一种前列地尔脂质毫微球注射液及其制备方法

摘要

本发明公开了一种前列地尔脂质毫微球注射液及其制备方法，属于药品技术领域。前列地尔脂质毫微球注射液，它是由下述原料按重量份数比制备而成：前列地尔0.002～0.2、注射用油40～100、乳化剂20～40、助乳化剂25～50、甘油20～30、水780～890。本发明前列地尔脂质毫微球注射液粒径小于100nm，可以采用无菌过滤的方式灭菌，克服了前列地尔热不稳定的缺点，增加了产品的稳定性。同时由于脂质微球具有低于100nm的更小粒径，更有利于前列地尔体内非RES组织分布，减少肺循环灭活和血液清除，有利于在体内长时间循环，适于心脏和脑神经外科疾病的治疗。

说明书

技术领域

本发明涉及一种前列地尔脂质毫微球注射液及其制备方法，该制剂主要用于注射给药，用于心血管及脑神经外科疾病的治疗，属于药品技术领域。

背景技术

前列地尔是一种疗效确切的血管扩张药，是一种人体生理物质，该药品临床上广泛用于冠心病，脉管炎，脑血栓后遗症，重症肝炎，血栓病，勃起障碍症的治疗。对溃疡性疾病，如糖尿病性溃疡，肢末端缺血引起的溃疡也有较好疗效。

前列地尔化学性质极不稳定，对水、热不稳定，很容易降解。前列地尔体内静脉给药，血液经过肺循环一次可灭活90％以上，首过效应明显，因此需要连续给药。前列地尔对血管刺激性很强，直接使用前列地尔给药，很多病人因为疼痛反应不能耐受，对临床应用有较大限制。因此，本领域技术人员研究开发了一系列可以保护主药稳定性和减少生理降解的新剂型，如采用α-环糊精包合技术制备的前列地尔包合物粉针，脂微球技术制备的前列地尔乳注射液，以及前列地尔脂质体技术等。环糊精包合虽可提高药物体外稳定性，但在体内能被肺酶降解，对肺首过效应没有明显帮助。脂质体技术由于包封率较低，工业化困难，较少采用。使用脂微球技术，可在体内、外保护前列地尔药物，减少主药在体内血液循环首过效应，延长药物作用时间，并具有靶向作用，减少药物对血管产生的刺激性，临床上取得了较好的效果，如已经上市的凯时前列地尔脂微球注射液等，以此技术申报的专利已有较多，如欧洲专利EP0097481，前列地尔脂肪乳制备方法。中国专利200610034259.3，前列地尔纳米乳及其制备方法。中国专利200410021253.3，前列地尔冻干乳剂及其制备方法，中国专利200710011921.8，一种供静脉输液用的前列地尔乳剂及其制备方法。中国专利200910058187.X，一种稳定的前列地尔注射乳剂及其制备方法。中国专利200910091207.3，一种前列地尔注射液制备方法。中国专利200810064654.5，一种前列地尔脂肪乳剂的无菌制剂的制备方法等等。上述的专利技术方案都是关于制备前列地尔亚微乳剂(脂微球)的，其乳剂处方中，油相基本使用包括大豆油等长链甘油三酸酯，乳化剂使用磷脂为主的乳化剂，最终得到的乳剂粒径一般在150nm以上，通常在200nm-500nm范围，在这些专利公开的内容中，其粒径都在150nm以上，按照目前本领域公知的知识，可以判定制备的乳剂属于亚微乳(脂微球)范畴。上述前列地尔专利技术方案均没有揭示出本发明的制备低于100nm乳剂惊奇的技术效果。亚微乳注射液灭菌方法主要包括热压灭菌和完全无菌操作，无菌过滤方法不能使亚微乳所有乳滴微球通过滤膜，即使在正压下大粒径乳滴挤过滤膜，也有可能因此破坏乳剂系统，因此，工业化生产不能采用过滤除菌方式进行亚微乳灭菌。完全无菌操作在工业上应用具有较大难度，对于含有营养成分的乳剂来说，被细菌污染可能性非常大，产品保障系数较低，所以热压灭菌是亚微乳常见、可靠的灭菌方式。由于前列地尔极不耐热，使用热压灭菌可能使产品全部降解，即使采用短时高温方法，产品也将产生可能高达60％降解物，而且由于高热产生的磷脂降解物继续影响主药稳定性，使产品保质期缩短，如现在已经上市的产品就是采用这样的方式生产，所表现出的产品技术缺陷已经极大影响了产品的临床应用。中国专利200410021253.3，前列地尔冻干乳剂及其制备方法，其公开的技术方案中虽然部分涉及到本专利注射油和乳化剂类似组合，并在专利其中一个实施例中罗列了包括药物前列地尔、大豆油、大豆卵磷脂、HS15、纯水等组合，但目的是为了制备冻干乳，因此加入了大量冻干保护剂甘露醇和采用了冻干工艺，从而使其乳剂粒径不可能小于100nm，发明说明书公开的实际乳液粒径达到了166nm和188nm，另外，关键是在这份专利中没有采用中链油和乳化剂组合的技术方案，从而不能得到这种小粒径的脂质毫微球效果。该专利的技术方案只适合于粒径超过100nm或更大的亚微乳(脂微球)制剂。传统脂肪乳处方基本都包含长链甘油三酸酯和磷脂，尤其是含有长链甘油三酸酯做为油相的处方，很难形成100nm以下乳剂。

