防治玉米丝黑穗病的SF-1水溶性生物种衣剂

摘要

防治玉米丝黑穗病的SF-1水溶性生物种衣剂，它涉及防治玉米丝黑穗病的生物种衣剂。本发明解决了采用化学药剂来防治玉米丝黑穗病存在污染环境、残留高、病菌容易产生抗药性的问题。防治玉米丝黑穗病的SF-1水溶性生物种衣剂由菌株SF-1的代谢产物、农用酵素菌、硫酸锌、硼酸、聚氧乙烯、聚乙二醇、水溶性伊红、NaCl、乙二醇和余量的蒸馏水组成。本发明生物种衣剂能有效地防治玉米丝黑穗病，增强作物抗逆能力、防治效果达86.5%～86.82%、玉米的增产率达13.69%～14.28%；有利于玉米植株地下部分的生长，促进根系生长，促进整株植株的生长发育，对玉米安全性无影响，且不会污染环境，无残留，不易产生抗药性。

说明书

技术领域

本发明涉及防治玉米丝黑穗病的生物种衣剂。

背景技术

玉米丝黑穗病（Sporisoriumrelianum(kuhn.)langdon&Fullerton）是中国春播玉米区的重要病害，在中国东北、华北、西北、西南和华南等地普遍发生。该病是玉米发芽期侵入的系统侵染性病害，一经发病，首先破坏雌穗，发病率等于损失率，给玉米生产造成了很大损失。目前主要采用化学药剂(化学成分制备成种衣剂)来防治玉米丝黑穗病害，但是化学药剂存在着污染环境，残留高，病菌容易产生抗药性等问题，与目前提倡的绿色农业相悖，因此选择合适的生防制剂来防治玉米丝黑穗病迫在眉睫。

发明内容

本发明的目的是为了解决采用化学药剂来防治玉米丝黑穗病存在污染环境、残留高、病菌容易产生抗药性的问题，而提供了防治玉米丝黑穗病的SF-1水溶性生物种衣剂。

防治玉米丝黑穗病的SF-1水溶性生物种衣剂为每100mL按体积份数比由18～22份菌株SF-1的代谢产物、2～5份农用酵素菌(BYM)、0.02～0.04份硫酸锌、0.01～0.02份硼酸、2.5份聚氧乙烯、2份聚乙二醇、1～2份水溶性伊红、4份NaCl、5份乙二醇和余量的蒸馏水组成；其中菌株SF-1为加德那链霉菌Streptomycesgardneri。

本发明中防治玉米丝黑穗病的SF-1水溶性生物种衣剂，主要用于玉米播种前的种子包衣，能有效地防治玉米丝黑穗病，增强作物抗逆能力、防治效果达86.5%～86.82%、玉米的增产率达13.69%～14.28%。

本发明中防治玉米丝黑穗病的SF-1水溶性生物种衣剂处理过的玉米种子和未处理的玉米种子相比，前者有利于玉米植株地下部分的生长，增加须根、提高根冠比，促进根系生长，促进整株植株的生长发育，对玉米安全性无影响，且不会污染环境，无残留，不易产生抗药性。

具体实施方式

本发明技术方案不局限于以下所列举具体实施方式，还包括各具体实施方式间的任意组合。

具体实施方式一：本实施方式防治玉米丝黑穗病的SF-1水溶性生物种衣剂为每100mL按体积份数比由18～22份菌株SF-1的代谢产物、2～5份农用酵素菌(BYM)、0.02～0.04份硫酸锌、0.01～0.02份硼酸、2.5份聚氧乙烯、2份聚乙二醇、1～2份水溶性伊红、4份NaCl、5份乙二醇和余量的蒸馏水组成；其中菌株SF-1为加德那链霉菌Streptomycesgardneri。

本实施方式中水溶性伊红作为警戒色使用。

本实施方式中菌株SF-1为加德那链霉菌Streptomycesgardneri，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏地址是北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所，保藏日期为2010年06月17日，保藏编号为CGMCC3928。

本实施方式中菌株SF-1的形态特征：SF-1革兰氏染色阳性；在GYM琼脂和酵母淀粉琼脂和燕麦粉琼脂等培养基上生长7天后，基内菌丝发育良好，无横隔，不断裂；气生菌丝生长良好、多分支；产生柔曲至松散螺旋孢子丝，孢子球形至卵圆形、光滑。

