制备反式－或顺式－二铵二氯二羟合铂(Ⅳ)的方法及其用于制备药物有效物质的用途

摘要

本发明涉及一种制备制备反式－或顺式－二铵二氯二羟合铂(IV)及其衍生物的方法。在低于30℃温度下，使反式－或顺式－二铵二氯合铂(II)与含有＞30％过氧化物的溶液反应，将得到的产物溶解在无机酸中，接着通过碱溶液沉淀。

说明书

本发明涉及一种制备反式-或顺式-二铵二氯二羟合铂(IV)及由这些化合物衍生的盐和衍生物的方法，本发明还涉及这些化合物在与细胞生长、细胞分化和/或细胞分裂相关的疾病、特别是肿瘤的预防、治疗、过程控制和术后处理中的用途。

众所周知，金属，例如钼、矾，特别是金和铂可以用于治疗急性或慢性疾病，例如风湿病、肿瘤或自身免疫疾病。所使用的金属中有很多是以络合物-化合物的形式与要治疗的生物组织接触使用，在很多情况下是通过口服给药。

包含这些金属的络合物-化合物很难以所需要的药物纯度制备。大量已公开的制备方法，或者无法以足够的药物纯度生成化合物，或者会生成大量副产物，导致在生物体中产生不希望的副作用。特别是通过公知的方法，无法以期望的纯度或在没有副产物的情况下制备药学上有兴趣的顺式-和反式氧代-铂-化合物(SU1137698A1，SU1021116A1)。在SU1137698A1中公开了用于制备顺式-二氨基二氯二羟合铂(IV)的方法。在该公开的方法中获得了纯度为99％-99.6％的期望的终产物。

在现有技术中，还公开了另外的顺式-铂化合物的酰基衍生物(Kelland etal.，Cancer Research，1992)。根据Kelland等人的教导，不是酰基残基，而是在氮原子残基上的取代基对于化合物治疗卵巢癌-细胞株(Zelllinien)起重要作用。根据作者的观点，在氮原子残基上的取代基与化合物的细胞毒素活性之间存在联系。随着碳原子的数量增加，氮原子残基上的取代基也提高顺式-铂化合物的细胞毒素活性。也就是说，根据Kelland等人的实施方式，本领域的技术人员无法说明将酰基残基替换为其它的化合物，例如烷基残基的机理，因为本领域技术人员的注意力都被Kelland等人引向氮原子残基的取代基上。因此，根据Kelland等人，本领域技术人员持续地将具有尽可能多数量碳原子的取代基作为氮原子残基上的取代基插入到每一个顺式-铂化合物中。根据Kelland等人，特别优选的是环状化合物，根据本领域技术人员的解释，尤其是在顺式-铂化合物中通过胺-配位体-取代基插入非常多环的化合物。

因此，本发明的任务是，提供一种可以简单、安全可靠和有效地制备顺式-或反式-氧代-铂-化合物的方法。

本发明通过如下所述的制备顺式-或反式-二铵二氯二羟合铂(IV)或二铵二氯反式-二羟合铂(IV)及其衍生物的方法解决了本发明的任务，其中，在30℃以下的温度下，使顺式-或反式-二铵二氯合铂(II)与含有＞30％的过氧化物的溶液反应，将由此得到的产物溶解在无机酸中，接着通过碱溶液沉淀。

出人意料的是，通过含有＞30％的过氧化物的溶液与相对低的温度，即低于30℃的温度的技术特征的组合，可以简单且安全可靠地制备氧代-顺式-铂-和氧代-反式-铂-化合物，其中仅产生少量不期望的副产物。在根据本发明的方法中，使用顺式-或反式-二铵二氯合铂(II)-化合物作为起始化合物，使其转变成相应的顺式-或反式-形式的二铵二氯-反式二羟合铂(IV)。优选的是，将含有过氧化物的溶液在长时间内，优选连续地添加到起始化合物中。在这些含有过氧化物的溶液中，可以包括在反应期间释放出过氧化物的溶液，或者基于其特定结构而表现的功能类似物的溶液，例如过氧化氢溶液或高氯乙酸溶液。

在根据本发明的方法中，在安全可靠地进行反应的同时，可以获得反应产物的高产量和纯度。与公知的方法相比，例如形成泡沫和反应混合物的喷溅被避免，而形成泡沫和反应混合物的喷溅会导致铂的损耗。所得产物的高纯度使其可以良好地被再处理形成药物有效物质，例如盐和衍生物。显而易见，本发明的方法还适用于在工业中或在大规模生产中制备所需的化合物。

在根据本发明的方法中，在低温下，必要时在冷却下，向起始物质中多次加入特别高浓度的过氧化氢溶液，并反应较长时间，例如数天。通过这些反应步骤，可以获得固体产物例如第一沉淀物，通过添加无机酸使其溶解。接着用优选浓度的碱溶液产生沉淀。

接着可以洗涤所得的产物并真空干燥。

即，通过顺式-或反式-二铵二氯合铂(II)的反应而获得的产物是溶液或固体，其中，获得的产物优选为第一沉淀物。使所得的产物与无机酸，例如磷酸或硫酸反应。当在获得的产物中存在沉淀时，用无机酸尽可能地将这些沉淀溶解。接着，将这些用无机酸溶解的沉淀通过碱溶液，例如浓缩的氢氧化钠溶液沉淀形成第二沉淀物。对顺式-或反式-二铵二氯二羟合铂(IV)沉淀物进一步处理获得所得到的反应产物的期望的其它用途，且其是本领域技术人员公知的。

在本发明的一个优选实施方式中，含有过氧化物的溶液是高浓度的过氧化氢溶液。该过氧化氢溶液优选的是＞30％的过氧化氢溶液，特别优选的是35％的过氧化氢溶液。如本领域技术人员所公知的，过氧化氢溶液还可以含有其它的成分，从而提高其氧化能力。例如优选的可以使用由30％的过氧化氢和70％的高氯乙酸组成的溶液。不言而喻，还可以使用含有高氯乙酸而不含有过氧化氢溶液。除了过氧化氢和高氯乙酸以外的大量的功能类似的生成过氧化物或制备过氧化物的化合物和溶液，例如过氧化钠或过氧化钾，都是本领域技术人员公知的。

在本发明的另一个优选的实施方式中，二铵二氯合铂(II)以顺式或反式的形式与含有过氧化物的溶液，优选过氧化氢溶液在室温下进行反应。就本发明而言，室温为20℃-29℃，优选为23℃-27℃，特别优选为24℃-25℃。所述的室温，例如在本发明中对其的理解，并不是一个固定的温度范围。根据其它的工艺方法的参数，在本发明中，室温还可以低一些或高一些。

特别优选的是，顺式-或反式-二铵二氯合铂(II)的反应或根据本发明所有的方法在低于20℃，优选在低于15℃，特别优选在低于10℃，最好是在低于7℃下进行。此外，非常特别优选的是，反应在用冰冷却下进行，使得温度达到大约4℃。但冷却并不是必须达到4℃，在冷却的过程中能抑制大量副产物的产生。

