一种以草酸盐制备洛铂三水合物的方法

摘要

本发明涉及一种以草酸盐制备洛铂三水合物的方法，以二氨甲基环丁烷草酸盐、亚铂酸钾和碘化钾为原料，先将氯亚铂酸钾置换为碘亚铂酸钾，在碱性条件下中和二氨甲基环丁烷中的草酸，使得二氨甲基环丁烷游离出来，然后与K

说明书

技术领域

本发明涉及一种洛铂三水合物的制备方法，具体是涉及一种以草酸盐制备洛铂三水合物的方法。

背景技术

洛铂(Lobaplatin，D19466)又名洛巴铂，是继顺铂、卡铂之后由德国爱斯达制药股份有限公司(ASTA Medica AG)研发的第三代铂类抗肿瘤药物。其化学名称为：1，2-二氨甲基-环丁烷-乳酸合铂。分子式为C₉H₁₈N₂O₃Pt，分子量为397.34，化学结构式如下：

洛铂具烷化作用，属烷化剂(广义)。研究表明，其对多种动物和人肿瘤细胞株有明确的细胞毒作用，与顺铂和卡铂的抑瘤作用相当或者更好，毒性作用与卡铂相同，且与顺铂无交叉耐药。抗癌活性强，毒性较小，溶解度好，在水中稳定，主要用于乳腺癌、小细胞肺癌及慢性粒细胞性白血病的治疗。

《国外医药》1994年第15卷第1期《抗肿瘤药洛巴铂》一文中报道了洛铂的合成方法，其配体的合成以丙烯腈经热或光化学头接头二聚合作用开始，产生的顺式和反式-1，2环丁烷二腈混合物进行蒸馏分离，然后将反式化合物通过氢化铝锂还原转化成1，2-二氨甲基环丁烷。1，2-二氨甲基环丁烷再和四氯代铂酸钾制备二氯铂配合物，与硝酸银反应生成硝酸基配合物，将反应物未经分离通过OH型强阴离子交换树脂柱后，活化的配合物在水溶液中和L-乳酸反应生成乳酸基配合物D-19466，即洛巴铂，是洛铂的无水物。

《中国现代应用药学杂志》2006年12月第23卷第6期《洛铂的合成》一文中报道了以1，2-二氰基环丁烷为原料，经还原、缩合、环合三步反应得到洛铂的方法。其主要改进是将第一步反应的四氢铝锂和第二步反应的1，2-二氨甲基环丁烷进行分次加入，目的是提高产物的收率和纯度，使反应更加完全。该方法的得到的洛铂产物也是无水物。

洛铂的无水物与水合物相比，具有潮解性，容易变粘，难以制成制剂，同时采用上述文献所述的方法，目标产物的纯度和含量很难做到可重复性。

中国专利94106670.3公开了洛铂三水合物的合成方法：首先将1，2-二氨甲基环丁烷与K₂PtCl₄反应得到顺式-[反式-1，2-环丁基双(甲胺)-N，N]二氯铂，然后与硝酸银反应，滤除析出的氯化银，然后将滤液通过碱性离子交换柱进行洗涤，然后滴加到L-乳酸中进行结晶，得到乳酸基配合物，最后在水/丙酮混合液中重结晶，即得到三水合物。

该方法主要的改进是在无水物的基础上进行重结晶，得到三水合物，优点是得到的产品操作简单，无潮解性，与无水物相比副产物减少，水分得到控制，贮存稳定性增加。

但是在进一步的研究中，我们发现以丙烯腈或1，2-二氰基环丁烷等为原料合成洛铂，原料种类较多，过程复杂繁琐，且中间产物反式-二氨甲基环丁烷性质不稳定，为液态，不便于贮存和运输，为进一步生成洛铂带来不便；在反应中使用K₂PtCl₄活性较低，导致反应不够完全，洛铂收率较低。

