痛经软膏及制备方法和质量控制方法

摘要

本发明提供了一种痛经软膏及制备方法和质量控制方法，它是由吴茱萸200g、延胡索200g、干姜1000g和姜黄1200g制成的；与现有技术相比，本发明组方简单，制作、使用方便，适合各类患者使用；疗效显著，见效快，疗程短，无副作用；所提供的质量控制方法精密度高，重现性好，测量结果准确，有效地保证了该制剂的临床疗效。

说明书

技术领域：本发明涉及一种痛经软膏及制备方法和质量控制方法，属于中药技术领域。

背景技术：痛经是妇科常见病，不仅使患者遭受身体上的痛苦，而且还影响到患者的工作和生活。痛经如果得不到有效治疗，还有可能引发其它身体疾病。目前的治疗方案一般采用西药或中药治疗，西药治疗时间短，疗效快，但西药治疗只是针对症状，治疗后容易反复发作，不能彻底改善痛经的现象，而且西药反复使用会造成较大的副作用。中药治疗能从根本解决痛经问题，而且副作用小，因而受到患者的欢迎，但多数中药一般疗程较长，服用剂量大，质量控制水平低。

发明内容：

本发明的目的在于：提供一种痛经软膏及制备方法和质量控制方法，本发明针对现有技术的不足，所提供的药膏制作、使用方便，见效快，治愈率高，疗程短，无副作用；且其质量控制方法科学合理，可有效控制和确保产品质量。

本发明是这样构成的：它由吴茱萸200g、延胡索200g、干姜1000g和姜黄1200g制成。

痛经软膏的制备方法为：取干姜、姜黄分别用水蒸汽蒸馏法提取挥发油；吴茱萸、延胡索分别加85％乙醇适量，加热回流提取二次，第一次2小时，第二次1小时，滤过，合并提取液，脱色，回收乙醇，浓缩至60～65℃相对密度为1.30～1.32的清膏，清膏与乳剂基质适量，研匀后加入上述挥发油，混匀，制成药膏；贴剂上盖衬，分切，即得。

痛经软膏的质量控制方法：所述质量控制方法主要包括性状、鉴别、检查、含量测定项目中的部分或全部；其中鉴别是对干姜、姜黄、吴茱萸和延胡索的薄层色谱鉴别；含量测定为对制剂中延胡索的含量测定。

干姜的鉴别方法是以生姜油对照品为对照，以环己烷∶乙醚＝9∶1为展开剂的薄层色谱法；姜黄的鉴别方法是以姜黄对照药材为对照，以环己烷∶乙醚＝9∶1为展开剂的薄层色谱法；吴茱萸的鉴别方法是以吴茱萸对照药材为对照，以正丁醇∶醋酸∶水＝2∶1∶1的上层溶液为展开剂的薄层色谱法；延胡索的鉴别方法是以延胡索乙素对照品为对照，以正己烷∶氯仿∶甲醇＝7.5∶4∶1为展开剂的薄层色谱法。

具体的鉴别方法包括以下项目的部分或全部：

(1)取本药膏4g，加水200ml及稀醋酸2ml，连接挥发油测定器，加热蒸馏提取挥发油，至测定器中油量不再增加；分取挥发油，加醋酸乙酯制成每1ml含20μl的溶液，作为供试品溶液；另取生姜油对照品，加醋酸乙酯制成每1ml含5μl的溶液作为对照品溶液；照中国药典2000年版一部附录VIB薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以环己烷∶乙醚＝9∶1为展开剂，展开，取出，晾干，喷以二硝基苯肼试液；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；

(2)取姜黄对照药材0.5g，加乙醚20ml，超声处理20分钟，滤过，滤液挥干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为对照药材溶液；照中国药典2000年版一部附录VIB薄层色谱法试验，吸取对照药材溶液及鉴别(1)项下的供试品溶液各10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以环己烷∶乙醚＝9∶1为展开剂，展开，取出，晾干，喷以新制的5％香草醛硫酸溶液，105℃加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；