在本发明的另一个优选的实施方式中，作为无机酸使用下面所述的酸，其能够将由含有过氧化物的溶液与顺式-或反式-二铵二氯合铂(II)反应得到的产物溶解。在这种情况下，优选的是硫酸。不言而喻，还可以使用其它本领域技术人员公知的无机酸，例如磷酸、硝酸、碳酸等。这些无机酸的所期望的浓度可以由本领域技术人员容易地确定。上述酸的数量和浓度应这样来选择，即，尤其是所得到的产物，首先是第一沉淀物可以被溶解。优选其浓度这样来选择，即只需要使用非常少的无机酸，例如0.5N硫酸这样刚刚足够的量。

在本发明一个优选的实施方式中，作为碱溶液使用氢氧化钠溶液。优选的是，该氢氧化钠溶液为25％、30％、33％或35％的氢氧化钠溶液。如本领域技术人员所公知的那样，除了氢氧化钠溶液之外，还可以使用所有其它的碱性化合物，以将用无机酸获得的产物沉淀。在这种情况下，碱溶液应这样来选择，即，使得终产物可以是纯净的，而且可以仅产生少量的副产物。本领域技术人员可以通过惯用的实验进行确定。

在本发明的另一个实施方式中特别优选的是，反式-或顺式-二铵二氯合铂(II)在多次加入含有过氧化物的溶液，尤其是高浓度过氧化氢溶液下，在冷却下反应12-96小时，优选的是24-48小时。其中，首先冷却是指温度不持续超过30℃。不过，在一定情况下该温度可以短暂地超过30℃并且这是期望的。优选的是，冷却在工业规模上是有效的并且可以安全可靠、价格低廉地实现，例如采用冰水或冰水-盐混合物的冷却。该冷却优选这样来选择，即，可以使得尤其是高浓度过氧化氢溶液与起始物质反应，从而可以进行能很好控制的化学反应。在本发明的意义上，可以控制是指不会发生剧烈的化学反应，这种剧烈的化学反应例如会使铂金属以喷溅等形式从反应混合物中损失掉。根据起始物质的浓度和所选择的种类，优选的冷却温度可以在低于10℃的温度，特别优选为3℃-7℃的温度。本领域技术人员可以通过对终产物、必要时还有所产生的副产物的纯度的分析而容易确定，是整个反应还是仅有反应的一个步骤在该温度下进行。例如优选的是，在3℃-7℃的温度范围，仅进行起始物质与含有过氧化物的溶液，例如过氧化氢溶液的反应；同样优选的是，还可以在该温度范围内进行全部本发明的方法。

在本发明的另一个实施方式中优选的是，通过用惯用的方法确定低于30℃的适宜的反应温度和含有过氧化物的溶液的适当浓度，反应产物的产量可以高于反式-或顺式-二铵二氯二羟合铂(IV)理论产量的60％，优选高于65％，特别优选高于67％。

本发明还涉及下式化合物

式中，x₁、x₂＝钙、镁、钠、钾、锂、烷基和/或芳基残基。

该通式化合物可以具有彼此完全不同的结构。例如可以是，当x₁和x₂＝钙和/或镁残基时，每一个2价的阳离子通过两个铂络合物的氧分子彼此相连，使得两个络合物化合物相连。还可以是，当x₁和x₂例如是钠或锂残基时，存在仅具有一个铂络合物的化合物。还可以优选的是，x₂为两价的阳离子，例如钙或镁，具有一个中心原子铂的两个络合物彼此相连，且x₁为钠、钾、锂、烷基和/或芳基残基。从而还可以在一个化合物中，获得具有1价、2价或3价的离子或具有1价或2价的离子、或具有1价、2价离子以及烷基和/或芳基残基的由本发明方法获得的碱式顺式-或反式-二铵二氯二羟合铂(IV)盐。优选的盐是下述的盐，即，作为阳离子，含有元素周期表的1-5主族的元素或1-8副族的元素。特别优选的是使用钾、锂、钠、镁、钡、锌、锰、银、铜、矾或钙的盐，其中阴离子例如可以是氯化物、硫酸盐、磷酸盐、硝酸盐或碳酸盐等。本领域技术人员可以使用其它公知的元素形成盐，例如元素周期表的1-5主族的所有元素以及1-8副族的元素。元素周期表中所有的元素均可以形成顺式-氧代铂的盐。优选烷基残基例如是甲基、乙基或丙基残基，优选芳基残基为苯基、萘基或蒽基残基。盐和衍生物，尤其是当其由根据本发明的方法制备的碱生成时，与顺式-或反式-二铵二氯二羟合铂(IV)相比具有很多优点。出人意料的是，盐与碱相比能够良好地溶解，这使得其适合与其它的活性物质或维他命或其它公知的药剂，例如抗癌剂联用。尤其令人惊讶的是，根据本发明的盐在0.1N HCl中具有比相应的碱好许多倍的溶解性。这样的浓度相应于胃酸的浓度，也就是说，尤其是在其制成药剂通过口服方式等给药时，根据本发明的盐在胃中能良好地溶解。特别优选的是，为了治疗胃癌或为了进行保护，本发明的化合物可以通过胃吸收给药到达机体的不同区域。与碱相比，由碱获得的盐和衍生物具有高的生物利用率，在小剂量下具有高的活性，从而具有小的副作用。在重要的代谢器官-例如肝或肾-中的停留时间，盐比原始化合物还要短。盐，尤其是在1价或2价的阳离子与本发明的化合物形成的结构，例如在肾和肝中产生了较少的加合物，因此有较小的肾毒性或对肝的微弱毒性。此外，还适合用于胃-肠道。然而，这些优点并不限于通过1价或2价的阳离子获得的盐。本发明的化合物尤其可以用于癌症的预防和治疗。因此，本发明还涉及本发明的化合物在医药中的用途，尤其是用于制备药物。

将本发明的化合物以治疗量与生物体接触；在这样的情况下，本发明的化合物用作药剂或药物，从而在本发明的上下文中的这些概念可以认为是同义的。术语治疗量，是指使用的量能够避免或者改善症状的紊乱或相应的病理学生理状况。在本发明某些适宜的实施方式中，使用的量足以阻止癌的生长，基本能妨碍或避免癌的扩大，癌的血管生成、癌的侵入和/或癌的转移，其中，癌症选自新生癌、晚期癌症和/或溃疡、淤血和水肿。因此，本发明涉及-例如阐述-含有本发明化合物、必要时还含有药物助剂的药剂或药物。

将用于健康人的预防或治疗患者所使用的本发明化合物的量处方化，并根据常规医疗实践将剂量固定，其中需要考虑处理的疾病、患者个体的情况、给药部位、给药方法等对于治疗的医生来说公知的因素。在类似的方法中，本发明化合物的给药剂量取决于癌症的性质、本发明的化合物在血浆内的体内半衰期、本发明化合物在处方中的浓度、给药途径、给药部位和给药速率、每一个个体(人类和动物)的治疗耐受性、患者的病理学效果等，例如医生或其它的本领域技术人员所公知的那样。通常，优选剂量约为每个体0.1-1000mg并进行给药，特别优选剂量为10-500mg，尤其特别优选为200-400mg，最好是300mg。还可以在前后相继的给药的过程中使用不同的剂量。

