从三七中制备三醇组人参皂苷和二醇组人参皂苷的方法

摘要

本发明公开了从三七中提取分离三醇组人参皂苷和二醇组人参皂苷的新方法。将三七总皂苷上氧化铝柱，用水或低浓度有机溶剂的水溶液洗脱获得三醇组人参皂苷，然后用四氢呋喃的水溶液洗脱获得二醇组人参皂苷。

说明书

技术领域

本发明涉及从三七中提取分离三醇组人参皂苷和二醇组人参皂苷的方法，属于天然药物化学研究领域。

背景技术

到目前为止人们从三七中分得多种人参皂苷，其中包括人参皂苷Rb₁、人参皂苷Rb₂、人参皂苷Rb₃、人参皂苷Rc、人参皂苷Rd等二醇组人参皂苷和人参皂苷Re、三七皂苷R1、人参皂苷Rg₁等三醇组人参皂苷，其中人参皂苷Rg₁和人参皂苷Rb₁含量最高，其次是三七皂苷R1。因此三七是提取分离三七皂苷R1、人参皂苷Rg₁和人参皂苷Rb₁单体的最好原料。将三七中的人参皂苷分成主要含有人参皂苷Re、三七皂苷R1、人参皂苷Rg₁等的三醇组人参皂苷和主要含有人参皂苷Rb₁、人参皂苷Rb₂、人参皂苷Rb₃、人参皂苷Rc、人参皂苷Rd等的二醇组人参皂苷两部分，不仅有可能获得具有新的生物活性的有效部位，也有利于从三七中提取分离三七皂苷R1、人参皂苷Rg₁和人参皂苷Rb₁单体。

发明内容

本发明提供一种从三七中获得三醇组人参皂苷和二醇组人参皂苷的简便方法。具体是将三七总皂苷上氧化铝柱，用水或有机溶剂的水溶液洗脱，洗脱液回收溶剂，获得主要由人参皂苷Re、三七皂苷R1和人参皂苷Rg₁组成的三醇组人参皂苷，然后用四氢呋喃的水溶液洗脱，洗脱液回收溶剂，获得主要由人参皂苷Rb₁、人参皂苷Rb₂、人参皂苷Rb₃、人参皂苷Rc和人参皂苷Rd组成的二醇组人参皂苷。获得的三醇组人参皂苷和二醇组人参皂苷可用于制备药物组合物、保健食品及人参皂苷单体。

目前从三七中提取分离总皂苷，主要采用大孔吸附树脂法。即三七加水煎煮提取，提取液过大孔吸附树脂吸附，乙醇洗脱，洗脱液回收溶剂，得三七总皂苷。当然还可以采用水提醇沉法、醇提水沉法等。本发明优先采用大孔吸附树脂法。把利用上述已知方法获得的三七总皂苷上氧化铝柱，先用水洗脱，这时被洗脱下来的成分是人参皂苷Re、三七皂苷R1和人参皂苷Rg₁，其它人参皂苷仍然被吸附在氧化铝上，洗脱液回收溶剂，获得主要含有人参皂苷Re、三七皂苷R1和人参皂苷Rg₁的三醇组人参皂苷。用水将人参皂苷Re、人参皂苷Rg₁洗脱完全后用四氢呋喃的水溶液洗脱，这时人参皂苷Rb₁、人参皂苷Rb₂、人参皂苷Rb₃、人参皂苷Rc、人参皂苷Rd等二醇组人参皂苷被洗脱下来，洗脱液回收溶剂，获得主要含有人参皂苷Rb₁、人参皂苷Rb₂、人参皂苷Rb₃、人参皂苷Rc、人参皂苷Rd等的二醇组人参皂苷。为了获得三醇组人参皂苷，也可以用有机溶剂的水溶液洗脱，但其浓度不能太高，最好低于35％，否则除了三七皂苷R1、人参皂苷Re和人参皂苷Rg₁外人参皂苷Rd等二醇组人参皂苷也同时被洗脱下来，达不到分离的目的。可以采用的有机溶剂有乙醇、甲醇、丙酮、正丙醇以及异丙醇或它们的混合物。

本发明的最佳方案是先用水洗脱，然后用四氢呋喃的水溶液洗脱。

具体实施方式

实施例1

三七5公斤，加水煎煮提取三次，每次加水量分别是三七重量的16、12、8倍，煎煮时间分别是2、1.5、1小时，合并煎煮液，过D4020大孔吸附树脂吸附，用水冲净，85％乙醇洗脱至洗脱液中检测不到人参皂苷Rg₁和人参皂苷Rb₁(硅胶薄层层析检测，正丁醇∶乙酸乙酯∶水＝4∶1∶5，上层，10％硫酸喷雾，105℃加热显色，以下相同)为止，回收乙醇，得三七总皂苷431克。

取三七总皂苷10克，用水溶解后上氧化铝柱，先用水洗脱至洗脱液中检测不到人参皂苷Re、人参皂苷Rg₁为止，洗脱液过D4020大孔吸附树脂吸附，用水冲净，85％乙醇洗脱至洗脱液中检测不到人参皂苷Rg₁和人参皂苷Re为止，洗脱液减压回收溶剂，得三醇组人参皂苷3.9克。经TLC检查，其中主要成分是人参皂苷Re、人参皂苷Rg₁和三七皂苷R1。然后用50％的四氢呋喃的水溶液洗脱至洗脱液中检测不到人参皂苷Rb₁为止。洗脱液减压回收溶剂，得二醇组人参皂苷5.0克。经TLC检查，其中主要成分是人参皂苷Rb₁、人参皂苷Rb₂、人参皂苷Rb₃、人参皂苷Rc、人参皂苷Rd等二醇组人参皂苷。

