人胚胎干细胞体外诱导分化为肝细胞的方法

摘要

本发明提供一种人胚胎干细胞(hES)体外定向诱导分化为肝细胞的方法，首先利用hES细胞的高度自我更新和增殖的生物学特性，采用胶原酶IV消化法进行传代扩增，获得大量干细胞；再将hES细胞接种到低吸附性的细菌皿中形成成熟拟胚体(EB)；然后将成熟的囊性EB用0.25胰酶－0.02％EDTA消化为单个细胞后接种到预先包被有I型胶原的组织培养皿，以含有地塞米松和人胰岛素的条件诱导液培养，并观察鉴定其向肝细胞方向分化。本发明提供hES细胞高效分化为肝细胞的方法，同时此法使得后续的鉴定工作更加简单、有效，为干细胞移植或生物人工肝治疗重症肝炎、肝衰竭等疾病奠定了基础。