用于治疗角结膜障碍的、包含作为活性组分的钠尿肽的泪液分泌促进剂或滴眼剂

摘要

钠尿肽在眼科学领域中的新效果。用于治疗角结膜衰竭的泪液分泌促进剂或滴眼剂,它们包含作为活性组分的钠尿肽。该钠尿肽包括:心房钠尿肽(ANP)、脑钠尿肽(BNP)和C钠尿肽(CNP)。角结膜衰竭的典型实例包括:眼干涸、角膜上皮磨损和角膜溃疡。

说明书

本发明涉及用于促进泪液分泌或治疗角结膜障碍的、包含作为活性组分的钠尿肽的滴眼剂。

泪液(它在生物体上具有保持湿润度的机制)覆盖角膜和结膜(角结膜)，保持湿润度并且防止它们干燥。泪液起润滑剂的作用(即，保护角结膜以防眨眼的刺激)而且有助于保持角膜表面光滑。泪液具有抑茵作用，防止细菌、真菌、病毒等的感染，给角膜提供氧和各种营养物并且除去二氧化碳气体和代谢物。当角结膜失常时，泪液起稀释和除去引起失常的刺激物的作用，还起这种作用：将液体组分(例如参与创伤愈合的上皮生长因子)和血细胞组分(例如纤连蛋白)携带到失常的部位。也就是说，泪液参与调节创伤愈合以及维持角结膜上皮细胞。所以，已知泪液(虽然它的量很少)调节角结膜的生理状况，从而保持角膜的透明性和体内稳态[眼杂志(Journal of the Eye),11,1179～1185(1994)]。

治疗角结膜障碍[例如眼干涸(干燥性角结膜炎等)]的已知方法有：用人造眼泪提供泪液组分的方法，用粘弹性物质将泪液保持在角结膜表面而导致治疗角结膜的方法等。由于泪液表现出上述治疗角结膜障碍的效果，所以预期到，寻找直接作用于泪腺功能和促进泪液分泌的化合物适用于治疗具有角结膜上皮障碍(例如眼干涸)的角膜侵蚀、角膜溃疡等。

属于钠尿肽的肽广泛分布于哺乳动物、禽类、两栖动物和鱼中，所述肽按结构被分为三类，即，心房钠尿肽(ANP)、脑钠尿肽(BNP)和C一型钠尿肽(CNP)。已知的心房钠尿肽(ANP)有：包含28个氨基酸的α-ANP,包含α-ANP的第4个到第28个氨基酸的α-ANP[4-28],包含α-ANP的第5个到第28个氨基酸的α-ANP[5-28]，具有α-ANP的反平行二聚体结构的β-ANP，通过从ANP前体切割出一条信号肽而形成的分子量为13,000的高分子型γ-ANP等。已知的脑钠尿肽(BNP)有：包含26个氨基酸的BNP-26，包含32个氨基酸的BNP-32，包含45个氨基酸的BNP-45，通过从BNP前体切割出一条信号肽而形成的分子量约为13,000的高分子型γ-BNP等。已知的C-型钠尿肽(CNP)有：包含22个氨基酸的CNP-22，包含53个氨基酸(延伸到N端)的CNP-53等。这些钠尿肽作用于肾、肾上腺和血管壁，并且在调节全身体液中的电解质和血压方面起重要作用[“调节循环和相关疾病的肽”(“PeptidesAdjusting Circulation and Related Diseases”),p.14～25,Youdosha,1992]。

α-ANP具有血管舒张作用和利尿作用，并且被用作心血管疾病(例如心力衰竭)的治疗剂[日本药理学和治疗学(Jpn.Pharmacol.THer.),23,949～952(1995)]。

在眼科学领域，报导了α-ANP表现出降低眼内压的效果[现代眼研究(Curr.Eye Res.),6,1189～1196(1987)]。然而，很少研究α-ANP的其它效果，而且文献没有报导钠尿肽对泪腺和角结膜障碍的效果(通过滴注它们)。

除了对于降低眼内压的效果的研究之外，很少进行钠尿肽在眼科学领域的应用研究。研究钠尿肽在眼科学领域中的新效果是一个很有意义的课题。

严谨地研究以便寻找钠尿肽在眼科学领域中的新效果，本发明人发现了，钠尿肽表现出促进泪液分泌的效果并且适用作角结膜障碍的治疗剂。

本发明涉及促进泪液分泌和治疗角结膜障碍的滴眼剂，该滴眼剂包含作为活性组分的钠尿肽。

在本发明中，钠尿肽是心房钠尿肽(ANP)、脑钠尿肽(BNP)和C-型钠尿肽(CNP)。具有不同结构的ANP、BNP和CNP是已知的，本发明的钠尿肽包括它们的全部。