实施例2

取三七总皂苷10克，用水溶解后上氧化铝柱，先用10％的乙醇水溶液洗脱至洗脱液中检测不到人参皂苷Re、人参皂苷Rg₁为止，洗脱液过AB-8大孔吸附树脂吸附，用水冲净，85％乙醇洗脱至洗脱液中检测不到人参皂苷Rg₁和人参皂苷Re为止，洗脱液减压回收溶剂，得三醇组人参皂苷4.1克，经TLC检查，其中主要成分是人参皂苷Re、人参皂苷Rg₁和三七皂苷R1。然后用70％的四氢呋喃的水溶液洗脱至洗脱液中检测不到人参皂苷Rb₁为止。洗脱液减压回收溶剂，得二醇组人参皂苷4.7克。经TLC检查，其中主要成分是人参皂苷Rb₁、人参皂苷Rb₂、人参皂苷Rb₃、人参皂苷Rc、人参皂苷Rd等二醇组人参皂苷。

实施例3

取三七总皂苷10克，用水溶解后上氧化铝柱，先用10％的甲醇水溶液洗脱至洗脱液中检测不到人参皂苷Re、人参皂苷Rg₁为止，洗脱液过AB-8大孔吸附树脂吸附，用水冲净，75％乙醇洗脱至洗脱液中检测不到人参皂苷Rg₁和人参皂苷Re为止，洗脱液减压回收溶剂，得三醇组人参皂苷4.0克，经TLC检查，其中主要成分是人参皂苷Re、人参皂苷Rg₁和三七皂苷R1。然后用80％的四氢呋喃的水溶液洗脱至洗脱液中检测不到人参皂苷Rb₁为止。洗脱液减压回收溶剂，得二醇组人参皂苷5.2克。经TLC检查，其中主要成分是人参皂苷Rb₁、人参皂苷Rb₂、人参皂苷Rb₃、人参皂苷Rc、人参皂苷Rd等二醇组人参皂苷。

实施例4

取三七总皂苷10克，用水溶解后上氧化铝柱，先用15％的正丙醇水溶液洗脱至洗脱液中检测不到人参皂苷Re、人参皂苷Rg₁为止，洗脱液过AB-8大孔吸附树脂吸附，用水冲净，75％乙醇洗脱至洗脱液中检测不到人参皂苷Rg₁和人参皂苷Re为止，洗脱液减压回收溶剂，得三醇组人参皂苷3.8克，经TLC检查，其中主要成分是人参皂苷Re、人参皂苷Rg₁和三七皂苷R1。然后用80％的四氢呋喃的水溶液洗脱至洗脱液中检测不到人参皂苷Rb₁为止。洗脱液减压回收溶剂，得二醇组人参皂苷5.0。经TLC检查，其中主要成分是人参皂苷Rb₁、人参皂苷Rb₂、人参皂苷Rb₃、人参皂苷Rc、人参皂苷Rd等二醇组人参皂苷。

实施例5

取三七总皂苷10克，用水溶解后上氧化铝柱，先用13％的异丙醇水溶液洗脱至洗脱液中检测不到人参皂苷Re、人参皂苷Rg₁为止，洗脱液过AB-8大孔吸附树脂吸附，用水冲净，75％乙醇洗脱至洗脱液中检测不到人参皂苷Rg₁和人参皂苷Re为止，洗脱液减压回收溶剂，得三醇组人参皂苷3.4克，经TLC检查，其中主要成分是人参皂苷Re、人参皂苷Rg₁和三七皂苷R1。然后用80％的四氢呋喃的水溶液洗脱至洗脱液中检测不到人参皂苷Rb₁为止。洗脱液减压回收溶剂，得二醇组人参皂苷5.4克。经TLC检查，其中主要成分是人参皂苷Rb₁、人参皂苷Rb₂、人参皂苷Rb₃、人参皂苷Rc、人参皂苷Rd等二醇组人参皂苷。

实施例6

取三醇组人参皂苷1.0克，湿法装柱，干法上样，以乙酸乙酯∶甲醇＝9∶1为洗脱液进行硅胶柱层析，TLC检测，分别收集人参皂苷Rg₁、三七皂苷R1、人参皂苷部分，回收溶剂得人参皂苷Rg₁365毫克，三七皂苷R1102毫克，人参皂苷Re98毫克。

实施例7

取二醇组人参皂苷1.0克湿法装柱，干法上样，以乙酸乙酯∶甲醇＝9∶1至1∶1为流动相进行硅胶柱层析梯度洗脱，TLC检测，分别收集人参皂苷Rb₁、人参皂苷Rb₂、人参皂苷Rb₃、人参皂苷Rc、人参皂苷Rd部分，回收溶剂，得人参皂苷Rb₁316克、人参皂苷Rb₂83克、人参皂苷Rb₃210毫克、人参皂苷Rc166毫克、人参皂苷Rd63毫克。

本发明利用氧化铝将三七中的三七皂苷R1、人参皂苷Re和人参皂苷Rg₁同其他人参皂苷分开，从而获得三醇组人参皂苷和二醇组人参皂苷，具有分离方法简便，成本低、操作简单等优点。