(3)取本药膏2g，加稀醋酸15ml，充分振摇，置水浴放置15分钟，立即滤过，滤液用浓氨试液调节PH至8～9，用乙醚20ml，振摇提取，分取乙醚液挥干，残渣加乙醇1ml使溶解，作为供试品溶液；另取吴茱萸对照药材0.2g，加乙醇10ml，超声处理20分钟，滤过，滤液作为对照药材溶液；照中国药典2000年版一部附录VIB薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以正丁醇∶醋酸∶水＝2∶1∶1的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，置365nm紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；

(4)取延胡索乙素对照品，加甲醇制成每1ml含0.4mg的溶液，作为对照品溶液；照中国药典2000年版一部附录VIB薄层色谱法试验，吸取鉴别(3)项下的供试品溶液和上述对照品溶液各10μl，分别点于同一用1％氢氧化钠溶液制备的硅胶G薄层板上，以正己烷∶氯仿∶甲醇＝7.5∶4∶1为展开剂，展开，取出，晾干，置碘蒸气中熏至斑点显色清晰；日光下检视，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；挥尽板上吸附的碘蒸气后，置365nm紫外光灯下检视，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。

延胡索的含量测定方法是以延胡索乙素对照品为对照，以甲醇∶PH为7.4的磷酸盐缓冲液＝60∶40为流动相的高效液相色谱法。

具体的含量测定方法为：

照中国药典2000年版一部附录VID高效液相色谱法测定：

色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇∶PH为7.4的磷酸盐缓冲液＝60∶40为流动相；检测波长为280nm；理论板数按延胡索乙素峰计算应不低于2000；

对照品溶液的制备  精密称取延胡索乙素对照品适量，加甲醇制成每1ml含0.1mg的溶液，即得；

供试品溶液的制备  取药膏装量差异项下的内容物，混匀，取6g，精密称定，置锥形瓶中，加稀醋酸30ml，充分振摇，冰浴放置30分钟后立即滤过，用冰冷稀醋酸10ml分次洗涤容器和残渣，滤过，合并滤液，用浓氨试液调节PH至8～9，用乙醚振摇提取3次，每次20ml，合并乙醚液，挥干，残渣加甲醇使溶解，置10ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得；

测定法  分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得；

本药膏每1g含延胡索以延胡索乙素C₂₁H₂₅NO₄计，不得少于0.15mg。

本发明所述质量控制方法包括：

性状：药膏为浅棕黄色的乳膏，气芳香；贴剂为不含药的圆形贴片；

鉴别：(1)取本药膏4g，加水200ml及稀醋酸2ml，连接挥发油测定器，加热蒸馏提取挥发油，至测定器中油量不再增加；分取挥发油，加醋酸乙酯制成每1ml含20μl的溶液，作为供试品溶液；另取生姜油对照品，加醋酸乙酯制成每1ml含5μl的溶液作为对照品溶液；照中国药典2000年版一部附录VIB薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以环己烷∶乙醚＝9∶1为展开剂，展开，取出，晾干，喷以二硝基苯肼试液；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；

(2)取姜黄对照药材0.5g，加乙醚20ml，超声处理20分钟，滤过，滤液挥干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为对照药材溶液；照中国药典2000年版一部附录VIB薄层色谱法试验，吸取对照药材溶液及鉴别(1)项下的供试品溶液各10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以环己烷∶乙醚＝9∶1为展开剂，展开，取出，晾干，喷以新制的5％香草醛硫酸溶液，105℃加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；

(3)取本药膏2g，加稀醋酸15ml，充分振摇，置水浴放置15分钟，立即滤过，滤液用浓氨试液调节PH至8～9，用乙醚20ml，振摇提取，分取乙醚液挥干，残渣加乙醇1ml使溶解，作为供试品溶液；另取吴茱萸对照药材0.2g，加乙醇10ml，超声处理20分钟，滤过，滤液作为对照药材溶液；照中国药典2000年版一部附录VIB薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以正丁醇∶醋酸∶水＝2∶1∶1的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，置365nm紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；

(4)取延胡索乙素对照品，加甲醇制成每1ml含0.4mg的溶液，作为对照品溶液；照中国药典2000年版一部附录VIB薄层色谱法试验，吸取鉴别(3)项下的供试品溶液和上述对照品溶液各10μl，分别点于同一用1％氢氧化钠溶液制备的硅胶G薄层板上，以正己烷∶氯仿∶甲醇＝7.5∶4∶1为展开剂，展开，取出，晾干，置碘蒸气中熏至斑点显色清晰；日光下检视，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；挥尽板上吸附的碘蒸气后，置365nm紫外光灯下检视，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；

