虎眼万年青皂甙OSW－1类型皂甙的23位杂原子取代的类似物及其合成方法和用途

摘要

本发明提供了一种23位杂虎眼万年青OSW－1类型皂甙的新化合物及其合成方法和用途。本发明提供的实用的合成23位杂OSW－1类型皂甙新结构的合成方法包括如下步骤：(1)16α－羟基的引入：以乙酰去氢表雄酮或其5，6－双氢化产物为原料，引入16α羟基；(2)Aldol反应引入侧链，同时构建得到17α－羟基；(3)16位羟基氧化成酮；(4)16位羟基构型的翻转；(5)16位羟基的糖苷化；(6)脱除保护基得到目标化合物。此类化合物显示了很强的抗肿瘤活性。此前尚无对此类化合物结构和合成的报道。

说明书

技术领域

本发明涉及具有高抗肿瘤和免疫抑制活性的虎眼万年青皂甙OSW-1类型皂甙的23位杂原子取代的类似物的结构和合成方法及用途。

背景技术

虎眼万年青皂甙OSW-1是日本化学家Sashida等从一种原产于南非斯威士兰(Swaziland)、德兰士瓦(Transvaal)、纳塔尔(Natal)等省的常绿观赏植物虎眼万年青(Ornithogalum Saundersiae)的地下球茎中分离提取出的具有胆甾烷骨架的皂甙[Kubo，S.Y.；Terao，M.M.；Sashida，Y.Phytochemistry 1992，31，3969]。生物活性测试显示OSW-1具有极强的广谱抗肿瘤活性[Mimaki，Y.；Kuroda，M.；Kameyama，A.；Sashida，Y.Biorg.Med.Chem.Lett.1997，7，633]。其IC₅₀值在0.1-0.7nM之间，比临床使用的甲胺喋呤(methotreate)、依托泊甙(etoposide)、阿霉素(adriamycin)、顺铂(cisplatin)、喜树碱(camptothecin)以及紫杉醇(taxol)等强10-100倍。而它对人正常肺细胞毒性与临床用药相当(IC₅₀＝1500nM)，而且使用10mg/Kg的量即可延长转染P388白血病小鼠的寿命达到59％。通常皂甙在很低的浓度下就有显著的溶血作用(如10μg/mL)，这种溶血作用大大阻碍了皂甙作为药物的可能性，而OSW-1即使在浓度高达100μg/mL时对人红细胞仍没有溶血作用。另外，离体器官实验表明，大大高于抗肿瘤剂量的OSW-1对内皮细胞也几乎没有损害作用。Sashida等随后从Ornithogalum Saundersiae及相关植物中分离出了一系列与OSW-1结构相关的皂甙，一些皂甙显示了相当的抗肿瘤活性和免疫抑制活性，并申请了一系列专利。[(a)Sashita，Y.；Oka，K.；Hirano，T.；Mimaki，Y.；Kuroda，A.；Fujii，A.；Myata，Y.(Sashita Y.；Oka K.；Pola Kasei Kogyo Kk，Japan).Jpn.Kokai Tokkyo Koho JP 09048794 A2 18 Feb 1997 Heisei，7 pp.(Japan).(b)Sashita，Y.；Oka，K.；Hirano，T.；Mimaki，Y.；Kuroda，A.；Fujii，A.；Myata，Y.(Sashita Y.；Oka K.；PolaKasei Kogyo Kk，Japan).Jpn.Kokai Tokkyo Koho JP 09048796 A2 18 Feb 1997 Heisei，6 pp.(Japan).(c)Sashita，Y.；Oka，K.；Hirano，T.；Mimaki，Y.；Kuroda，A.；Fujii，A.；Myata，Y.(SashitaY.；Oka K.；Pola Kasei Kogyo Kk，Japan).Jpn.Kokai Tokkyo Koho JP 09048795 A2 18 Feb 1997Heisei，7 pp.(Japan).(d)Sashita，Y.；Oka，K.；Hirano，T.；Mimaki，Y.；Kuroda，A.；Fujii，A.；Myata，Y.(Sashita Y.；Oka K.；Pola Kasei Kogyo Kk，Japan).Jpn.Kokai Tokkyo Koho JP 09040691 A210 Feb 1997 Heisei，7 pp.(Japan).(e)Sashita，Y.；Oka，K.；Hirano，T.；Mimaki，Y.；Kuroda，A.；Fujii，A.；Myata，Y.(Sashita Y.；Oka K.；Pola Kasei Kogyo Kk，Japan).Jpn.Kokai Tokkyo KohoJP 09040690 A2 10 Feb 1997 Heisei，10 pp.(Japan).]。

