一种尼群地平和阿替洛尔的联合测定方法

摘要

本发明公开了一种尼群地平和阿替洛尔的联合测定方法。色谱条件与系统适用性试验：用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇－0.02mol/L磷酸氢二铵(75∶25)为流动相；检测波长为275nm。理论板数按阿替洛尔峰计算不得低于1000，阿替洛尔与尼群地平峰分离度应不大于3.0。测定法：取片剂适量，研细，精密称取适量置量瓶中，加流动相适量，超声5分钟，使溶解，加流动相至刻度，摇匀，取滤液作为供试品溶液。精密量取供试品溶液注入液相色谱仪，记录色谱图；另取尼群地平对照品、阿替洛尔对照品，精密称定，按上法分别制成对照品溶液(1)和(2)。精密量取对照品溶液(1)和(2)分别注入液相色谱仪，记录色谱图。按外标法以峰面积计算尼群地平和阿替洛尔含量，即得。

说明书

技术领域

本发明涉及医药技术领域，公开了一种尼群地平和阿替洛尔的联合测定方法。

背景技术

尼群地平为一种双氢吡啶类钙拮抗剂，对血管选择性高，可扩张冠状动脉与外周血管，起效快、安全、温和、持久；较少出现水钠潴留，可降低心肌耗氧量，对缺血心肌具有保护作用；大剂量时可出现心率反射性增快，无体位性低血压；长期服用疗效不减，无蓄积作用。

阿替洛尔属于选择性β1-受体阻滞剂，无内在拟交感活性，无奎尼丁样心肌抑制作用，不通过血脑屏障；用于治疗高血压、心绞痛和心律失常。

二药都有自己完备的测定方法，但二药用高效液相色谱法联合测定，未见报道。

发明目的

本发明是提供了一种尼群地平和阿替洛尔的联合测定方法，以对其复方制剂进行二药含量的联合测定，保证了临床疗效。

发明内容

本发明提供了一种尼群地平和阿替洛尔的联合测定方法。

测定方法学研究

1、含量测定方法可行性研究

尼群地平和阿替洛尔两种成份组成的复方片剂，两种成份各自有紫外吸收，并部分重叠，曾用双波长法测定，回收率也满意，由于考虑到操作、计算的繁琐，试图用HPLC法同时测定两种成份，操作比较简单，省时省力。试验方法如下：

分别制备尼群地平、阿替洛尔及其混合品的流动相溶液，浓度分别为0.5，1.0，0.5+1.0mg/ml。照高效液相色谱法测定。用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，甲醇-0.02mol/L磷酸氢二铵溶液(75∶25)为流动相，检测波长275nm，流速1ml/min，进样量5μl，作液相色谱。结果是尼群地平与阿替洛尔可完全分离。

2、线性关系

精密称取尼群地平对照品50mg，阿替洛尔对照品100mg，分别置50ml量瓶中，加流动相适量，超声约5分钟使溶解，并稀释至刻度。分别精密量取以上溶液3.0、4.0、5.0、6.0、7.0ml置10ml量瓶中，加流动相至刻度，摇匀。以下按上法操作，量取峰面积，计算。

          表1阿替洛尔及尼群地平线性关系

          尼群地平            阿替洛尔  浓度(mg/ml)  峰面积  浓度(mg/ml)  峰面积  0.3142  0.4188  0.5236  0.6284  0.7330  749458  982146  1224860  1462318  1703238  0.6204  0.8272  1.034  1.2408  1.4476  285495  375980  468774  563636  656074

将以上结果回归，得回归方程及相关系数：

尼群地平  C＝0.000438Ar-13.37  r＝0.9999

阿替洛尔  C＝0.002226Ar-12.37  r＝0.9999

由回归曲线可知，尼群地平浓度在0.3-0.7mg/ml，阿替洛尔浓度在0.6-1.4mg/ml范围，分别与各自得峰面积成线性关系，相关系数均为0.9999以上。

3、回收率试验

精密称取阿替洛尔对照品100mg，尼群地平对照品50mg，同置于100ml量瓶中，加流动相适量，超声5分钟使溶解，并稀释至刻度，摇匀。精密量取10ml置1片量空白片粉(约65mg)中，超声5分钟使溶解，滤过，取续滤液作供试品溶液，以下按含量测定项下操作计算回收率及变异系数，分别为：阿替洛尔100.1±0.32％，尼群地平100.1±0.43％。

                         表2阿替洛尔及尼群地平回收率

              阿替洛尔                尼群地平  投入量  (mg)  回收量  (mg)  回收率(％)   投入量(mg)   回收量  (mg)  回收率  (％)  106.8  106.8  106.8  106.8  106.8  106.8  107.0  106.4  107.0  106.8  106.6  107.8  100.2  99.66  100.2  100.0  99.81  100.9  54.84  54.84  54.84  54.84  54.84  54.84  54.84  54.84  55.28  54.77  54.93  55.00  100.0  100.0  100.8  99.87  99.92  100.3

4、含量测定

系统适用性试验  用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，甲醇-0.02mol/L磷酸氢二铵(75∶25)溶液为流动相，检测波长为275nm。理论板数按阿替洛尔计算不得低于1000，阿替洛尔峰与尼群地平峰分离度应大于3.0。

供试品溶液的制备  取含阿替洛尔10mg和尼群地平5mg的片剂20片，精密称定，研细，精密称取适量(约相当于尼群地平25mg，阿替洛尔50mg)，置50ml量瓶中，加流动相约40ml，超声5分钟使溶解，加流动相至刻度摇匀，0.65μm滤膜滤过，取滤液作供试品溶液。

对照品溶液的制备  取尼群地平对照品约25mg，阿替洛尔对照品约50mg，精密称定，分别置50ml量瓶中，各加流动相约40ml，超声5分钟使溶解，加流动相至刻度，摇匀，作为对照品溶液(1)和(2)。

测定法  精密量取供试品溶液和对照品溶液(1)和(2)各5μl，分别注入液相色谱仪，根据对应的各自峰面积计算尼群地平和阿替洛尔含量，即得。

5、测定  对三批含阿替洛尔10mg和尼群地平5mg的样品按测定法测定，结果见表3。

          表3复方尼群地平片含量测定结果

  批号  尼群地平(％)  阿替洛尔(％)  1  2  3  101.2  101.4  102.0  97.24  97.90  97.91

从上述可见，此尼群地平和阿替洛尔的联合测定方法符合国家有关测定标准要求，可作为二药联合制剂的测定方法。