铂配合物以及含有该铂配合物的药物组合物

摘要

本发明提供一种具有较强的抗肿瘤活性、且以更小的剂量给药即可见效的新型铂配合物及含有该铂配合物的药物组合物。该铂配合物以下述通式(A)所示的螺[4，4]壬烷-1，6-二胺作为配体。(式中，X和Y相同或不同，分别表示卤原子，或者X和Y共同表示式(Z)表示的2价残基。)该铂配合物具有较强的抗肿瘤活性，作为恶性肿瘤治疗剂有效。

说明书

技术领域

本发明涉及一种新型铂配合物及将其作为有效成分的药物组合物，特别是恶性肿瘤治疗剂。

背景技术

近年来，恶性肿瘤位于死亡原因的第一位，相对于此，正在开发各种抗肿瘤物质。其中，目前来讲，铂配合物的抗肿瘤作用已经被认可，已开发有顺铂[I]、卡铂[II]、奥沙利铂[III]等，并用于治疗(例如，参照非专利文献1-非专利文献3)。

[式1]

专利文献

专利文献1：美国专利4,140,707(1979年，2月20日)

非专利文献

非专利文献1：Nature，1969，222，385-386

非专利文献2：Caneer Treat Reviews，1985，12，21-33

非专利文献3：Caneer Letters，1985，27，135-143

发明内容

发明要解决的课题

但是，顺铂存在肾毒性、血液毒性、消化器官毒性、神经毒性等副作用多的问题。因此，开发了作为减轻顺铂的肾毒性、并增加其水溶性的物质——卡铂，但是卡铂价格昂贵，同时其抗肿瘤效果未必令人满意。

在这些物质呈现抗肿瘤活性的另一方面，为了使其发挥预定的抗肿瘤活性，需要给予与其之相应的预定的给药量，因此，存在具有副作用的缺点。

本发明的目的在于提供一种新型配合物，其为将螺[4，4]壬烷-1，6-二胺作为配体的铂(II)配合物，其具有更强的抗肿瘤活性，以更小的剂量给药即可见效，因此，可相对减轻副作用。

特别是提供一种具有如下特征的新型配合物，其为铂-草酸盐配合物，其特征在于，以下式(G)所示的顺式，顺式-螺[4，4]壬烷-1，6-二胺作为配体，其对于恶性肿瘤、特别是像人淋巴瘤细胞那样的非实体瘤具有较强的抗肿瘤活性，且可相对减轻副作用。

[式2]

进而，由于顺式，顺式-螺[4，4]壬烷-1，6-二胺以具有2种立体结构(即(S，S，S)构型和(R，R，R)构型)的光学活性体的外消旋体的形式存在，明了了这些光学活性二胺的铂配合物对恶性肿瘤的效果，本发明提供一种新型配合物，其为以光学活性的(S，S，S)及(R，R，R)-顺式，顺式-螺[4，4]壬烷-1，6-二胺作为配体的铂(II)配合物，其具有更强的抗肿瘤活性，以更小的剂量给药即可见效，因此，可相对减轻副作用。

解决课题的手段

为了实现该目的，本发明的恶性肿瘤治疗剂是以下述通式(A)所示的螺[4，4]壬烷-1，6-二胺作为配体的新型铂(II)配合物及将该配合物作为有效成分的制剂。

[式3]

式中，X和Y相同或不同，分别表示卤原子，或者X和Y共同表示式(Z)表示的2价残基。

[式4]

式中，R表示单键或碳数1～6的直链或支链的2价烃残基，该烃残基可具有不饱和键，并且，该烃残基也可形成螺环结构。

本发明是将下式通式(B)所示的(S，S，S)-顺式，顺式-螺[4，4]壬烷-1，6-二胺作为配体的铂配合物。

[式5]

式中，X和Y相同或不同，分别表示卤原子，或者X和Y共同表示式(Z)表示的2价残基。

[式6]

式中，R表示单键或碳数1～6的直链或支链的2价烃残基，该烃残基可具有不饱和键，并且，该烃残基也可形成螺环结构。

本发明是将下式通式(C)所示的(R，R，R)-顺式，顺式-螺[4，4]壬烷-1，6-二胺作为配体的铂配合物。

[式7]

