一种缺失E1A编码序列的重组腺病毒构建体的获得及用途

摘要

本发明公开了一种在人类5型腺病毒(Humanadenovirus type5)的基因组中定点缺失(delete)E1A编码序列的构建方案，以及获得的重组腺病毒构建体在肿瘤治疗、诊断中的具体用途。用定点突变、PCR扩增、酶切、连接、亚克隆、转染、重组腺病毒单克隆纯化等技术，缺失E1A(382－1630nt)序列，筛选出不能表达E1A功能蛋白的重组腺病毒构建体。该构建体能选择性地在肿瘤细胞内复制增殖，从而特异性裂解杀灭肿瘤细胞，并对顺铂等一线化疗药物对肿瘤细胞的杀灭有显著的增效效应，另一方面该重组腺病毒构建体在正常细胞内不能复制增殖，因而对正常细胞无毒性效应。该重组腺病毒构建体在用于肿瘤治疗药物、诊断试剂的制备中具有良好的实用价值，同时也是一种良好的基因治疗载体。