1998年，邓绍江、俞飚和惠永正等率先完成了OSW-1的全合成[Deng，S.；Yu，B.；Lou，Y.；Hui，Y.J.Org.Chem.1998，202]。随后对于其全合成又有多次报道[(a)Morzycki，J.W.；Gryzkiewicz A.Carbohyd.Res.2002，1269-1274.(b)Yu，W.；Jin，Z.J.Am.Chem.Soc.2001，123，3369-3370.(c)Yu，W.；Jin，Z.J.Am.Chem.Soc.2002，124，6576-6583.]。近年来，我们小组通过对OSW-1及其衍生物的化学合成及生理活性的测定，对其构效关系有了进一步的了解[(a)Ma，X.；Yu，B.；Hui，Y.；Xiao，D.；Ding，J.Carbohydrate Research，329(3)，2000，495-505，.(b)Ma，X.；Yu，B.；Hui，Y.；Miao，Z.；Ding，J.Carbohydrate Research，334(2)，2001，159-164.(c)Ma，X.；Yu，B.；Hui，Y.；Miao，Z.；Ding，J.Bioorganic & Medicinal Chemistry Letters，11，2001，2153-2156.]。

发明内容

本发明提供的是23位杂OSW-1类型皂甙的新化合物。

本发明要解决的问题是提供一种实用的合成23位杂OSW-1类型皂甙的合成方法。

本发明要解决的问题是提供23位杂OSW-1类型皂甙的用途。

本发明提供的23位杂OSW-1类型皂甙的新化合物的结构通式如下：

其中：X＝O，S，N；R₁＝H，烷基(所述的烷基推荐为C₁-C₆的烷基)，酰基(所述的酰基推荐为C₁-C₁₀的酰基)或糖基；R₂＝H或者烷基(所述的烷基推荐为C₁-C₃的烷基)，构型不定；R₃＝直链或带支链烷基(所述的烷基推荐为C₁-C₁₀的烷基)，当X＝N时，允许双取代；C5-C6为单键或者双键连接。R₄＝糖基，推荐为带取代基团的单糖或二糖。

上述R₁为糖基时，所述的糖基推荐为葡萄糖基、甘露糖基、半乳糖基、阿拉伯糖基、木糖基等或它们组成的寡糖基；上述R₄＝糖基中的糖基为带取代基团的单糖或二糖，所述的带取代基团的单糖或二糖上的取代基是C₁-C₁₀的酰基，所述的单糖或二糖是葡萄糖基、甘露糖基、半乳糖基、阿拉伯糖基、木糖基等或它们组成的二糖基。

所述的23位杂OSW-1类型皂甙的新化合物例如：

其中的Ac＝乙酰基，MBz＝对甲氧基苯甲酰基。

本发明首次提供了一种合成一系列23位杂OSW-1类型皂甙的新的实用的合成方法，该方法包括如下步骤：

(1)16α-羟基的引入：以乙酰去氢表雄酮或其5，6-双氢化产物为原料，引入16α羟基；(2)Aldol反应引入结构所示侧链，同时构建得到17α-羟基，其中X为O或S，R₂、R₃如前所述；(3)16位羟基氧化成酮；(4)16位羟基构型的翻转；(5)16位羟基的糖苷化；(6)脱除保护基得到目标化合物。

所述的16位糖基推荐为所示的D-木糖和L-阿拉伯糖形成的OSW-1二糖：2-O-(4-甲氧基苯甲酰基)-β-D-木糖吡喃糖基-(1→3)-2-O-乙酰基-α-L-阿拉伯吡喃糖基。