发明内容

本发明的目的是提供一种以草酸盐制备洛铂三水合物的方法。通过本发明方法制备的洛铂三水合物，产品收率高、杂质含量小、产品性质稳定、适于工业化大生产。

为达上述目的，本发明采用了以下技术方案：

一种以草酸盐制备洛铂三水合物的方法，其以二氨甲基环丁烷草酸盐、氯亚铂酸钾和碘化钾为原料，包括如下步骤：

1)将氯亚铂酸钾水溶液与碘化钾水溶液混合进行置换反应，得碘亚铂酸钾与氯化钾混合溶液；

2)在二氨甲基环丁烷草酸盐水溶液中加入碱金属氢氧化物，充分混合，滤去杂质后，加入到步骤1)的溶液中，然后避光搅拌80-150分钟后，将料液抽滤，洗涤、干燥得二碘-1，2-二甲胺基环丁胺合铂粗品；

3)将所得二碘-1，2-二甲胺基环丁胺合铂粗品精制得二碘-1，2-二甲胺基环丁胺合铂精品；

4)将上步骤所得精品加入丙酮/水混合液中，搅拌至混合均匀后加入硝酸银进行置换反应，生成碘化银沉淀；

5)滤除上步骤中的碘化银沉淀，滤液与阴离子交换树脂进行抽滤分离，抽滤后的滤过液再与乳酸合成洛铂无水物，无水物在水/丙酮混合液中重结晶后干燥，即得洛铂三水合物。

本发明还可通过以下技术方案进一步实现：

所述的以草酸盐制备洛铂三水合物的方法，其中，所述步骤1)中先将氯亚铂酸钾溶解于纯化水中，同时在避光条件下将碘化钾完全溶解于纯化水中，然后再将完全溶解的碘化钾溶液加入氯亚铂酸钾溶液中搅拌20-50分钟，得碘亚铂酸钾与氯化钾溶液，其中加入的氯亚铂酸钾与碘化钾的质量比为1∶2-3。

所述的以草酸盐制备洛铂三水合物的方法，其中，所述的步骤2)中先将质量比为1.2-1.4∶1的二氨甲基环丁烷草酸盐及氢氧化钾分别溶解于纯化水中，再将二者混合反应10-40分钟后抽滤去杂质。

所述的以草酸盐制备洛铂三水合物的方法，其中，步骤2)中所述的洗涤是将料液抽滤后所得滤饼用纯化水冲洗，直至用2％的硝酸银溶液检测时洗过水无氯化物为止，步骤2)中所述的干燥是洗涤后的滤饼在45-55℃条件下真空干燥12小时以上。

所述的以草酸盐制备洛铂三水合物的方法，其中，步骤3)中所述的精制是将二碘-1，2-二甲胺基环丁胺合铂粗品加入N，N-二甲基甲酰胺中，室温避光搅拌60-120分钟，使粗品完全溶解后将料液进行第一次抽滤，用丙酮冲洗滤饼2-3次，合并滤液；再将合并的滤液缓慢加入纯化水中，避光搅拌20-50分钟，进行第二次抽滤分出沉淀，第二次抽滤的滤饼再用纯化水冲洗3-4次，然后将该滤饼在45-55℃条件下真空干燥16小时以上，得精品。

所述的以草酸盐制备洛铂三水合物的方法，其中，所述步骤4)中水/丙酮溶液混合液中水与丙酮的比例为6-10∶1，精品加入后避光搅拌20-50分钟；再加入硝酸银，室温避光反应15-24小时。

所述的以草酸盐制备洛铂三水合物的方法，其中，步骤5)中所述滤将碘化银沉淀是将步骤4)中反应液先抽滤，滤饼用纯化水冲洗2-3次，所得全部滤液合并。

所述的以草酸盐制备洛铂三水合物的方法，其中，步骤5)中所述抽滤分离是将合并的滤液加入阴离子交换树脂中避光反应20-60分钟后再与阴离子交换树脂抽滤分离，然后用纯化水冲洗阴离子交换树脂，至洗过水pH值在7.0-8.0，再合并所有滤过液。

