尤其具有抗衰老活性的含有非洲生畺或唤妍草植物提取物的美容组合物

摘要

本发明涉及一种美容组合物。该美容组合物的特征在于，包含作为活性成分的非洲生畺(Aframomum angustifolium)或Longoza(俗称唤妍草)植物的种子提取物，可选地在一种美容用赋形剂中。这种美容组合物呈现较好的抗衰老活性。

说明书

技术领域

本发明基本上涉及一种美容组合物，尤其具有抗衰老活性的美容组合物，其特征在于包含作为活性成分的Aframomumangustifolium(在本文中称非洲生畺)或Longoza(在中国俗称唤妍草)植物的种子提取物。

本发明还涉及非洲生畺或唤妍草植物的种子提取物作为一种美容剂的用途，尤其是用于具有抗衰老活性的美容组合物的生产。

为了简明，在说明书和权利要求中将优选使用词语“唤妍草”，但是该词明显而没有隐含差别地也指非洲生畺植物。

背景技术

E.M.Gaydou等发表于Revue francaise des Corps Gras[脂肪物质的法语综述]，1983年1月第一期，第21页至第25页的论文描述了关于从一些种子提取的油的脂肪酸组合物的研究，该种子来自一些来自马达加斯加岛的植物，包括非洲生畺(见第24页表1，续表2)。它是通过使用一种非极性溶剂，尤其是使用己烷提取的植物种子的提取物(见第24页[实验部分]第一段)。

发明目的

本发明的目的是解决以下技术问题，包括提供用于寻找作为美容剂的新的活性成分的解决方案，其中该美容剂具有良好的抗衰老活性，或者其抗衰老活性比已知的抗衰老美容剂的抗衰老活性有所提高，和/或该美容剂在用于美容目的(特别是用于皮肤)的局部施用方面有很好的相容性，和/或没有或基本没有副作用或刺激作用。

本发明的目的在于通过一种从可广泛获得的或容易培养的天然资源中获得的一种活性成分来解决上述技术问题。

本发明的目的还在于通过提供一种用于获得该活性成分的方法来解决上述技术问题，它可以为工业规模，尤其是美容业制备足够量的该活性成分。

发明内容

本发明针对上述技术问题提供一种简单、相对便宜的方式的解决方案，可以被用于工业规模，尤其是美容业。

根据第一个方面，本发明提供了一种美容组合物，其特征在于包含在一种美容用赋形剂中的作为活性成分的非洲生畺或唤妍草植物的种子提取物。

根据第二方面，本发明还涉及非洲生畺或唤妍草植物的种子提取物作为美容剂在一种美容组合物的生产中的应用。

根据本发明的一种有利的实施方式，唤妍草提取物被用作具有抗衰老活性的美容剂。

根据本发明的一种有利的变型和实施方式，该唤妍草植物的种子提取物被用于提供抗皱活性，尤其用于减少、消除或减缓皱纹的出现，该作用可以保护和修复皮肤结构，特别是通过一种刺激胶原质合成，尤其是存在于真皮表皮结合处或DEJ中的VII型胶原的合成的作用，和/或通过对耐酸纤维(前弹性纤维，oxytalan fibre)和/或伸展纤维(elaunin fiber)的作用。因此，本发明可以具有一种抗皱作用；一种对皮肤的弹性和/或收缩(firmness)起到保护、修复或恢复的作用。本发明还可以保护皮肤免受由光化辐射作用特别是由紫外线导致的老化。