具体来说，推荐各步骤如下：

(1)16α-羟基的引入：以乙酰去氢表雄酮或其5，6-双氢化产物为原料，醇/溴化酮回流下，然后重结晶得到16α-溴代酮，保护基操作保护3位羟基，碱性条件下水解，可以得到16α羟基。所述的醇推荐为甲醇，所述的碱性条件下水解推荐以DMF-H₂O-CH₂Cl₂作溶剂。

(2)Aldol反应(羟醛缩合反应)引入侧链：使用酯或硫酯，在常规条件下下发生16-羟基位阻诱导的Aldol反应，在17位引入结构所示侧链，同时构建得到17α-羟基，其中X为O或S，R₂、R₃如前所述。所述的酯或硫酯推荐为结构所示的酯或硫酯，R₂、R₃如前所述。

(3)16位羟基氧化成酮：Swern氧化或者TPAP/NMO氧化16位羟基为酮。Swem氧化可参见Deng，S.；Yu，B.；Lou，Y.；Hui，Y.J.Org.Chem.1998，202.；TPAP/NMO氧化可参见Paquette，L. A.；Zhao，M.；Wang，H.L.J.Am.Chem.Soc.1998，120，5213。所述的TPAP为Tetrapropylammonium perruthenate，所述的NMO为4-methylmorpholine N-oxide。

(4)16位羟基构型的翻转：NaBH₄/CeCl₃·7H₂O条件下还原翻转16位羟基。

(5)16位羟基的糖苷化：使用1位羟基用三氯乙酰亚胺酯活化的糖基给体，推荐为二糖给体，促进剂使用催化量的路易丝酸或质子酸。所述的路易斯酸或质子酸推荐为三烷基硅基三氟甲磺酸酯(如TMSOTf，TESOTf，TBSOTf)和三氟甲磺酸等。

(6)脱除保护基得到目标化合物，其结构通式如下：

式中R₁、R₂、R₃、R₄、X如前所述。

推荐为如下结构通式：

其中：X＝O，S，N；R₁＝H，烷基(C₁-C₆)，酰基(C₁-C₁₀)或糖基；R₂＝H或者烷基(C₁-C₃)，构型不定；R₃＝直链或带支链烷基(C₁-C₁₀)，当X＝N时，允许双取代；C5-C6为单键或者双键连接。R₄＝C₁-C₁₀的酰基。

对于23位杂原子为N时，步骤(4)后用DIBAL-H-RNH₂(or RR’NH·HCl)进行胺解，其中的R、R’＝C1-C10的烷基，DIBAL-H为diisobutylaluminiumhydride。后续步骤不变。

本发明提供的23位杂OSW-1类型皂甙的新结构化合物在体外活性试验中显示很强的对肿瘤细胞的抑制活性，半抑制浓度(IC₅₀)到达1-0.01微克/毫升。如化合物1对胃癌细胞AGS、肝癌细胞7404、乳腺癌细胞MCF-7的半抑制浓度(IC₅₀)分别为：2.71、0.027、0.27微克/毫升；优于作对照的顺铂(其半抑制浓度分别为7.23、2.51、5.61微克/毫升)。

具体实施方式

                         实施例1

                 23-氧杂-OSW-1(1)的合成

合成路线如下图所示：

试剂和条件：(a)3当量CuBr₂，CH₃OH，回流，99％；(b)TBSCl，imidazole，DMF，室温，过夜，96％；(c)1.3当量NaOH，DMF-H₂O-CH₂Cl₂(v/v＝3∶1∶2)，室温，过夜，94.5％；(d)i)ⁱPr₂NH，ⁿBuLi，-78℃，15分钟；ii)HMPA，THF，-78℃，C₂H₅CO₂CH₂CH(CH₃)₂，0.5小时；iii)6，-78 ℃，78％；(e)TPAP，NMO，CH₂Cl₂，4MS，室温，过夜，91％ or Swern氧化；(f) NaBH₄，CeCl₃·7H₂O，THF，-10℃，81％；(g)10，0.1当量TMSOTf，4MS，CH₂Cl₂，-20℃，2小时，49％；(h)Pd(MeCN)₂Cl₂，丙酮-水(v/v＝20∶1)，室温，过夜，85.8％.

