无菌小鼠人工喂养乳及其制备方法

摘要

本发明公开了一种无菌小鼠人工喂养乳及其制备方法，该喂养乳以102ml计，由下述原料组成：45.0－55.0g婴儿奶粉、3.0－5.0mg维生素B1、0.7－0.9mg维生素B2、3.0－5.0mg维生素B6、30.0－50.0μg维生素B12、11.0－13.0mg维生素C，余量为水；本发明喂养乳的制备方法包括以下步骤：取婴儿奶粉，经辐照消毒后溶解于无菌水中制得乳液，再取维生素B1、B2、B6、B12及C，加水制成维生素溶液，经过滤除菌后，按比例与乳液充分混合，制得无菌小鼠人工喂养乳；本发明无菌小鼠人工喂养乳营养结构合理，制备工艺简便，提高了人工喂养无菌小鼠的生长发育水平和成活率，降低了人工喂养成本。

说明书

技术领域

本发明涉及动物人工饲养用乳制品，尤其是涉及一种无菌小鼠人工喂养乳及其制备方法。

背景技术

实验动物是生命科学发展的基础和条件，不仅在生物医学研究中具有非常重要的地位，还广泛用于农业、化工、环保、航天、商检等诸多领域。通常，普通动物的体内和体外带有寄生虫，体内常带有细菌和病毒，并且血清中存在抗体，用于科学研究时会存在各种干扰，导致实验结果不准确，使用无菌动物则可克服上述缺点，保证实验结果的一致性与可靠性。无菌动物，是指不携带其它种生命体(包括一切微生物和寄生虫)的实验动物。小鼠是应用最广泛的实验动物之一，目前，无菌小鼠人工繁殖困难，发病率高，成活率低，价格昂贵。人工喂养乳的配制，是无菌动物饲养成功的关键之一，特别是对免疫能力较差的无菌小鼠，不仅要营养结构和鼠乳相近，而且要适合小鼠的消化吸收。现有的无菌小鼠人工喂养乳营养搭配不合理，制备方法复杂，成本昂贵，用其饲养无菌小鼠，小鼠成活率低，即使成活也存在生长发育不良、体格不健壮、易发病等问题。

发明内容

有鉴于此，本发明的目的在于提供一种营养结构合理、制备方法简便的无菌小鼠人工喂养乳及其制备方法，以提高人工喂养无菌小鼠的生长发育水平和成活率，降低无菌小鼠的人工喂养成本。

为实现上述目的，本发明采用以下技术方案：

无菌小鼠人工喂养乳，以102ml计，由下述原料组成：45.0-55.0g婴儿奶粉、3.0-5.0mg维生素B1、0.7-0.9mg维生素B2、3.0-5.0mg维生素B6、30.0-50.0μg维生素B12、11.0-13.0mg维生素C，余量为水。

进一步，所述无菌小鼠人工喂养乳，以102ml计，由下述原料组成：50.0g婴儿奶粉、4.0mg维生素B1、0.8mg维生素B2、4.0mg维生素B6、40.0μg维生素B12、12.0mg维生素C，余量为水；

进一步，所述婴儿奶粉，以100g计，其组分含量为：16.1g蛋白质、28.7g脂肪、51.0g碳水化合物、1541.0IU维生素A、258.0IU维生素D、7.0IU维生素E、27.0μg维生素K1、518.0μg维生素B1、781.0μg维生素B2、340.0μg维生素B6、1.8μg维生素B12、4445.0μg烟酸、39.6μg叶酸、2780.0μg泛酸、12.7μg生物素、50.0mg维生素C、72.0mg胆碱、407.0mg钙、313.0mg磷、68.0mg镁、8.3mg铁、4.1mg锌、357.0μg铜、250.9mg钠、587.0mg钾、543.0mg氯。