目前已有的公知技术中，载药脂肪乳按照粒径大小主要包括亚微乳和纳米脂肪乳，亚微乳也称为脂微球(LM)，乳粒粒径大于100nm，通常分布在200-500nm，纳米脂肪乳也称为脂质毫微球(LN)，乳粒粒径在100nm以下，大多在50nm以下。

上述已经公开的专利技术方案，没有涉及到前列地尔脂质毫微球注射液技术方案，没有揭示出本发明的技术方案，即制备小粒径乳剂(脂质毫微球)处方中，油相必须包含中链油，乳化剂包含磷脂与HS15等共同组合。

上述公开的前列地尔乳剂专利和已经上市的脂微球产品，其主要的药理、生理上的优点是与原型药静脉给药相比，减少了肺酶灭活，增加血液循环时间，能够特异性地被RES组织摄取，达到被动靶向RES组织目地，但是由于RES组织吞噬等作用，将很快从血液中清除，导致药理作用时间缩短。由于前列地尔是一种具有广泛生理活性的成分，对心脏组织、脑组织等非RES组织具有较好药理活性，另外，更长的血液清除时间对持久的药效也是更有意义，根据目前公知的技术得知，低于100nm的小粒径乳剂将有助于在非RES组织中分布，如心、脑组织等，因此，更小粒径的前列地尔脂质毫微球注射液与较大粒径的脂微球相比，更适合靶向非RES组织，将发挥对心脏疾病和脑神经外科疾病更好作用，同时，其血液清除时间将延长。

本发明人的前述中国专利201010101968.5，前列地尔脂质毫微球凝胶及其制备方法，是关于经皮给药的外用制剂，不同于本发明的内容和目的。

发明内容

本发明就是为了解决上述技术问题而提供一种前列地尔脂质毫微球注射液及其制备方法，其粒径在20-100nm，其含药乳液完全透明，可以通过过滤除菌达到灭菌目的，稳定性好，比大粒径脂微球具有更长时间的体循环，不容易被血液清除，易于聚集在靶器官，减少肺循环灭活和血液清除，提高了药效。

为了解决上述技术问题，本发明是通过下述技术方案实现的：

前列地尔脂质毫微球注射液，它是由下述原料按重量份数比制备而成：前列地尔0.002～0.2、注射用油40～100、乳化剂20～40、助乳化剂25～50、甘油20～30、水780～890。

