提高喜树中喜树碱含量的叶面促进剂

摘要

提高喜树中喜树碱含量的叶面促进剂，涉及用于植物的肥料，具体是用于提高喜树中喜树碱含量的叶面肥。该叶面促进剂，是由以下重量份的原料制成：重金属盐10～12份，稀土5～10份，有机酸1～5份，物生长调节剂1～5份。使用了本发明的叶面促进剂能显著提高喜树总喜树碱的含量；可以直接喷施，施用方便，采后室内荫蔽保湿操作简单，易于推广；见效快，只需要采收前一周和采收前夕喷施两次就可以大幅度提高喜树中喜树碱含量，从而大幅度提高喜树碱的产量，效率高，可以促进喜树资源的充分利用，保护喜树资源和生态环境；经济效益显著。

说明书

技术领域

本发明涉及用于植物的肥料，具体是用于提高喜树中喜树碱含量的叶面肥。

背景技术

喜树(Camptotheca acuminata Decne)为珙桐科(Nyssaceae)喜树属(Camptotheca Decne.)植物，广泛分布于亚洲，在我国分布尤其多，是我国南方特有树种。1999年8月经国务院批准列为第一批国家重点保护野生植物(II级)。喜树是单萜吲哚生物碱喜树碱的主要天然来源。目前国际市场每年喜树碱需求3000kg，而可供货仅1000kg。

喜树碱作为一种拓扑异构酶(Topoisor-merase)的抑制剂具有抗癌活性，经临床试验证明，喜树碱对30余种肿瘤均有明显疗效，且毒副作用小，具有极高的临床应用价值。而且由喜树碱为原料可制备系列的衍生物，如羟基喜树碱、拓扑替康、伊立替康、9-AC(9-氨基喜树碱)和9-NC(9-硝基喜树碱)等，均是“拓扑异构酶抑制剂”是一类极有前景的抗癌新药。

在喜树中喜树碱的含量甚微，以相对含量较高的嫩叶为例，López-Meyer等(López-Meyer M，Nessler CL，McKnight TD(1994)Sites of accumulationof the antitumor alkaloid camptothecin in Camptotheca acuminata.Plantamedica 60：558-560.)，Liu等(Liu Z，Carpenter SB，Bourgeois WJ，etal.(1998)Variations in the secondary metabol itecamptothecin inrelation to tissue age and season in Camptotheca acuminata.Tree Physiol18：265-270.)对喜树幼苗中各部位喜树碱含量进行了分析，并发现喜树嫩叶中的含量最高，约为0.017％至0.4％之间；但众多文献表明，各地自然生长喜树的嫩叶中喜树碱的含量也仅为0.1％左右(张玉红，祖元刚。不同产地和生长季节喜树叶中喜树碱含量测定。植物学通报。2003，20(5)：572-575)。为满足目前和未来潜在的医疗用药需求，提高喜树中的的喜树碱含量，已成为世界各国科学家的关注的焦点。

为此，发明者对如何提高喜树中的的喜树碱含量作了大量的研究工作。

发明内容

本发明的目的是提高喜树中的的喜树碱含量。

为达到本发明的目的，所采用的技术方案是：提供一种喜树的叶面促进剂，它是由以下重量份的原料制成的粉剂：

重金属盐            10～12份

稀土                5～10份

有机酸              1～5份

植物生长调节剂      1～5份

重金属盐有很多，如硫酸铜、硫酸锌、硝酸银、氯化汞等均可以，只要选择其中的一种或二种，本发明优选硫酸铜或硫酸锌。

所说的有机酸可以是丙二酸、苹果酸、马来酸、柠檬酸、抗坏血酸等均可以，只要选择其中的一种或二种，本发明优选丙二酸或苹果酸。

所说的植物生长调节剂有矮壮素(chlormequat)、氯化胆碱、多效唑(paclobutrazal)、比久(Daminozide，又名丁酰肼)，乙烯利、乙酰水杨酸、茉莉酸甲酯、三十烷醇、硫脲、亚硫酸氢钠等均可以，只要选择其中的一种即可，本发明优选矮壮素或氯化胆碱或多效唑或比久。

所说的稀土工业上很多，不同的厂商的产品也有不同，如有氯化稀土，混合碳酸稀土、硝酸铈，醋酸铈均可，本发明优选氯化稀土(工业级，含Ce：27％，La：17％，Ca：1.5％，Mg：1.5％，Ba：0.3％；Fe：0.007％)。