在本发明的内容中，有利地，将使用一种非洲生畺或唤妍草植物的种子提取物，该提取物用美容可接受的溶剂，尤其是醇或水-醇溶剂制备。

根据本发明的一种具体实施方式，该植物-种子提取物可通过一种提取方法获得，该方法包含至少一个用醇或水-醇溶剂提取磨碎的种子的步骤。

优选地，进行研磨直至获得细小的粉末。有利地，这种粉末的颗粒的直径大约在0.01mm至1mm之间。

根据本发明的方法的一种有利实施方式，使用的醇或水-醇溶剂中的醇为含有1至4个碳原子的一元醇或多元醇。有利地，这种醇选自甲醇、乙醇、正丙醇、异丙醇、乙二醇、丙二醇和丁二醇，优选乙醇。该提取过程可以在室温下进行，或在大气压下在溶剂的沸点温度以下进行，或者在沸点不超过大约120℃的高压下进行。优选地，醇和水之间的相对比例优选在30/70至100/0体积比的范围内。

可以进行几步连续的提取直至待提取物质被所用溶剂完全提出。

提取时间依考虑使用的溶剂、温度以及，可选地，所使用的压力的不同而变化，以便使该提取物质被完全提出。实际上，对于有利益的工业开发，提取时间被限制为小于半小时。通常，将达到30分钟。

根据这种提取方法的实施方式的一种特定变型，有利地，将所得的该含醇或含水-醇提取物除去脂类而脱脂，其通过至少一个用非极性有机溶剂(例如己烷或正庚烷)提取的步骤，从而得到脱脂的含醇或含水-醇提取物。

根据这种提取方法的一种具体实施方式，该脱脂的含醇或含水-醇提取物本身可以构成根据本发明的活性成分或活性剂(activeagent)。

根据本发明提取方法的另一特定变型的实施方式，使该脱脂的含醇或含水-醇提取物经历一个脱色步骤，即，包含滤过合适的脱色剂(例如活性炭)，然后，在除去活性炭之后，用醇或水-醇溶剂的溶液洗涤，该醇或水-醇溶剂的溶液可以与初始提取所用的溶液相同，也可以不同。

根据另一特定变型，可以基本上完全蒸发掉提取溶剂，得到一种干提取物，其可以直接用作上述活性成分，或者再次被溶解于美容可接受的溶剂中，尤其是醇或水-醇混合物中，以便得到上述活性成分的另一种变型。

根据本发明的另一有利变型，用于提取的醇是乙醇。

在本发明的内容中，所得的提取物易于用作一种美容剂，并易于与要制备的美容组合物的其他成分混合，而不管它是在水相还是在油相。

根据第三方面，本发明还涉及一种美容护理方法，其特征在于包括将美容有效量的上述非洲生畺或唤妍草植物的种子提取物局部施用到需要其的人的皮肤上。

根据本发明的一种有利的实施方式，该美容护理方法被用来将上述非洲生畺或唤妍草植物的种子提取物施用到需要抗衰老护理的皮肤区域，尤其用于抵抗因光化辐射，尤其是紫外线的作用引起的衰老的影响。

更具体地，该抗衰老活性尤其是指用于减少、消除或减缓皱纹出现的抗皱活性。

本发明还具有保护和恢复皮肤的结构的作用，尤其是通过一种刺激存在于真皮-表皮接合处(或DEJ)的胶原的合成，尤其是VII型胶原的合成的作用，和/或通过对耐酸纤维和/或伸展纤维的修复作用，该作用具有保护、修复或恢复皮肤的弹性和/或收缩的效果。

在本发明的任一方面的内容中，所述提取物所含的浓度，以干的提取物计，在组合物总重量的0.001％至5％，优选0.01％至1％的范围内。

附图说明

从下面的结合附图给出的说明书中，本领域技术人员可以明白本发明的其他目的、特征以及优点，其中：

-图1表示通过弹性纤维组织学量化获得的在人皮肤上用非洲生畺或唤妍草植物种子的提取物的测试结果，该皮肤被保持在存活条件下，利用紫外线照射进行人为老化(以“紫外线+唤妍草”为名记录结果)，该组织学量化是通过分析耐酸纤维-伸展纤维网络的计算机图像分析，与形成空白对照皮肤的相同的人的皮肤作比较(以“空白对照皮肤”为名记录结果)，或者与利用紫外线照射人为老化(指“+UV”)的相同的人类皮肤进行比较，沿x轴给出；沿y轴方向表示该弹性纤维的平均长度，其范围为0微米至350微米。