本实施方式中菌株SF-1的生理生化特征：葡萄糖试验为阳性、阿拉伯糖试验为阳性、半乳糖试验为阳性、蔗糖试验为阳性、棉籽糖试验为阳性、鼠李糖试验为阳性、果糖试验为阳性、甘露糖试验为阴性、乳糖试验为阳性、肌醇试验为阴性、明胶液化试验为阳性、淀粉水解试验为阳性、硝酸盐还原试验为阴性、类黑色素产生试验为阳性、纤维素降解试验为阴性、牛奶凝固试验为阴性、牛奶冻化试验为阴性、H₂S产生试验为阳性、酪氨酸降解试验为阳性。

本实施方式中菌株SF-1的16SrDNA序列与GenBank中相关序列Blast比较的结果表明菌株SF-1属于链霉菌属；与目前发表的相关菌株相比，菌株的16SrDNA序列与加德那链霉菌Streptomycesgardneri的序列相似性很高，为99.7%。

本实施方式中菌株SF-1的代谢产物对玉米安全性的测定：通过浸种、盆栽试验，结果表明：菌株SF-1的代谢产物对玉米植株的生长无毒害作用，同时能够促进玉米种子的萌发、对胚芽与胚根的生长发育也有一定的促进作用，经过菌株SF-1的代谢产物处理过的玉米植株和未处理的玉米植株相比，前者有利于玉米植株地下部分的生长，增加须根、提高根冠比，促进根系生长，促进整株植株的生长发育；所述玉米植株选用的是黑龙江省农垦科学院玉米育种研究室培育丝黑穗易感品种T-4019。

本实施方式中防治玉米丝黑穗病的SF-1水溶性生物种衣剂的理化性状进行测定，结果：黏度为431.00mPa.S，pH值为6.5，成膜时间为12h，包衣均匀度良好，包衣脱落率为3.25%，稳定性良好。

本实施方式中菌株SF-1的代谢产物，对冬孢子萌发抑制率的测定：将菌株SF-1的代谢产物，用移液管分别吸取1mL的母液加入灭菌的刻度试管中定容到5mL；将稀释后的生物种衣剂加入到融化的准确定量的25mL水麦芽糖琼脂培养基中混匀，倒入灭菌培养皿中，制成不同浓度的带药培养基，带药培养基的质量浓度均按生物种衣剂中杀菌剂的有效含量计算；取配置好的400μm孢悬液放于带药培养基中央涂匀；28℃恒温培养48h；冬孢子萌发以先菌丝长度超过冬孢子半径为准；结果为：冬孢子萌发抑制率为76.56%。

具体实施方式二：本实施方式与具体实施方式一不同的是防治玉米丝黑穗病的SF-1水溶性生物种衣剂为每100mL按体积份数比由18份菌株SF-1的代谢产物、2份农用酵素菌(BYM)、0.02份硫酸锌、0.01份硼酸、2.5份聚氧乙烯、2份聚乙二醇、1份水溶性伊红、4份NaCl、5份乙二醇和余量的蒸馏水组成。其它与具体实施方式一相同。

具体实施方式三：本实施方式与具体实施方式一不同的是防治玉米丝黑穗病的SF-1水溶性生物种衣剂为每100mL按体积份数比由22份菌株SF-1的代谢产物、5份农用酵素菌(BYM)、0.04份硫酸锌、0.02份硼酸、2.5份聚氧乙烯、2份聚乙二醇、2份水溶性伊红、4份NaCl、5份乙二醇和余量的蒸馏水组成。其它与具体实施方式一相同。

具体实施方式四：本实施方式与具体实施方式一不同的是防治玉米丝黑穗病的SF-1水溶性生物种衣剂为每100mL按体积份数比由19～21份菌株SF-1的代谢产物、3～4份农用酵素菌(BYM)、0.025～0.035份硫酸锌、0.012～0.018份硼酸、2.5份聚氧乙烯、2份聚乙二醇、1.2～1.8份水溶性伊红、4份NaCl、5份乙二醇和余量的蒸馏水组成。其它与具体实施方式一相同。

具体实施方式五：本实施方式与具体实施方式一不同的是防治玉米丝黑穗病的SF-1水溶性生物种衣剂为每100mL按体积份数比由20份菌株SF-1的代谢产物、3份农用酵素菌(BYM)、0.03份硫酸锌、0.015份硼酸、2.5份聚氧乙烯、2份聚乙二醇、1.5份水溶性伊红、4份NaCl、5份乙二醇和余量的蒸馏水组成。其它与具体实施方式一相同。