式中，X和Y相同或不同，分别表示卤原子，或者X和Y共同表示式(Z)表示的2价残基。

[式8]

式中，R表示单键或碳数1～6的直链或支链的2价烃残基，该烃残基可具有不饱和键，并且，该烃残基也可形成螺环结构。

本发明是铂-二羧酸配合物，其特征在于，将下式通式(D)所示的螺[4，4]壬烷-1，6-二胺作为配体。

[式9]

上述式中，R表示单键或碳数1～6的直链或支链的2价烃残基，该烃残基可具有不饱和键，并且，该烃残基也可形成螺环结构。

本发明是铂-二羧酸配合物，其特征在于，将下式通式(E)所示的(S，S，S)-顺式，顺式-螺[4，4]壬烷-1，6-二胺作为配体。

[式10]

式中，R表示单键或碳数1～6的直链或支链的2价烃残基，该烃残基可具有不饱和键，并且，该烃残基也可形成螺环结构。

本发明是铂-二羧酸配合物，其特征在于，将下式通式(F)所示的(R，R，R)-顺式，顺式-螺[4，4]壬烷-1，6-二胺作为配体。

[式11]

式中，R表示单键或碳数1～6的直链或支链的2价烃残基，该烃残基可具有不饱和键，并且，该烃残基也可形成螺环结构。

本发明是铂-草酸盐配合物，其特征在于，将下式(G)所示的顺式，顺式-螺[4，4]壬烷-1，6-二胺作为配体。

[式12]

本发明是铂-草酸盐配合物，其特征在于，将下式(H)所示的(S，S，S)-顺式，顺式-螺[4，4]壬烷-1，6-二胺作为配体。

[式13]

本发明是铂-草酸盐配合物，其特征在于，将下式(J)所示的(R，R，R)-顺式，顺式-螺[4，4]壬烷-1，6-二胺作为配体。

[式14]

本发明是铂-环丁烷二羧酸盐配合物，其特征在于，将下式(K)所示的顺式，顺式-螺[4，4]壬烷-1，6-二胺作为配体。

[式15]

本发明是铂-环丁烷二羧酸盐配合物，其特征在于，将下式(L)所示的顺式，反式-螺[4，4]壬烷-1，6-二胺作为配体。

[式16]

本发明的药物组合物含有上述各式的铂配合物作为有效成分。

本发明的恶性肿瘤治疗剂含有上述各式的铂配合物作为有效成分。

本发明是作为恶性肿瘤治疗剂的上述药物组合物。

本发明是作为非实体恶性肿瘤治疗剂的上述药物组合物。

发明效果

根据本发明的新型铂配合物，其对于恶性肿瘤、特别是像人淋巴瘤细胞那样的非实体瘤具有较强的抗肿瘤活性，与目前的铂配合物恶性肿瘤治疗剂比较，以更小的剂量给药即可见效，因此，可相对减轻副作用。

附图说明

图1是表示将本发明的(化合物1)作用于癌细胞及正常细胞时的细胞增殖抑制率(％)的图表。

图2是表示将本发明的(化合物2)作用于各种癌细胞时的细胞增殖抑制率(％)的图表。

图3是表示将本发明的(化合物3)作用于各种癌细胞时的细胞增殖抑制率(％)的图表。

具体实施方式

以下，对于本发明的铂配合物及含有该铂配合物的恶性肿瘤治疗剂的实施方式进行说明。

在本发明的铂配合物中，螺[4，4]壬烷-1，6-二胺在立体化学上存在顺式，顺式-构型、顺式，反式-构型、反式，反式-构型这3种立体异构体。但是，反式，反式-构型不能立体地与分子内的铂形成配合物，因此，优选顺式，顺式-构型、顺式，反式-构型。