钠尿肽是作为心血管障碍的治疗剂的有效药物，但除了它们在眼科学领域中降低眼内压的效果之外报导的效果很少。

研究钠尿肽在眼科学领域中的应用，本发明人发现了，当钠尿肽被滴注给兔后，钠尿肽表现优异的促进泪液分泌的效果。在“药理学试验”部分中将描述细节。如“背景技术”中详细描述的那样，由于泪液表现出治疗角结膜障碍的效果，所以，本药物有望适用作角结膜障碍的治疗剂。角结膜障碍的典型实例有：眼干涸、角膜侵蚀和角膜溃疡。

本发明的滴眼剂可通过将钠尿肽溶于滴眼剂应用的普通眼用载体而制备。所述滴眼剂可通过任选添加适当量的下列物质来配制：等渗剂(例如氯化钠或浓甘油)，缓冲剂(例如磷酸钠或乙酸钠)，表面活性剂(例如聚氧乙烯山梨糖醇酐单油酸酯、硬脂酸-40-聚烃氧基酯或聚氧乙烯氢化蓖麻油)，稳定剂(例如柠檬酸钠或乙二胺四乙酸二钠)，防腐剂(例如苯扎氯铵或对羟基苯甲酸酯)等。pH可在眼用制剂可接受的范围内，优选在4～8的范围内。

所述滴眼剂中活性组分的浓度是0.001～1％(W/V)，优选是0.005～0.5％(W/V)，更优选是0.05～0.5％(W/V)。所述滴眼剂是通过每天滴注一次到数次施用的。

实施本发明的最佳方式

下文以实施例形式示出了制剂实施例和药理学试验。1．制剂实施例

典型的制剂如下所示：制剂1(0.1％滴眼剂的制备)

将钠尿肽(100mg)溶于生理盐水(100ml)而制备0.1％的滴眼剂。

此外，改变添加的钠尿肽的量，还制备了浓度为0.001％、0.005％、0.01％、0.05％、0.5％和1.0％(W/V)的钠尿肽滴眼剂。2．药理试验

Schirmer试纸法(它被用于测定人泪液的量)是一种测定滴注药物时正常动物泪液量的改变的方法。在本发明中，滴注钠尿肽时泪液的量是通过应用Schirmer试纸法测定的，并且研究了钠尿肽对泪液分泌速度的影响。试验方法实验动物

雄性日本白兔(体重1.8～2.2kg)被用于试验。试验药物溶液的制备

恰在应用前，将钠尿肽(0.56 mg)溶于无菌纯化过的水而配制0.1％的溶液。该溶液被称为“试验药物溶液：施药方法

将试验药物溶液(50μl)一次性滴注入左眼。为了研究载体(纯化过的水)对泪液分泌的效果，单独将载体(50μl)一次性滴注入右眼。测定方法

在施药前和滴注规定的时间后，应用Schirmer试纸测定被施药的那只眼和未施药的那只眼泪液的量。折叠Schirmer试纸的一端，将折叠端插入兔的颞侧睑下方三分之一的部位。一分钟后，测定试纸折叠端润湿部分的长度(Schirmer值，mm)。

在测定泪液的量三分钟之前，往两只眼睛中一次性滴注O.4％盐酸奥布卡因(它是一种局部麻醉药)的眼溶液(10μl)。结果

在滴注后的T小时的时刻，试验药物溶液对泪液分泌速度的作用由通过如下方程确定的泪液的增加(mm)表示。

泪液的增加(mm)=[SM(D-T)-SM(D-O)]一[SM(V-T)-SM(V-O)]

SM(D-T)：施药后T小时施药的眼(右眼)中Schirmer值

SM(D-O)：施药前施药的眼(右眼)中Schirmer值

SM(V-T)：施用载体后T小时施载体的眼(左眼)中Schirmer值

SM(V-O)：施用载体前施载体的眼(左眼)中Schirmer值

作为试验结果的实施例，表1示出了滴注试验药物(大鼠α-ANP，大鼠BNP-32和人CNP-22；它们都购自Peptide Research Institute)的溶液后一小时泪液的增加(mm)。    

                            表1

测定时间    泪液的增加(mm)大鼠α-ANP大鼠BNP-32  人CNP-22施药后一小时    +1.92    +2.08    +1.33

表中的值分别是每组六个样品的平均值。

从表1明显可见，试验药物(大鼠α-ANP，大鼠BNP-32和人CNP-22)表现出促进泪液分泌的优异效果。

工业适用性

本发明能提供含钠尿肽的滴眼剂，该滴眼剂表现出促进泪液分泌的优异效果，适用作泪液分泌促进剂和作为角结膜障碍的治疗剂。