吗啡定量和微量检测方法

摘要

本发明涉及利用表面增强拉曼光谱(简称SERS)定量检测吗啡浓度的方法，属于药品、毒品检测技术领域。其方法：SERS活性基底的制备，取AgNO3溶于水中，配制成AgNO3水溶液，热到78℃～92℃后，加入柠檬酸三钠，同时搅拌60min，得到绿黄色的银胶；将银胶高速离心后得到高浓度银胶；把吗啡水溶液与部分高浓度银胶混合进行拉曼光谱测试，得到吗啡－银胶SERS谱图；取剩余高浓度银胶本底进行拉曼光谱测试，得到银胶本底SERS谱图；将两谱图用计算机进行光谱峰值的基线校正，得到高质量的吗啡SERS谱图；与标准的吗啡拉曼光谱强度－浓度曲线对照，得出吗啡的浓度。本发明的优点是：需要测量和分析的时间短，样品用量少，检测便捷、准确。

说明书

所属技术领域

本发明涉及吗啡的定量和微量检测及其方法，具体是指利用表面增强拉曼光谱(简称SERS)定量检测吗啡的浓度的方法，属于药品、毒品检测技术领域。

背景技术

自从F1eischmann等人发现以来，表面增强拉曼散射已经成为分子吸收、单分子检测等最为灵敏的检测技术之一。许多超低浓度的分析物，包括化学、生物和医学分子已经通过SERS检测出来。当目标分子吸附在银或者金的纳米结构上时，非共振的拉曼信号就被增强高达10¹⁴倍。拉曼光谱和SERS已经被广泛的应用于生物医学研究。吗啡(C₁₇H₁₉NO₃)是一种有力的镇痛剂，但也是一种常见的毒品，它引起了越来越多的科学家的兴趣。然而，在文献中还鲜见银溶胶中的吗啡表面增强拉曼光谱研究的报道，因此对吗啡的表面增强拉曼光谱进行细致的研究，对于广大的科学家、禁毒工作者和临床医生来说显得尤为重要，甚至对国家在打击毒品犯罪发明都有十分重要的应用价值。在本发明专利中，我们公布了一种新颖、便捷的表面增强拉曼光谱定量检测吗啡的的方法。

对吗啡的拉曼光谱检测还未见报道，特别是用表面增强拉曼光谱技术检测吗啡，国内目前尚是空白。

发明内容

1、本发明的目的是利用表面增强拉曼光谱及其检测方法，首先建立已知吗啡浓度的表面增强拉曼光谱强度-浓度曲线标准图，将待检测的含有吗啡的介质样品，用表面增强拉曼光谱检测，得到含有吗啡的待检样品SERS谱图，将该谱图与标准的拉曼光谱强度-浓度曲线标准图对照，从谱线相对强度，以及相应谱峰下的面积，可以直接计算出吗啡的浓度，达到对吗啡进行定性和定量的检测，为打击毒品犯罪提供科学依据。

为实现本发明的目的采用的技术方案是

1、SERS活性基底--银胶的制备：取AgNO₃溶于水中，配制成质量百分比为0.030％～0.008％的AgNO₃水溶液，将该水溶液加热到78℃～92℃后，逐滴加入质量百分比为1％的柠檬酸三钠水溶液10mL，同时搅拌60min，得到绿黄色的银胶。以相同的方法，也可以制备出银镜、金胶基底。

2、将适量银胶放入离心管里高速离心10分钟，取下层高浓度银胶备用。

3、把煎煮好的吗啡水溶液与部分高浓度银胶混合，静置50秒～70秒后进行拉曼光谱测试，得到吗啡-银胶SERS谱图。

4、取剩余部分的高浓度银胶本底进行拉曼光谱测试，得到银胶本底SERS谱图。

5、将吗啡SERS-银胶谱图和银胶本底SERS谱图用计算机进行光谱峰值的基线校正，扣除银胶本底SERS谱图中的拉曼光谱的本底，这样，就可以得到去除银胶本底信号干扰的高质量的吗啡SERS谱图。

6、用得到的SERS谱图与标准的吗啡拉曼光谱强度-浓度曲线对照，从谱线相对强度，以及相应谱峰下的面积，可以直接推断出吗啡的浓度。

本发明的优点是：需要测量和分析的时间短，样品用量少，检测便捷、准确，并可实现微量和定量的检测，检测限达到1.5ng/mL。

附图说明

图1是已知吗啡浓度的表面增强拉曼光谱强度-浓度曲线标准图。

图2是本发明所述的银胶本底SERS谱图。

图3是本发明所述的吗啡-银胶SERS谱图。

图4是本发明所述的扣除银胶本底的吗啡SERS谱图。

具体实施方式

附图是本实施例1中利用英国Renishaw的inVia型号的共聚焦显微拉曼光谱仪所测的谱图，为了对本发明有进一步的理解，现结合附图对本发明做进一步的说明。

实施例1

1、取90mg的AgNO₃溶于500mL水中，配制成质量百分比为0.018％的AgNO₃水溶液，将该水溶液加热到90℃时，逐滴加入质量百分比为1％的柠檬酸三钠水容液10mL，同时搅拌60min，得到绿黄色的银胶。

2、将适量银胶放入离心管里高速离心10分钟，取下层高浓度银胶备用。

3、称取0.9mg的吗啡，加入到1000mL的容量瓶中，用超纯水定容至1000mL，配制成900ng/mL的吗啡水溶液。量取5mL上述的吗啡溶液与5mL高浓度银胶混合，静置70秒后进行拉曼光谱测试，得到附图3所示的吗啡-银胶SERS谱图。吗啡溶液与银胶混合后会看到混合体系中胶体明显的聚集现象使混合体系发黑，混合体系在长波方向990nm左右处出现宽的新共振吸收峰。

4、取剩余的10mL高浓度银胶本底进行拉曼光谱测试，得到附图2所示的银胶本底SERS谱图。

5、将吗啡SERS-银胶谱图和银胶本底SERS谱图用计算机进行光谱峰值的基线校正，扣除银胶本底SERS谱图中的拉曼光谱的本底，这样，就可以得到附图4所示的去除银胶本底信号干扰的高质量的吗啡SERS谱图。

6、用得到的附图4所示的SERS谱图与标准的吗啡拉曼光谱强度-浓度曲线对照，用origin等数据处理软件计算出各个谱峰下的面积，从而可以直接推断出吗啡的浓度。