X和Y表示卤原子时，优选X和Y是相同的卤原子，特别优选X和Y均为氯原子。

另一方面，X和Y共同为式(Z)表示的化合物来源于与铂形成配合物的二羧酸。

R是单键时，该二羧酸是草酸，另外，R为碳数1-6的烃残基时，该二羧酸，例如当R是1、2、3的直链状时，分别是丙二酸、丁二酸、戊二酸。

R的烃残基具有不饱和键时，例如R的碳数为2时，该二羧酸是马来酸。

R的烃残基具有螺结构时，该二羧酸是碳数3～6的环状烃且在相同碳原子上具有2个键，作为这样的二羧酸，例如可举出环丙烷-1，1-二羧酸、环丁烷-1，1-二羧酸。

作为与铂形成盐的二羧酸，优选R是单键的草酸及R的碳数4的环丁烷二羧酸。

本发明的包含立体异构体的化合物可通过下述通式所示的反应式(i)、(II)所示的方法来合成。

[式17]

[式18]

对于化合物(M)、(N)，可应用公知的方法，例如J.Med.Chem.，1997，40，112-116、J.Inorg.Biochem.，1993，50，79-87、J.Inorg.Biochem.，1996，61，291-310所述的方法容易地得到。DMSO是二甲亚砜的缩写。

[式19]

式(M)的化合物其自身可以是本发明的目的化合物(A)。

作为式(M)中的碘以外的卤原子的化合物可与(M)同样操作来制备。或者，也可以按照常规方法，通过将(M)的化合物的碘原子置换为其他卤原子来制备。

在(M)的化合物中，使用的螺[4，4]壬烷-1，6-二胺在立体化学上存在顺式，顺式-构型、顺式，反式-构型、反式，反式-构型的3种立体异构体。但是，在立体化学上，反式，反式-构型不能形成分子内的配合物，因此变成顺式，顺式-构型、顺式，反式-构型这2种立体异构体。

作为用于反应式(i)的二羧酸的碱金属盐，优选Na、K盐，并且优选以当量使用。对于反应式(II)中的化合物(N)、(O)，优选以当量使用。

作为另一原料的式(O)所示的螺[4，4]壬烷-1，6-二胺，可以使用公知的方法(A.C.C Chan等人，Tetrahedoron.Lett.，2004，45，7379)，例如反应式(v)所示的方法来合成。即，可以由螺[4，4]壬烷-1，6-二醇(P)，通过3个阶段来合成。

[式20]

在此，MsCl表示甲磺酰氯(CH₃SO₂Cl)。化合物(O)存在3种异构体，即，顺式，顺式-构型、顺式，反式-构型、反式，反式-构型，但是其中，在分子内与铂形成配合物的是顺式，顺式-构型、顺式，反式-构型这2种。它们如反应式(iv)、(v)所示的那样，可以立体选择性地由相应的反式，反式-螺[4，4]壬烷-1，6-二醇(t，t-P)合成顺式，顺式[4，4]壬烷-1，6-二胺(c，c-O)、由相应的顺式，反式-螺[4，4]壬烷-1，6-二醇(t，c-P)合成顺式，反式-螺[4，4]壬烷-1，6-二胺(c，t-O)。

[式21]

[式22]

对于反式，反式-螺[4，4]壬烷-1，6-二醇(t，t-P)、反、顺-螺[4，4]壬烷-1，6-二醇(t，c-O)，可以通过公知的方法(J.A.Nieman，B.A.Keay，Synthetic Comm.，1999，29，3929)，例如用适当的还原剂(例如Na[(CH₃OCH₂CH₂O)₂AlH₂]等金属氢化物)对螺[4，4]壬烷-1，6-二酮(S)进行还原来得到。

[式23]

通常，可以以3种异构体的混合物的形式得到，这些异构体可以使用公知的方法，例如D.J.Cram等人，J.Am.Chem.Soc.，1959，81，2729的方法进行分离。

对于螺[4，4]壬烷-1，6-二酮(S)，可以通过公知的方法，例如J.A.Nieman，B.A.Keay，Synthetic Comm.，1999，29，3929的方法来合成。

[式24]

当将在此合成的二胺(c，c-O)、(c，t-O)用于反应式(i)、(II)时，则可以合成各自对应的铂配合物。

[式25]

[式26]

另外，对于本发明的包含光学异构体的化合物，可通过下述通式所示的反应式(I)、(II)所示的方法来合成。

[式27]

[式28]

对于化合物(a)、(b)、(c)，可应用公知的方法，例如J.Med.Chem.，1997，40，112-116，J.Inorg.Biochem.，1993，50，79-87、J.Inorg.Biochem.，1996，61，291-310所述的方法容易地得到。DMSO是二甲亚砜的缩写。