例如规定，用于本发明的化合物的治疗给药的注射途径(肌肉内、皮下或在血管中)，例如还可以将包入胶囊或负载在载体上的本发明的化合物作为气雾剂通过导管或外科橡胶管使用。其它优选的途径包括用于口服给药的悬浮剂、片剂、胶囊等，用于液体处方的市售的气雾器、冻干或aerolysierten的吸入给药和用于直肠或阴道的栓剂给药。液体处方可以是溶液、糖浆(Sirupe)、糖浆(Safte)、悬浮液、乳液、无菌的药物形式(无菌的安瓿、凿穿的瓶子、注射器、亲液胶体)和/或洗液。合适参数规格，例如剂量、路线、选择的助剂等，可以通过从患者-即人类或动物-取出的血清试样以及在使用中的测试而确定。另外，作为替代或伴随的方法，可以按照常规的方法确定免疫系统中T-细胞或其它细胞的量，以便获得患者的免疫体系的总体情况。另外，对于期望的效果，可以观察患者的临床治疗情况而得到。尤其是可以确定肿瘤的生长和转移。由于肿瘤可能带有其它病变例如合并感染，还可以通过其它的方式进行追踪。

通常，无论是含水的处方还是干燥的本发明的化合物，均可以与辅药混合，使得在例如通过溶剂处理之前获得稳定性。本发明化合物的含水溶液可以是本发明化合物的悬浮液或溶液。本领域技术人员可以使用其它公知的配制方式、给药方式和实施方式，例如凝胶、药粉、粉末、片剂、缓释剂、预混合物、乳液、浸剂配方、滴剂、浓缩液、颗粒、糖浆、小丸、大丸剂(Boli)、胶囊、气溶胶、喷雾剂和/或吸入剂。对常规癌症或白血病的处理包括对转移、侵入和/或血管生成的预防(Prophylaxe)、预防(Prvention)、诊断、减少、治疗、阶段控制和/或术后处理，其中，阶段控制是指监视和检查抗癌处理的效果。

本发明的化合物可以在含有防腐剂的溶液中使用。适宜的悬浮液或溶液的防腐剂的例子包括苯酚、苯甲醇、间甲酚、对羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸丙酯、氯苄烷胺、苄索氯铵。通常本发明化合物的配方含有大量的成分，其不会妨害稳定性的制备，且该量对有效、安全可靠的药物给药是适宜的。例如其它的药学可接受的，公知的赋形剂可以形成本发明化合物或处方的一部分。其中包括例如盐、各种填充剂、辅助的缓冲剂、螯合形成物、抗氧化剂、共溶剂等。

在本发明的一个优选实施方式中，本发明的化合物与脂质体、Siosomen和/或Niosomen联用。

其例如可以通过如下方式实现，使得本发明的化合物包含在脂质体中或固定在脂质体的表面上。如本领域技术人员所公知的，尤其是将组分耦合在脂质体的表面或插入脂质体的内部或仅仅简单地与脂质体混合时，脂质体的合成膜或天然膜可以具有免疫刺激的效果。这样的脂质体的配方可以不经肠胃(parentral)给药。这样的处方可以通过公知的方法，例如在鼻腔的黏膜上喷雾使用。通过喷雾的上述治疗处理优选适合于治疗肺癌或喉-鼻-耳癌。尤其是在鼻部给药中，本发明的化合物必须以这样的状态涂覆在黏膜上，从而使用通过黏膜或通过这样的方式进行吸收。因此，具有黏液的Vesikel必须是生物可相容的并在亲水性上具有确定的值。对于本领域技术人员而言，这样的结构例如由EP0682528公开，其教导收入本发明公开文本中。脂质体成分可以含有一种或多种其它的药物载体，这些载体选自表面活性物质和吸收促进剂，例如聚氧乙烯醇醚、胆汁酸盐及其衍生物、夫西地酸及其衍生物、油酸、卵磷脂、溶血卵磷脂、Tween^21-85等；水吸收性聚合物，例如糖原糠醛、聚乙二醇200-7500、聚乙烯吡咯烷酮、丙二醇或聚丙烯酸、明胶、纤维素及其衍生物等；能够阻止酶分解的物质，例如抑肽酶；有机溶剂，例如醇，如乙醇、甘油、苄醇等；或乙酸乙酯等；疏水剂，例如植物油、大豆油、豌豆油、可可油、玉米油、橄榄油、向日葵油、“Miglyolen”或它们的混合物等；pH-调节剂，例如硝酸、磷酸、乙酸、柠檬酸等；防腐剂和渗透压调节剂，例如甘油、氯化钠、对羟基苯甲酸甲酯、苯甲酸等；脂质体和/或乳液配方，例如卵磷脂等；微胶囊配方；促进剂，例如丁烷。

优选的是在本发明另一个实施方式中，任选将本发明的化合物彼此联用或通过载体插入脂质体中，其中，在本发明的方法中，并不是必须将化合物插入脂质体中，而是使其存在于脂质体的内部，在本发明的方法中，插入还可以是将本发明的化合物与脂质体的膜联用，例如固定在外膜上。优选在脂质体中或在其上制备本发明的化合物，其中本领域技术人员选择具有免疫刺激效果的脂质体。本领域技术人员由DE19851282公开的各种可能性，对脂质体的免疫刺激效果进行修饰。在脂质中可以是简单的脂质，例如酯和酰胺；或复杂的脂质，例如糖原脂质，如脑苷脂或神经节苷脂；鞘脂类或磷脂类。

在可以是含有本发明的化合物的药剂的组成部分的载体中，就本发明而言，可以是蛋白质，其根据抗体回应的免疫值进行刺激，还可以是本领域技术人员公知的药物助剂，例如QS21、GPI-0100或其它的皂甙，水-油-乳液，例如Montanide、多熔素、Polyagenin-化合物等，如磷酸盐缓冲的氯化钠溶液、水、各种洗涤剂、无菌溶液等。

本发明中的药剂，是在药物范围内的任何药剂，其可以用于患者的预防、诊断、治疗、阶段控制或术后处理，如果包含癌症，其能至少暂时性地确保整体状况或部分有机体状况病原体的改变。例如本发明中的药剂可以是疫苗或治疗剂。本发明中的药剂除了本发明的化合物以外，例如还可以含有可接受的盐或成分。因此，可以是例如诸如磷酸等无机酸的盐或者有机酸的盐。

此外，还可以是，所述的盐不含有羧基并且衍生于无机碱，例如氢氧化钠、氢氧化钾、氢氧化铵、氢氧化钙或氢氧化铁；或者衍生于有机碱，例如异丙胺、三甲胺、2-乙氨基乙醇、组氨酸等。液体载体的例子是无菌水溶液，其不含有其它的材料或活性成分，例如是水或如下物质：缓冲液，例如具有生理性pH的磷酸钠、生理盐水、或上述的两者，例如磷酸盐缓冲的氯化钠溶液，此外，液体载体可以不仅仅包含缓冲盐，例如氯化钠、氯化钾、葡萄糖、丙二醇、聚乙二醇等。药剂的液体成分还可以含有不包括水的液相。例如，这样的另外的液体是甘油、植物油、有机酯或水-油乳液。基于全部的药物成分，该药物成分或药剂中通常含有至少0.1重量％本发明的化合物。用于将本发明药剂给药的剂量或剂量范围是足够大的，从而获得形成中性抗体的期望的预防或治疗效果。因此，剂量不能任意确定，否则会出现不期望的副作用。通常，剂量根据患者的年龄、体质、性别而改变，并且显而易见的是，其还取决于疾病的程度。个体的剂量的确定不仅取决于原发的疾病，而且取决于出现的其它症状。确切的剂量可以由本领域技术人员根据公知的途径和方法确定，例如通过对依赖于剂量或使用途径或药物载体等的癌症发展的确定。因此，剂量可以根据患者单独确定。例如可以是患者耐受的药剂剂量，其在血浆中的范围或在单独器官中的范围为0.1-10000μm，优选为1-100μm。此外，剂量还可以取决于患者身体的重量。在一般的情况下，药剂的常规剂量为每kg体重0.1μg-100μg，优选为1-50μg/kg。此外还可以是，剂量并不取决于患者的整体，而是根据单个器官而确定。例如可以是，在将本发明的药剂例如在生物聚合物中用于单个的患者时，可以借助于手术将其填充在适宜器官的附近。本领域技术人员都知道，有很多生物聚合物可以以期望的工艺和方法将肽或重组的蛋白质释放出来。这样的凝胶例如可以含有1-1000μg本发明的氨基酸序列，例如肽或重组的蛋白质或药剂/ml凝胶组合物，优选为5-500μg/ml，特别优选为10-100μg/ml。在这样的情况中，治疗剂作为固体、凝胶状或液体状的组合物给药。