无菌小鼠人工喂养乳的制备方法，包括以下步骤：

a.对容器及滤器进行高温高压消毒，压力为1.05kg/cm²，温度为121℃，时间为30分钟；

b.按配方取婴儿奶粉，置经过步骤a消毒的容器中，加塞密封，进行40KGyCo⁶⁰辐照，辐照完毕后，加入75ml无菌水，加塞振摇，使婴儿奶粉充分溶解，再加水稀释至100ml，制得乳液，将所得乳液置温度37℃培养箱中，培养7天，取样作无菌检查，取检查结果合格者，备用；

c.按2.5倍配方量取维生素B1、维生素B2、维生素B6、维生素B12和维生素C，加入5ml蒸馏水使溶解，制得维生素溶液，将所得维生素溶液过滤灭菌，置经过步骤a消毒的容器中，取样作无菌检查，取检查结果合格者，备用；

d.将步骤b所得乳液100ml与步骤c所得维生素溶液2ml充分混合，制得无菌小鼠人工喂养乳。

本发明的有益效果在于：采用本发明所述原料配比制得的无菌小鼠人工喂养乳，在婴儿奶粉中加入无菌小鼠生长必需的维生素，满足了无菌动物无法在肠道内合成部分维生素的需要，配方成分不复杂且营养全面；本发明所述无菌小鼠人工喂养乳的制备方法简便，制备过程中采用辐照消毒，大大降低了营养成分的损失，制得的喂养乳形成有一定粘稠度、均匀的液体，无明显颗粒，不需碾磨，新生鼠吸吮容易，胃排空较快，不形成凝乳块，用其喂养无菌小鼠，小鼠成活率高，生长发育良好；本发明所述人工喂养乳成本较低，既可用于强饲法，也可用于自然吸吮法。

本发明的其他优点、目标，和特征在某种程度上将在随后的说明书中进行阐述，并且在某种程度上，基于对下文的考察研究对本领域技术人员而言将是显而易见的，或者可以从本发明的实践中得到教导。本发明的目标和其他优点可以通过下面的说明书和权利要求书来实现和获得。

具体实施方式

为了使本发明的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将对本发明的优选实施例进行详细的描述。应当理解，优选实施例仅为了说明本发明，而不是为了限制本发明的保护范围。

实施例1、无菌小鼠人工喂养乳(102ml)的制备

a.对容器和滤器进行高温高压消毒，压力为1.05kg/cm²，温度为121℃，时间为30分钟；

b.婴儿奶粉，以100g计，其组分含量为：16.1g蛋白质、28.7g脂肪、51.0g碳水化合物、1541.0IU维生素A、258.0IU维生素D、7.0IU维生素E、27.0μg维生素K1、518.0μg维生素B1、781.0μg维生素B2、340.0μg维生素B6、1.8μg维生素B12、4445.0μg烟酸、39.6μg叶酸、2780.0μg泛酸、12.7μg生物素、50.0mg维生素C、72.0mg胆碱、407.0mg钙、313.0mg磷、68.0mg镁、8.3mg铁、4.1mg锌、357.0μg铜、250.9mg钠、587.0mg钾、543.0mg氯；取45.0g婴儿奶粉，置经过步骤a消毒的塑料瓶中，加塞密封，进行40KGy Co⁶⁰辐照，辐照完毕后，加入75ml无菌水，加塞振摇，使婴儿奶粉充分溶解，再加水稀释至100ml，制得乳液，将所得乳液置温度37℃培养箱中，培养7天，取样作无菌检查，取检查结果合格者，备用；

c.取7.5mg维生素B1、1.75mg维生素B2、7.5mg维生素B6、75.0μg维生素B12、27.5mg维生素C，加入5ml蒸馏水使溶解，制得维生素溶液，将所得维生素溶液过滤灭菌，置经过步骤a消毒的容器中，取样作无菌检查，取检查结果合格者，备用；