所述的前列地尔脂质毫微球注射液，它是由下述原料按重量份数比制备而成：前列地尔0.005～0.10、注射用油70～100、乳化剂30～40、助乳化剂30～46、甘油20～24、水800～840。

所述的注射用油是中链油(MCT)。

所述的注射用油是中链油和大豆油的混合油，中链油(MCT)在混合油中所占的重量比大于等于60％。

所述的乳化剂为大豆卵磷脂或蛋黄卵磷脂。

所述的助乳化剂为聚乙二醇十二羟基硬脂酸酯(HS 15)。

一种所述的前列地尔脂质毫微球注射液制剂的制备方法，在无菌车间或百级净化车间内，按所述重量比取注射用油、乳化剂和助乳化剂混合，加热至60-70℃，加入符合所述重量比的前列地尔使其溶解，再加入含有所述重量比的甘油和水的混合溶液，保温至60-70℃，剪切搅拌形成初乳，然后放入高压均质机中，在20-100MPa压力下，循环3-10次，冷却至室温，采用0.45μm的滤膜过滤，再用0.22μm滤膜过滤，灌装，制备成乳液包装，即得。

本发明的优点、效果及特征如下：

本发明前列地尔脂质毫微球注射液粒径在20-100nm，其含药乳液完全透明，可以通过过滤除菌达到灭菌目的，稳定性好，比大粒径脂微球具有更长时间的体循环，不容易被血液清除，易于聚集在靶器官，减少肺循环灭活和血液清除，提高了药效。

本发明人通过研究发现，传统脂肪乳(脂微球)处方，即大豆油(长链甘油三酸酯)与蛋黄卵磷脂、甘油，可以得到150-1000nm的亚微乳剂，为了得到低于100nm小粒径的脂质毫微球，本发明人进行了大量实验处方及工艺研究，令人惊奇发现油相中包含中链油(MCT)，可以制备成功小粒径乳剂，而长链甘油三酸酯将使乳滴粒径变大，即使为了某种需要而将中链油与长链甘油三酸酯(LCT)混合，其中链油占油相比例应超过60％，这种情况下乳剂中总油相不能超过10％。还发现乳化剂中加入HS15，也有助于形成小粒径乳剂和乳剂液晶膜的稳定。通过实验本发明得出的技术方案是，包含前列地尔、含有中链油的注射用油、卵磷脂、聚乙二醇-12羟基硬脂酸酯(HS15)、甘油、纯水以合适比例组合时，经过高压均质可制备成稳定的低于100nm小粒径的脂质毫微球，其外观完全透明，其粒径最小可达20-50nm。实验还发现在这个处方中再加入一些保护剂或其他一些成分，或者经过不合理的冻干工艺过程后，乳剂系统将被改变，不能形成稳定的低于100nm的小粒径脂质毫微球。研究证明，这种小粒径的前列地尔脂质毫微球注射液在鼠药代动力学组织分布的试验中，同大粒径的脂微球相比具有不同的组织分布行为，更趋向于非RES组织，血液清除时间更长，这将有利于前列地尔长效、以及对心脏病和脑神经疾病的治疗。

本发明前列地尔脂质毫微球注射液，粒径小于100nm，乳液完全透明，可以采用无菌过滤的方式灭菌，主药前列地尔几乎不降解，克服了前列地尔脂微球注射液极不稳定的缺点，增加了产品的稳定性，保质期延长，使前列地尔注射液质量有了显著的提高，为临床使用提供了安全的保障。同时由于脂质微球具有低于100nm的更小粒径，更有利于主药前列地尔的体内长循环，减少了肺循环灭活和血液清除，其组织分布，显著不同于大粒径的脂微球注射液，趋向于非RES组织靶向，有利于对心脏病和脑神经外科疾病治疗。更长的血液清除时间对持久的药效也是更有意义，根据目前公知的技术得知，低于100nm的小粒径乳剂将有助于在非RES组织中分布，如心、脑组织等，因此，更小粒径的前列地尔脂质毫微球注射液与较大粒径的脂微球相比，更适合靶向非RES组织，将发挥对心脏疾病和脑神经外科疾病更好作用，同时，其血液清除时间将延长。

