神经生长因子类似物(2S，4S)－2－(2’－取代基)－4－吲哚－3－次甲基）－5，5－二取代基－1，3－噁唑烷化合物，其制备方法及其应用

摘要

如结构通式(I)所示的神经生长因子类似物(2S，4S)－2－(2’－取代基)－4－(吲哚－3－次甲基)－5，5－二取代基－1，3－噁唑烷化合物，该化合物的制备方法，将脂肪或芳香醛加入(2S)－3－(吲哚－3’－次甲基)－1，1－二取代基－N－甲基－1－丙醇的CH

说明书

技术领域：本发明涉及一种神经生长因子类似物，既(2S，4S)-2-(2’-取代基)-4-(吲哚-3-次甲基)-5，5-二取代基-1，3-噁唑烷化合物，该类化合物的制备方法及其应用。

背景技术：神经生长因子(NGF)是一种天然的蛋白质，其主要功能是维护神经细胞的正常生存、分化等。现在的医学研究表明，NGF与AlzHeimer’sDisease(AD)有密切关系。此外，NGF还具有广泛的生理活性，如促进PC12细胞族基因表达(Clusterin gene expression)增加钙电流，用于发炎与免疫反应中用作调节剂。NGF的缺少在神经细胞受到损伤或因年老导致的神经细胞体积收缩会造成严重损害：前者不能恢复机体的正常神经活动功能；后者则会造成神经信号在传递过程中变慢或发生困难，因此，老年人更容易患AD病。然而NGF很难获得足够的量用于临床上的各种需要，因此，寻找小分子来模拟NGF的所有或部分功能则显得非常重要。

发明内容：本发明的目的是利用天然生物碱来加以结构改造，提供了一类神经生长因子类似物(2S，4S)-2-(2’-取代基)-4-(吲哚-3-次甲基)-5，5-二取代基-1，3-噁唑烷，并提供了其制备方法及其作为神经生长因子及抗炎和免疫反应中的调节剂的应用。

为了实现本发明的目的，本发明提供了如下技术方案：

如结构通式(I)所示的神经生长因子类似物(2S，4S)-2-(2’-取代基)-4-(吲哚-3-次甲基)-5，5-二取代基-1，3-噁唑烷化合物

式中，R¹，R²＝脂肪基和芳基。

一种制备权利要求1化合物的方法，将脂肪或芳香醛加入(2S)-3-(吲哚-3’-次甲基)-1，1-二取代基-N-甲基-1-丙醇的CH₂Cl₂溶液中，在冰浴条件下用分子筛去水，然后将该溶液加热升至室温，反应在14h后完成(用TLC检测)，将所得反应物过滤，使滤液在减压条件下蒸发，其残余物用硅胶色谱柱分离纯化(乙酸乙酯∶己烷＝1∶10，v/v)，得到通式(I)化合物。

含神经生长因子类似物(2S，4S)-2-(2’-取代基)-4-(吲哚-3-次甲基)-5，5-二取代基-1，3-噁唑烷化合物作为活性成分的神经生长因子。

神经生长因子类似物(2S，4S)-2-(2’-取代基)-4-(吲哚-3-次甲基)-5，5-二取代基-1，3-噁唑烷化合物用作为神经生长因子。

神经生长因子类似物(2S，4S)-2-(2’-取代基)-4-(吲哚-3-次甲基)-5，5-二取代基-1，3-噁唑烷化合物在发炎与免疫反应中用作调节剂。

具体实施方式：下面用实施例来进一步描述本发明的实质性内容，但本发明的内容并不局限于此。

实施例1：

将2-甲基-丙醛(100mg，2.6eq.)加入(2S)-3-(吲哚-3’-次甲基)-1，1-二乙基-N-甲胺基-1-丙醇(345mg，1.5mmol)的CH₂Cl₂溶液中，在冰浴条件下用分子筛去水，然后将该溶液加热至室温，反应在14h后完成(用TLC检测)，将所得反应物过滤，使滤液在减压条件下蒸发，其残余物用硅胶色谱柱分离纯化(乙酸乙酯∶己烷＝1∶10，v/v)，得到75mg(2S，4S)-2-异丁基-4-(吲哚-3’-次甲基)-5，5-二乙基-1，3-噁唑烷。