-图2A示出了利用电子显微镜在放大400倍下拍摄的空白对照皮肤的照片；图2B示出了在相同条件下拍摄的经过紫外线照射人为老化的皮肤照片；而且图2C示出了在根据本发明的唤妍草种子的醇或水-醇提取物存在下结合紫外线老化所得的结果，该提取物由下文实施例1制备，示出了在本发明的背景下对耐酸纤维与伸展纤维网络以及成熟弹性纤维的恢复；

-图3示出了对在真皮-表皮结合处发现的VII型胶原的免疫组织化学评价的测量结果，沿x轴分别为“空白对照皮肤”所得的结果；仅经受紫外线照射的皮肤的结果(指“+UV”)；和在相同的根据本发明的唤妍草提取物的存在下，经过紫外线处理的皮肤的结果(“UV+唤妍草”)；以及，沿y轴为根据0至3.5范围的数值得到的分数，该分数证实，与在实验室经受紫外线辐射老化的皮肤相比较，本发明的唤妍草提取物对VII型胶原的显著修复作用；

-图4A是示出了在真皮-表皮接合处的皮肤的一部分的照片，其示出了在表皮-真皮结合处或DEJ的VII型胶原的标记强度(“空白对照皮肤”)；图4B示出相同条件下的经受紫外线照射的皮肤(“皮肤+UV”)；图4C表示在根据本发明的唤妍草种子的提取物的存在下，经受紫外线照射的相同的皮肤(“皮肤+UV+唤妍草”)，示出了在根据本发明的唤妍草提取物存在时，所观察到的标记强度与无紫外线的空白对照皮肤的标记强度接近。

具体实施方式

在下列实施例中，除非另外说明，所用的百分数均为重量比，温度为室温，即25℃，或者以摄氏度给出，且压力为大气压。

实施例1

制备根据本发明的非洲生畺或唤妍草植物的种子的脱脂的含醇或含水-醇提取物的实施例

使用100kg来自不同商业批次的唤妍草植物种子，可得自SOTRAMEX公司(法国)，进行以下提取过程：

a)首先，将商购的干燥种子磨碎，例如，直至得到平均粒径为0.01mm至1mm之间的粉末；

b)接着，对磨碎的种子进行三步连续提取，每次采用500升(L)水-醇混合物(例如体积比70/30的乙醇/水混合物)，有利地，在稍微加热(例如50℃)并搅拌条件下，持续约30分钟的时间。优选的醇为乙醇，因为其众所周知的生物相容性。可以清楚理解，使用纯净的醇可以使提取容易进行。

每一次提取后对提取饼粕(extract cake)进行的过滤是一个清洗过程。例如，通过一个孔径0.70μm的过滤器进行过滤，采用30L的70/30体积比的水-醇混合物进行清洗；

c)随后将滤出液合并，同时得到总体积约1500L的滤出液，所得溶液是浑浊的；

d)随后，进行清除脂质或脱脂的步骤，有利地，其通过使用非极性有机溶剂例如庚烷的液/液萃取来进行。

有利地，进行三次萃取，每次使用约500L的正庚烷并剧烈搅拌。

通过静置进行分离，以实现庚烷相与水-醇相的分离，弃去庚烷相。

因此得到的脱脂水-醇相基本上是清澈的，且体积约为1500L。

根据本优选的实施方式，此脱脂的水-醇相中包括根据本发明的唤妍草或非洲生畺的种子提取物，该提取物可作为美容剂使用，或者用作生产美容组合物的活性成分，如下面的实施例(提取物1d)中示出的。该水-醇溶液含有按重量计0.47％的干提取物。