检查：重金属  取本药膏1.0g，按中国药典2000年版一部附录IXE第二法检查，含重金属不得过百万分之二十；

其他  应符合中国药典2000年版一部附录IR软膏剂项下有关的各项规定；

含量测定：照中国药典2000年版一部附录VID高效液相色谱法测定：

色谱条件与系统适用性试验  用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇∶PH为7.4的磷酸盐缓冲液＝60∶40为流动相；检测波长为280nm；理论板数按延胡索乙素峰计算应不低于2000；

对照品溶液的制备  精密称取延胡索乙素对照品适量，加甲醇制成每1ml含0.1mg的溶液，即得；

供试品溶液的制备  取药膏装量差异项下的内容物，混匀，取6g，精密称定，置锥形瓶中，加稀醋酸30ml，充分振摇，冰浴放置30分钟后立即滤过，用冰冷稀醋酸10ml分次洗涤容器和残渣，滤过，合并滤液，用浓氨试液调节PH至8～9，用乙醚振摇提取3次，每次20ml，合并乙醚液，挥干，残渣加甲醇使溶解，置10ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得；

测定法  分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得；

本药膏每1g含延胡索以延胡索乙素C₂₁H₂₅NO₄计，不得少于0.15mg。

方中吴茱萸有疏肝下气，温中散寒，开郁止痛，降逆止呕，助阳止泻之功；用于头痛、疝痛、脚气、痛经、脘腹胀痛、呕吐吞酸、口疮等。延胡索性辛、温，味苦，既入血分，又入气分，既能行血中之气，又能行气中之血，为活血利气止痛之良药；用于胸肋、脘腹疼痛，经闭痛经，产后瘀阻，跌扑肿痛。干姜性辛、热，温中散寒，回阳通脉，燥温消痰，用于脘腹冷痛，呕吐泻泄，肢冷脉微，痰饮喘咳。姜黄性辛、苦、温，破血行气，通经止痛，用于血阏气滞、胸胁刺痛、经闭腹痛、跌打肿痛、风湿疼痛。诸药合用，对痛经的治疗效果显著，能迅速缓解并消除症状。

本申请人进行了一系列实验来选择本发明药物制剂的质量控制方法，以保证其科学、合理、可行，并确保药物的疗效。

质量控制方法研究

(一)样品及对照药来源

样品：本公司自制，批号为：050420、050506、050520。

生姜油对照品(中国药品生物制品检定所提供)

姜黄对照药材(中国药品生物制品检定所提供)

吴茱萸对照药材(中国药品生物制品检定所提供)

延胡索乙素对照品(中国药品生物制品检定所提供)

其它试剂为分析纯。

(二)含量限度

本制剂需要定量的含量指标采用高效液相色谱法测定，每1g药膏含延胡索以延胡索乙素(C₂₁H₂₅NO₄)计，不得少于0.15mg。

(三)性状

本制剂为清膏与乳剂基质研匀，加入挥发油，混匀制成，经多批样品试制，结果表明均为浅棕黄色的乳膏，气芳香。因此痛经软膏质量标准中性状一项规定为“药膏为浅棕黄色的乳膏，气芳香；贴剂为不含药的圆形贴片。”

(四)鉴别

本发明增加制订了干姜、姜黄的专属性薄层色谱鉴别。

供试品溶液的制备样品置挥发油测定装置中，加水和少量稀醋酸(使破乳，避免起泡)，加热回流提取挥发油至完全，在分液漏斗中分取挥发油，加醋酸乙酯使溶解，即得供试品溶液。同法分别制备缺干姜、缺姜黄阴性供试液。

干姜薄层色谱鉴别  干姜薄层色谱鉴别采用生姜油对照品。试验中曾用干姜对照药材，加乙醚(或乙醇)，超声处理(或回流)提取制备对照药材溶液，但薄层层析未见干姜挥发油相应的特征斑点。展开剂选择参考药典干姜鉴别项下的规定，展开剂比例稍作调整为环己烷∶乙醚(9∶1)，分离效果较好。曾用香草醛试液显色，但缺干姜阴性样品有干扰。考虑姜油中含有羰基化合物而选择二硝基苯肼试液显色，结果供试品色谱中在与生姜油对照品相应的位置上，显相同颜色(黄色)的斑点，阴性无干扰。