在本发明另一个优选的实施方式中，载体选自填充剂、填料、粘合剂、湿润剂、分裂剂、溶解阻滞剂、吸收促进剂、浸透剂、吸附剂和/或润滑剂。

因此，填充剂和填料优先选用淀粉、乳糖、蔗糖、葡萄糖、甘露醇和硅酸；粘合剂优先选用羧甲基纤维素、藻酸、明胶、聚乙烯吡咯烷酮；湿润剂优先选用甘油；分裂剂优先选用琼脂-琼脂、碳酸钙和碳酸钠；溶解阻滞剂优先选用石蜡；吸收促进剂优先选用季铵化合物；浸透剂优先选用鲸蜡醇和甘油单硬脂酸酯；吸附剂优先选用高岭土和膨润土；润滑剂优先选用滑石、硬脂酸钙和硬脂酸镁以及固体聚乙二醇或上述物质的混合物。

在本发明的另一个优选实施方式中，本发明的化合物作为凝胶、药粉、粉末、片剂、缓释剂、预混物、乳液、浸剂配方、滴剂、浓缩液、颗粒、糖浆、小丸、Boli、胶囊、气溶胶、喷雾剂和/或吸入剂配制和/或在这些方式使用。该片剂、糖衣药丸、胶囊、丸剂和颗粒剂可以通过含有常规的、任选的不透明剂，形成和制备涂层和外壳，使得其或有效物质仅或优选延迟至在肠道中的适宜部位吸收，其中，作为嵌入物质，可以例如是聚合物和石蜡。

本发明的药剂可以优选使用口服的易消化的剂型用于口服给药，包括胶囊、片剂、含水悬浮液和溶液，但并不限定于此。在用于口服给药的片剂的情况下，包括通常使用的载体乳糖和玉米淀粉。通常还添加润滑剂，例如硬脂酸镁。为了以胶囊的形式口服给药，中可以包含稀释剂乳糖和干燥的玉米淀粉。当以含水悬浮液口服给药时，将有效物质与乳化剂和悬浮剂联用。如果需要，可以添加适宜的甜味剂和/或调味剂和/着色剂。

必要时，有效物质-即本发明的化合物-还可以与一种或多种上述的载体物质形成微胶囊的形式。

除了有效物质以外，栓剂可以含有常规的水溶性或水不溶性载体物质，例如聚乙二醇、脂肪，如可可脂和高级酯(例如C₁₄醇与C₁₆脂肪酸的酯)或这些物质的混合物。

除了有效物质以外，软膏、糊剂、乳膏和凝胶还可以含有常规的载体物质，例如动物和植物脂肪、蜡、石蜡、淀粉、黄蓍胶、纤维素衍生物、聚乙二醇、聚硅氧烷、膨润土、硅酸、滑石和氧化锌或其混合物。

除了有效物质以外，粉剂和喷雾剂还可以含有常规的载体物质，例如乳糖、滑石、硅酸、氢氧化铝、硅酸钙和聚酰胺粉末或这些物质的混合物。喷雾剂还可以含有常规的促进剂，例如氯氟烃。

除了有效物质以外，溶液和乳液还可以含有常规的载体物质，例如溶剂、增溶剂和乳化剂，例如水、乙醇、异丙醇、碳酸乙酯、乙酸乙酯、苄醇、苯甲酸苄酯、丙二醇、1，3-丁二醇、二甲基甲酰胺、油、尤其是棉花油、豌豆油、玉米油、橄榄油、蓖麻油和芝麻油，甘油、甘油甲缩醛、四氢呋喃醇、聚乙二醇和山梨糖醇酐的脂肪酸酯或这些物质的混合物。为了不经肠胃给药，溶液和乳液还可以以无菌和血液等渗压(blutisotonischer)的形式存在。

除了有效物质以外，悬浮液还可以含有常规的载体物质，例如液体稀释剂，如水、乙醇、丙二醇；悬浮剂，如乙氧基化(ethoxilierte)的异硬脂酸醇、聚氧乙烯山梨糖醇和-脱水山梨糖醇酯、微晶纤维素、氢氧化铝、澎润土、琼脂-琼脂和黄蓍胶或这些物质的混合物。

药剂可以是无菌注射配方的形式，例如作为无菌注射的含水或含油悬浮液存在。该悬浮液还可以以本领域中公知的方法，通过使用适宜的分散剂或浸透剂(例如Tween80)和悬浮剂进行配制。无菌注射配方还可以是在无毒的非肠道吸收的稀释剂或溶剂中的无菌注射溶液或悬浮液，例如作为在1，3-丁二醇中的溶液。甘露醇、水、林格氏溶液和等渗压氯化钠溶液均属于可以使用的易消化的载体和溶剂。此外，通常使用无菌、非挥发性的油作为溶剂或悬浮介质，为了该目的，可以使用任意柔和的非挥发性的油，包括合成的一或二甘油酯。脂肪酸，例如油酸及其甘油酯衍生物能够在制备注射剂中使用，例如天然药物易消化的油，如橄榄油或蓖麻油，尤其是其聚氧乙烯化的形式。这些油溶液或悬浮液还可以含有长链醇或类似的醇作为稀释剂或分散剂。

上述的配方还可以含有着色剂、防腐剂以及气味和味道改善添加剂，例如胡椒薄荷油和桉叶油，以及甜味剂，例如糖原。本发明的化合物在所述的药物配方中，浓度为全部混合物的约0.1-99.5重量％，优选为约0.5-95重量％。

此外，所述的药物配方除了本发明的化合物以外，还可以含有其它的药物有效物质。上述药物配方的制备采用根据公知方法的常规途径，例如通过将有效物质与载体物质混合。

在人类和动物中，上述配方适用于口、鼻、直肠、区域-例如肝、脾、肾、肺等-非肠道(静脉内、肌内、皮下)、脑池内、阴道内、腹膜内、局部(粉剂、软膏、滴剂)和在空腔、Krperhhlen中注射治疗。作为适宜的配方，可以是注射溶液，用于口服治疗的溶液和悬浮液，凝胶、浸剂配方、乳液、软膏、滴剂。为了进行局部治疗，可以使用眼镜和皮肤的配方、银和其它的盐、耳部滴剂、眼膏、粉剂或溶剂。对于动物，给药还可以通过具有适宜配方的饲料或饮水进行。此外，对于人类和动物，还可以使用凝胶、药粉、粉末、片剂、缓释剂、预混物、浓缩品、颗粒、小丸、片剂、Boli、胶囊、气溶胶、喷雾剂和/或吸入剂。此外，本发明的化合物还可以添加在其它载体材料中，例如塑料、(用于局部治疗的塑料药盒)、骨胶原或骨质粉。