附图说明

图1为实施例1的粒径测定结果图。

图2为实施例2的粒径测定结果图。

图3为实施例3的粒径测定结果图。

图4为实施例4的粒径测定结果图。

图5为实施例5的粒径测定结果图。

图6为实施例6的粒径测定结果图。

图7为实施例7的粒径测定结果图。

图8为实施例8的粒径测定结果图。

图9为实施例9的粒径测定结果图。

图10为实施例10的粒径测定结果图。

图11为实施例11的粒径测定结果图。

具体实施方式

下面结合实施例对本发明做进一步详细说明，但本发明的保护范围不受实施例所限。

实施例1：

本发明前列地尔脂质毫微球注射液，由下述原料按重量份数比制备而成：前列地尔0.03g、中链油90g、大豆卵磷脂40g、聚乙二醇十二羟基硬脂酸酯50g、甘油20g、水800g制备而成。

在无菌车间或百级净化车间内，称取注射用中链油90g，向其中加入无菌大豆卵磷脂40g及无菌聚乙二醇十二羟基硬脂酸酯50g，将其加热至60-70℃，混合均匀，再向其中加入主药前列地尔30mg，使其溶解；加入60-70℃注射用水800g和注射级甘油20g的混合液，保温至60-70℃，剪切搅拌形成初乳，然后放入高压均质机中，在20-100MPa压力下，循环3-4次，冷却至室温，用0.45μm的滤膜过滤后，再用0.22μm滤膜过滤，制备成乳液。

实施例2：

本发明前列地尔脂质毫微球注射液，由下述原料按重量份数比制备而成：前列地尔0.002g、中链油40g、蛋黄卵磷脂26g、聚乙二醇十二羟基硬脂酸酯25g、甘油22g、水890g。

在无菌车间或百级净化车间内，称取注射用中链油40g，向其中加入无菌蛋黄卵磷脂26g及无菌聚乙二醇十二羟基硬脂酸酯25g，将其加热至60-70℃，混合均匀，再向其中加入主药前列地尔2mg，使其溶解，保温60-70℃；加入60-70℃注射用水890g和注射级甘油22g的混合液，保温至60-70℃，剪切搅拌形成初乳，然后放入高压均质机中，在20-100MPa压力下，循环8次，冷却至室温，用0.45μm的滤膜过滤后，再用0.22μm滤膜过滤，制备成乳液。

实施例3：

本发明前列地尔脂质毫微球注射液，由下述原料按重量份数比制备而成：前列地尔0.06g、中链油42g、大豆油28g、大豆卵磷脂30g、聚乙二醇十二羟基硬脂酸酯40g、甘油22g、水838g。

在无菌车间或百级净化车间内，按所述重量比称取注射用中链油42g和注射用大豆油28g，向其中加入无菌大豆卵磷脂30g及无菌聚乙二醇十二羟基硬脂酸酯40g，将其加热至60-70℃，混合均匀，再向其中加入主药前列地尔60mg，使其溶解，保温60-70℃；加入60-70℃注射用水838g和注射级甘油22g的混合液，保温至60-70℃，剪切搅拌形成初乳，然后放入高压均质机中，在20-100MPa压力下，循环10次，冷却至室温，用0.45μm的滤膜过滤后，再用0.22μm滤膜过滤，制备成乳液

实施例4：

本发明前列地尔脂质毫微球注射液，由下述原料按重量份数比制备而成：前列地尔0.06g、中链油52.5g、大豆油17.5g、大豆卵磷脂30g、聚乙二醇十二羟基硬脂酸酯40g、甘油22g、水840g。