本发明所提供的产品对于不同的喜树使用方法是不同的。用于已开始结果的成年喜树，在采收喜树枝叶或果实前2周，用本发明的叶面促进剂溶于水中均匀喷施枝叶和果实；然后在枝叶或果实采收前，再重复喷施一次，并马上采收枝叶或果实。采收后室内荫蔽保湿放置3-5天，然后不保湿自然阴干，提取喜树碱。喷施药量以喷湿枝叶和果实的各个面，但又不滴药液为度。

对于没有结果喜树幼树，可在枝叶采收前1周，用本发明的叶面促进剂溶于水中均匀喷施枝叶；然后在枝叶采收前，再重复喷施一次，并马上采收枝叶。采收后室内荫蔽保湿放置3-5天，然后不保湿自然阴干，提取喜树碱。喷施药量以喷湿枝叶的各个面，但又不滴药液为度。

对于矮密栽培幼龄喜树，当喜树幼苗开始封行时，用本发明的叶面促进剂均匀喷施枝叶；一周后在枝叶采收前，再重复喷施一次，并马上采收枝叶。采收后室内荫蔽保湿放置3-5天，然后不保湿自然阴干，提取喜树碱。喷施药量以喷湿枝叶的各个面，但又不滴药液为度。

本发明的有益效果是：

1.使用了本发明的叶面促进剂能显著提高喜树总喜树碱的含量。

2.本叶面促进剂可以直接喷施，施用方便，采后室内荫蔽保湿操作简单，易于推广。

3.本叶面促进剂见效快，只需要采收前一周和采收前夕喷施两次就可以大幅度提高喜树中喜树碱含量。从而大幅度提高喜树碱的产量，效率高，可以促进喜树资源的充分利用，保护喜树资源和生态环境。

4.使用本叶面促进剂经济效益显著。以矮密(80cm×80cm)栽培的喜树为例，用本发明所提供的叶面促进剂配置100kg的水溶液(亩用量)原料成本约10元，两次喷施约20元，两次喷施及室内保湿等工作所增加的人工投入约50元，成本低廉；采收干枝叶约100kg，不喷施叶面促进剂的喜树碱含量约0.1％，提取率约80％，可得喜树碱80g；同样条件，若喷施叶面促进剂后按喜树碱含量增加30％计算，可得喜树碱104g，按目前喜树碱60000元/kg算，可增加收入1440元，收入是投入成本的20倍。因此，本发明的经济效益十分显著。

下面结合实施例进一步阐述本发明技术方案和有益效果。但不限于如下实施例。

具体实施方式

实施例1 叶面促进剂的配制

称取硫酸铜10g(农用级，含量大于或等于98％)

丙二酸1g(工业级，含量大于或等于99.5％)

氯化稀土5g(工业级，含Ce：27％，La：17％，Ca：1.5％，Mg：1.5％，Ba：0.3％；Fe：0.007％)

矮壮素1g(农用级原药，大于或等于98％)

将所称的原料用常规的方法粉碎混合即得。

使用时可将所得的叶面促进剂溶于20公斤水即可中喷施。

实施例2 叶面促进剂的配制

称取硫酸铜12g(农用级，含量大于或等于98％)

丙二酸2g(工业级，含量大于或等于99.5％)

氯化稀土2g(工业级，含Ce：27％，La：17％，Ca：1.5％，Mg：1.5％，Ba：0.3％；Fe：0.007％)

矮壮素2g(农用级原药，大于或等于98％)

将所称的原料用常规的方法粉碎混合即得。

使用时可将所得的叶面促进剂溶于20公斤水中喷施。

实施例3 叶面促进剂的配制

称取硫酸铜11g(农用级，含量大于或等于98％)

丙二酸5g(工业级，含量大于或等于99.5％)

氯化稀土5g(工业级，含Ce：27％，La：17％，Ca：1.5％，Mg：1.5％，Ba：0.3％；Fe：0.007％)

矮壮素5g(农用级原药，大于或等于98％)

将所称的原料用常规的方法粉碎混合即得。

使用时可将所得的叶面促进剂溶于20公斤水中喷施。

当原料换用硫酸锌(农用级，含量大于或等于98％)、苹果酸(工业级，含量大于或等于99.5％)、氯化胆碱(饲料级原药，大于或等于98％)、多效唑(农用级原药，大于或等于90％)、比久(农用级原药，大于或等于92％)等时也同以上配比和使用。