d.将步骤b所得乳液100ml和步骤c所得维生素溶液2ml充分混合，制得无菌小鼠人工喂养乳。

实施例2、无菌小鼠人工喂养乳(102ml)的制备

a.对容器和滤器进行高温高压消毒，压力为1.05kg/cm²，温度为121℃，时间为30分钟；

b.婴儿奶粉，以100g计，其组分含量为：16.1g蛋白质、28.7g脂肪、51.0g碳水化合物、1541.0IU维生素A、258.0IU维生素D、7.0IU维生素E、27.0μg维生素K1、518.0μg维生素B1、781.0μg维生素B2、340.0μg维生素B6、1.8μg维生素B12、4445.0μg烟酸、39.6μg叶酸、2780.0μg泛酸、12.7μg生物素、50.0mg维生素C、72.0mg胆碱、407.0mg钙、313.0mg磷、68.0mg镁、8.3mg铁、4.1mg锌、357.0μg铜、250.9mg钠、587.0mg钾、543.0mg氯；取55.0g婴儿奶粉，置经过步骤a消毒的塑料瓶中，加塞密封，进行40KGy Co⁶⁰辐照，辐照完毕后，加入75ml无菌水，加塞振摇，使婴儿奶粉充分溶解，再加水稀释至100ml，制得乳液，将所得乳液置37℃培养箱中，培养7天，取样作无菌检查，取检查结果合格者，备用；

c.取12.5mg维生素B1、2.25mg维生素B2、12.5mg维生素B6、125.0μg维生素B12、32.5mg维生素C，加入5ml蒸馏水使溶解，制得维生素溶液，将所得维生素溶液过滤灭菌，置经过步骤a消毒的容器中，取样作无菌检查，取检查结果合格者，备用；

d.将步骤b所得乳液100ml和步骤c所得维生素溶液2ml充分混合，制得无菌小鼠人工喂养乳。

实施例3、无菌小鼠人工喂养乳(102ml)的制备

a.对容器和滤器进行高温高压消毒，压力为1.05kg/cm²，温度为121℃，时间为30分钟；

b.婴儿奶粉，以100g计，其组分含量为：16.1g蛋白质、28.7g脂肪、51.0g碳水化合物、1541.0IU维生素A、258.0IU维生素D、7.0IU维生素E、27.0μg维生素K1、518.0μg维生素B1、781.0μg维生素B2、340.0μg维生素B6、1.8μg维生素B12、4445.0μg烟酸、39.6μg叶酸、2780.0μg泛酸、12.7μg生物素、50.0mg维生素C、72.0mg胆碱、407.0mg钙、313.0mg磷、68.0mg镁、8.3mg铁、4.1mg锌、357.0μg铜、250.9mg钠、587.0mg钾、543.0mg氯；取50.0g婴儿奶粉，置经过步骤a消毒的塑料瓶中，加塞密封，进行40KGy Co⁶⁰辐照，辐照完毕后，加入75ml无菌水，加塞振摇，使婴儿奶粉充分溶解，再加水稀释至100ml，制得乳液，将所得乳液置37℃培养箱中，培养7天，取样作无菌检查，取检查结果合格者，备用；

c.取10.0mg维生素B1、2.0mg维生素B2、10.0mg维生素B6、100.0μg维生素B12、30.0mg维生素C，加入5ml蒸馏水使溶解，制得维生素溶液，将所得维生素溶液过滤灭菌，置经过步骤a消毒的容器中，取样作无菌检查，取检查结果合格者，备用；

d.将步骤b所得乳液100ml和步骤c所得维生素溶液2ml充分混合，制得无菌小鼠人工喂养乳。

无菌小鼠人工喂养乳应用效果

方法：采用本发明所述无菌小鼠人工喂养乳，喂养由SPF级KM孕鼠经剖腹产手术而得的20只无菌KM小鼠，并与采用普通人工喂养乳喂养结果相比较；所述普通人工喂养乳，以100ml计，由下述原料组成：24.0g蛋白质、5.8g矿物质、39.0g碳水化合物、2100.0IU维生素A、340.0IU维生素D、720.0mg磷，余量为水。

结果：两种人工喂养乳的喂养结果比较见表1。

表1、两种人工喂养乳喂养的无菌小鼠的生理学特性对比

结论：对比上表中无菌小鼠的生理学指标，可见采用本发明所述喂养乳喂养取得良好的人工喂养效果，无菌小鼠成活率高，生长发育良好，表明本发明所述喂养乳的原料配比合理，营养均衡，制备过程符合无菌小鼠的生理特征条件，有利于无菌小鼠的生长发育。

尽管通过参照本发明的某些优选实施例，已经对本发明进行了描述，但本领域的普通技术人员应当理解，可以在形式上和细节上对其作出各种各样的改变，而不偏离所附权利要求书所限定的本发明的精神和范围。