参与蛋白质－蛋白质相互作用的蛋白质亚群的分离方法

摘要

本发明提供了在复合体混合物中分离和鉴定参与蛋白质－蛋白质相互作用的蛋白质的方法。该方法使用化学反应性支持基质来分离蛋白质，蛋白质随后非共价结合其它蛋白质。分离支持基质，随后将非共价结合的蛋白质释放用于分析。由于在结合和释放步骤中都可通过化学操作影响蛋白质，鉴定非共价结合蛋白产生关于特定相互作用蛋白质种类的信息，如钙依赖或底物依赖性蛋白质相互作用。这允许在特定相互作用标准基础上从复合体混合物中选择蛋白质亚群。此方法优势是能同时筛选完整蛋白质组，不像双杂交系统或噬菌体展示方法，它们每次仅能检测结合单一钓饵蛋白。该方法可应用于研究活组织切片和尸体解剖样本中的蛋白质－蛋白质相互作用，研究信号分子、药物试剂或毒素存在时的蛋白质－蛋白质相互作用，用于比较患病和正常组织或癌和未转化细胞。