姜黄薄层色谱鉴别  采用姜黄对照药材，加乙醚超声处理提取挥发油，小心挥去溶剂，残渣加甲醇溶解，即得对照药材溶液。展开剂环己烷∶乙醚(9∶1)，显色剂5％香草醛硫酸试液，105℃加热至斑点显色清晰，在供试品色谱中与姜黄对照药材相应的位置上，显相同颜色(紫红色)的斑点，阴性无干扰。

(五)检查

重金属  取本药膏1.0g，按中国药典2000年版一部附录IXE第二法进行检查，结果均符合规定。

(六)含量测定

延胡索的含量测定方法研究：

1、方法

(1)仪器与试药：

仪器：HP1100高效液相色谱仪，HP色谱工作站；

试剂：甲醇、乙醚、稀醋酸均为分析纯；

对照品：延胡索乙素对照品(中国药品生物制品检定所提供)；

供试品：痛经软膏，本公司自制，批号为：050420、050506、050520。

(2)色谱条件：

用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇∶PH为7.4的磷酸盐缓冲液＝60∶40为流动相；检测波长为280nm；理论板数按延胡索乙素峰计算应不低于2000。

色谱柱型号：Hypersil ODS25μmφ4.6×200mm。

(3)对照品溶液的配制：

精密称取延胡索乙素对照品适量，加甲醇制成每1ml含0.1mg的溶液，即得。

(4)供试品溶液的配制：

取药膏装量差异项下的内容物，混匀，取6g，精密称定，置锥形瓶中，加稀醋酸30ml，充分振摇，冰浴放置30分钟后立即滤过，用冰冷稀醋酸10ml分次洗涤容器和残渣，滤过，合并滤液，用浓氨试液调节PH至8～9，用乙醚振摇提取3次，每次20ml，合并乙醚液，挥干，残渣加甲醇使溶解，置10ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。

(5)检测波长的选择：

量取延胡索乙素对照品溶液在紫外分光光度计上测定紫外光谱图，在400～200nm波长范围内扫描，结果在280nm波长处有最大吸收峰，故选择280nm作为本测定的检测波长。

2、提取方法的比较

取药膏装量差异项下的内容物，混匀，取6g，精密称定，置锥形瓶中，加稀醋酸30ml，充分振摇，冰浴放置30分钟后立即滤过，用冰冷稀醋酸10ml分次洗涤容器和残渣，滤过，合并滤液，用浓氨试液调节PH至8～9，用乙醚振摇提取3次，每次20ml，合并乙醚液，挥干，残渣加甲醇使溶解，置10ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。

另取药膏6g，精密称定，同上述方法用氯仿提取。

各取续滤液10μl注入液相色谱仪，记录色谱图。

提取方法的比较结果

  方法  含量(mg/g)  乙醚提取  0.40  氯仿提取  0.11

结果显示，乙醚提取比氯仿提取效率更高。因此选用乙醚提取。

3、空白试验

取缺延胡索阴性样品，照供试品溶液项下的方法配制，按上述色谱条件分析。在与对照品相应的位置上，无明显其它峰出现。结果证明阴性样品对该试验无干扰。

4、线性关系考察

精密称取延胡索乙素对照品适量，加甲醇配制成对照品储备液(0.1008mg/ml)，精密吸取对照品储备液0.5ml、1ml、2ml、3ml、4ml、5ml于5ml容量瓶中，分别加甲醇定容至刻度，摇匀，分别精密吸取上述对照品溶液各10μl，注入高效液相色谱仪，测定，记录结果。以延胡索乙素的浓度为横坐标，峰面积为纵坐标，绘图得标准曲线，延胡索乙素在0.01～0.1mg/ml之间呈良好线性关系。