[式29]

式(a)、(b)的化合物其自身可以是本发明的目的化合物(B)及(C)。

作为式(a)、(b)中的碘以外的卤原子的化合物，可与(a)、(b)同样操作来制备。或者，也可以按照常规方法，通过将(a)、(b)的化合物的碘原子置换为其他卤原子来制备。

作为用于反应式(I)的二羧酸的碱金属盐，优选Na、K盐，并且优选以当量使用。对于反应式(I I)中的(S，S，S)-顺式，顺式-螺[4，4]壬烷-1，6-二胺(d)、(R，R，R)-顺式，顺式-螺[4，4]壬烷-1，6-二胺(e)，优选以当量使用。

对于式(d)、(e)所示的(S，S，S)-顺式，顺式-螺[4，4]壬烷-1，6-二胺、(R，R，R)-顺式，顺式-螺[4，4]壬烷-1，6-二胺，可以使用公知的方法(A.C.C Chan等人，Tetrahedoron.Lett.，2004，45，7379)，例如采用反应式(V)所示的方法来合成。

[式30]

即，可以由相应的光学活性的(R，S，R)-反式，反式-螺[4，4]壬烷-1，6-二醇(f)、(S，R，S)-反式，反式-螺[4，4]壬烷-1，6-二醇(g)，通过3个阶段来合成。

在此，MsCl表示甲磺酰氯(CH₃SO₂Cl)。对于(R，S，R)-反式，反式-螺[4，4]壬烷-1，6-二醇(f)、(S，R，S)-反式，反式-螺[4，4]壬烷-1，6-二醇(g)，可以通过公知的方法(A.C.C Chan等人，Tetrahedoron.Lett.，2004，45，7379)，即，使用已知的光学活性的(S)-CBS(n)或(R)-CBS(o)作为催化剂，用硼烷还原螺[4，4]壬烷-1，6-二酮(m)来合成。当使用(S)-CBS催化剂时，则可以得到(R，S，R)-反式，反式-螺[4，4]壬烷-1，6-二醇(f)；当使用(R)-CBS催化剂时，则可以得到(S，R，S)-反式，反式-螺[4，4]壬烷-1，6-二醇(g)。

[式31]

对于(S)-CBS催化剂(n)、(R)-CBS催化剂(o)，可以通过利用下式反应式(VII)的公知方法(E.J.Corey，R.K.Bakshi，S.Shibata，J.Am.Chem.Soc.，1987，109，5551)来合成。

[式32]

对于螺[4，4]壬烷-1，6-二酮(m)，可使用公知的方法，例如J.A.Nieman，B.A.Keay，Synthetic Comm.，1999，29，3929的方法来合成。

[式33]

当将在此合成的光学活性的二胺(d)、(e)用于反应式(I)、(II)时，则可以合成各自对应的铂配合物。

本配合物有时作为含水配合物含有水，因此其含水形式也包含在本发明中。

在临床上给药包含有效量的本发明的铂配合物的药物组合物时，可以通过口服或非口服给药。其剂型包含片剂、糖衣片、丸剂、胶囊剂、散剂、锭剂、液体制剂、栓剂、注射剂等，这些剂型可配合药学上可允许的赋形剂来制备。本发明的药物组合物优选作为非口服用制剂来制备。作为赋形剂，可以例示如下物质：乳糖、蔗糖、葡萄糖、山梨糖醇、甘露醇、马铃薯淀粉、支链淀粉、其他各种淀粉、纤维素衍生物(例如羧甲基纤维素、羟乙基纤维素等)、明胶、硬脂酸钙、硬脂酸镁、聚乙烯醇、聚乙二醇蜡、阿拉伯胶、滑石粉、二氧化钛、橄榄油、花生油、芝麻油等植物油、石蜡油、中性脂肪基剂、乙醇、丙二醇、生理盐水、无菌水、甘油、着色剂、调味剂、增稠剂、稳定剂、等渗剂、缓冲剂等、及其他药学上可允许的赋形剂。