在无菌车间或百级净化车间内，按所述重量比称取注射用中链油52.5g和注射用大豆油17.5g，向其中加入无菌大豆卵磷脂30g及无菌聚乙二醇十二羟基硬脂酸酯40g，将其加热至60-70℃，混合均匀，再向其中加入主药前列地尔60mg，使其溶解，保温60-70℃；加入60-70℃注射用水840g和注射级甘油22g的混合液，保温至60-70℃，剪切搅拌形成初乳，然后放入高压均质机中，在20-100MPa压力下，循环10次，冷却至室温，用0.45μm的滤膜过滤后，再用0.22μm滤膜过滤，制备成乳液

实施例5：

本发明前列地尔脂质毫微球注射液，由下述原料按重量份数比制备而成：前列地尔0.06g、注射用油70g、大豆卵磷脂30g、聚乙二醇十二羟基硬脂酸酯40g、甘油22g、水838g。

在无菌车间或百级净化车间内，按所述重量比称取注射用中链油70g，向其中加入无菌大豆卵磷脂30g及无菌聚乙二醇十二羟基硬脂酸酯40g，将其加热至60-70℃，混合均匀，再向其中加入主药前列地尔60mg，使其溶解，保温60-70℃；加入60-70℃注射用水838g和注射级甘油22g的混合液，保温至60-70℃，剪切搅拌形成初乳，然后放入高压均质机中，在20-100MPa压力下，循环10次，冷却至室温，用0.45μm的滤膜过滤后，再用0.22μm滤膜过滤，制备成乳液

实施例6：

本发明前列地尔脂质毫微球注射液，由下述原料按重量份数比制备而成：前列地尔0.2g、中链油100g、大豆卵磷脂40g、聚乙二醇十二羟基硬脂酸酯50g、甘油22g、水780g。

在无菌车间或百级净化车间内，按所述重量比称取注射用中链油100g，向其中加入无菌大豆卵磷脂40g及无菌聚乙二醇十二羟基硬脂酸酯50g，将其加热至60-70℃，混合均匀，再向其中加入主药前列地尔200mg，使其溶解，保温60-70℃；加入60-70℃注射用水780g和注射级甘油22g的混合液，保温至60-70℃，剪切搅拌形成初乳，然后放入高压均质机中，在20-100MPa压力下，循环10次，冷却至室温，用0.45μm的滤膜过滤后，再用0.22μm滤膜过滤，制备成乳液

实施例7：

本发明前列地尔脂质毫微球注射液，由下述原料按重量份数比制备而成：前列地尔0.04g、中链油80g、大豆卵磷脂36g、HS-15为46g、甘油22g、水816g。

在无菌车间或百级净化车间内，按所述重量比称取注射用中链油80g，向其中加入无菌大豆卵磷脂36g及46g无菌HS-15，将其加热至60-70℃，混合均匀，再向其中加入主药前列地尔40mg，使其溶解，保温60-70℃；加入60-70℃注射用水816g和注射级甘油22g的混合液，保温至60-70℃，剪切搅拌形成初乳，然后放入高压均质机中，在20-100MPa压力下，循环10次，迅速冷却至室温，用0.45μm的滤膜过滤后，再用0.22μm滤膜过滤，制备成乳液

实施例8：

本发明前列地尔脂质毫微球注射液，由下述原料按重量份数比制备而成：前列地尔0.10g、中链油100g、大豆卵磷脂40g、HS-15为46g、甘油24g、水790g。

在无菌车间或百级净化车间内，按所述重量比称取注射用中链油100g，向其中加入无菌大豆卵磷脂40g及无菌46g HS-15，将其加热至60-70℃，混合均匀，再向其中加入主药前列地尔100mg，使其溶解，保温60-70℃；加入60-70℃注射用水790g和甘油24g的混合液，保温至60-70℃，剪切搅拌形成初乳，然后放入高压均质机中，在20-100MPa压力下，循环10次，冷却至室温，用0.45μm的滤膜过滤后，再用0.22μm滤膜过滤，制备成乳液

实施例9：

本发明前列地尔脂质毫微球注射液，由下述原料按重量份数比制备而成：前列地尔0.005g、中链油60g、大豆卵磷脂25g、HS-15为30g、甘油24g、水861g。