在本发明另一个优选的实施方式中，本发明的化合物在配方中以0.1-99.5重量％，优选为0.5-95重量％，特别优选为20-80重量％的浓度使用。即，本发明的化合物在上述的药物配方，例如片剂、丸剂、颗粒剂等中，浓度为全部混合物的0.1-99.5重量％。为了获得唯一的剂型，有效物质的量，即与载体物质联用的本发明化合物的量，可以由本领域技术人员根据治疗的对象，治疗的癌症和特定的给药方式而改变。在治疗对象或患者的状况改善后，配方中有效化合物的部分可以进行改变，使得能维持该剂型。然后，作为身体症状函数的剂量或给药的频率或两者降低，使其保持在改善的状态下。当症状缓和达到期望程度的时，治疗停止。然而，患者可以在疾病的症状消失后，在长时间的基础上停止治疗。因此，化合物部分，即在药物配方的全部混合物中的浓度，与其成分或组分乙氧发生改变，并且本领域技术人员可以根据本领域的常识进行改变和调整。

如本领域技术人员所公知的，本发明化合物可以以不同的途径与生物体，优选人类或动物接触使用。另外，如本领域技术人员所公知的，该药剂可以以不同剂量给药。因此，其给药为可以有效的控制癌症或以预防性的给药避免疾病的爆发。给药的浓度和方式可以由本领域技术人员通过路线试验确定。优选本发明化合物的给药方式是，以粉剂、片剂、汁液、滴剂、胶囊等形式口服给药，以栓剂、溶液等形式直肠给药，以注射、输液和溶液、气体吸入剂、气溶胶、粉末和膏药的形式非肠道给药，以及，以涂油膏、膏药、热敷、冲剂等局部给药。优选本发明的化合物以接触的方式用于预防或治疗。在预防的给药中，应至少能避免上述癌症的形成，从而能显著减少癌症的增殖或能基本完全消除癌症。在接触给药治疗的方式中，患者已经有了癌症，其可以消除身体中存在的癌症，或减轻该癌症。另外，对于优选的给药方式，例如为皮下、舌下、静脉内、肌内、腹膜内和/或局部给药。

在使用本发明的化合物时，除了上述浓度以外，在一个优选实施方式中，该化合物还可以以每24小时0.05-500mg/kg体重的总量使用，优选为5-100mg/kg体重。其中优选使用治疗量，其能够避免或者改善症状的紊乱或相应的病理学生理状况。使用的给药量应能避免癌症的生长。

显而易见的是，剂量取决于年龄、健康状况、受药人的重量，疾病的程度、必要的同时进行的处理方式、处理的频率和期望效果的方式和副作用。0.05-500mg/kg体重的每日剂量可以仅使用一次或多次使用，从而获得期望的结果。在包括可治疗的传染病的癌症患者的预防和治疗中，每日剂量值，例如在传染病中，可以由癌症确定，例如肝炎，尤其是B型肝炎传染病。通常，尤其是每日进行1-7次给药的药剂可以选择性地或额外的进行连续输液。这样的给药可以可以用作慢性疾病或急症的治疗。为了获得唯一的剂型，与载体物质联用的有效物质的量可以根据要治疗的对象和给药的方式改变，这是不言而喻的。优选的是，将目标剂量分成2-5次给药，其中，在每一次给药时，将具有0.05-500mg/kg体重的有效物质含量的片剂给药1-2片。不言而喻，有效物质的量还可以提高，例如为5000mg/kg的浓度。例如，片剂还可以缓释，因此每日给药的次数降低至1-3次。缓释片剂的有效物质含量可以是3-3000mg。当有效物质例如通过注射给药时，每日优选进行1-8次，通过持续输液给药时，为了使宿主与本发明化合物接触，优选每日的量为4-4000mg。优选的每日总量在人药和兽药中均是优选的。也可以不使用上述的剂量，而根据用于治疗宿主的方式和体重、疾病的方式和程度、药剂给药的方式和在给药中的时间或间隔获得。在一些情况下可以优选的是，将药剂以少于上述的量与有机体接触，在另外的情况下，上述有效物质的量必须增加。所需优选的剂量的确定以及优选物质的给药方式可以由本领域技术人员根据本领域的常识简单获得。

在本发明的另一个特别优选的实施方式中，本发明的化合物以1-80，尤其是3-30mg/kg体重的一次剂量给药。不管是每日的总量，还是每次给药的单独剂量，均可以由本领域技术人员根据本领域的知识加以改变。本发明使用的化合物，可以以上述单独的浓度和配方与饲料或饲料配方或饮用水混合用于动物的治疗中。在给药时，一次剂量所含有的有效物质的量相应为1天、半天、三分之一天、四分之一天的剂量。因此，剂量单元优选含有1、2、3或4或更多的一次剂量或0.5、0.3或0.25个单独剂量。优选本发明化合物的每日的剂量分为2-10次给药，优选为2-7次，特别优选为3-5次给药。显而易见的是，本发明的试剂也可以连续输液。

在本发明的一个特别优选的实施方式中，在本发明化合物每一次的口服给药时使用1-10个片剂或胶囊，优选为4-8个片剂或胶囊，更特别优选为6个片剂或胶囊。本发明的片剂或胶囊可以混合本领域技术人员公知的涂层和填料，并还可以这样制备，使得有效物质仅优选在受体的指定部位释放。

在本发明的另一个优选的实施方式中，本发明的化合物可以与至少一种其它公知的药剂一起使用。即，本发明的化合物在进行预防或治疗时，可以与公知的药剂结合使用。该结合使用可以是一同的，例如在一个药物配方中给药，或者也可以是分开的，例如以片剂、注射或其它的治疗方式联合的方式，在同一个时间或在不同的时间给药，从而有目的地获得期望的预防或治疗效果。这些公知的药剂，可以是能增强本发明化合物的效果的药剂。

不言而喻，本发明的化合物，尤其是药剂，还可以单独或与其它的药剂一起作为区域治疗剂，用于治疗，例如联合治疗中，例如优选在肝癌治疗中。

如本领域技术人员所公知的，提高将谷胱甘肽(Glutation)氧化或失活的药剂的浓度对于某些癌症是有益的。为了减少谷胱甘肽浓度，例如可以使用DL-Buthionin-SR-砜亚胺。

通常，本发明化合物彼此之间和/或与其他的治疗或增效剂(例如转运抑制剂和/或转运激活剂、物质转化抑制剂、用于肾排泄的抑制剂或激活剂、或葡糖化剂，例如丙磺舒、醋氨酚、阿司匹林、氯羟安定、甲氰咪呱、雷尼替丁、Colifibrat、消炎痛、酮洛芬、萘普生等)存在最佳的比例。优选的比例为如下定义的比例：在具有其它治疗剂的本发明化合物的情况下，治疗的总体效果大于单独治疗剂的效果之和。通常，优选的比例是，试剂以10∶1-1∶10、20∶1-1∶20、100∶1-1∶100、500∶1-1∶500的比例存在。有时，为了提高一种或多种其它药剂的效果，极少量的治疗剂就足够了。另外，本发明的化合物在联合使用时特别有益，尤其有利的是耐受的危险得到降低，而治疗效果得到提高。不言而喻，本发明的化合物可以与其它公知的抗癌剂一起使用。对于本领域的技术人员来说这样的药剂是公知的。因此，本发明的化合物可以与所有常规的药剂，尤其是其它的可以与癌症药剂一起使用的药剂一起使用，或者作为单独的药剂，或者作为药剂的组合，可以单独给药或联合给药。