本发明的治疗剂可以含有0.001～85重量％、优选0.005～60重量％的本发明的铂配合物。

本发明的治疗剂的给药量主要受症状控制影响，但为0.005～200mg/成人体重/日、优选为0.01～50mg/成人体重/日。

下面，列举实施例，进一步具体地说明本发明。

实施例1

在300ml的圆底烧瓶中装入四氯铂(II)酸钾(K₂PtCl₄)7.47g(18mmol)，并溶解于145ml水中，向其中加入使碘化钾(KI)29.9g溶解于40ml水中而得到的溶液，在室温下搅拌1小时。接着，加入顺式，顺式-螺[4，4]壬烷-1，6-二胺2.81g(18mmol)，在室温下搅拌22小时。进行过滤，将过滤物依次用水、乙醇、二乙醚洗涤，干燥。得到(顺式，顺式-螺[4，4]壬烷-1，6-二胺)二碘铂(II)8.47g。收率为87％。

在200ml的圆底烧瓶中装入蒸馏水150ml、丙酮15ml，再加入(顺式，顺式-螺[4，4]壬烷-1，6-二胺)二碘铂(II)3g(4.97mmol)，最后加入硫酸银1.47g(4.72mmol)，在暗处、室温下搅拌28小时。过滤不溶物。将滤液在减压下浓缩至约20ml。接着加入在1N苛性钠水溶液8.9ml(8.9mmol)中溶解有402mg(4.47mmol)草酸的溶液，在暗处、室温下搅拌1小时。冷却到4℃后进行过滤。将过滤物依次用冷水、丙酮洗涤，干燥。得到(顺式，顺式-螺[4，4]壬烷-1，6-二胺)草酸铂(II)配合物(化合物1)1.28g。收率为59％。

元素分析(作为C₁₁H₁₈N₂O₄Pt)

计算值(％) C：30.21 H：4.15 N：6.41 Pt：44.60

实测值(％) C：29.11 H：4.22 N：6.09 Pt：44.57

IR(KBr)cm^-1：3203，3115，1693，1672，1367

¹H-NMR(500MHz，DMSO-d6)δ：1.35(t，J＝9.5Hz，2H)，1.45-1.53(m，2H)，1.55-1.61(m，2H)，1.65-1.69(m，4H)，1.82-1.89(m，2H)，2.91-2.95(q，J＝5.8Hz，2H)，5.04(t，J＝11.6Hz，2H)，5.87(d，J＝10.5Hz，2H)

¹³C-NMR(125MHz，DMSO-d6)δ：20.6，32.7，35.2，56.3，60.4，166.2

MS(FAB)：m/z 438(M+H⁺)

由以上结果可以确定，本化合物具有(化合物1)所示的化学结构。

[式34]

(化合物1)

实施例2

在50ml的圆底烧瓶中装入四氯铂(II)酸钾(K₂PtCl₄)6.26g(15.1mmol)，并溶解于100ml水中，接着加入二甲亚砜(DMSO)3.34g(42.8mmol)，静置2日。过滤析出的结晶，接着依次用冷水、丙酮洗涤，干燥。得到作为DMSO配合物的(DMSO)₂PtCl₂ 5.44g。收率为84.3％。

将由此得到的作为DMSO配合物的(DMSO)₂PtCl₂2.60g(6.1mmol)装入200ml圆底烧瓶中，接着加入水110ml，再加入硫酸银(Ag₂SO₄)1.86g(6.0mmol)，在暗处、室温下搅拌19小时。使用作为过滤助剂的硅藻土进行过滤。在滤液中加入在1N苛性钠溶液12.6ml中溶解有草酸554mg的水溶液，在室温下搅拌4小时。进行过滤，将过滤物依次用冷水、丙酮洗涤，干燥。得到作为DMSO的草酸铂配合物的(DMSO)₂Pt(草酸)2.12g。收率为79.1％。

使顺式，顺式-螺[4，4]壬烷-1，6-二胺78mg(0.5mmol)溶解于10ml水中，进行过滤。在滤液中，加入先前得到的(DMSO)₂Pt(草酸)220mg(0.5mmol)，在90℃下加热搅拌1.5小时。析出白色固体。冷却到4℃进行过滤。将过滤物依次用冷水、丙酮洗涤，干燥。得到(顺式，顺式-螺[4，4]壬烷-1，6-二胺)草酸铂(II)配合物(化合物1)145mg。收率为66％。该物质的IR与实施例1得到的完全一致。