可以理解，通过调节提取参数，如所用的提取溶剂的量以及醇在水-醇混合物中的比例，可以得到不同含量的干燥提取物，例如含量更高，尤其是按重量计约1％；按干提取物重量计的浓度可以在一定范围内变化。

e)根据另一个变型例，可以进行一个清除微量的所用非极性有机溶剂，如正庚烷的步骤，例如通过将水-醇相加热至最高50℃的温度进行蒸馏，可选地，在减压条件下蒸馏。

f)随后，通过添加醇或水-醇溶剂溶液，对不再含有任何非极性有机溶剂的脱脂醇或水-醇溶液进行稀释，直至再次得到1500L的体积。

g)还可以通过在室温下、边搅拌，边用活性炭处理1小时，对脱脂溶液进行脱色，这对本领域的技术人员来说是熟知的。

随后，通过孔径0.45μm的过滤器过滤活性炭，然后用3L醇或水-醇溶液清洗过滤后的活性炭。

该脱脂且脱色的醇或水-醇溶液是清澈的且体积约为1500L。

h)随后，为了获得基本上的水相，主要通过蒸发醇将所述溶液浓缩，尤其是通过加热到最高50℃的适中温度，可选地，在减压条件下蒸发。该基本为水相的溶液也可以直接用作本发明的活性成分。

i)根据另一个变型例，可以冻干该基本为水相的溶液，以便得到干提取物，该提取物也可以直接用作本发明的活性成分。

j)为了将该干燥提取物引入到本发明的美容组合物中，也可以在生产所述组合物时在一种美容可接受的溶剂(尤其是水、乙醇或1，3-丁二醇，或这些溶剂的混合物)中制备一种它的临时溶液(extemporaneous solution)。因此该实施方式能够以所需的浓度制备非洲生畺或唤妍草植物的种子提取物的溶液。

k)最后，进行一个包装上述提取物的各种溶液的步骤，这时该溶液将要用于生产所期望的美容组合物。这里，优选地，在被包装进合适体积的瓶中之前，预先用0.22μm孔径的过滤器进行灭菌过滤，然后在冷藏室储存(例如4℃)

根据本发明的实施例2

测定唤妍草(非洲生畺)提取物对保存在存活条件下并用紫外线照射进行人为老化的人类皮肤的实验模型的抗衰老活性

为了确定根据本发明的唤妍草的提取物的抗衰老活性，使用一种皮肤的实验模型，该皮肤保存在存活条件下，且利用紫外线照射(“紫外线”)进行人为老化，以便对抗衰老效果进行评估。

评价该测试结果，这是通过利用VII型胶原的免疫组织化学评价来分析真皮-表皮接合质量的恢复，以及通过研究对耐酸纤维-伸展纤维网络来分析该表面真皮的弹性纤维，以及利用图像分析的形态定量来分析中等深度真皮。

为此，从整形手术后的妇女获取皮肤片段(来自8个不同的捐献者)。将这些片段放置在本身悬浮于培养孔上的培养板插(插入物，insert)中。

在本领域中技术人员所熟知的MEM培养基中补充庆大霉素抗生素、牛垂体提取物、胎牛血清以及氢化可的松后，将其添加到这些孔的底部。该培养液从该孔基部扩散通过厚度为12μm的多孔膜。每三天清除一次该培养基。

通过提供两种紫外线-照射操作，包括分别在一天后(“D1”)以及第三天(“D3”)的一个UVA部件(8J/cm²)和一个UVB部件(2J/cm²)，以便引起与老化过程中观察到的相似的皮肤变化，来实现了试验的老化模型。