在无菌车间或百级净化车间内，按所述重量比称取注射用中链油60g，向其中加入无菌大豆卵磷脂25g及30g无菌HS-15，将其加热至60-70℃，混合均匀，再向其中加入主药前列地尔5mg，使其溶解，保温60-70℃；加入60-70℃注射用水861g和注射级甘油24g的混合液，保温至60-70℃，剪切搅拌形成初乳，然后放入高压均质机中，在20-100MPa压力下，循环10次，迅速冷却至室温，用0.45μm的滤膜过滤后，再用0.22μm滤膜过滤，制备成乳液。

实施例10：

本发明前列地尔脂质毫微球注射液，由下述原料按重量份数比制备而成：前列地尔0.02g、中链油46g、大豆卵磷脂20g、HS-15为25g、甘油20g、水889g。

在无菌车间或百级净化车间内，按所述重量比称取注射用中链油46g，向其中加入无菌大豆卵磷脂20g及无菌十二羟基硬脂酸酯25g，将其加热至60-70℃，混合均匀，再向其中加入主药前列地尔20mg，使其溶解，保温60-70℃；加入60-70℃注射用水889g和注射级甘油20g的混合液，保温至60-70℃，剪切搅拌形成初乳，然后放入高压均质机中，在20-100MPa压力下，循环10次，迅速冷却至室温，用0.45μm的滤膜过滤后，再用0.22μm滤膜过滤，制备成乳液。

实施例11：

本发明前列地尔脂质毫微球注射液，由下述原料按重量份数比制备而成：前列地尔0.050g、中链油60g、大豆卵磷脂27g、HS-15为33g、甘油30g、水850g。

在无菌车间或百级净化车间内，按所述重量比称取注射用中链油60g，向其中加入大豆卵磷脂27g及33g的HS-15，将其加热至60-70℃，混合均匀，再向其中加入主药前列地尔50mg，使其溶解，保温60-70℃；加入60-70℃注射用水850g和注射级甘油30g的混合液，保温至60-70℃，剪切搅拌形成初乳，然后放入高压均质机中，在20-100MPa压力下，循环10次，迅速冷却至室温，用0.45μm的滤膜过滤后，再用0.22μm滤膜过滤，制备成乳液

实验例12：

粒径测定，取以上实施例1至实施例11所得到的前列地尔脂质毫微球注射液，使用激光散射光谱仪(PCS)进行粒径测定，结果见附图1-11及下表：

  类  别  实  施  例1  实  施  例2  实  施  例3  实施  例4  实施  例5  实施  例6  实施  例7  实施  例8  实  施例  9  实施  例  10  实施  例  11  平均  粒径  (nm  65.7  80.0  27.0  20.6  24.2  59.6  51.5  64.7  64.8  53.8  62.8  )  D(90  )  (nm)  74.6  92.5  9.4  10.6  8.6  66.4  61.8  69.3  73.9  65.6  69.7  PDI  0.19  0  0.17  7  0.12  2  0.58  0  0.32  7  0.19  1  0.11  7  0.17  1  0.16  1  0.09  9  0.16  5

实验例13：

药物含量测定，称取1至实施例11所得到的各前列地尔脂质毫微球注射液样品适量，约相当于含前列地尔25ug，分别加入3ml四氢呋喃和0.1g无水硫酸钠，超声混均后，用甲醇定量转移至10ml量瓶内，并用甲醇稀释成含前列地尔约为2.5ug/ml的溶液，过滤，续滤液为供试品，按照高效液相法，用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以0.0067mol/L磷酸盐缓冲液(pH为6.3)(取磷酸二氢钾9.07g，加水使溶解，制成1000ml，另取无水磷酸氢二钠9.46g，加水使溶解，制成1000ml，将后者加到前者中，直至pH为6.3，取此液100ml加水至1000ml，摇匀，即得)-乙腈(3∶1)为流动相；流速为每分钟1ml；柱后反应液为1mol/L氢氧化钾溶液，柱后反应管为聚四氟乙烯管(φ0.5mm×10m)；柱温60℃；检测波长278nm。按外标法测定，测定结果见下表：