所述的以草酸盐制备洛铂三水合物的方法，其中，步骤5)中所述滤过液与乳酸的合成是在滤过液中加入浓度为22％的乳酸溶液，在室温下反应60-96小时，反应液过滤，然后用旋转蒸发仪保温蒸发至无水滴滴下为止，水浴温度为50-60℃，真空度为150-110mbar；然后将水浴温度升至70-80℃，用体积比为1∶1的丙酮和水对析出的晶体进行一次及一次以上重结晶，待晶体完全析出后，将晶体与母液抽滤分离，再用体积比为1∶1的丙酮和水混合液冲洗晶体，最后将晶体在温度为20-50℃条件下真空干燥18-30小时。

所述的以草酸盐制备洛铂三水合物的方法，其中，所述反应液过滤是先用活性炭过滤，再用微孔滤膜过滤。

本发明的具体合成路线如下：

1、二碘化物合成

(1)氯亚铂酸钾和碘化钾起置换反应

反应方程式：K₂PtCl₄+KI→K₂PtI₄+KCl(式I)

(2)草酸盐和氢氧化钾反应

反应方程式：

(3)碘亚铂酸钾和二氨甲基环丁烷反应合成二碘化物

反应方程式：

2、洛铂原料合成

(1)二碘化物和硝酸银置换反应，生成碘化银沉淀

反应方程式：

(2)式IV所得反应物先与阴离子交换树脂进行离子交换，然后与乳酸合成洛铂

反应方程式：

(3)洛铂在水/丙酮混合液中重结晶，得到洛铂的三水合物

与现有技术相比，本发明以稳定的二氨甲基环丁烷草酸盐为起始原料，参与到洛铂产物的合成中，这样使得洛铂的合成过程适于工业化大生产。另外，将K₂PtCl₄在投料前转化为K₂PtI₄，然后生成二碘铂配合物，改进提高了反应物活性，使反应更加完全、充分，更有利于合成，收率更高。

采用同样的方法分别以K₂PtCl₄及K₂PtI₄合成洛铂的对比试验如下所示：

1、将35g氯亚铂酸钾溶解，与1mol二氨甲基环丁烷草酸盐、1mol氢氧化钾溶液，混合反应完全后，加入1mol硝酸银反应，抽滤，将滤液加入阴离子交换树脂中反应，收集滤液，与1mol乳酸合成，搅拌，反应液过滤，用丙酮和水溶解，抽滤分离，得洛铂粗品40g，收率为62％。

2、将35g氯亚铂酸钾溶解，与84.7g碘化钾水溶液反应，待反应完全后，与1mol二氨甲基环丁烷草酸盐、1mol氢氧化钾溶液，混合反应完全，加入1mol硝酸银反应，抽滤，将滤液加入阴离子交换树脂中反应，收集滤液，与1mol乳酸合成，搅拌，反应液过滤，用丙酮和水溶解，抽滤分离，得洛铂粗品46.7g，收率为70％。

上述实验表明，将K₂PtCl₄在投料前转化为K₂PtI₄，与直接使用K₂PtCl₄相比，采用同一制备方法制得的洛铂收率前者更高，达到了发明的目的。

具体实施方式

为了更进一步阐述本发明并便于技术人员更好的理解本发明，以下通过实施例来进一步阐述本发明。需要说明的是：以下实施例仅为阐释本发明，而不是限制本发明。

实施例1：

所用原料二氨甲基环丁烷草酸盐的制备

(1)、取丙烯腈200ml，在温度215℃、氮气加压至17bar条件下，加入0.05g Fecl3及0.044g对甲氧基苯酚，混合反应8h，反应完全后，得深红色液体20ml，经过170-180℃蒸馏后即得二腈基环丁烷粗品10g，其顺反比例约为4∶6，然后将粗品经过140-160℃蒸馏、精馏及顺反转化得反式-二腈基环丁烷6.5g，熔点37.5℃；

(2)、向反式-二腈基环丁烷中通入氨气后，温度升至70-85℃，氢气加压至20bar，活性镍催化，反应时间为20h，得到浅黄色液体16ml，即反式-二氨甲基环丁烷；