该化合物的结构及结构数据为：

(2S，4S)-2-(2’-(4’-溴)-噻吩)-4-(吲哚-3-次甲基)-5，5-二乙基-1，3-噁唑烷。¹HNMR(300MHz，CDCl₃)δ：8.04(1H，s)，7.63(1H，d，J＝7.62Hz)，7.36(1H，d，J＝7.92Hz)，7.15(3H，m)，6.88(2H，q)，4.81(1H，s)，3.02(3H，m)，2.20(3H，s)，1.99(1H，m)，1.63(2H，m)，1.18(1H，m)，0.99(3H，t，J＝7.38Hz)，0.78(3H，t，J＝7.38Hz)。¹³CNMR(75MHz，CDCl₃)δ：。147.1，136.3，128.9，127.4，127.1，122.2，122.0，119.3，118.9，114.0，113.0，111.2，93.1，86.1，69.0，36.9，28.3，27.9，24.8，8.0，8.0。MS(FAB+)m/z(％)：433[M]⁺，355(65)，130(100)，112(64)。

实施例2.将3-噻吩甲醛(100mg，2.6eq.)加入(2S)-3-(吲哚-3’-次甲基)-1，1-二乙基-N-甲胺基-1-丙醇(345mg，1.5mmol)的CH₂Cl₂溶液中，在冰浴条件下用分子筛去水，然后将该溶液加热至室温，反应在14h后完成(用TLC检测)，将所得反应物过滤，使滤液在减压条件下蒸发，其残余物用硅胶色谱柱分离纯化(乙酸乙酯∶己烷＝1∶10，v/v)，得到72mg(2S，4S)-2-(3’-噻吩)-4-(吲哚-3’-次甲基)-5，5-二乙基-1，3-噁唑烷。

该化合物的结构及结构数据为：

(2S，4S)-2-(3’-噻吩)-4-(吲哚-3’-次甲基)-5，5-二乙基-1，3-噁唑烷。¹HNMR(300MHz，CDCl₃)δ：8.14(1H，s)，7.68(1H，d，J＝7.62Hz)，7.26(6H，m)，7.01(1H，d，J＝2.01Hz)，4.73(1H，s)，3.08(3H，m)，2.20(3H，s)，2.03(1H，m)，1.72(2H，m)，1.19(1H，m)，1.05(3H，t，J＝7.41Hz)，0.81(3H，t，J＝7.41Hz)。¹³CNMR(75MHz，CDCl₃)δ：142.0，136.3，127.4，126.7，125.9，124.5，122.1，121.9，119.2，118.9，113.0，111.2，93.5，85.3，69.3，36.8，28.4，28.1，24.6，8.0，7.9 MS(FAB+)m/z(％)：355[M]⁺，130(100)，112(68)。

实施例3.将正丁醛(100mg，2.6eq.)加入(2S)-3-(吲哚-3’-次甲基)-1，1-二乙基-N-甲胺基-1-丙醇(345mg，1.5mmol)的CH₂Cl₂溶液中，在冰浴条件下用分子筛去水，然后将该溶液加热至室温，反应在14h后完成(用TLC检测)，将所得反应物过滤，使滤液在减压条件下蒸发，其残余物用硅胶色谱柱分离纯化(乙酸乙酯∶己烷＝1∶10，v/v)，得到78mg(2S，4S)-2-丙基-4-(吲哚-3’-次甲基)-5，5-二乙基-1，3-噁唑烷。

该化合物的结构及结构数据为：

(2S，4S)-2-丙基-4-(吲哚-3’-次甲基)-5，5-二乙基-1，3-噁唑烷。¹HNMR(400MHz，CDCl₃)δ：8.11(1H，s)，7.64(1H，d，J＝7.72Hz)，7.37(1H，d，J＝7.92Hz)，7.21(1H，m，J＝6.96Hz)，7.06(1H，s)，3.78(1H，d，J＝3.56Hz)，3.03(1H，t，J＝7.76Hz)，2.95(2H，t，J＝7.04Hz)，2.24(3H，s)，1.78(1H，m)，1.60(5H，m)，1.31(1H，m)，1.12(1H，m)，0.98(6H，m)，0.73(3H，t，J＝7.28Hz)。¹³CNMR(100MHz，CDCl₃)δ：136.4，127.6，122.1，121.0，119.3，119.1，113.8，111.1，96.4，84.1，69.9，37.8，36.4，28.5，27.9，24.9，17.9，14.3，7.9，7.9。m/z(FAB+)＝315.2378，Cal.Mass＝315.2436。IR(KBr)cm^-1：3260(s)，2880(m)，1440(s)，1345(m)，1230(m)，1180(m)，950(m)，790(w)，745(s)。