具体实施方式六：本实施方式与具体实施方式一不同的是防治玉米丝黑穗病的SF-1水溶性生物种衣剂为每100mL按体积份数比由21份菌株SF-1的代谢产物、4份农用酵素菌(BYM)、0.02份硫酸锌、0.02份硼酸、2.5份聚氧乙烯、2份聚乙二醇、1.8份水溶性伊红、4份NaCl、5份乙二醇和余量的蒸馏水组成。其它与具体实施方式一相同。

具体实施方式七：本实施方式与具体实施方式一至六不同的是菌株SF-1的代谢产物的制备：一、将纯化培养好的SF-1制成菌碟，然后将1.6ml的菌碟接种于80ml的发酵培养液中，在温度为32℃、pH值为7、转速为180r/min的条件下培养96h，再离心15min；二、离心后取上清液用细菌过滤器过滤，得到菌株SF-1的代谢产物；其中步骤一中发酵培养液为每100mL发酵培养液由1.5g大豆粒滤液、0.3g蛋白胨、0.25g硫酸氨、2.0g葡萄糖、1g淀粉，0.025g硫酸镁、0.02g磷酸二氢钾、0.2g氯化钠、0.2g碳酸钙和余量的蒸馏水组成，PH值为7～8，湿热灭菌30min；所述大豆粒滤液为大豆粒加水煮沸0.5～1h后过滤得到。其它与具体实施方式一至六相同。

具体实施方式八：本实施方式防治玉米丝黑穗病的SF-1水溶性生物种衣剂按体积份数比防治玉米丝黑穗病的SF-1水溶性生物种衣剂为每100mL按体积份数比由20份菌株SF-1的代谢产物、3份农用酵素菌(BYM)、0.03份硫酸锌、0.015份硼酸、2.5份聚氧乙烯、2份聚乙二醇、1.5份水溶性伊红、4份NaCl、5份乙二醇和余量的蒸馏水组成；其中菌株SF-1为加德那链霉菌Streptomycesgardneri。

本实施方式中防治玉米丝黑穗病的SF-1水溶性生物种衣剂，进行田间药效试验：

将生物种衣剂与玉米种子进行湿拌种，搅拌均匀后置于通风干燥处，干燥后即可播种；不包衣为空白对照，以2%立克秀为药剂对照；

小区随机区组排列，3次重复，小区面积20m²，行长5m，6行区，行距0.68m，其他田间管理措施正常；

对玉米出苗及生长发育的影响，结果如表1所示，本实施方式中生物种衣剂对玉米出苗率的影响与另外两组相比在1%水平上差异不显著；而且在整个生育期观察，与另外两组相比在后期各生育期阶段均无差异，拔节期、抽雄期、株高、叶色、果穗形状及成熟期均一致，这表明本实施方式中防治玉米丝黑穗病的SF-1水溶性生物种衣剂对玉米出苗及生长发育与现有化学药剂(2%立克秀)的效果相同。

表1

 

本实施方式中防治玉米丝黑穗病的SF-1水溶性生物种衣剂对玉米丝黑穗病的防治效果达86.5%，与现有化学药剂(2%立克秀)的防治效果86.72%相差不多，可以替代化学药剂。

本实施方式中防治玉米丝黑穗病的SF-1水溶性生物种衣剂对玉米产量的影响，结果如表2所示，生物种衣剂对玉米的增产起到了促进作用，增产率达13.69%。

表2

 

具体实施方式九：本实施方式防治玉米丝黑穗病的SF-1水溶性生物种衣剂为每100mL按体积份数比由21份菌株SF-1的代谢产物、4份农用酵素菌(BYM)、0.02份硫酸锌、0.02份硼酸、2.5份聚氧乙烯、2份聚乙二醇、1.8份水溶性伊红、4份NaCl、5份乙二醇和余量的蒸馏水组成；其中菌株SF-1为加德那链霉菌Streptomycesgardneri。

本实施方式中防治玉米丝黑穗病的SF-1水溶性生物种衣剂对玉米丝黑穗病的防治效果达86.82%，与现有化学药剂(2%立克秀)的防治效果86.72%相差不多，可以替代化学药剂。

本实施方式中防治玉米丝黑穗病的SF-1水溶性生物种衣剂对玉米的增产起到了促进作用，增产率达14.28%。