(3)、反式-二氨甲基环丁烷16ml与无水草酸3.5g在65-80℃、常压下搅拌3-5h，结合形成二氨甲基环丁烷草酸盐粗品3.3g，然后将制得的粗品用体积比为5∶2的甲醇和纯化水在60-80℃溶解，完全溶解后在4-6℃冷却结晶5h以上，过滤干燥得草酸盐精品3g。

实施例2：洛铂三水合物的制备

1、二碘化物的合成制备

1.1氯亚铂酸钾41.5g加入120ml纯化水中，搅拌使其完全溶解，避光条件下将碘化钾99.6g完全溶解于120ml纯化水中，然后将其加入氯亚铂酸钾溶液中搅拌30分钟；

1.2将31.2g草酸盐、22.4g氢氧化钾分别溶解于200ml纯化水中，将二者混合反应20分钟，抽滤去杂质，测pH值为10，然后加入1.1的溶液中，避光搅拌反应120分钟；

1.3反应结束后将料液抽滤，用纯化水冲洗滤饼，每次用水150ml，直至用2％的硝酸银溶液检测时洗过水无氯化物为止，将滤饼在45-55℃条件下真空干燥12小时以上，得粗品58g备用；

2、二碘化物精制

2.1取二碘化物粗品，加入100ml N，N-二甲基甲酰胺，室温避光搅拌90分钟，使粗品完全溶解，然后将料液抽滤，用80ml丙酮冲洗滤饼3次，合并滤液；

2.2将滤液缓慢加入400ml纯化水中，避光搅拌30分钟，至溶液变为浑浊，黄色沉淀生成完全，抽滤分出沉淀，滤饼用纯化水冲洗3次，然后将滤饼在50℃条件下真空干燥16小时以上，得二碘化物精制品56g；

3、洛铂制备

3.1取二碘化物精制品放入350ml纯化水和30ml丙酮溶液中，避光搅拌30分钟，使其充分混合均匀，防止结块；然后加入34g硝酸银，室温避光搅拌反应20小时；

3.2反应结束后将料液抽滤，用适量纯化水冲洗滤饼2次，合并滤液，将滤液加入阴离子交换树脂中避光搅拌40分钟，然后将料液与阴离子交换树脂抽滤分离，收集滤液，用纯化水冲洗阴离子交换树脂，至洗过水pH值在7.0-8.0，合并滤液；

3.3滤液中加入10.5g 22％乳酸，室温搅拌72小时，反应液过滤，然后用旋转蒸发仪保温蒸发至无水滴滴下为止，水浴温度为55℃，真空度为150-110mbar；

3.4将水浴温度升至75℃，用体积比为1∶1的丙酮和水约120ml溶解瓶内的晶体，溶解后冷却至室温，然后放置4℃冰箱内18小时以上，待晶体完全析出后，晶体与母液抽滤分离，将晶体在温度为40-50℃条件下真空干燥120分钟；

3.5将洛铂干燥品溶解于100ml体积比为1∶1的丙酮与纯化水的混合液中，设置水浴温度为70℃，直至晶体完全溶解，加入1.5g活性炭，搅拌脱炭10分钟，收集滤液，滤液放置在4℃冰箱中18小时以上，待晶体完全析出后，滤出晶体，母液回收；用冷却的约200ml体积比为1∶1的丙酮与纯化水的混合液对晶体冲洗2-3次，收集晶体，于15-25℃条件下真空干燥过夜，即得洛铂三水合物18g。

元素分析mp.210℃(分解)

C₉H₁₈N₂O₃Pt*3H2O  M＝451.38

计算值(％)：C 23.95 H 5.36 N 6.21 Pt 43.22

实测值(％)：C 23.94 H 5.31 N 6.13 Pt 43.11

实施例3：

洛铂三水合物的制备

1、二碘化物的合成制备

1.1氯亚铂酸钾23.1g加入100ml纯化水中，搅拌使其完全溶解，避光条件下将碘化钾46.2g完全溶解于60ml纯化水中，然后将其加入氯亚铂酸钾溶液中搅拌20分钟；