具体实验和数据：

(1)16α-Bromo-17-oxo Steroids 4

乙酰去氢表雄酮3(16.8克)和溴化铜(34.3克)于400毫升甲醇中回流，8小时后，反应完毕，冷却，过滤，浓缩去掉部分溶剂，倾入200毫升水中，二氯甲烷萃取，饱和氯化钠洗涤，无水Na₂SO₄干燥。过滤，旋干，甲醇重结晶，得白色固体4(16.9克，91％)。[α]²⁴_D＝-17.76(c0.8，CHCl₃)；¹H NMR(300MHz，CDCl₃)：δ5.39-5.37(m，1H)，4.56-4.54(m，1H)，3.56-3.53(m，1H)，1.04(s，3H)，0.93(s，3H)。

(2)16-Bromo-3β-O-(tert-butyldimethylsilyl)-17-oxo steroids 5：

化合物4(3.1克，8.4毫摩尔)，咪唑(1.4克，21毫摩尔)，TBSCl(tert-butyl-dimethylsilyl chloride)(3.8克，12.6毫摩尔)溶于30毫升干燥的DMF中，室温搅拌过夜，CH₂Cl₂稀释，水洗，5％HCl，饱和NaHCO₃，饱和NaCl水溶液洗涤，无水Na₂SO₄干燥，过滤，旋干。快速柱层析(石油醚∶乙酸乙酯∶二氯甲烷＝34∶2∶1)，得到16位异构化的白色固体产物5(3.9克，96％)。¹H NMR(300MHz，CDCl₃)：δ5.34-5.33(m，1H)，4.55-4.53(m，1H)，3.52-3.41(m，1H)，1.02(s，3H)，0.92(s，3H)，0.89(s，6H)，0.06(s，6H)；EIMS m/z(％)：425(同位素峰，100)，423(M-57⁺，94.20)；Anal.Calcd for C₂₅H₄₁BrO₂Si：C，62.35；H，8.58；Found：C，62.79；H，8.77。

(3)16α-Hydroxy-3β-O-(tert-butyldimethylsilyl)-17-oxo steroids 6：

化合物5(3.7克，7.68毫摩尔)溶于30毫升CH₂Cl₂和45毫升DMF的混合溶液中，NaOH(0.4克，10毫摩尔)溶于15毫升水中投入混合物中，室温搅拌过夜，反应液水洗，饱和NaCl洗，有机相无水硫酸钠干燥，过滤，旋干，柱层析(石油醚∶乙酸乙酯＝7∶1)，得到白色固体6(3.0克，95％)。[α]²⁶_D＝10.40(c1.0，CHCl₃)；¹H NMR(300MHz，CDCl₃)：5.34-5.32(m，1H)，4.40-4.37(m，1H)，3.53-3.43(m，1H)，1.02(s，3H)，0.97(s，3H)，0.88(s，9H)，0.05(s，6H)；ESIMSm/z：436(M+H₂O⁺)，459(M+H₂O+Na⁺)；Anal.Calcd for C₂₅H₄₂O₃Si：C，71.72；H，10.11；Found：C，71.41；H，10.08。

(4)16，17-cis Diol 7：

条件A：干燥的反应瓶中，氩气保护下，ⁱPr₂NH(2.8毫升)于40毫升THF中，冷至-45℃，逐滴加入ⁿBuLi(12毫升，1.6M)，恒温10分钟，冷至-78℃，逐滴加入丙酸异丁酯(3.2毫升)，恒温1小时。逐滴加入溶于10毫升THF的化合物6(1克)，-78°反应3小时，停止反应，倾入60毫升10％的HCl中，乙酸乙酯萃取，饱和NaCl洗，无水硫酸钠干燥。过滤，旋干，柱层析(石油醚∶乙酸乙酯＝8∶1)得泡沫状固体7(1.02克，78％)。[α]²⁶_D＝-41.34(c1.0，CHCl₃)；¹HNMR(300 MHz，CDCl₃)：δ5.25(m，1H)，4.18-4.16(m，1H)，3.88-3.84(m，1H)，3.54(br，1H)，3.53-3.41(m，1H)，2.75(q，J＝7.1Hz，1H)，1.23(d，J＝7.1Hz，1H)，1.02(s，3H)，0.97(s，3H)，0.93(s，3H)，0.83(s，9H)，0.75(s，3H)，0.05(s，6H)；EIMS m/z(％)：548(M⁺)，491(M⁺-57)；Anal.Calcd for C₃₀H₅₂O₅Si：C，69.18；H，10.06；Found：C，69.42；H，10.32。

