抗寒吉富罗非鱼的培育方法

摘要

抗寒吉富罗非鱼的培育方法。本方法采用建立多个家系，经过抗寒试验，选择出抗寒方差平均值高于总方差的家系，即原始家系。第二年5月，进行原始家系间一雌一雄配对繁殖，鱼苗孵出后经过生长选择和抗寒选择的二重选择，以及生长对比试验，选择出生长速度快于对照组奥尼杂交罗非鱼，抗寒方差高于该次抗寒总方差的家系，即第一代家系。选择和试验均在网箱内进行。第一代家系经过保种越冬，来年同理进行第二代家系选择。研究发现，抗寒选择的总方差均高于前一年，且差异显著。通过累代选择，可选择出生长速度快，抗寒能力得到充分改良的吉富罗非鱼。

说明书

技术领域

本发明属于鱼类育种技术领域，具体是罗非鱼抗寒品系培育技术。

背景技术

吉富品系罗非鱼最具生长优势，但抗寒性状比目前当家养殖品种奥尼杂交罗非鱼较弱，其抗寒性能的改良，能够成为罗非鱼养殖的替代品种。鱼类抗寒性状是鱼类育种研究的重点，也是限制鱼类产业发展的瓶颈。目前，对鱼类抗寒方面报道不多，仅限于鱼类对温度适应机制，低温对罗非鱼的影响，以及现有品系罗非鱼的抗寒性能比较，和通过低温驯化或连续低温选育方法改良罗非鱼不耐低温性状的可能性，还没有研究出对罗非鱼抗寒性状进行改良的方法和措施。在分子生物学方面，目前对抗寒基因做了一些探索，但难以在短期内应用到生产实际中去。

发明内容

本发明的目的是提供一种育种方法，通过多个家系进行联合累代选择，不仅能有效解决吉富品系罗非鱼抗寒基因的重组纯化问题，还保证了所选出的抗寒品系同时具有生长速度快的优良性状。

本发明解决其技术问题所采用的技术方案：

1、原始家系的建立：运用现有的普通吉富罗非鱼家系，或用遗传学建立家系的方法建立若干个吉富罗非鱼家系，再经过抗寒选择建立若干个原始家系。

抗寒选择的方法：取进行抗寒选择的家系中的一部分鱼，分别放进预先设置好的相同网箱内，每个家系分别放在两个(或三个)网箱，网箱一立方米大小，每个网箱放相同数量的鱼(一般20至30尾)，所有网箱设置在相同条件的同一池内，进行统一管理。网箱深100厘米，箱内水深50-70厘米，每个网箱内放充气量相同的充气头一个，保持箱内溶解氧在5毫克/升以上，保持水质良好和清澈透明以便观察。多个家系在相同条件下，经过寒冷时期自然降温过程，记录每个家系在不同极限温度条件下存活百分率的平均值。计算总方差和每个家系的方差，进行比较，保留高于总方差的家系作进一步选育。

2、对原始家系的二重选择：通过繁殖时原始家系雌、雄亲本个体大小和鱼苗阶段生长速度的选择，以及抗寒试验的筛选，对原始家系进行生长和抗寒的双重选择，选出生长速度和抗寒性能好的家系。

第一步：生长选择。5-6月份，水温升至25℃时，从原始家系挑选个体大、性腺发育较好的雌、雄亲本个体进行家系间的一对一配对繁殖，每对鱼放入一个网箱，做好编号和记录，三天后检查雌鱼(自然情况下，雌鱼会把受精卵吸进口中，在口腔内孵化)，从雌鱼口中取出卵粒后在孵化桶内进行人工孵化，一般体重达到150克的雌鱼产卵可在1000粒以上。孵出的鱼苗在网箱里进行养殖，并定期进行生长速度选择，选择个体较大和健壮的鱼苗，选择强度30％左右(即淘汰70％)，一般选择三次(第一次选择应保留1000-1200尾鱼苗)。在养殖过程中，要进行家系间的生长对比试验。