制备上述实施例1中在步骤d)结束时获得的唤妍草提取物溶液(提取物1d)的培养基中5％的溶液。从第一天至第十天，将该5％的溶液施用到皮肤片段的表面，每周三次。

在该试验中，在以下各部分之间进行比较：

a)仅置于存活条件下的空白对照皮肤；

b)保存在存活条件下，在UVA和UVB照射进行实验室老化的皮肤(参比对照皮肤)；

c)保存在存活条件下，利用紫外线A/B照射进行人为老化，并施用以上指定的唤妍草提取物的皮肤。

在第四天(“D4”)停止部分皮肤培养，以进行VII型胶原的免疫组织化学分析，其余的在第十天(“D10”)停止，以进行弹性纤维的形态测定分析。

所得的结果如下：

1)弹性纤维的组织学量化

该弹性纤维通过(+)儿茶素染色被可视化，通过利用计算机辅助Leitz XC-75CE相机提供的计算机图像分析进行形态量化，该计算机装有该相机生产商提供的软件。

对表面真皮的耐酸纤维和伸展纤维的平均长度(μm)进行评估，以它们的平均表面积(μm²)。

从发明人得出的结果中可以证实，与空白对照皮肤(长度64μm，表面积2808.9μm²)相比，使用皮肤老化模型，在耐酸纤维的平均长度(42.7μm)和真皮的耐酸纤维和伸展纤维的平均表面积(2339μm²)方面有统计学显著的减小，构成一个偏差p＜0.05的统计学显著值。

结果在附图1中给出，利用装有Leitz XC-75CE相机的Leitz电子显微镜拍摄的照片在图2A(空白对照皮肤)、2B(皮肤+紫外线)以及2C(皮肤+紫外线+唤妍草)中给出。

可以观察到，如实施例1中所得的，以脱脂的含醇或含水-醇提取物的形式利用根据本发明的唤妍草提取物，对耐酸性纤维与伸展纤维的修补作用是显著的。

具体地说，经过根据本发明的唤妍草提取物处理的皮肤的耐酸纤维的平均长度为75μm(p＜0.05)。与实验室老化的长度降至200μm的皮肤相比较，伸展纤维的平均长度增至267.4μm。类似地，该伸展纤维的平均表面积增至3397.2μm²，偏差p＜0.05。

因此，与空白对照+UV(+7.7％针对中层真皮以及8.4％针对深层真皮)相比，对中层或深层真皮的成熟弹性纤维的修补作用本身也是显著的。

所有结果均可清楚地见于附图1。

2)VII型胶原的免疫组织化学分析

使用取自上述经过整形手术后的女性，并经冷冻的皮肤片段，可以通过免疫组织化学探测到位于基膜(basal membrane)水平的胶原质类型VII。

通过一种三层的间接免疫过氧化物酶技术，使用来自Vector实验室(美国)的可商购的称为ABC过氧化物酶的试剂盒，并且利用诸如DAB(二氨基联苯胺)的可视化剂(visualizing agent)使该免疫检测可视化，进行免疫检测。

利用一个范围0至3的半量化分数进行评估，确定其标记强度与形貌(topography)，即，在真皮-表皮结合处的或多或少的大体上延伸。

上述皮肤紫外线老化的实验室模型，可以改变在真皮-表皮结合处(DEJ)VII型胶原。

相比较空白对照皮肤2.4的分数，实际上获得1.67的分数。

该差异是统计学显著的，偏差p＜0.05。

与在上述条件下实验室紫外线照射老化的皮肤相比较，当使用根据本发明的唤妍草的提取物时，可以观察到VII型胶原的显著修补效果，偏差p＜0.05。

所得到的胶原质类型VII的免疫组织化学评估的结果记录在附图3中。

而且，图3A示出用电子显微镜拍摄的一部分空白对照皮肤的照片，图3B示出一个皮肤照片，该皮肤由紫外线照射人为老化，以及图3C示出在相同条件下拍摄的、被紫外线照射人为老化并经过根据本发明的唤妍草提取物处理的皮肤照片。

在紫外线存在的情况下，在DEJ处可观察到VII型胶原的标记强度的降低。

另一方面，当皮肤经过根据本发明的上述唤妍草提取物处理时，观察到的标记强度与无紫外线空白对照的标记强度相似，这表明由根据本发明的唤妍草的提取物所提供的保护的有效性。