5、精密度试验：取本制剂(批号：050520)，按上述方法配制供试品溶液，精密吸取10μl，重复进样5次，结果RSD为1.32％，表明精密度良好。

6、重现性试验：按供试品配制方法配制5份供试品，分别测定每份样品含量，结果平均含量为0.185mg/g，RSD为1.45％，表明重现性良好。

7、回收率试验：精密称取一已知含量的供试品(批号：050520)5份，每份中精密加入对照品溶液(浓度为0.1008mg/ml)2ml，按上述方法制成供试品溶液，进行测定，计算回收率，平均回收率为99.135％，RSD＝1.80％，表明回收良好。

8、稳定性试验：取本制剂(批号：050520)，按上述方法配制供试品溶液一份，每隔一定时间进样测定，记录色谱图，结果峰面积在6小时内稳定。表明本试验方法稳定，测定时间可在6小时内。

9、样品的测定及含量限度的确定

按供试品溶液的配制方法，对多批样品进行含量测定，以确定其含量限度，样品的含量测定结果见下表。

                                           含量测定结果

  批号  031208  031218  040414  040424  040520  040608  040728  040808  040920  041019  含量  0.17  0.18  0.18  0.20  0.16  0.18  0.16  0.21  0.20  0.19  批号  041101  041128  041207  050203  050220  050323  050405  050420  050506  050520  含量  0.16  0.18  0.19  0.20  0.17  0.21  0.16  0.18  0.18  0.19

最后确定其含量限度为每1g药膏含延胡索以延胡索乙素(C₂₁H₂₅NO₄)计，不得少于0.15mg。

与现有技术相比，本发明组方简单，制作、使用方便，适合各类患者使用；疗效显著，见效快，疗程短，无副作用；所提供的质量控制方法精密度高，重现性好，测量结果准确，有效地保证了该制剂的临床疗效。

具体实施方式：

本发明的实施例1：吴茱萸200g、延胡索200g、干姜1000g、姜黄1200g

取干姜、姜黄分别用水蒸汽蒸馏法提取挥发油；吴茱萸、延胡索分别加85％乙醇适量，加热回流提取二次，第一次2小时，第二次1小时，滤过，合并提取液，脱色，回收乙醇，浓缩至60～65℃相对密度为1.30～1.32的清膏，清膏与乳剂基质适量，研匀后加入上述挥发油，混匀，制成药膏1000g；贴剂上盖衬，分切，即得。本产品外用，一日2～3次；取药膏适量涂入脐部，再贴上贴剂；其它患处可直接涂敷。

本发明的实施例2：所述质量控制方法包括以下内容：

性状：药膏为浅棕黄色的乳膏，气芳香；贴剂为不含药的圆形贴片；

鉴别：(1)取本药膏4g，加水200ml及稀醋酸2ml，连接挥发油测定器，加热蒸馏提取挥发油，至测定器中油量不再增加；分取挥发油，加醋酸乙酯制成每1ml含20μl的溶液，作为供试品溶液；另取生姜油对照品，加醋酸乙酯制成每1ml含5μl的溶液作为对照品溶液；照中国药典2000年版一部附录VIB薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以环己烷∶乙醚＝9∶1为展开剂，展开，取出，晾干，喷以二硝基苯肼试液；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；

(2)取姜黄对照药材0.5g，加乙醚20ml，超声处理20分钟，滤过，滤液挥干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为对照药材溶液；照中国药典2000年版一部附录VIB薄层色谱法试验，吸取对照药材溶液及鉴别(1)项下的供试品溶液各10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以环己烷∶乙醚＝9∶1为展开剂，展开，取出，晾干，喷以新制的5％香草醛硫酸溶液，105℃加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；

(3)取本药膏2g，加稀醋酸15ml，充分振摇，置水浴放置15分钟，立即滤过，滤液用浓氨试液调节PH至8～9，用乙醚20ml，振摇提取，分取乙醚液挥干，残渣加乙醇1ml使溶解，作为供试品溶液；另取吴茱萸对照药材0.2g，加乙醇10ml，超声处理20分钟，滤过，滤液作为对照药材溶液；照中国药典2000年版一部附录VIB薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以正丁醇∶醋酸∶水＝2∶1∶1的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，置365nm紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；