实施例3

在300ml的圆底烧瓶中装入四氯铂(II)酸钾(K₂PtCl₄)5.81g(14mmol)，并溶解于112ml水中，向其中加入使碘化钾(KI)23.26g溶解于31ml水而得到的溶液，在室温下搅拌1小时。接着加入(S，S，S)-顺式，顺式-螺[4，4]壬烷-1，6-二胺2.19g(14mmol)，在室温下搅拌22小时。进行过滤，将过滤物依次用水、乙醇、二乙醚洗涤，干燥。得到[(S，S，S)-顺式，顺式-螺[4，4]壬烷-1，6-二胺]二碘铂(II)7.17g。收率为85％。

在200ml的圆底烧瓶中装入蒸馏水150ml、丙酮15ml，再加入[(S，S，S)-顺式，顺式-螺[4，4]壬烷-1，6-二胺]二碘铂(II)3g(4.97mmol)，最后加入硫酸银1.47g(4.72mmol)，在暗处、室温下搅拌71小时。过滤不溶物。将滤液在减压下浓缩至约20ml。接着加入在1N苛性钠水溶液8.9ml(8.9mmol)中溶解有402mg(4.47mmol)草酸的溶液，在暗处、室温下搅拌1小时。冷却到4℃后进行过滤。将过滤物依次用冷水、丙酮洗涤，干燥。得到[(S，S，S)-顺式，顺式-螺[4，4]壬烷-1，6-二胺]草酸铂(II)配合物(化合物2)1.02g。收率为47％。

IR(KBr)cm^-1：3200，3111，1701，1670，1375

IR测定的结果与实施例1的化合物1一致，可以确认为化合物2。

[式35]

(化合物2)

实施例4

在300ml的圆底烧瓶中装入四氯铂(II)酸钾(K₂PtCl₄)5.84g(14mmol)，并溶解于114ml水中，向其中加入使碘化钾(KI)23.41g溶解于31ml水中而得到的溶液，在室温下搅拌1小时。接着，加入(R，R，R)-顺式，顺式-螺[4，4]壬烷-1，6-二胺2.20g(14mmol)，在室温下搅拌22小时。进行过滤，将过滤物依次用水、乙醇、二乙醚洗涤，干燥。得到[(R，R，R)-顺式，顺式-螺[4，4]壬烷-1，6-二胺]二碘铂(II)7.34g。收率为87％。

在200ml的圆底烧瓶中装入蒸馏水150ml、丙酮15ml，再加入[(R，R，R)-顺式，顺式-螺[4，4]壬烷-1，6-二胺]二碘铂(II)3g(4.97mmol)，最后加入硫酸银1.47g(4.72mmol)，在暗处、室温下搅拌28小时。过滤不溶物。将滤液在减压下浓缩至约20ml。接着加入在1N苛性钠水溶液8.9ml(8.9mmol)中溶解有402mg(4.47mmol)草酸的溶液，在暗处、室温下搅拌1小时。冷却到4℃后进行过滤。将过滤物依次用冷水、丙酮洗涤，干燥。得到[(R，R，R)-顺式，顺式-螺[4，4]壬烷-1，6-二胺]草酸铂(II)配合物(化合物3)1.15g。收率为53％。

IR(KBr)cm^-1：3202，3111，1697，1674，1377

IR测定的结果与实施例1的化合物1一致，可以确认为化合物3。

[式36]

(化合物3)

实施例5

在200ml圆底烧瓶中装入实施例2得到的DMSO铂配合物(DMSO)₂PtCl₂ 3.77g(8.93mmol)，接着加入水100ml。进而依次加入环丁烷二羧酸(CBDCA)1.22g、0.5N苛性钠水溶液34ml、硝酸银(AgNO₃)2.89g(17mmol)，在暗处、室温下搅拌46小时。进行过滤，将过滤物依次用冷水、丙酮洗涤，干燥。得到DMSO的CBDCA铂配合物(DMSO)₂Pt(CBDCA)2.55g。收率为57.9％。