实施例4.将异戊醛(100mg，2.6eq.)加入(2S)-3-(吲哚-3’-次甲基)-1，1-二乙基-N-甲胺基-1-丙醇(345mg，1.5mmol)的CH₂Cl₂溶液中，在冰浴条件下用分子筛去水，然后将该溶液加热至室温，反应在14h后完成(用TLC检测)，将所得反应物过滤，使滤液在减压条件下蒸发，其残余物用硅胶色谱柱分离纯化(乙酸乙酯∶己烷＝1∶10，v/v)，得到90mg(2S，4S)-2-异丁基-4-(吲哚-3’-次甲基)-5，5-二乙基-1，3-噁唑烷。

该化合物的结构及结构数据为：

(2S，4S)-2-异丁基-4-(吲哚-3’-次甲基)-5，5-二乙基-1，3-噁唑烷¹HNMR(400MHz，CDCl₃)δ：8.07(1H，s)，7.61(1H，d，J＝7.84Hz)，7.34(1H，d，J＝8.04Hz)，7.18(1H，t，J＝7.2Hz)，7.1 1(1H，t，J＝7.48Hz)，7.01(1H，s)，3.77(1H，dd，J＝2.16Hz，7.72Hz)，3.00(1H，m)，2.89(2H，m)，2.21(3H，s)，1.86(1H，m)，1.73(2H，m)，1.54(4H，m)，1.41(2H，m)，1.07(1H，m)，0.94(6H，m)，0.70(3H，t，J＝7.40Hz)。¹³CNMR(100MHz，CDCl₃)δ：136.4，127.6，122.1，122.0，119.3，119.1，113.8，111.1，95.3，84.1，69.8，43.7，37.8，28.7，28.1，25.0，23.8，22.6，18.2，7.9。MS(FAB+)found 329.2539，Cal.Mass＝329.2592。IR(KBr)cm^-1：3419(m)，3305(b.m)，3058(w)，2960(s)，2934(s)，2877(m)，1620(w)，1457(s)，1352(m)，1174(m)，1057(m)，1013(m)，924(w)，844(w)，739(vs)。

实施例5.将2，2-二甲基丁醛(100mg，2.6eq.)加入(2S)-3-(吲哚-3’-次甲基)-1，1-二乙基-N-甲胺基-1-丙醇(345mg，1.5mmol)的CH₂Cl₂溶液中，在冰浴条件下用分子筛去水，然后将该溶液加热至室温，反应在14h后完成(用TLC检测)，将所得反应物过滤，使滤液在减压条件下蒸发，其残余物用硅胶色谱柱分离纯化(乙酸乙酯∶己烷＝1∶10，v/v)，得到91mg(2S，4S)-2-新戊基-4-(吲哚-3’-次甲基)-5，5-二乙基-1，3-噁唑烷。

该化合物的结构及结构数据为：

(2S，4S)-2-新戊基-4-(吲哚-3’-次甲基)-5，5-二乙基-1，3-噁唑烷。¹HNMR(400MHz，CDCl₃)δ：8.03(1H，s)，7.60(1H，d，J＝7.68Hz)，7.34(1H，d，J＝8.00Hz)，7.18(1H，t，J＝7.2Hz)，7.11(1H，t，J＝7.76Hz)，7.02(1H，s)，3.75(1H，d，J＝8.32Hz)，3.02(1H，m)，2.92(1H，m)，2.82(1H，m)，2.19(3H，s)，1.71(1H，m)，1.47(3H，m)，1.38(1H，m)，1.07(3H，m)，0.95(9H，m)，0.70(3H，t，J＝7.36Hz)。¹³CNMR(100MHz，CDCl₃)δ：136.4，127.6，122.1，122.0，119.3，119.1，113.9，111.1，94.4，84.2，69.6，48.1，37.7，30.2，29.7，28.9，28.1，25.0。m/z(FAB+)＝342.2754，Cal.Mass＝343.2749。IR(KBr)cm^-1：3140(m)，2920(s)，2840(m)，1440(s)，1340(m)，1050(m)，730(s)。