优选的是，本发明的化合物与其它公知的药剂按照约0.005-1的比例给药。优选的是，本发明的化合物与特定的抗病毒剂以0.05-0.5份∶约1份公知的药剂一起给药。药物组合物可以以材料或作为水溶液存在，与其它的材料例如防腐剂、缓冲物质、用于调整溶液的渗透压的介质形成溶液。

优选的是，药剂还作为疫苗在癌症形成后使用或作为预防性的接种使用。接种优选在用于生物体后，能防止癌症的扩散或形成。不言而喻，还可以在有癌症症状之前或之后立刻接种，或作为治疗剂多次使用。如本领域技术人员所公知的，癌症的治疗优选可以在肿瘤形成转移时或之后进行，使得本发明方法中的疫苗或本发明药剂的给药可以在肿瘤形成后的数周、数月、数年或数十年使用。

本发明还涉及试剂盒及其在医疗中的用途。优选的是，将本发明的化合物或含有其的试剂盒用于联合治疗，尤其是用于治疗癌症。其中特别优选的是，联合治疗包括化学治疗、细胞抑制治疗和/或放射治疗。在本发明的一个特别优选的实施方式中，联合治疗是辅助的生物专一性治疗方式。更特别优选的是，治疗方式为免疫治疗。还特别优选的是，联合治疗包括基因治疗和/或含有本发明化合物的治疗。对于本领域技术人员来说，各种联合治疗，特别是用于癌症的联合治疗是公知的。例如，在联合治疗中进行细胞抑制治疗或例如在确定的癌症区域照射放射线，其中，这些治疗可以与基因治疗结合，其中使用本发明的化合物作为抗肿瘤剂。因此，可以特别优选的是，将本发明的化合物用于提高癌症细胞对细胞抑制和/或放射线的敏感性。另外优选的是，将本发明的化合物用于抑制细胞的活性、增殖和/或用于引发自然死亡和细胞循环-封闭。

在一个优选实施方式中，用于治疗或避免的肿瘤疾病或癌症选自喉-鼻-耳范围或癌症、肺、纵隔、胃肠道、泌尿生殖系统、妇科系统、胸腔、内分泌系统、皮肤、骨骼的肿瘤疾病或癌症疾病，以及软组织肉瘤、间皮瘤、黑瘤、中枢神经系统的螯生物、婴儿的肿瘤疾病或癌症、淋巴、白血病、副螯生物的并发症、无已知初生肿瘤的转移(CUP-并发症)、腹膜乳房癌素、恶性免疫缺陷和/或癌转移瘤。

在癌症中，尤其是可以治疗如下肿瘤形式：胸腺癌、前列腺癌和肠癌；所有形式的肺癌、支气管肿瘤；骨髓癌、黑瘤、肝细胞瘤、成神经细胞瘤；乳头状瘤；Apudom、迷芽瘤、鰓原瘤；恶性癌症-并发症；癌症-心脏疾病、癌(例如沃克癌、基础细胞-癌、嗜硷扁平细胞癌、Brown-Pearce癌、导管癌、埃尔利希癌、原位癌、癌-2癌、美克耳细胞癌、Schleim癌、非-小细胞支气管癌、Hafer细胞癌、乳头状癌、szirrhses癌、细支气管-小泡癌、小支气管癌、plattenepithel癌和过渡型细胞癌)；组织细胞功能性紊乱；白血病(例如涉及B-细胞白血病、总细胞白血病、中性细胞白血病、T-细胞白血病、慢性T-细胞白血病、HTLV-II-联合白血病、急性淋巴囊肿白血病、慢性淋巴囊肿白血病、肥大细胞白血病和脊髓白血病)；恶性组织细胞增殖、霍奇金癌症、非霍奇金淋巴瘤、单独血浆细胞癌；网状内皮细胞组织增殖、成软骨细胞瘤；软骨瘤、软骨肉瘤；纤维瘤、纤维肉瘤；大细胞癌；组织细胞增殖；脂肪瘤、脂肪肉瘤；白血病性肉瘤；间皮瘤；粘液瘤；粘液肉瘤；骨瘤；骨皮瘤；尤因皮瘤；滑膜瘤；腺纤维瘤；腺淋巴瘤；Karzinos肉瘤；脊索瘤、颅咽管瘤、无性细胞瘤、错构瘤、间质瘤；中肾瘤；肌肉瘤、成釉细胞瘤、牙骨质瘤；牙瘤；畸胎瘤；胸腺瘤、成绒(毛)膜细胞瘤；腺肌肉瘤、腺瘤；胆管瘤；珠光瘤；圆柱瘤；半胱胺加氧酶瘤、囊腺瘤；粒层细胞癌；Gynadroblastom；汗腺腺瘤；岛状细胞瘤；Leydig细胞癌；乳突淋瘤；塞尔托利细胞癌、囊细胞癌、平滑肌瘤；平滑肌肉瘤；成肌细胞瘤；肌瘤；肌肉瘤；横纹肌瘤；横纹肌肉瘤；室管瘤；神经节细胞瘤、神经胶质瘤；成神经管细胞瘤、脑(脊)膜瘤；神经鞘瘤；成神经细胞瘤；神经上皮瘤、纤维神经瘤、神经瘤、副神经节瘤、非嗜铬副神经节瘤、血管角质瘤、嗜酸性的成血管淋巴增殖；硬化型血管瘤；血管肉瘤；血管球瘤；血管内皮瘤；血管瘤；血管外皮细胞瘤、血管肉瘤；淋巴管瘤、淋巴管瘤、淋巴管肉瘤；松果体瘤；叶状膀胱肉瘤；血管肉瘤；淋巴管肉瘤；多发性黏液瘤、卵巢瘤；肉瘤(例如尤因肉瘤、实验、卡波济氏肉瘤和肥大细胞肉瘤)；瘤(例如骨状瘤、胸腔瘤、消化系统瘤、结肠直肠瘤、肝瘤、胰腺瘤、脑垂体瘤、睾丸瘤、眼眶瘤、头部和颈部肿瘤、中央神经系统肿瘤、耳部肿瘤、骨盆肿瘤、呼吸道肿瘤和泌尿生殖器肿瘤)；多发性神经纤维瘤和颈部平上皮结构不良。

