一种人工接种鉴定菊花蚜虫抗性的方法

摘要

本发明利用人工接种单株隔离对菊花抗蚜虫性鉴定的方法，属于抗性育种领域。选择苗高约10cm植株移栽，用毛笔将蚜虫接到鉴定植株的茎端或未展开幼叶处，随即用圆筒罩于植株上，使植株和蚜虫处于可以正常生长繁殖的条件下。接种后3周观察统计植株上的蚜虫数量，根据蚜虫的繁殖倍率对不同菊花材料的抗蚜虫能力做出比较鉴定。本发明利用的原材料非常普通，简单易行，成本低廉，可操作性强，实用性突出；试验结果受环境或人为因素的影响小，使筛选出对蚜虫抗性强的种质资源进行菊花育种成为可能，同时可用于抗蚜虫育种后代材料的早期鉴定，大大缩短开展菊花抗蚜虫育种所需的时间，确保所育品种对蚜虫抗性的真实性、科学性和稳定性。

说明书

一、技术领域

本发明利用人工接种单株并有效隔离的方法鉴定不同菊花材料的抗蚜虫性，适用于任何一种栽培菊花品种和菊属及其近缘属的野生种，方法简单易行、成本低廉，结果准确可靠，可用于种质资源的抗蚜虫性筛选和评价、抗性育种后代材料的早期筛选和育成品种的抗虫性鉴定，作为一种有效的育种辅助手段和技术，属于抗性育种领域。

二、背景技术

菊花(Dendranthema morifolium)又名鞠秋、鞠、菊华、女华、黄花、茱英、金英、帝女花等，原产我国，是中国十大传统名花和世界四大切花之一，也是世界上最重要的观赏花卉之一，距今已有1600多年的栽培历史。唐朝时期，中国菊花经朝鲜传入日本，17世纪中叶始，中国菊花传入荷兰、法国、英国等欧美国家。菊花盛开于秋季花少时节，而且花期长达一个月以上，给众花凋零的秋日园林带来了璀璨的美；也使我们十一、十二月的寒冷季节充满了花卉的芬芳，因此它在观赏园艺领域有着特殊重要的地位，特别值得花卉育种家的注意。目前，我国选育的菊花品种约有4000多个，全球品种总数在2万之上(陈俊愉，2001)，是世界上商品产值最高的花卉(Boaes，1997)。菊花不仅在切花和盆花中具有十分重要的地位，而且在露地栽培中也起到了越来越大的作用，因此加强菊花育种具有很高的经济效益和社会效益。

在菊花栽培中，最容易发生的虫害是蚜虫。蚜虫的危害不仅在于蚜虫本身对菊花体内汁液的吸取导致的菊花营养不良，还在于它会传播多种病毒，导致菊花发生严重的病毒病，从而给生产带来严重损失。因此，开展菊花的抗虫性育种，尤其是抗蚜虫育种，既可提高菊花生产的产量和品质，又可减少农药的用量，能产生显著的经济效益、生态效益和社会效益。鉴于此，找到一种简单易行、成本低廉、准确可靠的菊花抗蚜能力的比较鉴定方法和技术，就显得十分重要，可以为育种家缩短育种周期、培育出抗性较强的品种提供技术支撑。

三、发明内容

技术问题 本发明的目的是针对目前菊花抗虫育种上没有一套简易实用的抗性鉴定方法这一现状，提供一套简单易行、成本低廉、结果准确可靠的人工接种鉴定菊花抗蚜虫能力的方法，达到获得菊花抗性种质、缩短菊花抗虫育种周期的目的，实用性和科学性突出。

技术方案 本发明利用人工接种鉴定菊花蚜虫抗性的方法，包括：

1)需要鉴定菊花材料的获得

选择需要对其进行蚜虫抗性鉴定的菊花材料，进行苗床播种或扦插繁殖，在苗高约10cm时选择长势健壮、整齐一致植株移栽到塑料花盆中，花盆规格为盆口直径15cm、高13cm。每盆种植1株，每品种重复30盆以上。移栽后置入温室中常规管理，10d后即可用于接种蚜虫，获得需要鉴定蚜虫抗性的菊花材料；

2)蚜虫隔离罩的制作

选择厚度为0.1mm高度透明的聚酯投影片，制作成高度为25～30cm、直径为12cm的圆筒，将其一端用纱布或80目防虫网封住，在接种蚜虫后罩于植株上，既可为植株和蚜虫的正常生长提供必要的空间、光照和空气，又能够有效地防止蚜虫的迁飞和交叉传染，保证鉴定结果的准确度和科学性，即为鉴定蚜虫抗性所需的隔离罩。

3)人工接种与观察统计的方法

(一)收集虫源：在生有蚜虫的菊花植株上，用毛笔轻轻把2～3日龄的蚜虫刷到或抖落到培养皿中。(二)人工接种：把收集到的蚜虫用毛笔小心接到鉴定植株的茎端或未展开幼叶处；每株接种5只蚜虫，每处理重复30株。接种完毕后立即罩上蚜虫隔离罩，将植株置温室内常规管理。(三)调查统计：接种3周后统计植株上的蚜虫数量，计算蚜虫的繁殖率(调查虫口数/接种虫口数)；求其平均值，按以下标准对鉴定材料进行抗性评价：

 

级别抗性结果蚜虫繁殖倍率备注1极高抗性<1蚜虫不能或很少存活，不能繁殖；植株生长正常，抗虫性极强。                2高抗性1～4蚜虫能存活或大部分能活，不能繁殖或繁殖较少；植株生长基本正常，抗虫性强。3中抗性4～7蚜虫能存活，繁殖量较多；植株生长较正常，抗虫性一般。                      4低抗性7～10蚜虫能存活，繁殖量多；植株生长受到一定影响，抗虫性较弱。              5无抗性>10蚜虫能存活，繁殖量最多；植株生长受到影响，基本无抗虫性或抗虫性很弱。    

