人外周血淋巴细胞培养和染色体观察的教学试剂盒

摘要

本发明涉及一种人外周血淋巴细胞培养和染色体观察的教学试剂盒，针对人外周血淋巴细胞培养技术和染色体核型的观察实验，将试剂和材料分别以小包装形式分组装在试剂盒内，并按10组一个实验教学标准班进行优化配置，每组独立小包装包括秋水仙素、注射器、配制固定液的甲醇和冰乙酸、低渗液、改良苯酚品红染液、洗镜液、擦镜纸、1640培养液、载玻片、离心管、染色架、长滴管、冰盒、镊子等，每个试剂盒还配备培养架和使用手册。本发明应用于生物科学实验导论教学中，可节约教师实验准备时间，减少实验人员配置，降低实验准备的技术难度，使人外周血淋巴细胞培养技术和染色体核型观察实验能够高效、快速的完成并取得良好的实验效果。

说明书

技术领域

本发明涉及一种人外周血淋巴细胞培养和染色体观察的教学试剂盒，用于生物科学实验导论教学中人外周血淋巴细胞培养技术和染色体核型观察的实验。

背景技术

目前，我国生物科学实验教学面临投入大、产效低的窘境，一般的实验室都需要同时配置实验教师和实验员。在实验前需要做大量的准备工作，往往先要购买与实验相关的多种试剂和材料，然后根据实验的要求、实验的人数情况进行分组配制。这些工作的完成需要一定数量的实验人员配置，同时购买的试剂和材料往往都大于实际需要的用量，因而存在不同程度的浪费，提高了实验成本。同时实验准备工作的技术难度也很高，对每个实验小组的使用量，对每种试剂、每种材料用量的精确度量及分配，都要求细致准确，以保证实验的正常进行。由此可见，准备实验需要消耗和浪费大量的人力、物力、财力，急需一种新的准备实验的方式。科研试剂盒虽然在我国生物科学研究中应用已非常普遍，具有方便、快捷、高效和结果准确可靠的特点，但是至今未见到适用于生物科学实验导论教学的试剂盒专利产品。同时由于科研试剂盒一般都是针对某一特定实验环节的，具有很强的技术特征，其内容很难适应面上的教学实验。因而，发明一种适用于生物科学实验教学的教学试剂盒显得尤为必要和迫切。

发明内容

本发明的目的在于针对现有技术的不足和实际需要，提供一种适用于人外周血淋巴细胞培养和染色体观察的教学试剂盒，可以方便的直接用来完成教学实验，保证实验的高效率，节约实验成本。

为实现这样的目的，本发明针对人外周血淋巴细胞培养和染色体观察实验，将试剂和材料分别以小包装形式分组装在试剂盒内，并按10组一个实验教学标准班进行优化配置，每组独立小包装内的材料根据一个实验小组的使用量设计，包括秋水仙素、注射器、配制固定液的甲醇和冰乙酸、低渗液、改良苯酚品红染液、洗镜液、擦镜纸、1640培养液、载玻片、离心管、染色架、长滴管、冰盒、镊子等。每个试剂盒内装有独立十组小包装，并配备培养架和使用手册，可供一个标准班开展实验。

本发明的教学试剂盒含有人外周血淋巴细胞培养技术和染色体核型观察实验的全套材料和试剂。试剂盒内分组安放10组小包装材料，每组包括一管1ml秋水仙素、一支2ml注射器、一瓶9ml固定液组分甲醇、一瓶3ml固定液组分冰乙酸、一瓶5ml低渗液、一瓶2ml改良苯酚品红染液、一瓶1ml洗镜液、一包10片擦镜纸、一包6片载玻片、一支10ml离心管、一块纱布、一个染色架、一个长滴管、一个冰盒、一把镊子和5ml 1640培养液。试剂盒配另备一个培养架(10孔，可供10个组共同培养)、一本试剂盒使用手册。