在另一个优选的实施方式中，被治疗和避免的肿瘤疾病或癌症选自：喉-鼻-耳范围内的癌症，包括内鼻腔癌、骨鼻窦癌、鼻咽癌、唇癌、口腔癌、口咽癌、喉癌、下咽部癌、耳癌、唾液腺癌和神经节细胞瘤；肺癌，包括非-小细胞支气管癌、小细胞支气管癌、纵隔癌；胃肠道癌，包括食道癌、胃癌、胰腺癌、肝癌、胆囊癌和胆管癌、小肠癌、结肠和直肠癌和肛门癌；泌尿生殖器癌，包括肾癌、输尿管癌、膀胱癌、前列腺癌、尿道癌、阴茎和睾丸癌；妇科癌症，包括子宫颈癌、阴道癌、外阴癌、Korpus癌、恶性滋养层疾病、卵巢癌、输卵管癌(Tuba Faloppii)；腹腔癌；乳房癌；内分泌器官癌，包括甲状腺癌、副甲状腺癌、副肾外皮癌、内分泌胰腺癌；致癌性肿瘤和致癌性并发症；多内分泌瘤；骨肉瘤和软组织肉瘤；间皮瘤；皮肤癌；黑素瘤，包括的皮肤和皮内黑素瘤；中央神经系统癌；婴儿的癌症，包括视网膜细胞瘤、Wilms癌、神经纤维瘤、成神经细胞瘤、尤因肉瘤癌症族、横纹肌肉瘤；淋巴瘤，包括非霍奇金淋巴瘤、皮肤T细胞淋巴瘤、中央神经系统的基本淋巴瘤、霍奇金疾病；白血病，包括急性白血病、慢性白血病和淋巴组织白血病、血浆细胞瘤、骨髓塑料化综合症、paraneo塑料化综合症、无基本癌症的转移瘤(CUP-并发症)、peritoneale致癌性转移瘤；免疫力缺陷导致的恶性肿瘤，包括AIDS导致的恶性肿瘤，如Kaposi肉瘤、与AIDS联发的淋巴瘤、与AIDS联发的中央神经系统淋巴瘤、与AIDS联发的霍奇金疾病和与AIDS联发的肛门与生殖器癌、移植导致的恶性肿瘤；转移瘤性癌，包括脑部转移瘤、肺部转移瘤、肝部转移瘤、颈部转移瘤、胸部和perikardiale转移瘤以及恶性maligne Aszites。

在另一个优选的实施方式中，被治疗和避免的肿瘤疾病或癌症选自：乳腺癌；胃肠癌，包括胃癌、胰腺癌、小肠癌；卵巢癌；子宫颈癌；肺癌；前列腺癌；肾细胞癌和/和肝转移瘤。

以下，通过实施例进一步阐述本发明，但本发明并不限定于这些实施例。

1.顺式-二铵二氯二羟合铂(IV)的合成

将150g顺式-铂悬浮于21的三口烧瓶中的约300ml水中，在搅拌下，于2天内向其中间歇加入350ml H₂O₂(35％)。然后在约20℃下再搅拌4天。从而获得粗产物，用少量的冰水洗涤，将其溶解在正好足够量的0.5N硫酸中并用35％的NaOH使之沉淀(pH～7-8)。在冷却槽中放置过夜，从而得到黄色的结晶物质，用少量的冷水、乙醇以及乙醚洗涤并真空干燥。

产量(3次沉积)：336.79g(69.2％理论产量)

2.顺式-二铵二氯二羟合铂(IV)二钠盐的合成

在加热下，将20g(0.06Mol)顺式-二铵二氯二羟合铂(IV)溶解在约450ml的NaOH水溶液中(含有4.8g(0.12Mol)NaOH)，冷却至室温，在冷却槽中放置过夜。吸滤得到沉淀的反应产物，用少量的冷水、乙醇、最后用乙醚洗涤并真空干燥。

产量：13.6g(59.9％理论产量)

3.顺式-二铵二氯二羟合铂(IV)钙盐的合成

将氧代-铂(9.3g)悬浮于80ml水中，在添加了等摩尔量(2.1g)的氢氧化钙后，于室温下搅拌24小时，然后吸滤得到反应产物，用水、乙醇以及乙醚洗涤并真空干燥。

产量：7.7g。

4.含有烷基残基或芳基残基的铂-(IV)-化合物的合成

采用本发明方法制备的反式或顺式二铵二氯二羟合铂-(IV)-化合物(铂-(IV)-羟合-化合物)是非常不活泼的，并是一种亲核试剂，其与弱的亲电子试剂可以良好地反应。将铂-(IV)-羟合-化合物放入惰性溶剂(醚)中，并通过持续的搅拌进行混合。搅拌尤其可以通过在实验室常规搅拌装置上的电动搅拌器进行。在搅拌过的溶液中添加过量的烷基或芳基脱水物，例如苯酐(苯甲酸酐)。除了合适的脱水物以外，还可以使用相应的异氰酸酯和焦碳酸酯。将该混合物搅拌约12-48小时。只要在所选择的铂-(IV)-羟合-化合物涉及难溶的化合物，就通过启动搅拌装置的加热片，在搅拌下对化合物进行加热。任选可以通过使用强极性反应介质促进反应。在冷却之后，反应产物沉淀，可以进行过滤。根据情况进行额外的常规提纯步骤以获得期望的纯度级别。

接着，可以在实验室中对所得到的铂-(IV)-羟合-化合物的烷基或芳基衍生物测试其癌抑制效果。在抗坏血酸盐的存在下，通过放置数天，可以将铂-(IV)-化合物转变为铂-(II)-化合物。因此，本发明的衍生物还可以用作铂-(II)-化合物的前药。

5.顺式-二铵二氯二羟合铂(IV)及其盐的用途。

对不同的人类细胞系的生长抑制试验显示出顺式-铂、顺式-氧代铂、奥沙利铂(Oxaliplatin)的不同活性。下述的结果表明，顺式-氧代铂具有接近于例如奥沙利铂的活性，还具有比羰基铂强的活性。下面的表示出由顺式-铂、氧代铂、羰基铂和奥沙利铂得到的结果(所述值为以μg/ml计的IC50值，即在50％的细胞存在下的浓度，nd＝不适合，res＝耐受性＝不敏感或IC50值在直到40μg/ml下的浓度均不适宜；IC＝抑制浓度)。

表1

  细胞种类  顺式-铂  顺式-氧代铂  羰基铂  奥沙利铂  HOS骨肉瘤  nd  2.5  5  nd  SaOS骨肉瘤  nd  5  5  nd  PC3前列腺  res  7.5  10  nd  M607黑素瘤  0.3  5  10  10  M518黑素瘤  40  res  res  res  Me128黑素瘤  0.3  2.5  10  10  JVSO黑素瘤  40  10  res  res  Pancl胰腺癌  1  40  20  5  BxPC3胰腺癌  0.6  2.5  10  10  MiaPaCa2胰腺癌  1.5  5  5  5  HCT8结肠癌  5  40  res  res  HT29结肠癌  0.3  20  20  20  HCT-15结肠癌  0.3  20  res  10  A498肾细胞  1  20  res  10  C320DM结肠癌  0.3  2.5  10  0.15  Colo205结肠癌  10  res  res  1  CC1227结肠癌  0.3  10  res  0.2  MCF-7乳腺癌  2.5  5.5  res  res  T47D乳腺癌  0.3  2.5  nd  0.1

表2

  细胞种类  IC50μg/ml  顺式-氧代铂  顺式-氧代铂钠盐  T47D乳腺癌  3  18  SK-OV3卵巢癌  15  22  U 373MG星状细胞瘤  15  18  BxPC3胰腺癌  13  12  SK-OV4卵巢癌  16.2  12.8  PC3前列腺  7.5  5.3  CaCo-2结肠  1.52  2.22  CRO2B癌  3.0  10.1  HT29结肠  13.5  4.55  Du145前列腺  19.0  27.0  SW480结肠  8.2  2.5  SIM肉瘤  15.2  11.2