综上所述，由于使用实验室老化模型，在存活条件下保持的人类皮肤上，可以证实本发明的唤妍草提取物对于表面真皮的耐酸纤维和伸展纤维、对于中层及深层真皮的弹性网络、以及对于真皮-表皮结合处的VII型胶原的显著修补作用。

因此，本发明可以作为一种美容剂，用于制备局部施用的美容组合物，该美容组合物用于维护结构蛋白如胶原质或弹性蛋白，并且用于巩固真皮-表皮结合。

下文中将通过举例说明的方式给出美容组合物配方的多种实施例，因此不能限制本发明的范围。

在说明书的所有实施例中，除非另有说明，所有的百分数均为以重量计。

根据本发明的实施例3

用于促进面部收缩的美容凝胶

-实施例1d)中所得的唤妍草的脱脂含醇或含水-醇提取物  2％

-乙二醇(glycol)                                    3％

-商购的AMPS聚合物(商品名Sepigel 305)              3％

-氢化蓖麻油(Cremophor CO-60)                      2％

-聚乙二醇                                          1.5％

-防腐剂                                            0.5％

-香精                                              0.3％

-紫外线屏蔽剂(苯甲酮-4)                            1％

-水，加至100％

可以将这种凝胶抹到脸上，每天一次，持续几周，以实现对面部皮肤收缩的改善，尤其是在有皱纹的区域，因此在该处理的后期，观察到对皮肤明显的恢复青春作用的柔软度的修复，以及明显的减少或消除皱纹的作用。

根据本发明的实施例4

一种乳液形式的抗皱日霜

-实施例1d)中所得的唤妍草的脱脂含醇或含水-醇提取物  2％

-聚氧乙烯(21)硬脂醇醚(Brij 721)                    2.5％

-硬脂酸甘油酯(Tegrin)                              1.1％

-硬脂醇                                            5％

-三癸酸丙三醇酯/辛酸丙三醇酯                       12.5％

-丁二醇                                            3％

-甘油                                              2％

-防腐剂                                            0.5％

-香精                                              0.5％

-紫外线屏蔽剂(甲氧基肉桂酸辛酯)                    7.5％

-水，加至100％

根据本发明的实施例5

抗皱纹柔肤水

-实施例1d)中所得的唤妍草的脱脂含醇或含水-醇提取物  2％

-丁二醇                                            3％

-EDTA                                              0.1％

-增溶剂                                            1％

-香精                                              0.3％

-乙醇                                              5％

-紫外线-屏蔽剂(苯甲酮-4)                           0.13％

-水，加至100％

根据本发明的实施例6

用于抵抗紫外线照射的面部化妆粉

-实施例1d)中所得的唤妍草脱脂含醇或含水-醇提取物  0.25％

-滑石                                            17％

-云母                                            20％

-绢云母                                          20％

-颜料                                            8％

-有机粉末(尼龙)                                  20％

-硅土                                            8.75％

-硅酮或矿物油                                    3％

-紫外线屏蔽剂(甲氧基肉桂酸辛酯)                  3％

根据本发明的实施例7

抗皱处理粉底

-实施例1d)中所得的唤妍草的脱脂含醇或含水-醇提取物  2％

-聚甘油基-4异硬脂酸酯、鲸蜡基二甲基硅氧烷共聚醇(cetyldimethicone copolyol)和月桂酸正己酯                    5.1％

-环戊硅氧烷和环己硅氧烷                            5.0％

-鲸蜡基二甲基硅油                                  1.0％

-辛酸/癸酸甘油三酯                                 2.2％

-硬脂酸辛酯                                        1.4％

-矿物油                                            3.5％

-氢化蓖麻油                                        1.2％

-蜂蜡                                    0.8％

-聚甲基丙烯酸甲酯                        1.1％

-氧化铁                                  0.45％

-二氧化钛                                5.2％

-NaCl                                    0.6％

-香精                                    0.1％

-紫外线屏蔽剂(肉桂酸辛酯)                3％

-水，加至100％