实施例4 用于已经开始结果的成年喜树进行实验

喜树成年大树栽种于广州市天河区龙洞广东省中药研究所中药标本园，1985年移植，胸径达30厘米，高度约12米，树冠直径约8米，生长发育良好，枝叶茂盛。

2007年10月24日，离采收果实前的一周，选定6棵树龄相同长势一致的大树，随机分为两组(处理组和对照组)。处理组喷施实施例1的叶面促进剂，喷施药量以喷湿枝叶和果实的各个面，但又不滴药液为度。然后在11月1日采收果实前夕再次喷施实施例1的叶面促进剂喷施药量以喷湿枝叶和果实的各个面，但又不滴药液为度。对照组于同期喷施清水两次。于2007年11月1日，采收果实，和收取枝叶1公斤采收后室内荫蔽保湿放置3天，然后不保湿自然阴干，粉碎。提取和测定方法参照阎秀峰，等报道的方法，文献“阎秀峰，王洋，于涛，张玉红，殷丽君，喜树叶中喜树碱含量的高效液相色谱分析分析测试学报，2002，21(2)：15-18”

具体的检测方法如下。

喜树碱的提取：精确称取0.4克干燥材料，倒入50毫升锥形瓶中，加25毫升75％的乙醇。称重后，置于超声仪中，50℃提取10分钟。当冷至室温后，以75％乙醇补回液体蒸发的量。该提取液0.45微米过滤膜和10μl用于喜树碱的高效液相色谱法(HPLC)测定。

高效液相色谱分析：采用高效液相色谱仪(Waters公司，美国)，包括高压泵(Waters2695)控制器和一个光电二极管阵列检测器(Waters2996)。色谱条件为：色谱柱应用C-18柱(5μm，4.6×250毫米)，洗脱流动相乙腈：水(30∶70)，流速为1ml/min，检测波长为254nm。保留时间为11.8min。采用峰面积进行定量。喜树碱标准品购自中国药品生物制品检定所。样品三次重复取平均值。(以下实施例采用相同检测方法)

 

果实中喜树碱含量(％/干重)对照树10.118±0.026对照树20.129±0.032对照树30.117±0.018试验组树10.182±0.044试验组树20.185±0.035试验组树30.176±0.037

结论：采用本发明提供的叶面促进剂在果实中喜树碱的含量比未经使用叶面促进剂提高40％以上。

实施例5 用没有开始结果喜树幼龄树进行试验

喜树幼树种源采自广州市天河区龙洞广东省中药研究所中药标本园，栽种于广东省龙洞中药标本园科研教学区，2005年定植，胸径达4厘米，高度约5米，树冠直径约4米，生长发育良好，枝叶茂盛。

2008年5月24日，离采收枝叶前一周，选定6棵树龄相同长势一致的幼树，随机分为两组(处理组和对照组)。处理组喷施实施例2的叶面促进剂；然后在6月1日采收枝叶前夕再次喷施实施例2叶面促进剂。喷施药量以喷湿枝叶和果实的各个面，但又不滴药液为度。对照组于同期喷施清水两次。于2007年11月1日，采收果实，采收后室内荫蔽保湿放置3天，然后不保湿自然阴干，粉碎。按上述方法测定喜树碱含量(三次重复)。

 

喜树碱含量(％/干重)对照树10.103±0.021对照树20.102±0.015对照树30.104±0.016实验组树10.142±0.023实验组树20.144±0.018实验组树30.151±0.028

结论：采用本发明提供的叶面促进剂在幼树枝叶中喜树碱的含量比未经使用叶面促进剂提高40％以上。

实施例6 矮密栽培幼树的喜树

矮密栽培的喜树的种源采自广州市天河区龙洞广东省中药研究所中药标本园，栽种于广东省中药研究所标本园种植试验区。2008年1月采用撒播的方式播种育苗，播种量为每平方20克，用薄膜搭起小拱棚保温保湿，待种子发芽后，将小拱棚的两端打开，并每天浇水一次促进生长。幼苗移植前，将种植地提前翻耕，作成宽120厘米、高15厘米的畦6块，长度随地块而定。当幼苗长到15厘米左右时，按80*80厘米的规格种植，定植后淋足定根水，之后每天淋水一次，定期清除杂草，以保证生长良好。处理组随机选取3畦处理，分两次喷施叶面促进剂：当喜树幼苗开始封行时，按实施例3均匀喷施枝叶；一周后在枝叶采收前夕，再重复喷施一次，喷施药量以喷湿枝叶和果实的各个面，但又不滴药液为度。并马上采收枝叶。其它3畦作为对照，当喜树幼苗开始封行时，喷施清水，一周后采收前夕，再喷施清水一次。采收后室内荫蔽保湿放置3天，然后不保湿自然阴干，粉碎。按上述方法测定喜树碱含量(三次重复取平均值)。

 

喜树碱含量(％/干重)对照树10.107±0.023对照树20.109±0.027对照树30.106±0.018试验组树10.185±0.042试验组树20.177±0.046试验组树30.173±0.034

结论：采用本发明叶面促进剂可使矮密栽培枝叶平均喜树碱含量增加60％以上。