第二步：抗寒选择。养殖至低温季节再进行家系间的抗寒选择，结果保留生长和抗寒值均较高的家系，即第一代家系，第一代家系进行保种越冬，来年进行第二代家系建立。在抗寒试验中，以奥尼杂交罗非鱼作为对照，发现有抗寒效果与对照组接近或者更好的家系存在，即为选择的目标品系。

有益效果：本项发明对抗寒品系的选择是建立在生长速度较快的家系间进行的，保证了所选择出来的抗寒品系必然是具备生长和抗寒性状高度结合的。这样避免了目前鱼类选择育种过程中，同时选择几个性状指标，往往顾此失彼，一个指标上了，另一个指标确下去了，耗时长，选择困难，过程复杂，还很难达到生长和抗寒优良性状高度统一等问题。本发明还充分考虑基因遗传和环境遗传效力两方面的作用，操作简单可行且实用性强，方法较为全面，能较快达到选择的目标。吉富品系罗非鱼抗寒能力的改善可大大提高越冬成活率，节约成本，提高产量，扩大其养殖推广范围。

具体实施方式

具体实施方式：

1、建立抗寒育种的原始家系

第一年11月，我们从现有的吉富罗非鱼家系中挑选了30个，进行了抗寒选择。每个家系取鱼40尾，每尾体重160克左右，分两个组，每组20尾，分放在温室内的两个网箱内，所有的网箱设置在条件相同的水池内。网箱大小1立方米，箱内水深60厘米，每个网箱放入充气头一个，网箱内溶解氧达到8毫克/升，保持水质清澈透明以便观察，进行相同条件下的管理。当水温降低到极限值12℃附近时，观察并记录不同温度情况下的成活率，至最后一个家系的成活率为零，计算各个家系的平均方差和总体平均方差，高于总体平均值的家系得以保留，结果保留了13个家系，即原始家系。然后，进行进一步越冬保种。

2、用生长选择和抗寒选择对原始家系进行二重选择：

第一步：生长选择。第二年5月份当水温上升至25℃左右时，从13个原始家系挑选个体较大、性腺发育较好的雌、雄个体进行原始家系间的雌雄一对一配对繁殖。考虑到育种的规模和雌雄个体性腺发育等状况，结果配了32对，少于理论值2C₁₃²＝156对。每对鱼放入同一1立方米大小的网箱内进行繁殖，做好编号和记录，网箱内水深70厘米，所有网箱设在同一个水池内。3天后(此时水温25.5℃)从雌鱼口中取出受精卵，雌鱼大小每尾180-210克，取卵量在1300-3000粒/尾，取出的受精卵在孵化桶内进行人工孵化。鱼苗孵出后在网箱内养殖，10天体长达到3厘米左右，每个家系选择无缺陷、个体较大和健壮的鱼苗1000尾，每隔15天又选择了两次，至300尾，100尾，选择强度为30％。每个家系仍在网箱内分别养殖。

在养殖过中，进行生长对比试验：以奥尼杂交罗非鱼作为对照，试验在网箱内进行，每个家系取25克左右的鱼苗各40尾，按相同数量分别放入两个网箱内，网箱1立方米大小，没入水深70厘米，在相同的饲养条件下养殖20天，结果发现生长速度快于对照组的有28个家系。

第二步：抗寒选择。当年12月，从生长选择保留下来的28个吉富罗非鱼家系中，每个家系取40条鱼分成两组，每组20尾，分别放进预先设置好的相同网箱内，网箱一立方米大小，并以奥尼杂交罗非鱼作为对照。所有网箱设置在相同条件的同一池内，进行统一管理，箱内水深60厘米，每个网箱内放充气量相同的充气头一个，网箱内溶解氧达到8毫克/升，保持水质清澈透明以便观察。经过自然状态下的降温，当水温降到12℃时，有鱼开始死亡，记录每个试验家系在不同极端温度条件下存活百分率的平均值。计算总方差和每个家系的方差，结果发现高于总方差的家系有14个(即第一代家系)。第一代家系抗寒的总方差比原始家系有所提高，差异显著。第一代家系的总方差比原始家系要接近对照组。14个第一代家系保种越冬后，用作进一步选育，来年再进行第二代家系的建立。