(4)取延胡索乙素对照品，加甲醇制成每1ml含0.4mg的溶液，作为对照品溶液；照中国药典2000年版一部附录VIB薄层色谱法试验，吸取鉴别(3)项下的供试品溶液和上述对照品溶液各10μl，分别点于同一用1％氢氧化钠溶液制备的硅胶G薄层板上，以正己烷∶氯仿∶甲醇＝7.5∶4∶1为展开剂，展开，取出，晾干，置碘蒸气中熏至斑点显色清晰；日光下检视，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；挥尽板上吸附的碘蒸气后，置365nm紫外光灯下检视，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；

检查：重金属取本药膏1.0g，按中国药典2000年版一部附录IXE第二法检查，含重金属不得过百万分之二十；

其他应符合中国药典2000年版一部附录IR软膏剂项下有关的各项规定；

含量测定：照中国药典2000年版一部附录VID高效液相色谱法测定：

色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇∶PH为7.4的磷酸盐缓冲液＝60∶40为流动相；检测波长为280nm；理论板数按延胡索乙素峰计算应不低于2000；

对照品溶液的制备  精密称取延胡索乙素对照品适量，加甲醇制成每1ml含0.1mg的溶液，即得；

供试品溶液的制备  取药膏装量差异项下的内容物，混匀，取6g，精密称定，置锥形瓶中，加稀醋酸30ml，充分振摇，冰浴放置30分钟后立即滤过，用冰冷稀醋酸10ml分次洗涤容器和残渣，滤过，合并滤液，用浓氨试液调节PH至8～9，用乙醚振摇提取3次，每次20ml，合并乙醚液，挥干，残渣加甲醇使溶解，置10ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得；

测定法  分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得；

本药膏每1g含延胡索以延胡索乙素C₂₁H₂₅NO₄计，不得少于0.15mg。

本发明的实施例3：质量控制方法可包括以下内容：

性状：药膏为浅棕黄色的乳膏，气芳香；贴剂为不含药的圆形贴片；

鉴别：(1)取本药膏4g，加水200ml及稀醋酸2ml，连接挥发油测定器，加热蒸馏提取挥发油，至测定器中油量不再增加；分取挥发油，加醋酸乙酯制成每1ml含20μl的溶液，作为供试品溶液；另取生姜油对照品，加醋酸乙酯制成每1ml含5μl的溶液作为对照品溶液；照中国药典2000年版一部附录VIB薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以环己烷∶乙醚＝9∶1为展开剂，展开，取出，晾干，喷以二硝基苯肼试液；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；

(2)取姜黄对照药材0.5g，加乙醚20ml，超声处理20分钟，滤过，滤液挥干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为对照药材溶液；照中国药典2000年版一部附录VIB薄层色谱法试验，吸取对照药材溶液及鉴别(1)项下的供试品溶液各10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以环己烷∶乙醚＝9∶1为展开剂，展开，取出，晾干，喷以新制的5％香草醛硫酸溶液，105℃加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；

含量测定：照中国药典2000年版一部附录VID高效液相色谱法测定：

色谱条件与系统适用性试验  用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇∶PH为7.4的磷酸盐缓冲液＝60∶40为流动相；检测波长为280nm；理论板数按延胡索乙素峰计算应不低于2000；

对照品溶液的制备  精密称取延胡索乙素对照品适量，加甲醇制成每1ml含0.1mg的溶液，即得；

供试品溶液的制备  取药膏装量差异项下的内容物，混匀，取6g，精密称定，置锥形瓶中，加稀醋酸30ml，充分振摇，冰浴放置30分钟后立即滤过，用冰冷稀醋酸10ml分次洗涤容器和残渣，滤过，合并滤液，用浓氨试液调节PH至8～9，用乙醚振摇提取3次，每次20ml，合并乙醚液，挥干，残渣加甲醇使溶解，置10ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得；

测定法  分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得；

本药膏每1g含延胡索以延胡索乙素C₂₁H₂₅NO₄计，不得少于0.15mg。

本发明的实施例4：质量控制方法可包括以下内容：

性状：药膏为浅棕黄色的乳膏，气芳香；贴剂为不含药的圆形贴片；

鉴别：(1)取本药膏4g，加水200ml及稀醋酸2ml，连接挥发油测定器，加热蒸馏提取挥发油，至测定器中油量不再增加；分取挥发油，加醋酸乙酯制成每1ml含20μl的溶液，作为供试品溶液；另取生姜油对照品，加醋酸乙酯制成每1ml含5μl的溶液作为对照品溶液；照中国药典2000年版一部附录VIB薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以环己烷∶乙醚＝9∶1为展开剂，展开，取出，晾干，喷以二硝基苯肼试液；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；

