察到在关节处骨生长(bony growth)或关节的异常角度。由于是风湿性疾病，故许多类型的关节炎可以导致影响身体的多个器官的症状，所述器官不直接的涉及关节。因此，患某些类型关节炎的一些患者中的症状还可以包括但不限于发烧、腺体肿胀、体重减轻、疲劳、感觉不适和来自器官(例如，肺、心或肾)异常的症状。

骨关节炎是最常见的关节炎类型，是由软骨的异常磨损导致的。虽然骨关节炎典型的存在于年龄较大的人中，但是较小年龄的人也可以受影响。尽管年龄与骨关节炎正相关，但这仅表示该疾病需要时间发展，但并不清楚何种原因确切的导致软骨的降解。虽然并非意在受任何理论的约束，骨关节炎通常与绝经同时，因而在该时期的雌性身体内进行的改变可以对骨关节炎的发生或恶化来部分的负责。由此，在一个方面，本发明的用于治疗骨关节炎的方法可用于经历绝经同时患骨关节炎的雌性，以及用于患骨关节炎的绝经后雌性，以及用于在年轻的年龄发展出骨关节炎的绝经前雌性，例如受伤或积累性创伤的结果。在本发明的另一个方面，也可以用G-CSF治疗患关节炎包括骨关节炎的雄性个体。在本发明的另一个方面，也可以用G-CSF治疗同时患关节炎(包括骨关节炎)和激素改变的雄性个体。

关于考虑进行治疗的个体，可以理解所述个体一般处于医师的护理下，医师可以观察治疗计划，保证疗效和其它的安全性方面。个体可以是治疗与绝经、激素改变或关节炎相关的疼痛或不适的医师的患者。然而，本发明还考虑对未处于医师仅针对上述适应症(例如，绝经、激素改变或关节炎)进行的护理下的个体的治疗。

剂量、配方和施用

为了实践本发明的方法，通常以有效实现治疗益处的量(例如，治疗有效量)施用G-CSF，例如改善与绝经、激素改变和关节炎相关的疼痛和/或不适。本领域的技术人员(例如，临床医师)可以基于普遍已知的参数帮助确定是治疗有效量的量，所述参数例如个体的体重和医疗史。

在本发明的一些方面，用于治疗需要其的个体的G-CSF的治疗有效量是约5mcg/kg(mcg＝微克，kg＝千克)体重。在另一个方面，G-CSF的量增加至约5-10mcg/kg体重的剂量。由于实现治疗效果必需的量取决于症状的严重程度和本文所述的疾病，以及取决于个体，可以施用在约2-10mcg/kg体重之间或在约2-20mcg/kg体重之间的G-CSF剂量，并可以根据症状和/或疾病状态的严重程度来调节所述剂量。

通常，约每1至2个月施用1次G-CSF，来治疗、改善、预防或降低本文所述症状的频率。在较不严重的情况下，约每2至3个月施用1次G-CSF。在非常轻微的情况下，约每3至4个月施用1次G-CSF。在一个方面，仅施用1次G-CSF作为治疗。在其它方面，施用2次G-CSF作为治疗。施用的频率取决于本文所述症状的严重程度，以及患这些症状的个体。由此，需要时可以根据本领域熟练地技术人员确定的，调节治疗的剂量和频率。例如，医师可以监控用根据本发明的G-CSF治疗的患者中的一种或多种症状，并且基于对一种或多种症状的减弱观察一段时期，得出这样的结论，即在不进一步施用G-CSF一段时期的条件下，患者可以维持本文所述的治疗的积极效果。如果需要，患者可以根据需要在稍后的时间点重新进行其他的治疗。

可以通过任何本领域技术人员已知的施用模式来施用G-CSF。优选的，皮下或静脉内的施用G-CSF。其他的施用方法包括但不限于肠胃外、肠内的、局部的施用或吸入。可选的，可以使用以吸盘(adhensive disc)或贴剂(patch)生产的透皮递送系统，所述系统缓慢的释放活性成分供经皮吸收。可以向这些递送系统添加渗透促进剂，利于G-CSF的透入。此外，允许活性成分缓慢释放且适合移植的装置可用于G-CSF的施用。

在本发明的方法中施用的G-CSF可以是任何无限制的、本领域技术人员已知的G-CSF。在某些实施方案中，G-CSF是可商购的G-CSF，作为适合向动物包括人施用的药物组合物可获得。此类可商购的组合物可以是但不限于非格司亭(Amgen和Merck)、培非司亭(Amgen)和来格司亭(Chugai)。

本发明还考虑G-CSF衍生物、模拟物、变体、化学修饰的化合物的用途。见例如美国公开号No.2007/0071716和美国专利号5,399,345；5,416,195；5,981,551；6,166,183和6,261,550。

发明的试剂盒

本发明提供了试剂盒，其包含被配制用于人个体的治疗有效量的G-CSF，所述个体正经历与绝经、激素改变或关节炎(例如，骨关节炎)相关的症状。任选的提供使用的说明书。试剂盒可以包括治疗量的G-CSF，其被配制用于最有效的递送(例如，皮下、静脉内、肠胃外、肠内的、局部、吸入、透皮等)。G-CSF可以包装成允许一次使用或多次使用的方式。

下列实施例仅供示例的目的，并非意在以任何方式限制本发明的范围。

实施例

实施例1：G-CSF缓解绝经症状

向经历绝经症状的雌性个体给予单剂量的300mcg(5mcg/kg)的非格司亭，增强嗜中性粒细胞的生产。雌性个体在施用非格司亭的一周内经历绝经症状显著降低，例如热潮红、疲劳、睡眠障碍、盗汗、关节疼痛、健忘和情绪波动，所述降低持续4-6周。

实施例2：G-CSF缓解与骨关节炎相关的症状

向经历绝经症状和关节炎疼痛的症状的雌性个体给予单剂量的300mcg(5mcg/kg)的非格司亭，增强嗜中性粒细胞的生产。雌性个体在接受非格司亭的一周内经历与骨关节炎相关的关节疼痛肿胀和僵硬的显著降低，并持续8-12周。