(5)Ketone 8：

TPAP(47毫克，0.26当量)和NMO(194毫克)溶于5毫升干燥CH₂Cl₂中，加入4MS，常温加入7(348毫克)，4小时后，硅藻土过滤，旋干，柱层析(石油醚∶乙酸乙酯＝60∶1)得白色固体8(315毫克，91％)。[α]²⁶_D＝-114.4(c1.0，CHCl₃)；¹H NMR(300MHz，CDCl₃)：δ5.32-5.30(m，1H)，4.04-3.88(m，2H)，3.49(m，1H)，2.58(q，J＝7.2Hz，1H)，1.27(d，J＝7.2Hz，3H)，1.02(s，3H)，0.98(s，3H)，0.96(s，3H)，0.88(s，9H)，0.78(s，3H)，0.05(s，6H)；EIMS m/z(％)：546(M⁺，7.53)，489(M-57⁺，56.28)；Anal.Calcd for C₃₂H₅₄O₅Si：C，70.28；H，9.95；Found：C，69.80；H，10.12。

更经济的方法为使用Swern氧化，操作同常规方法。

(6)16，17-trans Diol 9：

化合物8(280毫克)溶于12毫升THF中，-10℃下加入CeCl₃·7H₂O(243毫克)和NaBH₄(130毫克)，2小时后，降温至-78℃，缓慢加入0.5毫升CH₃OH淬灭，再加入10毫升5％的盐酸，CH₂Cl₂萃取，饱和氯化钠洗，无水硫酸钠干燥。过滤，旋干，柱层析(石油醚∶乙酸乙酯＝30∶1)得白色固体9(227毫克，81％)。[α]²⁶_D＝-38.0(c0.9，CHCl₃)；¹H NMR(300MHz，CDCl₃)：δ5.26-5.24(m，1H)，3.95-3.81(m，3H)，3.50-3.34(m，1H)，3.34(br，1H)，3.05(q，J＝7.1Hz，1H)，1.21(d，J＝7.1Hz，1H)，0.95(s，3H)，0.90(s，3H)，0.88(s，3H)，0.85(s，3H)，0.83(s，9H)，0.05(s，6H)；EIMS m/z(％)：530(M-18⁺)，473(M-57-18⁺)；Anal.Calcd for C₃₂H₅₆O₅Si：C，70.02；H，10.28；Found：C，69.87；H，10.28。

(7)全保护的23-氧杂-OSW-1 11：

9(150毫克，0.27毫摩尔)和10(1.69克，6.4当量)，4MS于30毫升干燥的CH₂Cl₂中，室温搅拌15分钟，冷至-20℃，3毫升TMSOTf(trimethylsilyltrifluoromethane sulfonate)(0.0045M的CH₂Cl₂液)逐滴加入，3小时后，2.5毫升Et₃N淬灭，过滤，旋干，柱层析(石油醚∶乙酸乙酯＝30∶1-25∶1)得11(183毫克，49％)。[α]²⁰_D＝-38.3(c1.1，CHCl₃)；¹H NMR(300MHz，CDCl₃)：δ8.06 and 6.89(AB，4H)，5.30(m，1H)，4.98(br，1H)，4.90-4.89(m，1H)，4.81-4.80(1H)，4.39-4.35(1H)，4.30(br，1H)，3.86(s，3H)，2.87(q，J＝7.4Hz，3H)，2.00(s，3H)，1.17(d，J＝7.4Hz，1H)，0.06(s，6H)；¹³C NMR(75 MHz，CDCl₃)：δ179.3，168.9，164.6，163.3，141.5，132.0，122.8，121.1，113.3，100.5，84.872.6，71.3，70.6，69.4，55.4，53.3，49.6，48.3，45.8，42.8，40.9，37.3，36.6，34.9，32.0，29.6，27.5，25.9，20.7，20.5，19.2，18.9，18.7，18.2，14.0，13.0，6.9，6.7，4.8，4.7，-4.6；MALDI-MS m/z：1353.7(M+Na⁺)；HRMS(MALDI)m/z 1353.7702(M+Na⁺)Calcd for C₇₀H₁₂₂NaO₁₆Si₄：1353.7724。

