慢病毒介导的三融合报告基因转染标记iPS细胞的方法

摘要

本发明公开了一种慢病毒介导的三融合报告基因标记iPS细胞的方法，主要是(1)将携带fluc-mrfp-ttk的质粒、psPAX2和pMD2G混合，将混合质粒与EntransterTM-H试剂混合，再加入293T细胞中，混合培养，离心，浓缩；(2)用胰酶消化iPS细胞，重悬；将iPS细胞接种于Matrigel胶包被的组织培养皿中培养；(3)向iPS细胞加入(1)的浓缩病毒，培养；将mrfp阳性的iPS细胞分离、纯化。本发明方法对iPS细胞进行三融合报告基因标记，可实现对动物中的iPS细胞中进行实时、定位、定量追踪检测；本发明方法对iPS细胞损伤小，转染效率高，转染效率可达25％以上。