可溶性膜蛋白受体结构域的化学合成及应用

摘要

本发明涉及膜蛋白受体的膜外受体结构域的化学合成以及使用所述膜蛋白受体的膜外受体结构域的组合物和方法。所述膜外受体结构域包括膜蛋白受体的可溶性配体结合胞外结构域和胞质结构域。通过在化学选择性化学连接条件下使膜蛋白受体的膜外受体结构域的第一种肽和第二种肽连接,产生本发明的膜外受体结构域,其中所述肽具有能够在它们之间形成共价健的未保护化学选择性反应性基团。使所述连接产物暴露于近似细胞膜的水－脂质界面的含有一种离液剂和一种有机溶剂的折叠缓冲液中。暴露于折叠缓冲液后,将与膜蛋白受体的配体结合的连接产物从缓冲液中分离。通过这种方法产生的连接产物的配体结合部分代表折叠膜外受体结构域。本发明例举了胰高血糖素样肽1受体的N末端结构域的全化学合成,证明了它与肽配体结合的能力,并且鉴定了它的二硫化物图谱。