亨廷顿病相关蛋白polyQ的体外聚集模型的建立方法

摘要

本发明为一种亨廷顿病相关蛋白polyQ的体外聚集模型的建立方法，包括如下步骤：构建GST-polyQ(Q36-Q55)融合蛋白表达载体；将该表达载体在表达菌中表达GST-polyQ(Q36-Q55)融合蛋白；将表达产物通过亲和层析纯化获得GST-polyQ(Q36-Q55)融合蛋白；将GST-polyQ(Q36-Q55)融合蛋白用蛋白酶酶切去除GST标签，获得polyQ多肽，冷冻干燥；制备polyQ多肽溶液；将polyQ多肽溶液在pH6.5-7.8的PBS中或Tris-HCl中进行聚集反应，使用Thioflavin T检测其聚集过程。本发明构建的模型可以用于抗亨廷顿病活性物质的筛选及动力学研究。与人工合成的polyQ多肽相比较，可大大降低其筛选成本。