有益效果 本发明提供的利用人工接种单株隔离鉴定菊花蚜虫抗性的方法，与现有技术相比具有如下优点和积极效果：

(1)本发明利用的原材料非常普通，简单易行，成本低廉，可操作性强，实用性非常突出。试验所需的塑料花盆、聚酯透明胶片、纱布或防虫网、毛笔等在市场上非常易购，所有开展菊花育种的单位和个人都有条件实施本发明所提供的技术和方法。

(2)和原有的鉴定方法如田间鉴定或蚜虫撒播鉴定相比，本技术更能保证蚜虫的接种密度均匀和百分百成活率，试验结果受环境或人为因素的影响极小，因而能更客观地反应出鉴定对象在抗蚜虫能力上的差异，鉴定结果的准确性和科学性突出。

(3)在本发明基础上，使筛选出对蚜虫抗性强的菊花种质进行菊花育种成为可能，同时可大大缩短开展菊花抗蚜虫性育种所需的时间，确保所育品种对蚜虫抗性的真实性和稳定性。

四、附图说明

图1、应用人工接种单株隔离法对菊花种质资源抗蚜虫性进行筛选评价

1.甘菊；2.芙蓉菊；3.菊花脑；4.南京野菊；5.小红菊；6.野路菊；7.阴歧的油菊

图2、应用人工接种单株隔离法对菊花抗蚜虫育种的后代材料进行鉴定

1.母本，抗性低；2.杂交后代，抗性高；3.父本，抗性极高

五、具体实施方式

本发明所提供的人工接种单株隔离鉴定菊花蚜虫抗性的方法，其实施方式如下：

1)需要鉴定菊花材料的获得

选择需要对其进行蚜虫抗性鉴定的菊花材料，进行苗床播种或扦插繁殖，在苗高约10cm时选择长势健壮、整齐一致植株移栽到塑料花盆中，花盆规格为盆口直径15cm、高13cm。每盆种植1株，每品种重复30株以上。移栽后置入温室中常规管理，10d后即可用于接种蚜虫，获得需要鉴定蚜虫抗性的菊花材料；

2)蚜虫隔离罩的制作

选择厚度为0.1mm高度透明的聚酯投影片，制作成高度为25～30cm、直径为12cm左右的圆筒，将其一端用纱布或80目防虫网封住，在接种蚜虫后罩于植株上，既可为植株和蚜虫的正常生长提供必要的空间、光照和空气，又能够有效地防止蚜虫的迁飞和交叉传染，保证鉴定结果的准确度和科学性，获得鉴定蚜虫抗性所需的隔离罩。

3)人工接种与观察统计的方法

(一)收集虫源：在生有蚜虫的菊花植株上，用毛笔轻轻把2～3日龄的蚜虫刷到或抖落到培养皿中。(二)人工接种：把收集到的蚜虫用毛笔小心接到鉴定植株的茎端或未展开幼叶处；每株接种5只蚜虫，每处理重复30株。接种完毕后立即罩上蚜虫隔离罩，将植株置温室内常规管理。(三)调查统计：接种3周后统计植株上的蚜虫数量，计算蚜虫的繁殖率(调查虫口数/接种虫口数)；求其平均值，按以下标准对鉴定材料进行抗性评价：

 

级别抗性结果蚜虫繁殖倍率备注1极高抗性<1蚜虫不能或很少存活，不能繁殖；植株生长正常，抗虫性极强。                2高抗性1～4蚜虫能存活或大部分能活，不能繁殖或繁殖较少；植株生长基本正常，抗虫性强。3中抗性4～7蚜虫能存活，繁殖量较多；植株生长较正常，抗虫性一般。                      4低抗性7～10蚜虫能存活，繁殖量多；植株生长受到一

 

定影响，抗虫性较弱。5无抗性>10蚜虫能存活，繁殖量最多；植株生长受到影响，基本无抗虫性或抗虫性很弱。    

实施实例一：应用本方法对菊属及其近缘属约20份种质资源的抗蚜虫性进行初步筛选评价，在不到1个月的时间里即有了满意结果，筛选出对蚜虫抗性极强的材料多份，如黄金艾蒿、芙蓉菊、短舌匹菊和滨菊等(见图1)，为开展菊花的抗蚜虫育种提供了很好的亲本材料，鉴定结果见下表：

 

材料名称蚜虫繁殖倍率抗性级别抗性评价阴歧的油菊26.705无抗性小红菊19.475无抗性泡黄金菊16.215无抗性甘菊15.275无抗性菊花脑12.335无抗性紫花野菊12.245无抗性毛华菊11.075无抗性金陵国粉24.335无抗性雨花银桂17.415无抗性野路菊9.304低抗性萨摩野菊8.684低抗性宜色菊8.334低抗性那贺川野菊8.124低抗性南京野菊7.464低抗性钟山紫荷7.934低抗性大岛野菊5.853中抗性滨菊01极高抗性短舌匹菊01极高抗性芙蓉菊01极高抗性黄金艾01极高抗性

实施实例二：应用本方法对菊属栽培菊花品种“钟山金桂”与蒿属野生种黄金艾蒿的杂交后代进行抗蚜虫性鉴定(鉴定结果见下表)，在早期世代即鉴定出具高抗性的后代株系，大大缩短了育种周期。

 

材料名称蚜虫繁殖倍率抗性级别抗性评价钟山金桂8.714低抗性F12.922高抗性黄金艾蒿0.031极高抗性