(8)23-氧杂-OSW-1 1：

化合物11(41毫克，0.029毫摩尔)和约3毫克PdCl₂(CH₃CN)₂溶于2毫升丙酮和水(v/v＝20∶1)中，室温搅拌过夜，旋干，柱层析(二氯甲烷∶甲醇＝25∶1)得白色固体1(23毫克，86％)。[α]²⁰_D＝-47.2(c1.2，CHCl₃)；¹H NMR(300MHz，Py-d₅)：δ8.40 and 7.14(AB，4H)，5.82-5.75(2H)，5.46(m，1H)，5.30(d，J＝7.0Hz，1H)，4.67(d，J＝6.3Hz，1H)，4.63(s，1H)，4.51-4.25(8H)，3.81(s，3H)，3.27(q，J＝7.5Hz，1H)，2.01(s，3H)，1.55(d，J＝7.5Hz，3H)，1.13(s，3H)，1.02(s，3H)，0.88(d，J＝7.5Hz，6H)；¹³C NMR(75MHz，Py-d₅)：δ178.2，169.4，165.3，163.6，141.7，132.2，120.9，113.8，102.5，101.8，88.2，84.8，79.4，76.2，75.4，74.6，71.0，70.4，70.2，67.7，66.3，65.5，55.3，50.0，48.7，46.3，43.3，41.1，37.6，36.6，35.6，32.5，32.4，32.0，31.9，29.8，27.8，20.7，20.6，19.4，19.0，18.9，13.3，13.2；MALDI-MS m/z：897.4(M+Na⁺)；HRMS(MALDI)m/z 897.4243(M+Na⁺)Calcd for C₄₆H₆₆O₁₆Na：897.4279。

                         实施例2

                  23-氮杂-OSW-12的合成

合成路线如下图所示：

试剂和条件：(a)3当量CuBr₂，CH₃OH，回流，99％；(b)TBSCl，imidazole，DMF，室温，过夜，96％；(c)1.3当量NaOH，DMF-H₂O-CH₂Cl₂(v/v＝3∶1∶2)，室温，过夜，94.5％；(d)i)ⁱPr₂NH，ⁿBuLi，-78℃，15分钟；ii)HMPA，THF，-78℃，C₂H₅CO₂CH₂CH(CH₃)₂，0.5小时；iii)6，-78℃，78％；(e)TPAP，NMO，CH₂Cl₂，4MS，室温，过夜，91％；或Swern氧化；(f)i)NaBH₄，CeCl₃·7H₂O，THF，-10℃；ii)CH₃OH，室温，10分钟，then water，室温，0.5小时，92％.或条件f’；i)NaBH₄，CeCl₃·7H₂O，THF，-10℃；ii)CH₃OH，-78℃，0.5小时，then H₂O至室温(g)i)ⁱBuNH₂，THF，DIBAL-H，0℃，2小时；ii)14(or 14’)，THF，室温，4小时，95％；(h)10，0.1当量TMSOTf，4MS，CH₂Cl₂，-20℃，2小时，65％；(i)Pd(MeCN)₂Cl₂，acetone-water(v/v＝20∶1)，室温，过夜，75％.

