重组中华蜜蜂王浆主蛋白AccMRJP1的酵母表达方法及产物用途

摘要

本发明公开了一种重组中华蜜蜂王浆主蛋白AccMRJP1的酵母表达方法及产物用途，该方法是利用基因工程手段，从中华蜜蜂脑cDNA文库中筛选出含AccMRJP1基因全长的克隆，并通过PCR扩增得到目的基因，将该基因优化后连接到大肠杆菌-酵母穿梭载体pPIC9K，线性化后导入酵母细胞，然后在诱导AccMRJP1表达的条件下培养酵母细胞，最终收获表达产物，通过亲合层析进行纯化，可得到与天然蛋白糖基化程度和生物活性一致的产物。本发明获得的重组AccMRJP1可用于传代和原代昆虫、人体和动物细胞的体外无血清培养，排除了血清中众多不明细胞因子，如污染外源病毒和致病因子的风险，抗原、抗体、激素等干扰，在生命科学、医学、生物医药等领域具有广泛的用途。