1.2将20g草酸盐、16.7g氢氧化钾分别溶解于150ml纯化水中，将二者混合反应10分钟，抽滤去杂质，测pH值为11，然后加入1.1的溶液中，避光搅拌反应100分钟；

1.3反应结束后将料液抽滤，用纯化水冲洗滤饼，每次用水100ml，直至用2％的硝酸银溶液检测时洗过水无氯化物为止，将滤饼在45-55℃条件下真空干燥15小时，得粗品31g备用；

2、二碘化物精制

2.1取二碘化物粗品，加入50ml N，N-二甲基甲酰胺，室温避光搅拌60分钟，使粗品完全溶解，然后将料液抽滤，用50ml丙酮冲洗滤饼3次，合并滤液；

2.2将滤液缓慢加入250ml纯化水中，避光搅拌25分钟，抽滤分出沉淀，滤饼用纯化水冲洗2次，然后将滤饼在45℃条件下真空干燥24小时，得二碘化物精制品30g；

3、洛铂制备

3.1取二碘化物精制品放入90ml纯化水和15ml丙酮溶液中，避光搅拌20分钟，使其充分混合均匀，防止结块；然后加入17.3g硝酸银，室温避光搅拌反应18小时；

3.2反应结束后将料液抽滤，用适量纯化水冲洗滤饼2次，合并滤液，将滤液加入阴离子交换树脂中避光搅拌20分钟，然后将料液与阴离子交换树脂抽滤分离，收集滤液，用纯化水冲洗阴离子交换树脂，至洗过水pH值在7.0-8.0，合并滤液；

3.3滤液中加入22g 22％乳酸，室温搅拌72小时，反应液先用活性炭过滤，再用微孔滤膜过滤，然后保温蒸发至无水滴滴下为止，水浴温度为55℃，真空度为150-110mbar；

3.4将水浴温度升至75℃，用体积比为1∶1的丙酮和水约60ml溶解瓶内的晶体，完全溶解后冷却至室温，然后放置4℃冰箱内24小时，待晶体完全析出后，晶体与母液抽滤分离，用冷却的约100ml体积比为1∶1的丙酮与纯化水的混合液对晶体冲洗2-3次，收集晶体，于20-30℃条件下真空干燥过夜，即得洛铂三水合物10g。

实施例4：

1、二碘化物的合成制备

1.1氯亚铂酸钾56g加入150ml纯化水中，搅拌使其完全溶解，避光条件下将碘化钾168g完全溶解于150ml纯化水中，然后将其加入氯亚铂酸钾溶液中搅拌50分钟；

1.2将48.5g草酸盐、34.6g氢氧化钾分别溶解于200ml纯化水中，将二者混合反应40分钟，抽滤去杂质，测pH值为11，然后加入1.1的溶液中，避光搅拌反应100分钟；

1.3反应结束后将料液抽滤，用纯化水冲洗滤饼，每次用水100ml，直至用2％的硝酸银溶液检测时洗过水无氯化物为止，将滤饼在45-55℃条件下真空干燥24小时，得粗品74.7g备用；

2、二碘化物精制

2.1取二碘化物粗品，加入50ml N，N-二甲基甲酰胺，室温避光搅拌120分钟，使粗品完全溶解，然后将料液抽滤，用60ml丙酮冲洗滤饼3次，合并滤液；

2.2将滤液缓慢加入250ml纯化水中，避光搅拌50分钟，抽滤分出沉淀，滤饼用纯化水冲洗2次，然后将滤饼在45℃条件下真空干燥32小时，得二碘化物精制品72.3g；

3、洛铂制备

3.1取二碘化物精制品放入150ml纯化水和15ml丙酮溶液中，避光搅拌50分钟，使其充分混合均匀，防止结块；然后加入17.3g硝酸银，室温避光搅拌反应24小时；