具体实验和数据：

(1)16，17-cis Diol 12：

反应条件同上述条件A，得白色固体12(1.94克，75％)，21-甲基异构体(0.31克，12％)。[α]²⁶_D＝-45.47(c1.0，CHCl₃)；¹H NMR(300MHz，CDCl₃)：δ5.30-5.28(m，1H)，4.19-4.11(m & q，1H+2H)，3.70-3.50(br，1H)，3.53-3.44(m，1H)，2.78(q，J＝7.1Hz，1H)，1.31-1.25(d & t，6H)，0.99(s，3H)，0.88(s，9H)，0.80(s，3H)，0.05(s，6H)；EIMS m/z(％)：518(M⁺，5.36)，561(M-57⁺，100)；Anal.Calcd forC₃₀H₅₂O₅Si：C，69.18；H，10.06；Found：C，69.12；H，9.67。

(2)16-Ketone 13：

TPAP(221毫克，0.2当量)和NMO(1.14克，3当量)溶于30毫升干燥CH₂Cl₂中，加入4MS，常温加入12(1.64克)，4小时后，硅藻土过滤，旋干，柱层析(石油醚∶乙酸乙酯＝30∶1)得白色固体13(1.49克，92％)。[α]²⁶_D＝-126.8(c1.0，CHCl₃)；¹H NMR(300MHz，CDCl₃)：δ5.32-5.30(m，1H)，4.28-4.20(m，2H)，3.53-3.46(m，1H)，2.56(q，J＝7.1Hz，1H)，1.33(t，J＝7.1Hz，3H)，1.26(d，J＝7.1Hz，3H)，1.02(s，3H)，0.89(s，6H)，0.78(s，3H)，0.06(s，6H)；EIMS m/z(％)：520(M⁺)，463(M-57⁺，100)；Anal.Calcd for C₃₀H₅₀O₅Si：C，69.45；H，9.71；Found：C，69.20；H，9.74。

更经济的方法为使用Swern氧化，操作同常规方法。

(2)Lactone 14：

化合物13(318毫克，19毫摩尔)，NaBH₄(160毫克，135毫摩尔)和CeCl₃·7H₂O(320毫克，27毫摩尔)悬浮于15毫升干燥的THF中，0℃下反应1小时，加入1毫升CH₃OH，室温搅拌10分钟，再加入1毫升水，室温搅拌半小时，二氯甲烷稀释，水洗，无水硫酸钠干燥。过滤，旋干，柱层析(石油醚∶乙酸乙酯∶二氯甲烷＝9∶1∶2)得白色固体14(267毫克，92％)。[α]²⁶_D＝-85.23(c0.3，CHCl₃)；¹H NMR(400MHz，CDCl₃)：δ5.27-5.25(m，1H)，4.43(dd，J＝4.7Hz，3.2，1H)，3.46-3.39(m，1H)，2.67(q，J＝7.7Hz，1H)，1.29(d，J＝7.7Hz，3H)，1.03(s，3H)，0.89(s，9H)，0.81(s，3H)，0.06(s，6H)；ESIMS m/z：492.4(M+Na⁺)，971.6(2M+Na⁺)；Anal.Calcd for C₂₈H₄₆O₄Si：C，70.84；H，9.77；Found：C，71.03；H，9.78。

(4)Amide 15：

DIBAL-H-ⁱBuNH₂复合物的制备：0℃，氩气保护下，4.9mL DIBAL-H(1Min甲苯)逐滴加入0.5毫升ⁱBuNH₂(5毫摩尔)的2毫升THF中，加完后，升至室温，搅拌2小时，制得浓度约为0.72mol/L的溶液。

30毫克化合物14溶于2毫升无水THF中，氩气保护室温下，逐滴加入0.44毫升(0.72mol/L，5当量)的DIBAL-H-ⁱBuNH₂复合物，TLC检测反应完成后，0.1毫升水淬灭，加入5毫升1M KHSO₄搅拌，二氯甲烷萃取，饱和食盐水洗，有机相无水硫酸钠干燥，过滤，旋干，快速柱层析(石油醚∶乙酸乙酯＝5∶1)得白色固体(33毫克，95％)。也可以化合物14’为原料制备，操作相同。[α]²⁰_D＝-39.2(c0.5，CHCl₃)；¹H NMR(300MHz，CDCl₃)：δ5.77(br，1H)，5.29-5.28(m，1H)，4.21(s，1H)，3.92(m，1H)，3.50-3.43(m，1H)，3.12-3.00(m，2H)，2.86(q，J＝7.2Hz，1H)，2.66(m，1H)，1.24(d，J＝7.2Hz，3H)，1.13(s，3H)，0.98(s，3H)，0.91(s，3H)，0.88(d，9H)；¹³C NMR(75MHz，CDCl₃)：δ178.4，141.5，120.8，85.1，81.8，72.5，49.6，48.4，46.7，46.3，42.7，41.8，37.3，36.5，35.8，32.6，32.0，31.9，31.8，28.5，25.9，20.4，20.1，19.4，18.2，13.4，-4.6；ESI-MS m/z：570.4(M+Na⁺)；HRMS(ESI)m/z570.3963(M+Na)⁺Calcd for C₃₂H₅₇NO₄SiNa⁺：570.3949。

