单链引物－启动子－选择子构建体的IVT的应用

摘要

所公开的是一个单链的引物－启动子－选择子构建体，其包含(从3′到5′方向)一个与靶标退火的引物子序列，一个T7启动子或其它启动子子序列(模板链)，和一个选择子子序列。引物可以通过模板介导的延长作用而得到延伸，所述延长作用包括反转录或连接至其它寡核苷酸。启动子序列定向为与引物延伸方向相反以引导体外转录(IVT)，其中选择子子序列作为IVT的模板。选择子与感兴趣的靶标子序列相关，其和扩增产物是与样品中存在的其它序列不同的独特子序列。所述构建体可用于测定样品中指定子序列的存在和相对丰度、多重基因表达分析、多重等位基因计数、确定多态性/突变位点和杂合性缺失。