3.2反应结束后将料液抽滤，用适量纯化水冲洗滤饼2次，合并滤液，将滤液加入阴离子交换树脂中避光搅拌60分钟，然后将料液与阴离子交换树脂抽滤分离，收集滤液，用纯化水冲洗阴离子交换树脂，至洗过水pH值在7.0-8.0，合并滤液；

3.3滤液中加入22g 22％乳酸，室温搅拌96小时，反应液先用活性炭过滤，再用微孔滤膜过滤，然后保温蒸发至无水滴滴下为止，水浴温度为55℃，真空度为150-110mbar；

3.4将水浴温度升至75℃，用体积比为1∶1的丙酮和水约100ml溶解瓶内的晶体，完全溶解后冷却至室温，然后放置4℃冰箱内48小时，待晶体完全析出后，晶体与母液抽滤分离，用冷却的约100ml体积比为1∶1的丙酮与纯化水的混合液对晶体冲洗2-3次，收集晶体，于20-30℃条件下真空干燥过夜，即得洛铂三水合物25g。

实施例5：对比实验

样品1：以上述实施例1-3方中方法制得的洛铂三水合物，共三批；

样品2：采用专利94106670.3专利说明书第6页——制备洛巴铂三水合物的实施例的方法制得的洛铂三水合物，共三批。

1、含量测定

照高效液相色谱法测定

色谱条件：用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以磷酸二氢钾溶液∶乙腈＝92∶8为流动相，检测波长为210nm，柱温40℃，理论板数按洛铂峰计算应补低于1000，洛铂峰与杂质峰分离度符合要求；

对照品溶液的制备：取洛铂对照品约10mg，精密称定置50ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀即得；

供试品溶液的制备：取样品1和样品2每批各约20mg，精密称定，分别置100ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀即得；

测定及结果：精密量取对照品、供试品1、供试品2溶液各10μl，分别注入液相色谱仪，记录色谱图，按外标法以峰面积计算，按无水物计，样品1中有效物质洛铂的含量为98.7±1.16％，样品2中洛铂的含量为99.5±0.43％。标准范围为97.0％-102％。

2、杂质检查

用薄层层析测定洛铂、1，2-二氨甲基环丁烷(CBMA)、乳酸等已知的和未知的杂质含量。

展开剂：乙醇∶氯仿∶25％氨水∶水＝53∶39∶15∶1.5(体积比)，薄层层析板：硅胶60 F²⁵⁴10×10薄层板。展开后至碘蒸气中用0.3％茚三酮试剂和对亚硝基二甲苯胺试剂显色，检查杂质CBMA以及未知杂质。

检测结果显示样品1中杂质总量为0.32±0.15％，样品2中的杂质总量为0.47±0.26％，杂质的绝对量和变动范围都得到了改进。

3、水分

分别精密量取样品1、2每批各两份，用KarlFischer方法测定，结果显示样品1含水分为12.05±0.07％，样品2含水分为12.37±0.10％。三水合物的理论量为11.96％，标准范围为11.0-11.3％。

4、稳定性

4.1加速稳定性试验：随机选取样品1及样品2各两份，样品1编号A和B，样品2编号C和D，在30℃±2℃，相对空气湿度为80％的条件下放置，分别在试验期间第1个月、2个月、3个月、6个月末取样一次进行考察，结果见表1。

4.2长期稳定性试验：随机选取样品1及样品2各两份，样品1编号A和B，样品2编号C和D，分别在4℃、室温条件下贮存，于3、6和12个月末时取样一次进行考察。

上述考察以有效成分含量、杂质、水分和溶液的澄清度为指标，检查产品的稳定性，结果见表2、表3。

从上述试验结果可看出，本发明制备的洛铂三水合物样品与采用专利94106670.3方法制备的样品经过加速试验、4℃及室温条件下长期贮存，各考察项目均不见异常，有效成分含量未发生明显变化，符合质量标准要求，且检测结果中表明本发明制备方法所得样品稳定性高于采用专利94106670.3方法制备的样品。