一种从常春藤中制备常春藤苷C的方法

摘要

一种从常春藤中制备常春藤苷C的方法，将常春藤茎干燥、粉碎后加入乙醇－水混合溶剂作为提取溶剂回流提取得常春藤粗提物，将粗提物放入超声波发生器加水溶解，用乙醚、乙酸乙酯和正丁醇分别萃取三次，萃取液用乙醇溶解，在搅拌下逐渐加入乙酸乙酯至不再产生沉淀为止，静置，过滤收集沉淀物；沉淀物用甲醇溶解，以硅胶为固定相，用氯仿与甲醇的混合液为流动相进行柱层析洗脱，收集洗脱液，冷冻干燥得到纯度大于98％的常春藤苷C。本发明工艺条件简单，可获得的纯度高达98％的常春藤苷C单一化合物，适合大量制备常春藤苷C。

说明书

技术领域：

本发明涉及一种制备常春藤苷C的方法，具体是一种从常春藤中制备常春藤苷C的方法。属于中药制备领域。

背景技术：

常春藤(Hedera nepalensis k.)为五加科常春藤属植物，分布于华中、华南、西南及甘、陕等省，常春藤苷C有显著的生物活性，具有祛风，利湿，平肝，解毒等功能，具有很大的药用价值和市场前景。目前，常春藤叶提取物已成功地用于治疗呼吸道疾病，因为该提取物显示出解痉、祛痰及抗阻塞的作用。这些作用特别归因于常春藤叶提取物的重要活性成分，该成分属于三萜皂苷类，其中的主要皂苷为双糖链的常春藤苷C(Hederacoside C)，分子式C₅₉H₉₆O₂₆，分子量1221。由于常春藤苷C显著的生物活性作用，其已成为人们重视的天然活性成分，具有很大的药用价值和市场前景。

中国专利CN 1384110A公开了一种常春藤苷元的制备方法，主要包括将常春藤苷通过酸水解降解为常春藤苷元，而且该发明是从中药川续断中制备常春藤苷元。CN 1852724A和CN 1856317A公开了从常春藤叶制备提取物的方法以及用这种方法制备的提取物，但两方法均是经过简单的醇提，制备的是含常春藤苷C百分之十几的常春藤提取物。此外，DE 3025223A1公开了基于常春藤提取物的药物制剂以及制备它们的方法，所述制剂中含有作为活性成分的60％含量的含常春藤苷C的提取物或α-常春藤素。该提取物用丙酮和甲醇获得，为了将常春藤苷C转化为α-常春藤素，在上述申请中，用氢氧化钠或氢氧化钾进行水解。

发明内容

针对现有方法存在的不足，本发明的目的是提供一种从常春藤中制备常春藤苷C单体的方法。

一种从常春藤中制备常春藤苷C的方法，具体方法步骤如下：

(1)将常春藤茎、叶进行收集、干燥和粉碎；

(2)加入乙醇浓度为30％-95％的乙醇-水混合溶剂作为提取溶剂回流提取2次，其用量按体积比分别为原料的6-10倍、3-7倍，提取时间分别为2-4小时、1-3小时，合并两次提取液，减压回收溶剂，得常春藤粗提物；

(3)将常春藤粗提物放入超声波发生器加水溶解，将该水溶液依次用等体积乙醚、乙酸乙酯和正丁醇分别萃取三次；

(4)合并正丁醇萃取液，减压浓缩至近干后用95％乙醇溶解；

(5)在搅拌下往95％乙醇溶解液中逐渐加入乙酸乙酯至不再产生沉淀为止，静置，过滤收集沉淀物；

(6)沉淀物用甲醇溶解，以硅胶为固定相，用氯仿与甲醇的混合液为流动相进行柱层析洗脱，氯仿与甲醇体积比50-70∶50-30；

(7)收集洗脱液，将收集到的含常春藤苷C的洗脱液进行浓缩，冷冻干燥得到纯度大于98％的常春藤苷C。

本发明工艺条件简单，可获得的纯度高达98％的常春藤苷C单一化合物，适合大量制备常春藤苷C。

具体实施方式

下面结合发明内容提供具体实施例，对本发明作进一步说明。

实施例1

取干操常春藤茎、叶500g，粉碎，用30％乙醇4000mL、2000mL在80℃下先后加热回流二次，回流时间分别为3小时、2小时。合并两次提取液，减压回收溶剂，得常春藤粗提物。将常春藤粗提物放入超声波发生器加水150mL溶解，将该水溶液依次用等体积乙醚、乙酸乙酯和正丁醇分别萃取3次。合并三次正丁醇萃取液，减压浓缩至近干后用95％乙醇80mL溶解。在搅拌下往95％乙醇溶解液中逐渐加入乙酸乙酯至不再产生沉淀为止，静置2小时后过滤收集沉淀物。沉淀物用少量甲醇溶解，以硅胶为固定相，用氯仿∶甲醇等于65∶35的混合液为流动相进行柱层析洗脱。收集洗脱液，将收集到的含常春藤苷C的洗脱液进行浓缩，冷冻干燥得到常春藤苷C 1.0759g，经高效液相色谱检测常春藤苷C含量为98.2％。

实施例2

取干操常春藤茎、叶300g，粉碎，用60％乙醇3000mL、1800mL在80℃下先后加热回流二次，回流时间分别为3小时、2小时。合并两次提取液，减压回收溶剂，得常春藤粗提物。将常春藤粗提物放入超声波发生器加水100mL溶解，将该水溶液依次用等体积乙醚、乙酸乙酯和正丁醇分别萃取3次。合并三次正丁醇萃取液，减压浓缩至近干后用95％乙醇50mL溶解。在搅拌下往95％乙醇溶解液中逐渐加入乙酸乙酯至不再产生沉淀为止，静置2小时后过滤收集沉淀物。沉淀物用少量甲醇溶解，以硅胶为固定相，用氯仿∶甲醇等于65∶35的混合液为流动相进行柱层析洗脱。收集洗脱液，将收集到的含常春藤苷C的洗脱液进行浓缩，冷冻干燥得到常春藤苷C 0.61849g，经高效液相色谱检测常春藤苷C含量为98.1％。

实施例3

取干操常春藤茎、叶400g，粉碎，用95％乙醇3200mL、2000mL在80℃下先后加热回流二次，回流时间分别为3小时、2小时。合并两次提取液，减压回收溶剂，得常春藤粗提物。将常春藤粗提物放入超声波发生器加水130mL溶解，将该水溶液依次用等体积乙醚、乙酸乙酯和正丁醇分别萃取3次。合并三次正丁醇萃取液，减压浓缩至近干后用95％乙醇70mL溶解。在搅拌下往95％乙醇溶解液中逐渐加入乙酸乙酯至不再产生沉淀为止，静置2小时后过滤收集沉淀物。沉淀物用少量甲醇溶解，以硅胶为固定相，用氯仿∶甲醇等于65∶35的混合液为流动相进行柱层析洗脱。收集洗脱液，将收集到的含常春藤苷C的洗脱液进行浓缩，冷冻干燥得到常春藤苷C 0.8526g，经高效液相色谱检测常春藤苷C含量为98.2％。