(5)全保护的23-氮杂-OSW-1 16：

15(33毫克，0.06毫摩尔)和10(70毫克，0.072毫摩尔)，200毫克4MS于3毫升干燥的CH₂Cl₂中，室温搅拌15分钟，冷至-20℃，30微升TMSOTf(0.1M的CH₂Cl₂液)逐滴加入，2小时后，0.1毫升Et₃N淬灭，过滤，旋干，柱层析(石油醚∶乙酸乙酯＝15∶1-10∶1)得16(52毫克，65％)。[α]²⁰_D＝-24.3(c1.6，CHCl₃)；¹H NMR(300MHz，CDCl₃)：δ8.03 and 6.93(AB，4H)，7.20(m，1H)，5.62(s，1H)，5.30(m，1H)，4.89(s，1H)，4.82-4.81(m，2H)，4.47-4.42(2H)，3.89(s，3H)，3.50-3.47(m，1H)，3.12(q，J＝7.4Hz，1H)，1.99(s，3H)，1.32(d，J＝7.4Hz，3H)，0.06(s，6H)；δ180.1，169.1，166.7，163.4，141.3，132.0，122.0，121.1，113.6，100.5，98.1，91.2，85.5，76.1，73.9，72.5，71.9，70.6，68.4，65.3，63.2，59.7，55.5，49.6，48.2，46.1，45.7，42.9，40.4，37.2，36.5，35.0，32.3，32.1，31.9，28.2，25.9，20.7，20.6，20.2，20.1，19.2，18.2，14.5，14.4，6.9，6.7，5.1，5.0，4.7，-4.6；MALDI-MS m/z：1352.7(M+Na⁺)；HRMS(MALDI)m/z 1352.7905(M+Na)⁺Calcd for C₇₀H₁₂₃NaNO₁₅Si₄：1352.7862。

(6)23-氮杂-OSW-1 2：

化合物16(40毫克，0.03毫摩尔)和约2毫克PdCl₂(CH₃CN)₂溶于2毫升丙酮和水(v/v＝20∶1)中，室温搅拌过夜，旋干，柱层析(二氯甲烷∶甲醇＝25∶1)得白色固体2(20毫克，75％)。[α]²⁰_D＝-45.3(c0.9，CHCl₃)；¹H NMR(300MHz，CDCl₃)：δ8.07 and 6.99(AB，4H)，5.65-5.62(m，1H)，5.32-5.31(m，1H)，5.27(s，1H)，4.90(br，1H)，4.90-4.87(m，1H)，4.71-4.70(m，1H)，4.39(br，1H)，4.32-4.31(m，1H)，4.28-4.27(m，1H)，3.96(br，1H)，3.88(s，3H)，2.58(q，J＝7.4Hz，1H)，2.02(s，3H)，1.19(d，J＝7.4Hz，3H)，1.00(s，3H)，0.84(s，3H)，0.79(d，J＝6.6Hz，6H)；¹³C NMR(75MHz，CDCl₃)：δ179.4，169.6，166.0，164.3，140.5，132.2，121.6，121.0，114.2，99.5，99.4，90.4，85.3，76.1，72.6，72.4，71.7，70.3，69.1，63.7，63.0，59.6，55.6，49.5，48.0，46.2，45.7，42.3，40.6，37.1，36.4，34.7，32.2，31.8，31.6，28.2，20.8，20.6，20.0，19.9，19.4，14.5，13.5；MALDI-MS m/z：896.5(M+Na⁺)；HRMS(MALDI)m/z 896.4446(M+Na⁺)Calcd for C₄₆H₆₇O₁₅NaN：896.4403。