每组小包装试剂和材料的用量是经过历年来多次实验教学摸索得到的优化值，其中所述10个组的10瓶1640培养液集中于-20℃保存。

本发明的试剂盒中一组材料可供一组学生(2-3人)使用，十组材料可供一个标准班(30人)开展实验。还可以根据不同的需要配备相应的实验指导教材和光盘。

实验开始之前，实验老师需安排好抽血的时间和名单，先将冷冻的1640培养液取出，置于37℃的水浴锅中预热10分钟，将静脉抽取的新鲜血液于无菌条件下接种于培养瓶中，每瓶0.3～0.5ml血液，轻轻摇动使之混匀，将培养瓶编号，记录献血者姓名和性别。将接种好的培养瓶置37℃水浴锅中培养3天，每天摇动培养瓶1次，使细胞分散，并检查有无污染。将10个冰盒盛满水，置于-20℃冰箱中冷冻。实验时，自备酒精灯、离心机和显微镜，即可开始实验。首先在培养终止前2～4小时取出培养瓶，用注射器抽取秋水仙素，每瓶加入5滴，继续培养2～4小时。从试剂盒中取出低渗液置于37℃的水浴锅中预热10分钟，取出培养瓶，小心倾去上层培养液，留下细胞，加入5ml低渗液，将细胞转入10ml离心管中，重置于37℃水浴锅中低渗20～25分钟。把固定液组分甲醇和冰乙酸混匀制成固定液，取出离心管以1000r/min离心5分钟，倾去上层液体，加入固定液4ml，用长滴管将细胞与固定液混匀，室温固定15～30分钟。以同上条件再次离心，倾去上层液体，再次加入2ml固定液进行固定，时间为15分钟～16小时。再次离心，倾去上层液体，加入0.5ml固定液悬浮细胞，制成细胞悬液。取出冻好的冰盒，用纱布擦干净载玻片，将载玻片平放在冰盒上，用长滴管吸取细胞悬液于高处滴于载玻片上，将载玻片在酒精灯上烤干。载玻片置于染色架上，用改良苯酚品红染液染色10分钟，用流水冲洗载玻片，并再次烤干。将制片置于显微镜下观察，低倍镜下寻找良好的分裂相，高倍镜观察绘图；教师可根据学生情况决定实验中那些步骤可由同学操作，以保证实验的成功率，也可根据实验结果情况，安排合适的实验报告要求。试剂盒中试剂和材料的用量已优化配置，可以满足实验需要，保证实验的进行，另一方面可做到节约。

本发明的教学试剂盒配制好1640培养液，冷冻保存，实验时只要提前10分钟融化温浴即可。可使实验教师不需经历培养液配制、灭菌、分装等繁琐的实验准备就可完成学生实验教学，这一方面减少了实验人员配置，另一方面也使得实验教学快捷、高效，学生可获得比较标准、可靠的实验结果。

本发明为生物科学实验导论教学提供了一种经济实用的教学试剂盒，将实验试剂和材料采用小包装并按10组一个实验教学标准班进行优化配置，避免了不必要的浪费，节约了试剂和材料。实验时，教师阅读试剂盒使用手册后，只要按照说明将每组所需的材料和试剂分发到各组结合讲解即可进行实验教学，省去了繁琐的实验准备，节约了教师的时间和精力。同时，工作效率的提高使得实验人员的配置可以有一定的减少。学生根据教师的课堂讲解以及试剂盒附有的使用手册，可以在较短的时间内对实验内容有很好的掌握并顺利完成实验。本发明的试剂盒使人外周血淋巴细胞培养技术和染色体核型观察实验能够高效、快速的完成并取得良好的实验效果，可将实验准备所需要消耗的财力、物力、人力降到最低。

附图说明

图1为本发明试剂盒所包含的试剂和药品的展示。

图2为试剂盒中每组包含实验材料和试剂的展示。

图中，1.试剂盒，2.秋水仙素，3.注射器，4.固定液组分一，5.固定液组分二，6.低渗液，7.改良苯酚品红染液，8.洗镜液，9.擦镜纸，10.载玻片，11.10ml离心管，12.纱布，13.染色架，14.长滴管，15.冰盒，16.镊子，17.1640培养液，18.培养架，19.试剂盒使用手册。

具体实施方式

以下结合附图对本发明的技术方案作进一步描述。

图1为本发明提供的教学试剂盒的一个实施例，图2为图1中分组包装的放大图，试剂盒中包含了人外周血淋巴细胞培养技术和染色体核型观察实验所需的全套材料和试剂。如图1所示，实验试剂和材料采用小包装并按10组一个实验教学标准班进行优化配置，试剂盒1内分组安放10组小包装材料，每组材料见图2，包括一管秋水仙素2、一支注射器3、一瓶固定液组分一4、一瓶固定液组分二5、一瓶低渗液6、一瓶改良苯酚品红染液7、一瓶洗镜液8、一包擦镜纸9、一包载玻片10、一支离心管11、一块纱布12、一个染色架13、一个长滴管14、一个冰盒15、一把镊子16和1640培养液(10个组的10瓶培养液集中于-20℃保存)17。其中秋水仙素1ml、固定液组分一为甲醇9ml、固定液组分二为冰乙酸3ml、低渗液5ml、注射器2ml、改良苯酚品红染液2ml、洗镜液1ml、擦镜纸10片、1640培养液5ml、载玻片6片、离心管10ml、纱布40×40cm²。另外试剂盒配有一个培养架18(10孔，可供10个组共同培养)、一本试剂盒使用手册19。

试剂盒中上述每个小包装中材料的用量是历年实验教学得到的优化值，一组材料供一组学生(2-3人)使用，十组材料可供一个标准班(30人)开展实验。

实验时，将试剂盒中的每组材料取出分到各个实验小组，按照使用手册的说明，教师进行讲解即可指导学生完成实验。另外，试剂盒内还可以根据不同的需要配置相应的配套实验指导教材和光盘，结合教学进行实验，效果更好。