实施例6将2-噻吩甲醛(100mg，2.6eq.)加入(2S)-3-(吲哚-3’-次甲基)-1，1-二甲基-N-甲胺基-1-丙醇(345mg，1.5mmol)的CH₂Cl₂溶液中，在冰浴条件下用分子筛去水，然后将该溶液加热至室温，反应在14h后完成(用TLC检测)，将所得反应物过滤，使滤液在减压条件下蒸发，其残余物用硅胶色谱柱分离纯化(乙酸乙酯∶己烷＝1∶10，v/v)，得到71mg(2S，4S)-2-(2’-噻吩)-4-(吲哚-3’-次甲基)-5，5-二甲基-1，3-噁唑烷。

该化合物的结构及结构数据为：

(2S，4S)-2-(2’-噻吩)-4-(吲哚-3’-次甲基)-5，5-二甲基-1，3-噁唑烷¹HNMR(300MHz，CDCl₃)δ：8.07(1H，s)，7.65(1H，d，J＝7.56Hz)，7.35(2H，t)，7.25(4H，m)，6.96(1H，m)，4.92(1H，s)，3.15(1H，m)，2.91(2H，q)，2.29(3H，s)，1.41(3H，s)，1.03(3H，s)。

¹³CNMR(75MHz，CDCl₃)δ：145.0，136.3，127.4，127.0，126.6，126.3，122.3，122.1，119.3，119.0，112.5，111.2，92.2，82.2，72.8，36.6，27.6，24.9，24.3。

MS(FAB+)m/z(％)：326[M]⁺，194(100)，129(65)，83(89)。

实施例7将2-噻吩(100mg，2.6eq.)加入(2S)-3-(吲哚-3’  -次甲基)-1，1-乙基-N-甲胺基-1-丙醇(345mg，1.5mmol)的CH₂Cl₂溶液中，在冰浴条件下用分子筛去水，然后将该溶液加热至室温，反应在14h后完成(用TLC检测)，将所得反应物过滤，使滤液在减压条件下蒸发，其残余物用硅胶色谱柱分离纯化(乙酸乙酯∶己烷＝1∶10，v/v)，得到110mg(2S，4S)-2-(2’-噻吩)-4-(吲哚-3’-次甲基)-5，5-二乙基-1，3-噁唑烷。

该化合物的结构及结构数据为：

(2S，4S)-2-(2’-噻吩)-4-(吲哚-3’-次甲基)-5，5-二乙基-1，3-噁唑烷¹HNMR(300MHz，CDCl₃)δ：8.03(1H，s)，7.64(1H，d，J＝7.62Hz)，7.35(2H，t)，7.15(4H，m)，6.95(1H，q，J＝3.81Hz)，4.89(1H，s)，3.05(3H，m)，2.21(3H，s)，2.01(1H，m)，1.62(2H，m)，1.13(1H，m)，1.01(3H，t，J＝7.32Hz)，0.78(3H，t，J＝7.32Hz)。¹³CNMR(75MHz，CDCl₃)δ：145.1，136.3，127.4，126.9，126.6，126.1，122.2，122.0，119.3，119.0，113.2，111.2，93.2，85.8，69.2，36.9，28.4，28.1，24.7，8.0，8.0，MS(FAB+)m/z(％)：355[M]⁺，130(100)，112(62)。

实施例8  将2-噻吩甲醛(100mg，2.6eq.)加入(2S)-3-(吲哚-3’-次甲基)-1，1-二丙基-N-甲胺基-1-丙醇(345mg，1.5mmol)的CH₂Cl₂溶液中，在冰浴条件下用分子筛去水，然后将该溶液加热至室温，反应在14h后完成(用TLC检测)，将所得反应物过滤，使滤液在减压条件下蒸发，其残余物用硅胶色谱柱分离纯化(乙酸乙酯∶己烷＝1∶10，v/v)，得到108mg(2S，4S)-2-(2’-噻吩)-4-(吲哚-3’-次甲基)-5，5-二丙基-1，3-噁唑烷。

该化合物的结构及结构数据为：

(2S，4S)-2-(2’-噻吩)-4-(吲哚-3’-次甲基)-5，5-二丙基-1，3-噁唑烷。¹HNMR(300MHz，CDCl₃)δ：8.03(1H，s)，7.64(1H，d，J＝7.62Hz)，7.35(2H，t)，7.15(4H，m)，6.94(1H，m)，4.87(1H，s)，3.12(2H，m)，2.99(1H，q)，2.21(3H，s)，1.98(1H，s)，1.56(3H，m)，1.33(3H，m)，1.10(1H，m)，0.96(3H，t，J＝6.48Hz)，0.68(3H，t，J＝6.96Hz)。¹³CNMR(75MHz，CDCl₃)δ：145.1，136.3，127.4，126.9，126.7，126.0，122.2，122.0，119.3，119.0，113.1，111.2，93.2，85.6，69.5，36.2，35.7，25.6，24.7，23.6，23.1，14.2，13.8。