使顺式，顺式-螺[4，4]壬烷-1，6-二胺760mg(4.86mmol)溶解于10ml水中，进行过滤。在30ml的圆底烧瓶中加入该滤液，加入上述得到的DMSO的铂配合物(DMSO)₂Pt(CBDCA)2.4g(4.86mmol)，在90℃下加热搅拌1.5小时。在加热搅拌30分钟后白色固体析出。冷却到4℃进行过滤，依次用冷水、丙酮洗涤，干燥。得到目标的(顺式，顺式-螺[4，4]壬烷-1，6-二胺)环丁烷二羧酸铂(I I)配合物(化合物4)1.44g。收率为60％。

元素分析(作为C₁₅H₂₄N₂O₄Pt·H₂O)

计算值(％) C：35.36 H：5.14 N：5.50 Pt：38.29

实测值(％) C：34.63 H：5.24 N：5.30 Pt：37.99

IR(KBr)cm^-1：3207，3098，1661，1672，1373

¹H-NMR(500MHz，DMF-d7)δ：1.49-1.53(m，2H)，1.58-1.65(m，2H)，1.70(5重峰，J＝7.9Hz，2H)，1.75-1.80(m，2H)，1.82-1.89(m，2H)，1.91-1.97(m，2H)，2.00-2.07(m，2H)，3.17-3.20(m，2H)，5.09(t，J＝11.3Hz，2H)，5.64(d，J＝11.0Hz，2H)

¹³C-NMR(125MHz，DMF-d7)δ：15.8，21.2，31.3，33.6，6.3，56.7，57.4，61.7，178.6

MS(FAB)：m/z 492(M+H⁺)

由以上结果可以确定，本化合物具有(化合物4)所示的化学结构。

[式37]

(化合物4)

实施例6

将顺式，反式-螺[4，4]壬烷-1，6-二胺997mg(6.38mmol)溶解于100ml水中，进行过滤。在200ml的圆底烧瓶中加入该滤液，接着加入实施例5得到的DMSO的铂配合物(DMSO)₂Pt(CBDCA)3.15g(6.38mmol)，在室温下搅拌26小时，然后在90℃下加热搅拌2.5小时。大约1小时后可确认白色固体析出。冷却到4℃，过滤，依次用冷水、丙酮洗涤，干燥。得到(顺式，反式-螺[4，4]壬烷-1，6-二胺)环丁烷二羧酸铂(II)配合物(化合物5)1.12g。收率为36％。

元素分析(作为C₁₅H₂₄N₂O₄Pt)

计算值(％) C：36.66 H：4.92 N：5.70 Pt：39.70

实测值(％) C：36.56 H：4.88 N：5.57 Pt：39.91

IR(KBr)cm^-1：3209，3115，1651，1614，1373

¹H-NMR(500MHz，DMSO-d6)δ：1.13-1.17(m，1H)，1.24-1.29(m，1H)，1.33-1.52(m，2H)，1.59-1.72(m，2H)，1.79-1.82(m，2H)，1.87-1.94(m，1H)，1.98-2.09(m，3H)，2.53-2.60(m，2H)，2.68(q，J＝9.2Hz，1H)，2.78-2.80(m，1H)，2.87-2.92(m，1H)，4.72(t，J＝11.8Hz，1H)，5.23(d，J＝11.7Hz，1H)，5.36(d，J＝8.5Hz，1H)，5.71(d，J＝8.8Hz，1H)

¹³C-NMR(125MHz，DMSO-d6)δ：15.0，18.5，22.7，27.8，29.0，29.1，31.5，34.0，37.0，55.3，55.58，55.65，59.9，177.2，177.5

MS(FAB)：m/z 492(M+H⁺)

由以上结果可以确定，本化合物具有(化合物5)所示的化学结构。

[式38]

(化合物5)

实施例7

通过将(化合物1)以8mg/ml的浓度溶解于二甲亚砜(DMSO)中来制备试验溶液。

使用作为癌细胞的U937(人淋巴瘤细胞)、作为正常细胞的HEK293(人胚胎肾细胞)进行试验。

使这些细胞悬浮于添加有10％血清的各培养基中，分别注入96孔板。然后，在37℃、5％CO₂的环境中培养过夜。次日，在培养基中将试验溶液配制成各种浓度(0、4、8、16μg/ml)，分别注入预先播种了细胞的平板上。进而，在37℃、5％CO₂的环境中培养3天。