  类别  实施  例1  实施  例2  实施  例3  实施  例4  实施  例5  实施  例6  实施  例7  实施  例8  实施  例9  实施  例10  实施  例11  含量  (ug  /ml)  29.1  2  2.16  61.5  4  58.2  2  56.9  3  187.  6  38.7  5  105.  3  4.48  22.6  7  48.6  1

实验例14：

药物包封率测定，称取1至实施例11所得到的各前列地尔脂质毫微球注射液样品100mg，分别加蒸馏水10ml，使用截留分子量5000的超滤离心管，以5000rpm/分离心，得滤液，按照上述高效液相法测定，结果见下表：

  类别  实施  例1  实施  例2  实施  例3  实施  例4  实施  例5  实施  例6  实施  例7  实施  例8  实施  例9  实施  例10  实施  例11  包封  率(％)  89.43  90.54  88.06  90.61  87.95  89.88  91.74  90.24  91.04  88.25  87.47

实验例15：

药物的稳定性研究，取实施例5所得到的前列地尔脂质毫微球注射液样品及自制前列地尔脂肪乳样品(121℃热压灭菌6分钟)，进行6个月的4℃长期留样考察。以各取样时间点PGE₁和PGA₁的含量作为评价指标。考察结果见下表：

时间         实施例5              自制脂肪乳

PGE1含量    PGA1含量    PGE1含量    PGA1含量

((ug/ml)    (ug/ml)     (ug/ml)     (ug/ml)

0月    56.93       0.22        4.32        1.53

1月    56.72       0.24        4.11        1.79

2月    55.96       0.64        3.67        2.12

3月    55.77       0.97        2.81        3.01

6月    55.69       1.34        1.86        4.03

实施例16：

氚标记示踪法测定PGE₁-LM与PGE₁-LN的体内分布差异

给药量：50μg/kg

规格：5μg/mL

实验分组：给药组-1：³H-PGE₁-LM平均粒径：200nm

给药组-2：³H-PGE₁-LN平均粒径：50nm

实验前准备：

氘化标记PGE₁并制备PGE₁-LM(前列地尔脂微球)与PGE₁-LN(按照本发明制备的前列地尔脂质毫微球)溶液，稳定实验表明样品在3周内保持稳定，配置闪烁液。

实验过程：

昆明种小鼠18只(雄性)，随即分成两组，每组9只，实验前禁食一夜。按50μg/kg给药剂量分别尾静脉注射给予³H-PGE₁-LM与³H-PGE₁-LN注射液。分别于给药后1min，5min，15min(每个时间点3只小鼠)处死动物，取出心、肝、脾、肺、肾、脑生理盐水冲洗、滤纸吸干后精确称重，备用。液体闪烁计数仪测定组织样品中放射性活度值(R)，根据所测各组织放射活度值及组织重量计算各组织单位放射性活度Rd，按下面公式计算两个给药组在小鼠体内的³H-PGE₁-LM与³H-PGE₁-LN浓度：

C＝/R×3/R₀

其中：R为组织中检测到的放射性活度值；R₀为对照给药溶液的放射性活度值。

绘制组织中药物浓度(c)-时间(t)曲线，矩形法分别计算出各组织中药物的AUC值，得出两组药物在体内的分布趋势如下：

³H-PGE₁-LM：肾＞肝＞脾＞肺＞心＞脑

³H-PGE₁-LN：肾＞心＞肺＞肝＞脑＞脾

结论：

由初步组织分布实验结果可以看出，PGE₁-LN改变了PGE₁-LM体内RES靶向分布，由于药物经肾排泄，因此两组药物在肾组织中被检测到最多，但是PGE₁-LN在心脏及脑分布量较PGE₁-LM明显提高，可以看出将药物制成LN，由于粒径减少，其体内行为靶向于非RES器官。