实施例9将正戊醛(100mg，2.6eq.)加入(2S)-3-(吲哚-3’-次甲基)-1，1-二邻甲苯基-N-甲胺基-1-丙醇(345mg，1.5mmol)的CH₂Cl₂溶液中，在冰浴条件下用分子筛去水，然后将该溶液加热至室温，反应在14h后完成(用TLC检测)，将所得反应物过滤，使滤液在减压条件下蒸发，其残余物用硅胶色谱柱分离纯化(乙酸乙酯∶己烷＝1∶10，v/v)，得到72mg(2S，4S)-2-丁基-4-(吲哚-3’-次甲基)-5，5-二邻甲苯基-1，3-噁唑烷。

该化合物的结构及结构数据为：

(2S，4S)-2-丁基-4-(吲哚-3’-次甲基)-5，5-二邻甲基-1，3-噁唑烷。¹HNMR(400MHz，CDCl₃)δ：7.88(1H，s)，7.59(1H，d，J＝7.8Hz)，7.52(1H，d，J＝6.72Hz)，7.33(1H，d，J＝8.00Hz)，7.21-7.00(9H，m)，6.83(1H，s)，4.31(1H，m)，3.65(1H，dd，J＝2.92Hz，6.00Hz)，2.34(1H，m)，2.20(1H，m)，2.16(6H，s)，2.04(3H，s)，1.65(3H，m)，1.42(3H，m)，0.95(3H，t，J＝7.12Hz，14.28Hz)。¹³CNMR(100MHz，CDCl₃)δ：140.3，139.1，136.3，133.3，131.6，128.4，127.7，127.2，125.1，123.9，121.6，119.2，118.4，111.2，94.0，67.5，38.9，34.6，32.2，26.9，22.7，22.3，21.7，14.0。IR(KBr)cm^-1：3226(b.m)，3061(w)，2954(s)，2928(s)，2861(m)，1623(w)，1484(m)，1458(s)，1353(m)，1234(m)，1131(m)，1017(m)，916(w)，813(w)，754(s)，739(s)。

从本发明的化合物中通过活性试验发现该类化合物有强烈的杀死PC12细胞的活性。表明这一类化合物有潜在的能起到NGF的部分功能特性，为此，在此结构基础上，本发明合成了此类化合物用于体外PC12细胞的活性筛选。发现化合物4、9有较强的促进PC12细胞体积增加的功能。这是一个非常有意义的发现。它符合用小分子来模拟NGF的所有或部分功能的典型特征。有关试验结果可以从表1中得到。

从表1中可得出结论：1、结果可认为无明显区别。2.对照为添加同样体积溶剂的化合物。3.细胞是在显微镜下观察得到的。

本发明化合物对PC12细胞生长的影响见表1：

表1.化合物对PC12细胞生长的影响(相对于对照)

化合物编号  观测结果

1           ＜10μg/ml：±5％的细胞生长

            ＞50μg/ml：4天以后细胞死亡数增加(用量分别为50μg/ml和100μg/ml时

            细胞减少45％)

2           ＜10μg/ml：±10％的细胞生长

            ＞50g/ml：4天以后细胞死亡数增加(用量分别为50μg/ml和100μg/ml时细

            胞减少30％和40％)

3           所有的浓度(0.1 to 10％μg/ml)均表现±5％的抑制1，同对照一致

4           可促进PC12细胞的生长，当用量从0.1μg/ml到10μg/ml时细胞有1％到15％

            的生长

5           所有的浓度(0.1 to 10％μg/ml)均表现±5％的抑制，同对照一致

6           ＜50μg/ml：±5％的细胞生长

            100μg/ml：4天以后细胞死亡数增加(用量为100μg/ml时细胞减少20％)

7           所有的浓度均表现±5％的生长

8           ＜10μg/ml：±10％的细胞生长

            ＞50g/ml：4天以后细胞死亡数增加(用量分别为50μg/ml和100μg/ml时细

            胞减少45％)

9           可促进PC12细胞的生长，当用量从0.1μg/ml到10μg/ml时细胞有3％到16％

            的生长