活性根据细胞种类而有所不同。Na盐在HT29和SW480中明显有效(约70％)，在SK-OV4、PC3和SIM中有效(约30％)，而在CaCo-2、DU145和CRO2B细胞中有微效。对于这些细胞，其中氧代铂的IC50值为10.5+/-6.4μg/ml，而钠盐为9.5+/-8μg/ml。

以下的对比实验显示出了在PC3细胞中，顺式-氧代铂与顺式氧代铂-钠相比，对剂量响应的依赖程度。

  浓度(μg/ml)  ％存活率/氧代铂  ％存活率/钠盐  40  20  10  5  15.8±2.7  56.0±6.3  87.4±11.8  105.2±10.8  0.6±0.5  33.2±3.0  77.7±2.4  109.3±9.1

这些是对PC3、SK-OV4和SIM的典型结果。Na盐在较高的浓度范围内有活性；相反，在较低的浓度下差别较弱。与氧代铂相比，顺式-氧代铂-钠想必具有略微不同的结构和其它的作用机理，其在特定的细胞种类中，比顺式-氧代铂具有高30-70％的活性或低40-50％的活性。所述顺式-氧代铂-钠的优异活性存在于高的浓度范围中(超过5μg/ml)。

顺式-氧代铂对婴儿中典型癌症的细胞种类的效果

在婴儿中主要出现白血病、成神经细胞瘤和尤因肉瘤/周边神经外胚层癌(尤因家族癌的种类＝EFT)。用于测试的癌细胞种类包括3种EFT(EW-7、SIM和KAL)，以及2种成神经细胞瘤细胞种类(NB：LAN1和LAN5；洛杉矶成神经细胞瘤＝LAN)(参见表3)。

表3

  细胞种类  氧代铂(IC50-μg/ml)  EW-7(EFT)  SIM(EFT)  KAL(EFT)  LAN1(NB)  LAN5(NB)  1.25  14  未测试  17  3.5

顺式-氧代铂与顺式-氧代铂-Ca效果的对比

在10种细胞种类中，将顺式-氧代铂-Ca与顺式-氧代铂进行对比(参见表4)。

(IC50值是以μg/ml说明的，试验是是作为甲簪进行的)。

表4

  细胞种类  来源  氧代铂  IC50(μg/ml)  氧代铂-Ca  IC50(μg/ml)  SW480  结肠  8.2  2.5  MDA-MB-435  乳腺  16.5  12.0  BT20  乳腺  3.75  3.5  Colo205  结肠  29.0  13.5  Du145  前列腺  19.0  14.5  HT29  结肠  13.5  8.0  CRO2B  良性肿瘤  3.0  2.20  CaCo-2  结肠  1.52  0.87  BxPC3  胰腺  26.0  30.0  T47D  乳腺  2.5  3.6

对于所有细胞种类，顺式-氧代铂的IC50(±SEM)平均值为12.3±3.2，而顺式-氧代铂-Ca的IC50(±SEM)值为9.1±2.8。

计算出的结果表明，化学性质上接近的铂化合物，例如顺式-铂和顺式-氧代铂，对于不同的人体癌细胞具有不同的效果，且铂化合物的盐在癌症上与用于制备该盐的基础化合物相比，表现是不一样的。如通常和超出具体的实验所示，与顺式-氧代铂相比，顺式-氧代铂盐，尤其是顺式-氧代铂钠盐的DNA结合能力是出人意料的。例如在不同的DNA-加合物结构中存在的原因，一方面是由碱形成，另一方面由盐形成。另外可以预测的是，顺式-氧代铂盐与相应的碱相比，经历了生物转化的额外过程。该出人意料的区别在碱和盐用于癌症治疗中具有明显的意义。碱和盐的不同性能表现的另一个重要之处例如是：受体、分布范围和在组织中以及在单个器官中的分配。顺式-氧代铂-钠盐在细胞内的受体及毒性也与相应的碱不同；顺式-氧代铂盐的吸收和溶解以及遗传药理学也与碱不同。顺式-氧代铂盐通过DNA进行转化反应的方式，例如效率和效果，以及治疗能力也与顺式-氧代铂。这些可以通过在顺式-氧代铂-钙盐的化学结构上进行改变，例如由二价的阳离子形成的盐而示出：

由该结构表明，盐例如钙盐，具有与相应的碱完全不同的结构。该不同的立体化学性质对其在细胞中，尤其是在癌症细胞中通过DNA进行转化反应的方式产生影响。通过盐的不同结构，以较少的剂量就可以达到治疗的效果。另外，其可以进行生物转化，从而铂(IV)-络合物在身体中转化为铂(II)-络合物，其中，铂(IV)-和铂(II)-络合物对不同的癌症产生不同的作用(参见表I)。

6.反式-氧代铂(TRAXO)的细胞毒性活性

使反式-氧代铂的初始浓度为40μg/ml，采用两个步骤将其用于细胞系的板进行测试。由于在多数情况下，无法达到IC50值，其在最高的浓度下仍有细胞存活。

表5

  细胞种类  在40μg/ml TRAXO下的存活率％  (当显示20μm/ml时除外)  U-87-MG星形细胞瘤  100  ASTRO星形细胞瘤  82(20)71  SW620结肠癌  43/51/97  MDA-MB-231乳腺癌  70/103/106  G-292骨肉瘤  8.6/68  PANCl胰腺癌  100  CRO1A类癌瘤  87/104/70  CRO2B类癌瘤  24/57  MIAPaCa2胰腺癌  92/83  Fib3成纤维细胞瘤  91  K562白血病  97  WI-38胚胎、肺成纤维细胞瘤  21  COLO205结肠癌  109  HCT-15结肠癌  100  T-47D乳腺癌  101  HL-60白血病  0.5  HOS骨肉瘤  4.3  ACHN肾癌  48  BxPC3胰腺癌  106

如通过对19个细胞系的实验抽表明的那样，TRAXO对1种结肠癌细胞(SW620)、2种骨肉瘤细胞(G-292、HOS)、1种肾癌细胞(ACHN)、1种白血病细胞(HL-60)和1种肺纤维原细胞癌(WI-38)具有显著的活性。对顺式-氧代-铂敏感的细胞类，例如T-47D和BxPC3，对TRAXO并不敏感。反式氧代铂化合物的盐可以具有不同的治疗能力，并对单独的人体癌细胞和细胞系以及癌症有不同的治疗效果。

7.烷基衍生物的抗癌效果

将铂-(IV)-羟合-化合物的乙基、丙基、苯基和萘基衍生物在癌症小鼠中进行测试，其中，上述的衍生物通过输液用于目标生物体中，并还作为饲料混合物进行口服给药。令人惊讶的是，口服给药特别有效，这是由于所得的衍生物具有小的分子量，基本是中性的，动力学惰性，酸稳定，且在确定的物质中是亲脂体。测试的成分在老鼠模型中显示出不寻常的细胞毒性活性和良好的口服抗癌活性。其癌效果通过以克计的癌的重量确定而确定。在未治疗的癌症小鼠中，癌的平均重量为37g。在输液剂给药(剂量：5mg/kg体重)中，癌症的平均值为31g。在口服给药中，癌重量的平均值测定为24g。通过实验，令人惊讶地发现，癌症小鼠(Walker-癌)通过口服给药烷基或芳基衍生物，可以得到特别有效的治疗。在单独的芳基衍生物和烷基衍生物之间的波动通过在实验中对癌症的抑制而测定，不允许其存在显著的区别。