在添加药剂后的第1～3天，利用MTS法(Promega公司制，细胞增殖试验用试剂盒)测定添加药剂后的细胞的增殖。

由测定的MTS值，用以下公式求出细胞增殖抑制率(％)。

抑制率(％)＝(1-添加药剂组的MTS值/未添加药剂组的MTS值)×100

由上述公式求出的值表示细胞增殖的抑制率，因此，数值越高，表示药剂效果越高。将该值在50(％)以上的药剂评价为有效药剂。结果如下所示。

图1所示的图表的X轴表示添加药剂后的天数，Y轴表示由上式求出的细胞增殖抑制率(％)。进而，将各浓度(4、8、16μg/ml)示于同一图表上。

[表1]从添加药剂起的1～3天期间的细胞增殖抑制率(％)

根据上述表1，在癌细胞(U937)中可以看出明显的药效。对于奥沙利铂，也进行了和上述同样的试验，结果可判明，虽然在U937中也观察到了药效，但是明显可以看出(化合物1)的药效更强。

实施例8

通过将[(S，S，S)-顺式，顺式-螺[4，4]壬烷-1，6-二胺]草酸铂(II)配合物(化合物2：以下记为S药剂)以10mg/ml的浓度溶解于二甲亚砜(DMSO)中来制备S药剂试验溶液，通过将[(R，R，R)-顺式，顺式-螺[4，4]壬烷-1，6-二胺]草酸铂(II)配合物(化合物3：以下记为R药剂)以10mg/ml的浓度溶解于二甲亚砜(DMSO)中来制备R药剂试验溶液。

使用作为癌细胞的A549(人肺癌细胞)、LU65A(人肺癌细胞)、RERF-LC-MA(人肺癌细胞)、LU99(人肺癌细胞)、H460(人肺癌细胞)、HCT116(人结肠癌细胞)、HT-29(人结肠癌细胞)、MKN-45(人胃癌细胞)、MKN-1(人胃癌细胞)、U937(人淋巴瘤细胞)、KP-1N(人胰腺癌细胞)、H2452(人的间皮瘤细胞)来进行试验。

使这些细胞悬浮于添加有10％血清的各培养基中，分别注入96孔板。然后，在37℃、5％CO₂的环境中培养过夜。次日，在培养基中将S药剂试验溶液及R药剂试验溶液配制成各种浓度(5、10、20μg/ml)，分别注入预先播种了细胞的平板上。进而，在37℃、5％CO₂的环境中培养3天。

在添加药剂后的第1～3天，利用MTS法(Promega公司制，细胞增殖试验用试剂盒)测定添加药剂后的细胞增殖。

由测定的MTS值，用以下公式求出细胞增殖抑制率(％)。

抑制率(％)＝(1-添加药剂组的MTS值/未添加药剂组的MTS值)×100

由上述公式求出的值表示细胞增殖的抑制率，因此，数值越高，表示药剂效果越高。将该值在50(％)以上的药剂评价为有效药剂。结果如下所示。

图2和图3所示的图表的X轴表示药剂添加后的天数，Y轴表示由上式求出的细胞增殖抑制率(％)。进而，将各浓度(5、10、20μg/ml)示于同一图表上。

[表2]从添加药剂起3天后的细胞增殖抑制率(％)

×：0～25％ △：26～50％ ○：51～75％ ◎：76～100％ -：未测定

对于S药剂而言，在除了H2452细胞(人的间皮瘤细胞)之外的所有细胞中，细胞增殖抑制率均为50％以上。对于R药剂而言，在所有细胞中细胞增殖抑制率均为50％以上。

根据以上结果，可以说S药剂和R药剂对许多肿瘤细胞显示出药效，且R药剂的效果更高。另外，S药剂和R药剂与目前作为抗肿瘤治疗剂的奥沙利铂相比，显示出更高的药效。

产业实用性

如上所述，本发明的铂配合物具有较强的抗肿瘤活性，作为恶性肿瘤治疗剂是有效的。