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一种筛选基因组DNA中差异位点及其侧翼序列的方法

摘要

本发明公开了一种筛选基因组DNA中差异位点及其侧翼序列的方法。该方法包括以下步骤:1)用能产生粘性末端的限制性核酸内切酶消化参比基因组DNA和待测基因组DNA;2)根据所述粘性末端设计接头H,使其与所述带有粘性末端的DNA片段连接;3)以所述连接产物作为模板,利用引物H1进行PCR扩增;4)先利用S1核酸酶切割含有错配碱基的异源双链DNA;然后再加入所述限制性核酸内切酶;5)对所述待测基因组DNA中差异位点侧翼序列片段加dATP尾;6)对所述具有dATP尾的待测基因组DNA中差异位点侧翼序列片段连接接头T;7)利用引物H1和T1扩增所述待测基因组DNA中差异位点侧翼序列片段,并进行测序,获得所述侧翼序列;确定所述待测基因组DNA中的差异位点。

著录项

  • 公开/公告号CN101012482A

    专利类型发明专利

  • 公开/公告日2007-08-08

    原文格式PDF

  • 申请/专利权人 中国农业大学;

    申请/专利号CN200710063835.1

  • 发明设计人 王涛;李春雨;董江丽;

    申请日2007-02-12

  • 分类号C12Q1/68(20060101);C12P19/34(20060101);

  • 代理机构11245 北京纪凯知识产权代理有限公司;

  • 代理人关畅;任凤华

  • 地址 100094 北京市海淀区圆明园西路2号

  • 入库时间 2023-12-17 18:54:43

法律信息

  • 法律状态公告日

    法律状态信息

    法律状态

  • 2009-11-04

    发明专利申请公布后的驳回

    发明专利申请公布后的驳回

  • 2007-10-03

    实质审查的生效

    实质审查的生效

  • 2007-08-08

    公开

    公开

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