(2)取本药膏2g，加稀醋酸15ml，充分振摇，置水浴放置15分钟，立即滤过，滤液用浓氨试液调节PH至8～9，用乙醚20ml，振摇提取，分取乙醚液挥干，残渣加乙醇1ml使溶解，作为供试品溶液；另取吴茱萸对照药材0.2g，加乙醇10ml，超声处理20分钟，滤过，滤液作为对照药材溶液；照中国药典2000年版一部附录VIB薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以正丁醇∶醋酸∶水＝2∶1∶1的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，置365nm紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；

(3)取延胡索乙素对照品，加甲醇制成每1ml含0.4mg的溶液，作为对照品溶液；照中国药典2000年版一部附录VIB薄层色谱法试验，吸取鉴别(2)项下的供试品溶液和上述对照品溶液各10μl，分别点于同一用1％氢氧化钠溶液制备的硅胶G薄层板上，以正己烷∶氯仿∶甲醇＝7.5∶4∶1为展开剂，展开，取出，晾干，置碘蒸气中熏至斑点显色清晰；日光下检视，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；挥尽板上吸附的碘蒸气后，置365nm紫外光灯下检视，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；

检查：重金属  取本药膏1.0g，按中国药典2000年版一部附录IXE第二法检查，含重金属不得过百万分之二十；

其他  应符合中国药典2000年版一部附录IR软膏剂项下有关的各项规定。

本发明的实施例5：质量控制方法可包括以下内容：

性状：药膏为浅棕黄色的乳膏，气芳香；贴剂为不含药的圆形贴片；

鉴别：(1)取本药膏4g，加水200ml及稀醋酸2ml，连接挥发油测定器，加热蒸馏提取挥发油，至测定器中油量不再增加；分取挥发油，加醋酸乙酯制成每1ml含20μl的溶液，作为供试品溶液；取姜黄对照药材0.5g，加乙醚20ml，超声处理20分钟，滤过，滤液挥干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为对照药材溶液；照中国药典2000年版一部附录VIB薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以环己烷∶乙醚＝9∶1为展开剂，展开，取出，晾干，喷以新制的5％香草醛硫酸溶液，105℃加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；

(2)取本药膏2g，加稀醋酸15ml，充分振摇，置水浴放置15分钟，立即滤过，滤液用浓氨试液调节PH至8～9，用乙醚20ml，振摇提取，分取乙醚液挥干，残渣加乙醇1ml使溶解，作为供试品溶液；另取吴茱萸对照药材0.2g，加乙醇10ml，超声处理20分钟，滤过，滤液作为对照药材溶液；照中国药典2000年版一部附录VIB薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以正丁醇∶醋酸∶水＝2∶1∶1的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，置365nm紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；

检查：重金属  取本药膏1.0g，按中国药典2000年版一部附录IXE第二法检查，含重金属不得过百万分之二十；

其他  应符合中国药典2000年版一部附录IR软膏剂项下有关的各项规定；

含量测定：照中国药典2000年版一部附录VID高效液相色谱法测定：

色谱条件与系统适用性试验  用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇∶PH为7.4的磷酸盐缓冲液＝60∶40为流动相；检测波长为280nm；理论板数按延胡索乙素峰计算应不低于2000；

对照品溶液的制备  精密称取延胡索乙素对照品适量，加甲醇制成每1ml含0.1mg的溶液，即得；

供试品溶液的制备  取药膏装量差异项下的内容物，混匀，取6g，精密称定，置锥形瓶中，加稀醋酸30ml，充分振摇，冰浴放置30分钟后立即滤过，用冰冷稀醋酸10ml分次洗涤容器和残渣，滤过，合并滤液，用浓氨试液调节PH至8～9，用乙醚振摇提取3次，每次20ml，合并乙醚液，挥干，残渣加甲醇使溶解，置10ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得；

测定法  分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得；

本药膏每1g含延胡索以延胡索乙素C₂₁H₂₅NO₄计，不得少于0.15mg。